文摘
研究观察电针刺激的效果(EA)在肝脏血液灌注(HBP)和血管调节。我们调查了60雄性小鼠麻醉下以下三个条件:没有EA刺激(对照组);艺电刺激在Zusanli (ST36组);艺电刺激在nonacupoint (NA组)30分钟。使用激光散斑的家庭血压测量灌注成像(LSPI)。一氧化氮(NO)水平,endothelin-1 (ET-1)和去甲肾上腺素(NE)在肝组织中检测到生物化学方法。结果如下。在每个时间点,增加HBP ST36组高于NA组在麻醉老鼠。HBP逐渐减少在对照组30分钟。没有ST36组水平高于NA组。 The level of both ET-1 and NE was the highest in control group, followed by NA group and ST36 group. It is concluded that EA at ST36 could increase HBP possibly by increasing the blood flow velocity (BFV), changing vascular activity, increasing the level of NO, and inhibiting the level of ET-1 in liver tissue.
1。介绍
临床上,针灸对各种肝脏疾病有显著的影响。针灸治疗可以有效地改善肝炎患者免疫力降低脂肪肝患者的血脂和改善临床症状。它还可以减轻疼痛,减少放疗和化疗的副作用在肝癌患者,从而提高生活质量和延长生命1- - - - - -3]。此外,它是证明针灸对血液循环良好的规范操作多路,多层次、多链路,multisubstance方式(4]。据报道,针灸治疗可以改善血液流变学和血管活性的物质,如凝血恶烷、前列腺素、内皮素(ET)和心房利钠因子(曾帮工)[5]。Zhang et al。6)报道,血液供应的胃缺血再灌注由EA刺激改善和提升。因此,内脏血液灌注的增加(BP)是一个重要的影响针灸和针灸治疗内脏疾病的基础(7,8]。
肝循环(HC)非常丰富。报告显示,HBP和内脏疾病有显著关联。莱韦森et al。9)报道,胃肠道癌症患者并发肝转移表现出较高的肝动脉的血流量(BF)。(et al。10)报道,结直肠癌肝转移患者同时透露,肝动脉的男朋友是显著增加,门户的男朋友是降低了。HBP可以预测潜在生物标志物的临床进展或结果癌症患者(11,12]。此外,ct灌注(CTP)已经成功地应用于多种临床肝脏条件。检测到HBP是减少肝硬化条件(13,14]。因此,我们认为HBP会理解机制的重要生物标志物的影响针灸在HBP使用针灸治疗肝脏疾病。在这项研究中,LSPI技术被用来显示HBP前后小鼠和分析之间的时间效应关系EA和家庭血压。同时,神经递质之间的关系、血管活性的物质,和家庭血压变化进行调查,以探索EA对HC的影响机制。
2。材料和方法
2.1。动物和组
本研究利用60名健康成年雄性昆明小鼠称重提供的3个月,g,平均年龄动物实验中心,军事医学科学院(中国)。60小鼠被随机分配到三组:ST36集团NA组和对照组,每组20只老鼠。实验过程都是通过伦理委员会医学科学院和按照国际公认的原则进行实验动物使用和护理。
2.2。电针刺激
双边ST36 ST36集团是位于后肢的后外侧的膝盖,约2毫米以下腓骨头,刺激了32#针(毫米)到3毫米深。然后,针的连接到EA设备(《疼痛治疗设备,《韩- 100 a;南京的扛鼎之作医疗技术公司,南京,中国)。刺激的时间是30分钟,电流强度是5 V,脉冲的频率是50赫兹。NA集团的双边nonacupoints位于胫骨内侧ST36和接近的刺激。EA的方法是一样的,对于ST36组。为对照组,针灸是没有完成。
2.3。在老鼠体内肝模型的制备
鼠标被2%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉(2.5毫克/公斤,Sigma-Aldrich,圣路易斯,美国)30分钟前体内小鼠肝脏模型的制备。在麻醉下,鼠标在仰卧位固定在一块木板。大约1厘米的线性切口剑突下和沿腹正中线。然后肝脏组织被曝光。下面肝脏叶分离和明显地放在腹部上方的支架。
2.4。测量LSPI
鼠标模型放置在实验恒温箱的温度保持在30 -°C和相对湿度80 - 90%。肝脏叶被28 - 30厘米低于激光扫描仪。这个盒子是放置在一个没有阳光直射的屏蔽室,红外辐射、通风。
Moor-FLPI激光散斑灌注(LSP)成像仪(沼泽仪器有限公司、阿、英国)被用于这项研究。扫描模式是低密度和25帧/秒,时间间隔是1 s,曝光时间是20毫秒,在每个时间点和10帧不断扫描(10帧平均加工成单帧获取平均HBP在每个时间点)。这个仪器系统可以同时记录LSP肝脏图像和数字编码的图像(检查部分的实际位置的图像)。这两个图片是用于分析高炉分布之间的关系和肝表面的位置。
ST36组和NA组,HBP图像记录在EA,每5分钟前5到30分钟为对照组,在EA。HBP图像记录每5分钟在0到30分钟(图5)。然后HBP图片保存和分析Moor-FLPI-V2.0图像审查程序的软件。位置、范围和程度的HBP三组在每个时间点进行比较。感兴趣的圆形区域(ROI)与同一地区在每个LSP映像被选为家庭血压测量。
2.5。测定肝血管监管机构
HBP图像记录后,扫描叶肝(约0.5克)是均质和足够的0.89%生理盐水和离心机。然后,浮在表面的被检测的水平没有与硝酸还原酶和ET-1水平等(无& ET-1化验用品,Sinouk生物技术研究所、北京中国;r - 911 Radio-immune计数器,工商企业、中国科技大学、中国)和NE水平和酶联immunoabsorbent试验(试验装备,研发系统、美国;不删FEX 2100酶标记计,感知技术公司说,美国)。
2.6。统计分析
意思是6,分别计算灌注单位(简称PU)作为单位。HBP在每个时间点的值是用均值±标准差表示。使用SPSS13.0软件进行统计分析。不同的家庭血压值之间的时间点以及为每组生成,和男朋友的时间效应关系的变化进行了分析。
ET-1水平,不,NE在每组的肝组织中表达为平均值±标准偏差。SPSS 13.0统计软件是用于搭配以及组织之间的相同的索引。被认为是明显不同的。
3所示。结果
3.1。分析太阳能发电ST36组肝脏的图像
在ST36集团EA刺激(图1(一)),更亮绿色和黄色区域显示在肝脏的LSP图像,表明家庭血压较低。刺穿5分钟后,红色区域增加。红色区域逐渐增加与EA,增加肝汇管区周围更迅速和更慢的区域靠近肝边缘区域。25分钟后(图1 (f)),发现深红色区域的形象;英国石油公司达到最大。后来,红色的是轻均匀分布在肝脏(图1)。
(一)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)
(h)
3.2。分析太阳能发电NA组肝脏的图像
EA之前和之后,在NA组,LSP图像的变化类似于ST36集团,但是红色的范围和程度增加的EA后小于ST36组(图2)。
(一)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)
(h)
3.3。分析对照组肝脏的LSP图像
LSP的形象开始的调查(图3(一个)),它可以看到HBP很有钱。家庭血压高的扇形面积接近肝门户是深红色显示图像,从扇形区域和家庭血压降低到肝脏前边缘地区显示黄色和浅绿色。通过调查时间,亮绿色和黄色区域扩展,和红色区域逐渐减少,而HBP慢慢减少(图3)。
(一)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)
(h)
3.4。定量分析方面的变化
HBP在每个EA组显著增加在每一个时间点与0分钟。5分钟后,HBP的增加(PU),增加了%。最高的增加被发现在25分钟,这是PU、增加了% ST36组。5分钟后,HBP的增加PU、增加了%。最高的增加被发现在25分钟,这是PU、增加了%在NA组。在对照组,HBP 30分钟(图期间下降缓慢4)。它可以看到从表1在所有时间点的EA HBP的增长率NA组和对照组显著低于ST36集团()。
3.5。没有水平的比较,ET-1和东北
数据描述的水平不,ET-1,综述了三组NE在桌子上2。没有最高水平ST36组和对照组中最低的。统计分析表明,水平没有ST36组明显高于对照组;NA组明显高于对照组()。这一趋势与HBP一致。
ET-1最高水平在对照组和ST36组最低。统计分析表明,NA组和对照组的ET-1水平显著高于(ST36组)
NE水平在对照组最高和最低ST36组;ET-1变化趋势类似于水平但相反的每组没有变化。没有明显差异在NE水平三组。
4所示。讨论
肝脏具有双重血液供应和是一个巨大的血库。,许多肝动脉的分支和门户静脉肝血窦的混血儿15]。肝脏功能受损时,可引起肝细胞变性和坏死肝血液流变学和微循环的异常,甚至在整个身体。另一方面,肝血液流变学和微循环的异常可以引起肝细胞损伤16,17]。中药(TCM)理论认为,“肝脏血液商店,”和肝脏功能密切相关的男朋友。因此,治疗肝脏疾病的重要意义,提高肝微循环。一些研究表明,艺电刺激能有效地提高血液灌注(BP)的病理组织和器官,改善生理功能(18- - - - - -20.]。据报道,HBP针灸治疗后发现增加了彩色多普勒超声(CDU)成像(21]。但基民盟一直应用于检测血管分布和男朋友大血管的变化,主要评估组织或器官的血管病变和高炉状态(22,23]。与基督教民主联盟相比,Moor-FLPI具有以下优点:微循环的使用的调查,广泛的检测和非接触检测(24]。因此,它非常适合监控组织和器官的英国石油公司有足够的血液循环(25,26]。在这项研究中,Moor-FLPI是用来显示HBP为了准确记录动态HBP EA后变化。HBP稳定的LSP画面显示正常状态。EA刺激30分钟后,HBP不断增加,影响ST36组比NA组更重要。否则,肝门静脉的血管密集,英国石油公司增加了更多的地区,在该地区远离肝门户在EA刺激(27]。
生活中没有血管舒张和更强的活动身体。它介导松弛血管平滑肌和血管舒张的第二信使。同时不参与维护循环系统的生理功能,如血小板粘附和抑制,BF和通风的肺泡之间的匹配,肾小球和骨髓微循环,调节心脑血管张力,保护心肌细胞,等等(28- - - - - -32]。ET-1多肽与最强的血管收缩活动。它是由血管内皮细胞合成和释放,心肌、平滑肌,等等。它能引起血管收缩,减少血流通过促进Ca2 +涌入血管平滑肌细胞,改变血管壁的形式和功能通过刺激血管平滑肌细胞的增殖,细胞外基质堆积,和胶原蛋白的合成33- - - - - -35]。此外,没有血管舒张的功能和ET-1血管收缩是敌对的。没有的增加会抑制肝组织的合成和释放ET-1 [36]。东北是一个重要的同情vasoconstrictive神经递质(37]。艺电刺激可以激活神经系统调整发射机的合成和释放,就像NE剂量(38,39]。
从结果可以看到,不仅是家庭血压显著增加,而且ET-1血管活性的物质,不,EA和神经递质在肝组织中不被更改。然后,如何作用于血管的物质在肝脏的变化与EA后增加了HBP吗?根据研究结果,我们认为HBP EA后,肝德国情报机构越快。肝循环被EA提升。因此,BF和血管壁之间的摩擦力增加。血管内皮细胞的活动,血管平滑肌,神经是出于增加摩擦。因此,合成和释放血管活性的物质和神经递质必须适应这些变化。最后,在肝组织内,vasoconstrictive物质ET-1和神经递质减少,vasodilative物质没有增加,血管扩张,HBP改善。
ST36是主要用于治疗消化系统疾病。临床上,ST36是一个重要的治疗肝脏疾病(40- - - - - -42]。在这项研究中,在同一时间点,增加率方面,没有ST36组的水平明显高于NA组和对照组。的水平ET-1 ST36组明显低于其他组()。建议EA的影响在HC ST36 nonacupoint优越。此外,EA对增加HBP的影响主要是通过增加任何内容和抑制ET-1肝脏组织。此外,该机制方面将研究血管活性的物质在这项研究的一部分。会发生什么在另一边EA也等待进一步的研究。
许多临床实践证明,针灸有两相的调制效果。它可以促使异常的生理功能正常的水平。之间有明显差异的影响针灸在病理状态和健康状态。本文后增加HBP EA中检测出健康的小鼠。它建议EA对HBP产生影响。根据结果,我们将研究EA的影响HBP肝损伤模型小鼠在下一步。
5。结论
EA的影响对HC首次使用LSPI显示在这项研究中。结果表明,EA ST36可以调节血管肝组织的活动,因此明显提高HBP,为临床提供新的动物实验证据vasoregulation针灸对HC和机制的影响。与此同时,这证实了中医理论,针灸可以促进气和血液循环。
利益冲突
作者宣称没有利益冲突有关的出版。
承认
作者真诚地承认中国国家自然科学基金(不提供资金。本研究30572418)。