文摘
背景。酸盐水注射在大鼠腓肠肌肌产生类似纤维肌痛的两国长期的痛觉过敏。没有以前的研究调查了电针刺激的效果(EA)在酸性盐模型。本研究旨在确定EA的影响在重复产生的痛觉过敏肌内注射酸性盐。方法。老鼠被分为四组(,每组):控制、针灸、EA 15赫兹和100赫兹。离开腓肠肌肌肉注射100μL的pH值4.0无菌生理盐水两次相隔五天。EA、针灸或控制治疗日常管理(20分钟)麻醉下连续5天。针被安置在St36 Sp6穴位。评估二级机械痛觉过敏、热痛觉过敏、和运动性能进行前注射和治疗前后进行每一天。爪子撤军阈值测试使用非参数克鲁斯卡尔-沃利斯检验和组内差异Wilcoxon配对。方差分析的延迟和电机性能测试参数检验独立措施,为不同的组,我们使用以及对配对样本。事后图基测试是用于多个修正。值小于0.05被认为是具有统计学意义。结果。表明有显著减少机械撤出阈值和爪子撤军延迟24小时后,第二次注射。此外,机械和热痛觉过敏被EA 15显著逆转,100赫兹,和针灸。结论。结果表明,EA高和低频率以及针灸是有效减少痛觉过敏在慢性肌肉疼痛模型。
1。介绍
肌肉骨骼疼痛是常见的和成本数以十亿美元计的卫生保健和工资损失(1]。慢性肌肉骨骼疼痛综合症,如纤维肌痛和肌筋膜疼痛综合征可以禁用和难以治疗2]。关注这些问题,长期的机械模型2肌内注射引起的过敏症酸性(pH值4.0)盐(3)开发。这个过程会产生双边肌肉和皮肤的机械过敏症和内脏敏感性增加3,4]。
只有5研究显示在这个模型的双注射后疼痛酸盐和一些治疗和两个非药物治疗(5,6],之后也阿片系统的交互影响身体活动被证明(5)和三个研究,药理治疗逆转痛觉过敏(4,7,8]。基于电针刺激的镇痛的功效良好的文档记录,和一些试验表明,电针刺激减少术后镇痛药物(消费的需要9,10]。其他研究已经表明,EA是有效的治疗偏头痛的危机11]和orofacial疼痛[12不使用药物。促进EA镇痛的效果在动物模型的急性或慢性疼痛是有据可查的文献[13- - - - - -24证明这种疗法的潜力。
研究显示激活下行抑制的方法,下行阿片系统刺激后EA (16,25,26),增加β内啡肽水平的等离子体(24,27),和大脑19]与gaba ergic系统相互作用[28),激活脊髓毒蕈碱的受体(29日,30.羟色胺系统[],和参与的16在其他动物模型的痛觉过敏。关于治疗的最佳频率EA,文学是清楚的最有效的方法。一些研究显示,动物模型更好的结果较低频率(13,17)在其他研究高频EA是更有效的31日]。
本研究的目的是确定电针刺激和针灸的效果,减少镇痛效应在纤维肌痛的动物模型。
2。方法
所有实验动物保健和使用委员会批准的联邦大学的塞尔希培,并依照国际研究协会的指导方针疼痛使用实验动物。成年雄性Wistar鼠(,250 - 300 g)被用于这项研究。
2.1。Muscle-Induced痛觉过敏
基线行为后立即测量如下所述,老鼠与异氟烷麻醉(2%到5%)和注射100毫升的pH值4.0无菌生理盐水的腓肠肌肌肉在0天左后肢(注1),在5天(注2)。这个过程会导致双边机械敏感的肌肉和爪子,持续4周(3,4,32]。
2.2。二次机械痛觉过敏
老鼠检测爪子撤军阈值与冯·弗雷细丝表面应用于足底爪子。最初,这些动物能适应连续两天在实验开始前机械阈值测量协议。动物行为的空间进行了30分钟,然后放在透明的有机玻璃隔间网高板,习惯每天30分钟。,动物们习惯在家里笼子在行为空间30分钟,放在小房间每天30分钟前测试。一系列的细丝与增加弯曲部队(11日8到190年,9 mN)应用两次的足底表面后爪直到老鼠退出刺激计划。最低的老鼠撤回了爪子的力量从1 2应用程序记录的爪子撤军阈值。减少爪子撤军阈值被视为一种皮肤过敏。这种测试方法显示重要的两次试验法的可靠性,甚至注射酸性盐应用于单边肌肉;这个测试是用来捕获非常敏感,因为这可以促进动物模型与两国参与中枢敏化(3]。
2.3。热痛觉过敏
执行的测试是使用动物的尾巴轻轻装置被放置在明确丙烯酸结构只有尾巴面对外面,支持在一个金属结构加热到50°C /一段20秒。老鼠开始去除叶片的尾巴表示时间宽容的动物在叶片产生的热量。
热痛觉过敏试验进行的下一刻完成机械阈值的测量和发动机性能测试在以下时间:第一次和第二次酸盐水注入之前,第二次注射后24小时酸性盐,和每个治疗前后应用程序上诉后连续5天的治疗肌肉疼痛的感应。
2.4。电机的性能
运动效果由electroacupunture或针灸用Rota-rod跑步机在老鼠身上进行了测试。具体地说,这些动物放在Rota-rod运行速度逐渐增加从1到18每分钟旋转(rpm)为120秒和维护另一个30秒18岁rpm (3]。
电机性能测试是同时进行的机械阈值的测量和热测试在以下时间:第一次和第二次酸盐水注入之前,第二次注射后24小时酸性盐,和每个治疗前后应用资源连续五天的治疗后肌肉疼痛的感应。
2.5。针灸
不锈钢针(30×0.25毫米)插入到穴位St36,位于胫骨前肌,10毫米远膝关节,到穴位Sp6,上方的内踝(图1),20分钟;独立针刺激手动每5分钟。
2.6。电针刺激刺激
不锈钢针(30×0.25毫米)插入到穴位St36,位于胫骨前肌,10毫米远膝关节,到穴位Sp6,上方的内踝(图1),当针灸或电针刺激。电针刺激治疗,针的连接到电子脉冲发生器输出(NKL便携式厄尔608年,巴西),产生一个双极型和不对称方波。测试频率是15赫兹和100赫兹,和刺激的持续时间是20分钟的频率。刺激强度保持在一个感觉阈值,下面可检测肌肉颤搐,为了模拟强度尽可能用于临床实践。
所有的动物都在异氟烷麻醉刺激。控制与异氟烷麻醉动物相同的时间,但没有交付使用针也没有电流。我们选择麻醉下的模型,由于模型不使用动物的麻醉效果造成多人受伤,从而阻碍治疗效果的真实感知。
2.7。实验设计
所有动物都能适应连续两天前开始实验。机械爪撤军阈值、热痛觉过敏和电动机性能测量前的第一次和第二次注射前后酸性盐和所有干预措施在连续5天的治疗。图中给出的实验的时间表2。
2.8。统计分析
爪子撤军阈值检测治疗组之间的差异是通过使用非参数克鲁斯卡尔-沃利斯测试和组内差异Wilcoxon配对。延迟和电机性能测试之间的差异治疗组自主措施,通过方差分析参数测试,我们使用不同的组以及对配对样本。事后图基测试是用于多个修正。值小于0.05被认为是具有统计学意义。
3所示。结果与讨论
3.1。爪子撤军阈值
显示所有组显著减少双边机械撤出爪子的阈值()第二次注射后24小时酸性盐()。然而,有一个显著逆转机械痛觉过敏治疗组与EA(100赫兹和15赫兹)和针灸相比,控制(连续五天,图3)。
3.2。热痛觉过敏
24小时后,第二次注射诱导肌肉痛觉过敏的酸性盐,延迟(尾巴)显著降低。治疗后显著逆转撤出所有治疗组的血压阈值与对照组相比)(图4)。
3.3。电机的性能
有显著减少的时间下降Rota-rod装置中所有组第二次注射后24小时酸性盐(),它一直在实验的时候通过五天的治疗(图5)。
这项研究的结果表明,针刺和电针刺激减少了机械痛觉过敏和热痛觉过敏后政府相关的双肌内注射的酸性盐生成肌肉痛觉过敏实验模拟纤维肌痛综合症。同时,电机性能进行优化组接受电刺激。
据我们所知,这是第一个工作对老鼠的实验动物研究调查的影响针灸电针刺激和纤维肌痛的动物模型。然而,类似于我们的发现,一些先前的实验研究使用不同的动物模型证明了EA效应:降低机械痛觉过敏,比如在角叉菜胶引起的炎性疼痛模型(20.,21];神经生长因子(17)或弗氏佐剂14,16,18,22,23,33在神经性疼痛模型),脊髓节之间S3和S4 [13)和结扎前胫骨和腓肠神经的34];疼痛的脚踝扭伤(15];卵巢切除术在女狗24)在大鼠(27和癌症动物模型诱导19]。针灸已经显示出在神经性antihyperalgesic效果模式35)福尔马林注入引起的疼痛(36];然而,没有显著区别针灸和EA在弗氏佐剂引起的炎性疼痛模型37和角叉菜胶38]。
在目前的研究中,EA和针灸能够促进减少热痛觉过敏在这个模型中检测不到发炎的迹象肌肉疼痛。一些研究已经证明了EA-induced antihyperalgesia EA模型中炎症引起的疼痛注射弗氏佐剂(16,18,33)、卡拉胶(39S1和S2),神经性疼痛之间的部分(28,30.),并通过小鼠的尾巴轻轻测试验证的有效性不同频率的EA (40]。然而,在研究炎症引起的疼痛管理弗氏佐剂(14和神经性疼痛39),没有明显变化,治疗组与对照组之间的热痛觉过敏。
我们的研究结果表明,在目前的研究中,老鼠的电机性能没有变化的延迟下降相比,控制动物。除了降低24小时内第二次注射后,当肌肉痛觉过敏应该是最大和电机性能下降。首先,这表明,痛觉过敏的逆转由EA在两个频率传播,以及针灸,实际上是分配antihyperalgesic行动的刺激,镇静或肌肉松弛剂治疗后可能会改变电动机性能。此外,肌肉的发展似乎普遍痛觉过敏在这个实验模型负责损害研究关联EA和运动性能模型大鼠痛觉过敏的稀缺。另一方面贾et al。41]显示,电机效率显著改善和协调在小鼠体内诱导的帕金森病后内侧前脑束的单边部分处理高低频电针刺激,但只有高频(100赫兹)证明了这个模型的改进协调和运动性能,这在我们的研究中没有被观察到。
重复使用电针刺激后,我们观察到维护镇痛功效的低和高频率,尽管一些研究表明镇痛宽容的发展和可能的介入调停opioidergic的EA的影响在两个频段。与我们的研究结果相似,连续应用EA模型中三天的小鼠内脏过敏没有出现公差与电针刺激镇痛治疗(42]。然而,一些研究已经证明了阿片系统参与的antihyperalgesia电针刺激应用程序通过管理提升的阻滞剂μ和δ阿片受体(8,16,19- - - - - -21,27,31日,33,36,43]。其他的研究也证实了的作用β内啡肽就是明证,增加等离子体在术后卵巢切除术后应用电针刺激雌性狗(24)和大鼠(27]。增加血液和大脑β脑内啡已经证明在癌症诱导的大鼠模型19]。虽然与这些数据我们不能确认阿片系统的参与,我们相信这种可能性,但是我们并没有观察电针刺激减少了5天的治疗后的效果在这个动物模型。
gaba ergic系统证明了公园的参与et al。28]在神经性疼痛模型大鼠;封锁GABA (A)和GABA (B)逆转antihyperalgesic效应刺激后低频EA(2赫兹)。并行2赫兹EA在脊髓毒蕈碱的受体,经过政府的阿托品,逆转EA(产生的镇痛效果29日,30.]。血清素激活的和glutamatergic系统也有他们的股份在EA调解的效果在先前的研究证明。痛觉过敏的动物模型与弗氏佐剂诱导后的应用EA是儿茶酚胺和5 -羟色胺的产生,证明这些通路的激活在控制疼痛16]。同时,EA显示减少的磷酸化脊髓NMDA (n -甲基- d)的子单元,也证明这些结构的参与过程中刺激EA镇痛的42- - - - - -45]。我们的数据不允许我们说哪些疼痛抑制系统代理。
只有五个先前的研究调查了anti-hyperalgesic治疗策略的影响在老鼠实验模型,纤维肌痛,有药物治疗和其他的后备技术。减少吗啡产生的痛觉过敏,SNC80 damge,选择性阿片受体受体激动剂是预防通过阻断阿片受体μ和δ但不是κ。因此,激活脊髓μ阿片受体和δ减少机械痛觉过敏肌内注射后重复酸性盐(7]。普瑞巴林减少机械痛觉过敏,但高剂量有运动障碍(4)和曲马多的组合和milnacipran提高antihyperalgesia调频的动物模型8]。后二次机械痛觉过敏的逆转低强度的体育锻炼5,6)是证明我们所使用的相同的动物模型和阿片系统刺激运动的作用是显示当纳洛酮阻断受体阻滞镇痛的效果。
纤维肌痛患者的临床,使用EA在只有一个控制的临床试验研究。在这项研究中,纤维肌痛患者接受六个交易日的EA三周,1和99赫兹之间使用不同的频率,与亮度级汽车收缩。与对照组相比,受试者治疗显示显著的镇痛效果,减少疼痛和镇痛消费的强度和分布,提高痛阈的压力,和改善睡眠质量46]。
我们的工作有一些类似的结果在行为测试与先前的研究显示,参与阿片系统的痛觉过敏的逆转疼痛动物模型通过使用电针刺激,这对我们来说是可能的,但是治疗的效果在我们的工作没有失去其有效性即使连续5天,所以我们没有开发公差来治疗。我们正在做一些工作来阐明针刺和电针刺激镇痛效应的可能机制这动物模型通过阻断剂纳洛酮和naltrindole鞘内和颅内水平。
4所示。结论
我们所有的数据表明,EA高和低频率和针灸有能力扭转机械和热痛觉过敏在慢性肌肉广泛疼痛动物模型,分散,检测不到发炎和双边迹象产生的双注入生理盐水酸性(pH值4.0)。对电机性能,治疗组(针灸、EA 15赫兹和100赫兹)显示无显著差异在时间Rota-rod相比控制。研究正在进行,以更好地了解行动的机制EA的痛觉过敏肌肉疼痛动物模型,特别是与阿片系统交互,以及其他中央和周边机制。
利益冲突
作者宣称没有利益冲突有关的出版。