文摘

本研究的目的是观察电针刺激的效果(EA) ST36穴位在gastric-related脊髓背角神经元的放电频率(SDH)和核束solitarius (nt)。有不同的效果的胃膨胀在SDH和nt在46岁男性Sprague-Dawley老鼠。在SDH 10兴奋性神经元中,大部分的神经元被同侧的EA抑制。发射率显著降低( )兴奋gastric-related神经元在10元;6个神经元的放电率进一步兴奋到同侧的EA,显著增加的发射率( );所有抑制性神经元gastric-related nt被EA兴奋。同侧的EA的抑制率显著增加与对侧相比EA gastric-related神经元SDH ( )。没有显著区别同侧的侧EA在gastric-related nt的神经元。EA在ST36 gastric-related神经元的放电频率变化在SDH和nt。然而,也有一些差异在这些神经元响应模式。这些差异的存在可能是EA的多样性和复杂性的生理基础的影响。

1。介绍

电针刺激(EA),一个新的和现代的传统针灸,广泛用于治疗各种类型的疾病在临床环境的改变外围电刺激而不是手操纵(1]。传统针灸或“手动针灸”包括插入针手工的操作,如起重、抽插,扭曲,旋转或其他复杂的组合。EA是这种技术的修改与电流刺激穴位代替手工操作和似乎有更多的可重复的结果在临床和研究环境(2,3]。

优秀止痛功效概要文件和重大的影响在某些临床症状,EA正在日益被医生和病人在西方接受(4,5]。在过去的二十年里,相当数量的研究调查了EA的功效治疗功能性胃肠疾病。人类和动物研究进行探索EA在胃肠道分泌的影响,感觉,能动性,myoelectrical活动,和分子神经生物学(6- - - - - -8]。ST36的穴位(Zusanli),最重要和最常用的胃经穴位,被认为是主要的调节胃肠功能,促进胃肠蠕动和解毒,保护黏膜屏障(9]。

疼痛的信号的传输可以通过强大的调制在第一个脊柱继电器控制包括节段性机制和系统性机制涉及脊椎上的结构(10]。人们普遍认为下行疼痛调节系统的多个脊椎上的站点对抑制反应起到强有力的作用针灸的内脏痛觉信息在脊髓水平(11,12]。据报道,疼痛的内脏输入可以通过针灸ST36,抑制脊髓背角扮演了非常重要的角色在这个过程(13]。很多报告显示,调节胃感觉和刺激引起的运动性ST36似乎介导通过迷走神经反射在脊椎上的通路14- - - - - -17]。在这项研究中,我们关注这两个级别的中枢神经系统和观察到的可能影响EA在ST36 gastric-related神经元的放电频率在SDH和核束solitarius (nt)。

2。材料和方法

2.1。动物的准备工作

实验进行了46个成年男性的雄性SD (SD)中老鼠(重量:250 - 300 g),购买的实验动物科学研究所,中国中医科学院(CACMS),和曾经(中国,北京)。所有操作和程序都按照指南进行护理和使用实验动物发行的美国国立卫生研究院和被批准的机构CACMS动物保健和使用委员会。老鼠被安置( °C)在组织和维持12小时光/暗周期可以随意提供食物和水。大鼠禁食过夜有免费的水和麻醉约4 - 5小时的腹腔内注射聚氨酯(1.0 g / kg, Sigma-Aldrich,圣路易斯,密苏里州,美国)。所有的实验都是在白天;2毫米直径聚氨酯管连接到一个直径1厘米乳胶气球通过小纵切口插入到胃,这是在从幽门十二指肠2 - 3厘米。一个注射器连接到套管膨胀和缩小气球。气球可以装满5毫升空气,等于10厘米H2O压力(18]。

2.2。细胞外记录的SDH和nt

22个老鼠采用椎板切除术的实验,这是执行从T10 L1椎骨暴露脊髓神经元记录。细胞外记录是用钨电极(尖端:20μ1.5 m,阻抗:MΩ;我系统、Sequim佤邦,美国)插入左边脊髓(0.5 - -1.0毫米侧中线,深度300 - 1300吗μ米)。稳定的录音是通过将2% Ringer-agar凝胶表面的髓质。宽动态范围(WDR)神经元的SDH识别特征的基础上,对机械刺激应用于接受域(19- - - - - -21]。细胞外记录的《世界发展报告》的持续监控使用MP150数据采集系统(美国Biopac Goleta, CA)。信号分析了离线使用PowerLab数据系统(ADInstruments PowerLab / 4年代,悉尼,澳大利亚)上升2包(剑桥电子设备,剑桥,英国)。

nt的实验的一部分,涉及到细胞外记录大鼠24日进行。nt神经元的细胞外信号(距离前囱,美联社:−11.3 ~−14.3毫米;ML: 0 ~ 1.3毫米;DV: 4 ~ 7毫米)被玻璃微电极记录(10 - 20 MΩ,Narishige PE-2垂直拉从灯丝玻璃)回填pontamine天蓝色为2%。解雇的nt神经元记录玻璃电极是美联储通过微电极放大器(日本Kohden mez——8201年,东京,日本)。信号被捕获的在线和离线分析1401 - +数据采集系统和使用清洁能源的2包(剑桥电子设备,剑桥,英国)。

2.3。电针刺激

刺激电极放置在ST36,后肢的EA或手动针灸增强胃蠕动(22]。基于描述在先前的报道23),位置在附近的后肢前外侧的侧胫骨前嵴的胫骨前肌下膝盖以下。这一点是双边刺激2 - 3 mA 0.5毫秒的脉冲持续时间20赫兹的频率为40秒的一对电极针插入3毫米深入皮肤。躯体刺激的电流是由刺激产生(sen - 7203,日本Kohden、东京、日本)。

2.4。实验的程序

一旦细胞外记录的数据监控已达到一个稳定状态5分钟,胃扩张和艺电刺激进行。以下测量时间进行了分析:(a) 20秒前刺激胃膨胀,(b) 20秒在胃扩张刺激,和(c) 20秒刺激胃扩张和EA ST36(图1)。有一个10分钟的刺激后恢复时间。


图1
测量过程的研究。答:刺激之前,记录神经元的初始状态(20秒)。B:记录在两种刺激(40秒)。C:刺激后恢复时间(10分钟)。
2.5。数据分析

发射率和峰值的变化速率分析了20秒。的变化速率峰值计算峰值的数量之前刺激和刺激后峰值的数量。数据显示为的意思±平均数标准误差(SEM)。评价意义,与正态分布的数据集分析成对或未配对 测试两组或一维方差分析紧随其后 测试和 被认为是具有统计学意义。

3所示。结果

3.1。胃膨胀的影响在SDH和nt

所有的25个神经元记录在SDH胃膨胀后,11神经元被刺激敏感。他们显示超过15%的变化峰值和被称为gastric-related神经元的数量(15]。其中,10是兴奋和1被胃膨胀抑制。总共22元研究神经元记录;19显示明显的兴奋性神经元( )或抑制( 胃扩张(图)的反应2)。


图2
不同的胃膨胀的影响在SDH和nt。答:25神经元记录在SDH。有14个胃nonrelated神经元(56%),10胃膨胀兴奋神经元(40%),和1胃膨胀抑制神经元(4%)。B: 22神经元记录在nt。有3胃nonrelated神经元(14%),10胃膨胀兴奋神经元(45%),和9胃膨胀抑制神经元(41%)。
3.2。同侧的EA的影响在ST36 Gastric-Related神经元的放电频率在SDH和nt

在SDH 10兴奋gastric-related神经元中,8个神经元的放电率被EA抑制。发射率降低了 赫兹, 赫兹( ;一个图3)。兴奋gastric-related神经元在10元,6个神经元的放电率被EA进一步激发,发射率的增加 赫兹, 赫兹( ;B在图3)。在nt 4其他兴奋gastric-related神经元中,发射率增加 赫兹, EA后赫兹,但没有显著差异(C图3)。所有的9抑制性神经元gastric-related nt被EA兴奋。发射率增加 赫兹, 赫兹( ;D在图3)(图4)。


图3
同侧的EA的影响在ST36 gastric-related神经元的放电频率在SDH和nt。答:刺激的兴奋性神经元gastric-related ST36 SDH;发射率抑制和减少 赫兹, 赫兹( )。B:刺激的兴奋性神经元gastric-related ST36 nt;发射率增加 赫兹, 赫兹( )。C:刺激的兴奋性神经元gastric-related ST36 nt:发射率增加 赫兹, EA后赫兹,但没有显著差异( , )。D:刺激ST36抑制性神经元gastric-related nt;发射率增加 赫兹, 赫兹( )。

图4
细胞发射在SDH和nt的例子。答:兴奋gastric-related神经元的变化引起的SDH EA ST36的刺激。B和C:兴奋gastric-related神经元的变化引起的nt EA ST36的刺激。D:抑制gastric-related神经元的变化引起的nt EA ST36的刺激。
3.3。同侧的影响和对侧的EA在ST36解雇Gastric-Related神经元的改变率在SDH和nt

引起的抑制率在ST36同侧的刺激 %,相比显著增加侧ST36刺激( %)在神经元兴奋性gastric-related SDH ( )。之间没有显著差异的刺激同侧的ST36 ( %)和侧ST36 ( %)对变化的兴奋gastric-related神经元发射率在nt ( )。也没有显著区别同侧的ST36 ( %)和侧ST36 ( %)对变化的发射率抑制gastric-related神经元在nt ( )(图5)。


图5
同侧的影响和对侧的EA在ST36解雇gastric-related神经元的改变率在SDH和nt。答:gastric-related神经元的放电频率的变化引起同侧的侧EA在SDH ST36。侧ST36相比,抑制率显著增加了同侧的ST36 EA (* )。B和C: gastric-related神经元的放电率的变化引起同侧的侧EA在nt ST36;没有显著区别同侧的侧ST36 ( )。

4所示。讨论

SDH是第一个突触传递点传入通路发挥重要作用在修改的传播有害输入(24]。背外侧细绳的完整性是必要的老鼠tail-flick EA-induced镇痛的测试(25]。nt是主要中心不仅接收内脏传入也为躯体传入。通常标签延髓区域是迷走神经的背运动核(DMV), nt,和区域postrema(美联社)后注射霍乱毒素B亚基(施)和假狂犬病病毒Bartha应变牛乳糖(PRV-Ba-Gal)到胃和ST36,分别为(26]。有一些品种的响应nt对胃扩张刺激神经元在不同的身体表面和针灸点(27]。在这项研究中,我们观察到,nt神经元呈现更加多样化的响应模式和对胃膨胀比SDH神经元。

Fusumada等人的一份报告表明,中脑导水管周围灰质(PAG)神经元激活EA ST36可能发挥重要作用在下行疼痛控制系统包括伽马氨基丁酸(GABA),自PAG特别参考SDH和疼痛控制的功能28]。双边nociceptin受体拮抗剂(NOP)显微镜下注射到背角或intermediolateral列T1部分逆转ST36 EA的抑制作用,这表明nociceptin脊髓中介导的一部分内脏反射反应的EA-related调制(29日]。EA ST36可以广泛调节SDH的信息处理和诱导基因的调制/表达序列标签(est)方向相同,这是与神经信号传输(30.]。这些结果类似于我们的研究中,最受欢迎的方式应对EA是减少神经元的兴奋峰值的数量。

EA在ST36不仅调节胃活动也激活神经元的nt和DMV显著(31日]。EA在ST36可能调节胃迷走神经背侧通过中介的活动复杂,类似于心血管功能,通过激活压力感受器敏感神经元nt (32]。最近的证据表明,针灸在圣36可以调节胃活动,根据相关的神经基础或结构和可能是中央神经背侧迷走神经的复杂(33]。EA-induced表达瞬时受体电位辣椒1型神经元一氧化氮合酶(TRPV1-nNOS)和nt /纤弱的核参与通过躯体感觉afferent-medulla EA刺激的信号转导通路(34]。在我们的研究中,对EA的模式在gastric-related ST36更复杂的神经元nt SDH的比。这是基于nt神经元的复杂的组件和联系。

5。结论

总之,EA ST36 gastric-related神经元的放电频率变化在SDH和nt。然而,也有一些差异对这些神经元的响应模式。这些差异的存在可能是EA的多样性和复杂性的生理基础的影响。

利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

确认

该项目是由中国国家自然科学基金(批准号81202649)973(没有国家重点基础研究项目。2011 cb505201),北京市自然科学基金(7132148)。作者感谢Eurasia-Pacific Uninet发放奖学金奖:王副教授小雨。本文写于零件在她呆在格拉茨医科大学的。也在这种情况下,由于去奥地利政府部门科学研究和健康,它也支持中国和奥地利之间的双边中医项目。此外,在奥地利工作得到了斯特罗纳克医疗集团。