文摘

本研究的目的是探讨电针刺激(EA)的纵向影响Zusanli (ST36)和安穴位在促进骨骼肌再生和抑制过度纤维化挫伤后的兔子。六十兔子被随机分为4组:正常,挫伤,EA,重组人胰岛素样生长因子(rhIGF-I)。急性骨骼肌挫伤是右侧腓肠肌(GM)由一个用仪器测量drop-mass技术。EA进行15分钟每两天0.4 mA (2 Hz),和通用汽车注射执行rhIGF-I(0.25毫升一周一次)。兔子处理EA T-SOD较高和T-AOC血清活动和降低血清MDA水平,血液灌注的也显著提高。在EA组,肌原纤维的直径均匀,安排定期与挫伤组。再生肌纤维的数量和直径在EA组和MHC表达增加。EA治疗显著降低纤维化形成和减少GDF-8和p-Smad2/3表情肌肉受伤。我们的数据表明,EA可以促进肌纤维再生,减少过度纤维化通过改善血液流动和抗氧化能力。此外,EA可能挫伤后调节信号因子的表达。

1。介绍

骨骼肌损伤是非常普遍的,尤其是在运动。同时,肌肉拉伤或挫伤引起的大多数这样的伤害。肌肉损伤后,治疗过程,涉及变性,炎症、再生和纤维化启动。虽然肌肉再生的过程中被激活受伤后不久,可以阻碍治疗肝纤维化的发展和影响程度的复苏。此外,肝纤维化的发展致使肌肉进一步的损伤(1]。此外,不完整的功能恢复也经常发生,因为肌肉挫伤后纤维化(2]。

目前,治疗与治疗超声(3- - - - - -5],低能激光[6,7),和细胞移植8- - - - - -10)促进骨骼肌再生的新方法。然而,这些治疗不能减少过度纤维化根据动物实验和临床研究。生长因子,如碱性纤维母细胞生长因子(bFGF)、胰岛素样生长因子(IGF-I)和神经生长因子(神经生长因子),改善肌肉愈合,但postcontusion愈合过程仍然是不完整的11]。如果antifibrosis代理能阻止myofibroblast形成和提高肌肉愈合(同时得罪转化生长因子1 (TGF -β1))、基因治疗和组织工程(可能仍然需要11,12]。因此,这种策略将复杂的在诊所。同样,虽然研究还表明,其他药物包括耻骨松弛激素,decorin,和洛沙坦能有效地防止肝纤维化、增强肌肉再生(13- - - - - -15),前,需要进一步的研究可以应用于临床。此外,必须考虑成本和副作用的药物。

补充医学,如针灸,已广泛应用在中国和其他国家。它有独特的临床疗效等多种疾病的治疗痛风性关节炎(16],脚踝扭伤[17),和创伤后应激障碍18]。针灸的方法之一,电针刺激(EA),是基于传统针灸,但在现代科技的帮助下。EA显示了更好的疗效和更广泛的应用在某些方面比传统的针灸(19,20.]。最近,研究报道,针灸对伤口愈合有积极影响21,22)和功能性周围神经再生(23]。使用信使rna指纹和生物信息学方法,高冈et al。24)透露,EA可以促进骨骼肌细胞增殖导致肌肉修复。我们的初步研究也表明,EA不仅促进了骨骼肌的再生,也减少了过度纤维化(25]。还必须指出的是,EA行动的确切机制了解甚少这两种影响。

因此,我们进行了以下实验研究来确定行动的机制。通过执行EA Zusanli和安穴位,我们检查了急性挫伤修复过程的兔子。我们观察到EA对肌纤维再生的影响,超微结构的受伤腓肠肌(通用),局部微循环灌注,氧化应激水平,胶原蛋白沉积,肌球蛋白重链(MHC)的变化,生长分化factor-8 (GDF-8)和p-Smad2/3。获得的结果提供某些可靠的实验证据解释EA的影响在挫伤后骨骼肌损伤的修复。

2。材料和方法

2.1。动物模型和实验小组

新西兰兔(无论男性或女性,体重:2.0±0.2公斤)是通过耳朵的边际静脉静脉麻醉管理3%戊巴比妥钠(30毫克/公斤体重)。右边的动物被定位固定在实验桌上。动物的后肢被扩展膝盖和定位dorsiflexing脚踝到90°显示通用。麻醉的动物后,冲受伤造成的通用位置80毫米的跟骨后缘的压碎机使用drop-mass技术。损伤面积是1厘米²和有一个能量9.555 J [26- - - - - -28)(图1(一)- - - - - -1 (b))。动物恢复正常活动之前,我们证实了皮肤完好无损,没有胫骨和腓骨骨折。虽然解剖学、病理和功能测试确认通用损伤伴有明显的收缩功能障碍,有相邻肌肉组织没有损伤。这种损伤是急性严重GM挫伤模型(29日,30.]。

本研究使用60兔子同样随机分为4组:正常组(,正常组),挫伤组没有治疗(挫伤组),EA-treated实验组(EA组),重组人类IGF-I——(rhIGF-I)(美国新泽西州PeproTech)治疗实验组(rhIGF-I集团)。每组又分成三个相等的时间点组(7天、14和28挫伤后,每个时间点)。所有的动物被饲养在温度(23±1°C)和湿度(50±5%)控制的房间在12小时光暗周期。动物获得食物和水随意。实验过程都是通过伦理委员会医学科学院和符合国际公认的原则进行实验动物使用和护理。

2.2。治疗

保持受伤现场干燥,避免感染,25 g / L Entoiodine是局部使用一天一次。动物们处理EA或rhIGF-I挫伤后24小时。EA是每隔一天15分钟0.4 mA(2赫兹)。一根针的直径0.25毫米和25毫米长度(中研泰和医疗器械有限公司,北京,中国)被用于这项研究。主要针(阳极)插入一个穴位的正常侧ST36(根据世界卫生组织的标准)和15毫米。然后,辅助针(阴极)放置5毫米远离主要针。在伤者身边,安从近端端穴位位于10毫米(阳极)和远端(阴极)挫伤中点和处理针喜欢ST36穴位的地区。所有的针放置时,所有的电极刺激具有相同参数的同步使用韩寒的穴位神经刺激器(韩寒的200 e,南京的扛鼎之作医疗有限公司、江苏、中国)(数据1 (c)- - - - - -1 (f))。rhIGF-I组治疗的剂量为0.1毫克/毫升rhIGF-I 0.25毫升每只兔子。rhIGF-I注入了通用一周一次。兔子挫伤组被允许恢复自然的伤害,这与正常的和rhIGF-I组收到模拟EA治疗(固定位置和时间在EA EA组但没有治疗)。五只兔子从每个子群牺牲了7天,14日或挫伤后28。

2.3。T-SOD T-AOC活动的评价和MDA水平

1天前挫伤(0)1天,7、14、28从耳朵收集血液挫伤后中央动脉和离心机。血液是按照要求准备每个工具包(南京建成生物工程,中国)。血液是用黄嘌呤氧化酶法治疗总超氧化物歧化酶(T-SOD)分析,铁还原法对总抗氧化能力(T-AOC)和硫代巴比土酸丙二醛(MDA)的方法。样本化验在550海里,520 nm和532 nm使用Varioskan Flash(美国马热)。光谱扫描和多功能仪表读数进行+ SkanIt 2.4.3软件来记录数据。

2.4。局部微循环检测

天7、14和28挫伤后,动物与静脉麻醉镇静,背侧皮肤的右后肢开放手术。钝性剥离的筋膜组织进行,和通用汽车表面进行扫描激光多普勒血流灌注成像(LDPI) (PeriScan PIM II型、PERIMED、瑞典)。扫描激光波长为670 nm, NR扫描模式与中间使用了扫描精度。有20厘米的距离扫描头的检测对象,而扫描图像的面积大约是70(宽度)×70毫米(高度)²,导致一个图像像素大小为0.5×0.5毫米²。用于扫描一个图像的时间是45秒,每个区域扫描实现平均值的两倍。附属的在线LDPI 2.5图像分析系统是用来进行身体血流量记录,分析,处理和存储。血流量值从通用挫伤部位的表面被提取。血流灌注还计算出测量单位(PU) PERIMED仪器(PU =在CMBC(血液细胞内的浓度测量体积)×V(血液细胞的平均速度))。

2.5。组织学染色和定量组织学分析

组织学分析挫伤后的四组在不同时间点被hematoxylin-eosin可视化(他)染色。再生肌纤维被他们杰出的集中的核(31日]。原子核周围没有明显的细胞质被丢弃。再生肌纤维的总数在挫伤网站以5每个样本的随机领域使用先前描述的协议(32]。测量再生肌纤维的直径,短轴直径(最小的直径)来衡量Image-Pro +图像分析软件(IPP, 6.0版本,媒体控制论,美国)。对于每一个样本,六个部分从他随机选择部分(图像采集原始放大,×200)。该技术测量centronucleated肌纤维的最小直径是一种广泛使用的方法来评估肌肉再生(33]。我们跟着先前建立的协议(34),和centronucleated肌纤维直径超过10μm是连续测量每个通用。准备部分由一个侦探观察实验使用光学显微镜(蔡司是不可见的范围。人工智能,德国卡尔蔡司)。

2.6。马森染色和免疫组织化学(MHC、GDF-8 p-Smad2/3)

通用样本固定在4%福尔马林3天前被嵌入在石蜡。切成5块μ米部分,然后通过一系列分级酒精脱蜡、水化。这个协议通常用于古典马森染色和immunohistological染色。

使用经典的马森染色。短暂,马森的三色的染色进行量化胶原蛋白含量以及受伤的区域。这个过程彩色骨骼肌纤维的红色。胶原蛋白是彩色有点绿色,细胞核染黑。对于每一个样本,由IPP六个部分进行了分析,collagen-positive总面积的百分比相对于总横截面积计算估计纤维化形成(×200)。

Immunohistostaining:检索后,部分被放置在3% H₂O₂在室温下10分钟(RT)。洗后,部分被封锁屏蔽解决方案10分钟rt,部分主要抗体孵育:MHC (1: 50), GDF-8(1: 50),和p-Smad2/3(1: 50)兔多克隆抗体(美国圣克鲁斯,CA)一夜之间在4°C。洗后,部分在37°C孵化30分钟以下抗体:聚合合共轭,anti-rabbit免疫球蛋白(武汉博士德生物工程有限公司,中国)。洗涤后,用组织化学染色结果发现3′′diaminobenzidine(民建联、武汉博士德生物工程有限公司,中国)10分钟rt,棕色染色的细胞质或核被认为是一个积极的结果。当所有的为每个样本染色完成后,六个部分从免疫组织化学(×400)随机选择部分图像采集。最后,平均光密度由IPP (MOD)值的计算。准备部分由一个侦探观察实验使用光学显微镜(蔡司是不可见的范围。人工智能,德国卡尔蔡司)。

2.7。透射电子显微镜(TEM)观察肌原纤维超微结构

兔子牺牲时,一块通用收获(1×1×1毫米³)。受伤的转基因组织固定在5%戊二醛1 - 3 h,洗在缓冲区,然后固定在1%锇酸与pH值调整在4°C 7.2 - -7.4。组织与乙醇梯度脱水,然后被放在100%丙酮为10分钟。组织被嵌入在100%的脱水剂和等价的包埋剂的混合物(Epon 812) 60分钟,才最终放置在一夜之间纯粹的包埋介质在4°C。

肌纤维的结构进行了分析和电子显微镜(日本日立公司(Hitachi Ltd .))。组织部分80海里的准备与醋酸铀染色饱和水溶液,其次是柠檬酸铅。组织检查等形态学改变肌原纤维排列规则,肌节的位置,肌节的光带(我线),和暗区(一条线)。任何z线异常、骨骼肌细胞膜、细胞核、线粒体、肌浆网,T管小,卫星细胞,等等也被观察到。

2.8。统计数据

数据从本研究提出了均值±标准差。每个时间点的数据用SPSS 13.0统计软件进行分析。正态分布进行了分析和单因素方差分析。组间比较采用LSD法进行。结果与双面检查评估。一个被认为有显著性差异。

3所示。结果

3.1。评估肌肉挫伤后再生

3.1.1。肌肉再生的定量组织学分析

我们发现受伤的差距最初装满一个大血肿和增殖肉芽组织和连接疤痕组织开发网站挫伤后14天内受伤。在这项研究中,挫伤后再生肌纤维显示嗜碱性胞浆和trachychromatic细胞核聚集在中央区域(图2(一个))。

挫伤愈合,centronucleated再生肌纤维取而代之的是肌纤维直径较大的细胞核位于边缘。挫伤组再生肌纤维周围大量的胶原纤维。胶原纤维的数量和直径均明显低于正常组()。EA治疗后,肌纤维再生发生,这一直持续到28天。再生肌纤维的数量和直径相比大幅度增加的挫伤组7天(或)。然而,没有明显差异观察正常和EA组之间在28天()。此外,再生肌纤维也发现rhIGF-I集团及其直径明显大于EA组()。然而,纤维的数量低于EA组(或)(数据2 (b)- - - - - -2 (c))。

3.1.2。MHC在不同组织的表达

MHC是一个重要的观察的肌球蛋白丝结构,负责维护肌纤维的结构完整性。在骨骼肌的发育过程和再生,MHC的细胞质肌肉管是肌纤维再生(24]。因此,MHC的表达强度在细胞质中被用来评估肌纤维再生(25,26]。

我们发现在正常肌纤维MHC表达很少存在,国防部价值的MHC挫伤组也明显高于正常组在天7日14日和28挫伤后(或)。国防部的MHC EA组显著高于挫伤组(),但低于rhIGF-I组()(图3)。

3.1.3。损伤后骨骼肌超微结构的变化在不同的组

TEM显示肌纤维超微结构的变化,特别是观察和线粒体的变化。肌纤维的肌节结构反映了功能,线粒体的变化显示肌纤维的状态。正常组,通用观察正常结构,清晰和常规,和作用被安排在一个有序的时尚学科去。肌原纤维之间有少量的线粒体和肌浆网分布规律与综合肌膜。卫星细胞位于基底膜的数量减少,他们有一个轴的形状与少量的细胞质。挫伤后7天,肌原纤维结构,观察受伤组织的无序和z轴,线粒体和肌浆网是不正常的。卫星细胞被激活后受伤。挫伤组,z线模糊,明显的流。线粒体的肿胀,肌浆网统一rhIGF-I组和人数都增加了。挫伤后14天,受伤组织的肿胀线粒体数量减少。 In the contusion group, myofibrils were small and the diameters were different. In the EA and rhIGF-I groups, the arrangement between myofibrils appeared like a connection of joints, with the Z-Line being clear and regular. However, the diameter of myofibrils was uneven. On day 28 after contusion, Z-Lines disappeared in some myofibrils in the contusion group and some were atrophic with mitochondria gathered under the muscle membrane like a bubble. The structures of the myofibril, sarcomere, and Z-Line were regular, and mitochondria returned to normal in the EA and rhIGF-I groups (Figure4)。

3.2。EA通用的微循环和抗氧化能力的影响

3.2.1之上。受伤后微循环变化的通用汽车

LDPI直接应激反应后可以检测微循环状态,已广泛应用于临床诊断、评估和研究与微循环有关针灸等(35和骨骼肌微循环36]。我们测量的数量灌注单位在本研究中:PU =在CMBC(血液细胞内的浓度测量体积)×V(血液细胞的平均速度)。

挫伤组的PU值显著降低()比正常组的7天,14日,挫伤后28。EA组明显高于挫伤组(),但明显低于rhIGF-I组(或)。修复的过程仍在继续,EA和rhIGF-I组织的血液灌注增加(图5)。

3.2.2。MDA T-AOC T-SOD的表达,在不同的组

调查EA的保护作用在挫伤后氧化应激反应,我们检测了血清T-SOD活动,T-AOC和MDA。挫伤后第一天,T-SOD的活动和T-AOC显著下降,低于正常组()。然而,MDA组(图显示了相反的结果6)。

在肌肉损伤修复,T-SOD和在每个挫伤组T-AOC活动逐渐增加,28天恢复正常。相反,血清MDA水平逐渐下降到正常水平。天7、14和28挫伤后,T-SOD T-AOC活动在EA组明显高于那些挫伤组(),但低于rhIGF-I集团(或在7天)。几乎没有区别EA和rhIGF-I组14天()。28天,EA组相比明显高于rhIGF-I集团()。在天7和14日挫伤后,EA组MDA水平明显低于挫伤组(),但高于rhIGF-I组()(图6)。

3.3。EA影响胶原纤维的密度,GDF-8, p-Smad2/3

3.3.1。胶原纤维的密度在不同的组

我们对当地的纤维化程度挫伤后细胞外基质(ECM)。马森三色的染色检测纤维的比例执行区域的总横截面积肌肉。有绿色的小染色正常肌纤维周围胶原纤维。在修复过程中,绿色的胶原纤维在红染色肌纤维肌肉细胞外的区域。挫伤后7天,肌纤维周围胶原纤维沉积。天7、14和28挫伤后,挫伤组胶原纤维的密度明显高于正常和EA组()。此外,EA组有更多的纤维比rhIGF-I集团()(图7)。

3.3.2。GDF-8和p-Smad2/3在不同组织的表达

分析机制EA如何抑制过度ECM纤维化,我们调查了GDF-8 / p-Smad2/3信号通路。我们发现在7天、14和28挫伤后的蛋白表达水平GDF-8和p-Smad2/3挫伤组明显高于正常组()。EA组明显高于挫伤和rhIGF-I组()。这种趋势符合胶原纤维的密度的变化(数据8和9)。

4所示。讨论

使用针灸有着悠久的历史在中国和整个亚洲。针灸的疗效并不广为人知,这限制了其在全球范围内使用。因此,它是非常重要的定义针灸的好处。作为现代针灸的方法之一,EA使用针灸针作为一个电极应用低频刺激。证据表明,EA是安全的和有效的在各种各样的疾病,如多囊卵巢综合征(37,痛经38),和自闭症谱系障碍(39]。

骨骼肌是至关重要的支撑结构,运动,和功能。最常见的原因之一,肌肉挫伤是一个非穿透物体的影响(40]。一旦挫伤损伤发生,治疗的过程中被激活和再生肌纤维有能力通过卫星细胞的激活40]。然而,纤维化形成最终会损害肌肉愈合过程由于过量的胶原蛋白的积累。纤维化甚至可以成为一个自我实现的过程,和过度纤维化的抑制再生肌纤维(41]。

基于之前的研究,我们调查了EA影响机制促进骨骼肌挫伤后再生和抑制过度纤维化。本研究观察兔通用挫伤后的愈合过程,表明EA治疗可以显著增加和再生肌纤维直径和改善MHC的水平。此外,作用在肌原纤维的排列和z轴分布分析了TEM时似乎正常化。挫伤组肌原纤维断裂和萎缩。这一结果表明,EA不仅可以促进肌纤维再生,而且提高肌原纤维的修复和肌节结构。

纤维化的自然愈合区域包含地区和大量的胶原纤维紧密围绕肌纤维萎缩的肌纤维和证据。EA治疗可以有效地减轻纤维化和降低肌纤维萎缩。周围组织和血管也遭到破坏,所以供应营养神经和肌纤维被阻塞。这阻塞造成二次伤害42),和血液循环障碍的一个重要原因增强ECM纤维化和降低肌纤维再生。因此,适当的血液灌注治疗受伤的肌肉(至关重要43]。以前的研究报道,电针刺激ST36 [44)或安穴位(45)改善血液流动。我们评估微循环变化的通用受伤后,发现EA组比挫伤组织更有效地修复。此外,EA和挫伤组之间有显著差异。我们的数据表明,electro-acupuncturing ST36和安穴位改善血液流动的速度和促进血肿的吸收。这些改进可能与整体效果。

挫伤会损害等离子体膜的完整性和骨骼肌纤维的基膜。损伤导致细胞外钙离子通量和局部血肿形成,激活中性粒细胞和巨噬细胞,“呼吸爆发的感应。“呼吸爆发导致superoxygen离子的形成。氧自由基损伤等大型细胞分子脂类,蛋白质,和DNA,最终导致细胞死亡,并导致骨骼肌的进一步损害46]。因此,抗氧化剂能有效降低组织纤维化(47和是有益的肌纤维结构重建48)通过防止肌纤维萎缩(49]。

通过抗氧化作用Electro-acupuncturing ST36穴位保护身体。EA保护下丘脑,肝脏,血红细胞(50),和黑质纹状体(51),等等。T-AOC包括酶和非酶的抗氧化防御系统,反映了身体调节抗氧化剂和清除自由基的能力。低水平的T-AOC可以减少体内抗氧化酶合成或利用控制过度的非酶的抗氧化剂活性氧(ROS)生成的氧化/抗氧化平衡。EA T-AOC水平增加受伤的组织,发挥保护作用[52]。骨骼肌内T-SOD是主要的抗氧化酶,它可以消除组织和细胞代谢产生的自由基和过氧化物,保护细胞不受氧化应激损伤(53]。在这项研究中,挫伤后第一天,血清T-AOC和T-SOD活动显著降低然后逐渐增加。血清T-SOD在我们实验的水平下降可能是由于抑制或氧化失活的酶蛋白血清引起的过量生成活性氧(54]。的活动在EA组血清T-AOC和T-SOD逐渐恢复正常,并高于挫伤组。增强T-AOC可能增加抗氧化细胞损伤或促进细胞的生物合成得到亚致死的伤(55]。这些可能性与我们实验的结果相一致。EA还可以减少浸润细胞和/或不受欢迎的氧化可以促进组织修复。MDA的主要次生氧化产品之一来自多不饱和脂肪酸(56),所以MDA水平的检测可以反映体内脂质过氧化的程度和细胞损伤的程度。我们发现,MDA水平的提高,可以直接反映氧化损伤肌纤维挫伤后1天。EA治疗后,MDA水平显著降低。这一结果表明,清除氧自由基增加,因为EA改善血液循环。改进的循环保护细胞膜免受氧自由基的攻击,减少了一代的脂质过氧化作用的产品。

氧化应激引起的灾难性的循环线粒体DNA (mtDNA)损伤和功能下降。这就产生了更多的活性氧生成和细胞损伤(57]。本研究证实,EA改善线粒体功能受伤组织(58),electro-acupuncturing ST36穴位(59减轻线粒体的肿胀。28天,挫伤组显示线粒体变化伴随着肌原纤维断裂和萎缩。然而,EA或rhIGF-I治疗组没有表现出相同的现象。这种现象可能与转基因微循环灌注不足,因为挫伤组线粒体肿胀。因此,EA活化血液循环和骨骼肌挫伤后逐渐改善微循环。改进的循环增加氧自由基清除能力和提高抗氧化能力。此外,增加循环还可以帮助改善受伤组织的能源供应,减少氧化应激损伤,减轻细胞渗透,保护肌节结构,并最终减少纤维化。这些属性是肌原纤维再生有利。

成纤维细胞被激活后骨骼肌损伤和分泌胶原纤维数周(60]。胶原纤维的早期阶段,伤口愈合有积极的效果,可以增加伤口的抗拉强度,让伤口两端的纤维附着在骨架(61年]。修复完成后,最早的肉芽组织取代了疤痕组织(主要是I型胶原蛋白)和长时间保持不变62年]。新纤维疤痕组织是一个障碍,抑制骨骼肌再生(11]。之前有研究表明,过度纤维化肌纤维再生受损(ECM是一个重要的因素33]。因此,我们推测,EA可以促进肌纤维再生通过抑制过度纤维化。Thorsteinsdottir et al。63年)表明,降解ECM和减少纤维化是有利于骨骼肌卫星细胞迁移和分化和促进再生。在器官纤维化的研究中,electro-acupuncturing ST36缓解肾衰竭引起的肾小球硬化症,tubulointerstitial纤维化(64年),和碳tetrachloride-induced肝纤维化(65年]。调查是否EA可以减少ECM纤维化的骨骼肌挫伤后,本研究观察了损伤区域的纤维化形成过程反复在天7日14日和28日。结果表明,挫伤组明显纤维化,但是EA组抑制胶原纤维沉积的第七天,显著降低整体的纤维化。

调查EA如何抑制ECM纤维化的机制,我们分析了EA GDF-8 / p-Smad2/3信号通路的影响。GDF-8 TGF -的一个成员β总科(66年)是参与加速ECM的沉积增加ECM的合成蛋白质和抑制ECM降解[40]。这也是一个监管机构的骨骼肌负增长(66年],它的信使rna和蛋白质表达的是高度退化骨骼肌肉和结缔组织(67年]。GDF-8还能抑制肌肉卫星细胞的自我更新68年)通过推迟myogenin表达式(69年)通过激活和增强纤维化的典型TGF -β/ Smad信号通路(70年]。p-Smad2/3 profibrotic因素与GDF-8在细胞核诱发ECM纤维化的沉积过程71年]。GDF-8也有监管作用在瘠薄肌成纤维细胞的增殖41和成肌细胞分化72年]。TGF -β需要激活Smad2/3信号转导通路,因为效果可能会阻止使用TGF -β中和抗体(73年]。天7、14和28挫伤后,EA可以显著抑制GDF-8和p-Smad2/3蛋白表达水平。EA不仅减少纤维化通过抑制TGF -β/ Smad信号通路还肌纤维再生通过抑制GDF-8改善。

总之,这些结果表明,EA促进骨骼肌再生和抑制过度纤维化挫伤后,机制可能与几个因素有关。这些因素包括其影响与促进血液循环改善局部微循环灌注,消除血瘀。此外,EA增加了抗氧化应激能力,从二级保护骨骼肌损伤。EA还抑制ECM纤维化和提供了一个良好的环境为骨骼肌再生增强胶原蛋白降解能力和抑制TGF -β/ Smad信号通路。和一些功能的评估将被添加在EA的进一步设计揭示意义治疗挫伤后肌肉力量和电生理学。

作者的贡献

丹罗Rongguo Wang,程小同样导致这项工作作为共同第一作者。

承认

本文从美国国家科学基金会支持的项目中国没有。81173343)。