文摘
铂化疗药物,常常会导致神经性冷触诱发痛后一个政府。蜂毒针灸(BVA)已经被使用在韩国来缓解各种疼痛症状和显示有一个强有力的老鼠在nerve-injured antiallodynic效果。我们检查是否BVA缓解oxaliplatin-induced冷触诱发痛和内源性镇痛系统有牵连。寒冷的铂注入引起的异常性疼痛(6毫克/公斤,i.p。)评估老鼠的尾巴沉浸到冷水(4°C)和测量延迟撤军。BVA(1.0毫克/公斤,南卡罗来纳州。)Yaoyangguan (GV3) Quchi (LI11),或Zusanli (ST36)穴位显著降低冷触诱发痛和最长的效果被GV3集团所示。相反,高剂量的BVA(2.5毫克/公斤)GV3没有显示显著antiallodynic效果。酚妥拉明(α肾上腺素的拮抗剂,2毫克/公斤,i.p)部分屏蔽BVA在异常性疼痛的缓解效果,而纳洛酮(阿片拮抗物,2毫克/公斤,i.p)没有。我们进一步证实一个鞘内idazoxan管理局(α2肾上腺素的拮抗剂,50μg)封锁了BVA-induced anti-allodynic效果。这些结果表明,BVA减轻oxaliplatin-induced冷触诱发痛在老鼠,至少部分,通过激活去系统的。因此,BVA oxaliplatin-induced神经病变可能是一个潜在的治疗选择。
1。介绍
结直肠癌(CRC)是第三个男性和女性最常见的癌症,在2008年造成608000人死亡,在世界范围内,使其成为第四个死于癌症最常见的原因(1]。铂是一个重要的化疗药物用于治疗转移性CRC患者(2,3]。因为它的以铂为基础的分子结构,它会引起神经毒性副作用,特点是自发的迅速出现严重的疼痛和冷触诱发痛的手,脚,口周的区域,或喉咙,甚至从一个政府(4,5]。这是唯一主要dose-limiting毒性与铂使用[6]。自机制仍不清楚,建立的有效治疗神经性触诱发痛尚未发现(7]。因此,这将是非常重要的发现潜在的治疗选项来管理oxaliplatin-induced神经性疼痛。
蜂毒针灸(英国),治疗的方法注入蜂毒(BV)到一个或多个穴位,已经使用传统上在东亚,特别是韩国,以减轻疼痛和治疗各种疾病,如关节炎、风湿、背痛、扭伤、腰椎间盘突出髓核(8- - - - - -12]。众所周知,针灸、电针刺激的镇痛效应(EA)介导的内源性阿片类药物和/或去甲系统[13- - - - - -18]。相比之下,antinociceptive BVA的行为被报道是由去甲系统,而不是阿片类药物(19- - - - - -21]。在外围nerve-injured老鼠,李和他的同事们证明BVA减毒机械触诱发痛,热痛觉过敏,和寒冷的异常性疼痛,主要是通过激活中枢去甲系统(22- - - - - -24]。然而,英国对oxaliplatin-induced神经性疼痛的影响及其机制还没有研究。
在目前的研究中,我们调查是否BVA缓解oxaliplatin-induced冷触诱发痛,如果是这样,内源性镇痛系统有牵连。我们报告在这里BVA有力antiallodynic影响oxaliplatin-induced在大鼠周围神经病变,穴位和剂量相关,它包括去甲系统部分,但不是内源性阿片系统。
2。材料和方法
2.1。动物
成年男性Sprague-Dawley老鼠(210 - 250克,8周大)(Daehan Biolink,来自韩国忠北,韩国)被安置在笼子里(3 - 4每笼老鼠),水和食物随意。房间保持12 h-light /黑暗周期(光周期;08:00-20:00,黑暗周期;20:00-08:00)和保持在23±2°C。所有动物都适应了他们的笼子前1周任何实验。所有程序涉及动物机构批准的动物保健和使用委员会庆熙大学(KHUASP (SE) 12 - 044),并按照指南进行痛苦的国际研究协会(25]。
2.2。铂注射液
如前所述(5,26),草酸铂(西格玛化工有限公司、美国)溶解在5%葡萄糖的浓度(美国σ)解决方案2毫克/毫升,腹腔内注射6毫克/公斤。同样体积的5%葡萄糖溶液注射在车里被对照组。
2.3。行为测试
估计冷触诱发痛是否诱导、冷浸渍试验进行了如前所述[27,28]。短暂,每个动物都固定在一个塑料夹,尾巴低垂了冷水刺激的正确应用。老鼠适应持有人行为开始前2天测试。尾巴是沉浸在4°C水,然后尾巴撤退延迟(TWL)测量的截止时间15秒。冷浸渍试验以5分钟的间隔重复了五次。在计算平均延时,截止时间被分配到正常的反应。的平均延迟被作为衡量冷触诱发痛的严重程度;更短的TWL被视为一种更严重的异常性疼痛。
因为我们以前的研究表明,一个重要allodynic行为诱导后3天一个铂(6毫克/公斤,i.p。)注入和持续注射后1周(未发表的数据),我们测试是否以及如何BVA缓解oxaliplatin-induced冷触诱发痛后3到7天铂管理。
2.4。BVA治疗
确定最优BVA的穴位,oxaliplatin-injected老鼠被随机分为三组:Quchi (LI11) Zusanli (ST36)和Yaoyangguan (GV3)组(/组)。冷敏感性基线测量后,BV(1.0毫克/公斤)溶解在生理盐水(N / S, 0.05 cc)在GV3皮下注射,LI11,分别或右ST36穴位(图1)。冷浸渍试验是在BVA 1小时,2小时后再次执行。LI11位于大萧条内侧伸腕桡侧的,年底侧前臂的折痕(29日]。ST36位于胫骨前肌,5毫米侧和远端前的胫骨结节(30.]。GV3穴位位于尖尖的过程之间的第四和第五腰椎(29日]。
为了找到BVA的有效剂量,与冷触诱发痛大鼠随机分为四组BV2.5, BV1.0 BV0.25和CON组(/组)。BV(2.5毫克/公斤,1.0毫克/公斤或0.25毫克/公斤)溶解在N / S皮下注射GV3穴位。对照组(CON),只有0.05毫升的N / S是在同一穴位注射皮下注射。
2.5。药物治疗
BVA的调查机制,oxaliplatin-injected老鼠被随机分为三组:N / S + BV,纳洛酮+ BV,酚妥拉明+ BV (/组)。基线后,检查冷敏感性;纳洛酮+ BV和酚妥拉明+ BV团体治疗腹腔内与纳洛酮和酚妥拉明(2毫克/公斤,溶解在生理盐水的浓度1毫克/毫升),分别。N / S + BV组与生理盐水治疗腹腔内。二十分钟后,所有组治疗皮下注射和0.25毫克/公斤的BV GV3穴位。进一步确认的去机制BVA-induced antiallodynia, idazoxan (α2肾上腺素能受体拮抗剂,50μ50 g溶解在μL N / S)或N / S,鞘内注射异氟烷麻醉下如前所述[31日]。冷浸渍试验BVA后又进行了30分钟。所有的药物都来自Sigma-Aldrich(圣路易斯,密苏里州,美国)。
2.6。统计分析
所有的数据都意味着±SEM。统计分析和图形作品用Prism 5.0(美国图垫软件)。配对t以及或重复测量方差分析(方差分析)其次是Dunnett事后测试是用于统计分析。在所有情况下,被认为是显著的。
3所示。结果
3.1。BVA的影响在Oxaliplatin-Induced寒冷异常性疼痛:穴位和剂量
BVA的anti-allodynic效应在不同的穴位(GV3 LI11,或ST36)在oxaliplatin-injected老鼠如图2。在所有组中,BVA治疗(1.0毫克/公斤,南卡罗来纳州)显著增加TWL BVA后1小时与基线相比TWL ()。这样anti-allodynic效应GV3 BVA的持续治疗后2小时(),而著名的镇痛穴位,LI11 ST36 BVA治疗,显示无显著影响BVA(后2小时)。在控制实验中,前后无显著差异在TWLs光固定没有BVA(数据未显示)和N / S注入GV3 (,图3 (d))被观察到。这些结果表明,BVA治疗有效的镇痛措施,效果是依赖于穴位。
(一)
(b)
(c)
(一)
(b)
(c)
(d)
图3显示BVA的影响与不同剂量oxaliplatin-induced冷触诱发痛。高剂量的BVA(2.5毫克/公斤)或N / S注入GV3没有显示显著anti-allodynic效果(BVA的),而低剂量(0.25毫克/公斤和1.0毫克/公斤)在GV3显著增加TWLs 1小时后注射与TWL相比之前注入(和、职责)。BVA ST36或LI11最高(2.5毫克/公斤)或最低(0.25毫克/公斤)剂量显示无显著anti-allodynic效果(之前和之后TWLs BVA: 3.13±1.10和7.35±2.09(2.5毫克/公斤BVA ST36);4.65±1.16和8.61±1.25(2.5毫克/公斤BVA LI11);4.90±0.75和9.04±2.00(0.25毫克/公斤BVA ST36);3.87±0.60 vs。6.49±2.41(0.25毫克/公斤BVA LI11);/组,通过配对t以及)。
3.2。阿片类药物和肾上腺素能受体拮抗剂对BVA-Induced Antiallodynia
自0.25毫克/公斤BVA略比1.0毫克/公斤BVA(数据更有效3 (b)- - - - - -3 (c)),0.25毫克/公斤BVA GV3被用来看到内源性镇痛系统介导BVA-induced anti-allodynic行动。如图4,酚妥拉明(α肾上腺素能受体拮抗剂,2毫克/公斤,i.p)预防组表现出TWL BVA(前后的差异不显著),这表明去甲系统在调节过程中发挥作用的抑制效果BVA oxaliplatin-induced冷触诱发痛。我们进一步证实idazoxan的鞘内注射(信息技术)(α2肾上腺素能受体拮抗剂,50μg),但不是N / S,封锁了BVA-induced anti-allodynic效应(数字4 (d)- - - - - -4 (e)。相比之下,纳洛酮(阿片拮抗物,2毫克/公斤,i.p)和N / S显示显著增加TWL BVA治疗后(和、职责),表明内源性阿片系统没有参与BVA-induced anti-allodynia。
(一)
(b)
(c)
(d)
(e)
4所示。讨论
铂是一种以铂为基础的第三代化疗药物治疗转移性CRC患者(2,3]。因此,它在结构上类似于顺铂和卡铂和神经毒性副作用,但没有观察到肾毒性和hematotoxicity (2,4]。这种急性oxaliplatin-induced神经毒性是通过单个铂发达甚至管理(5,26]。只有少数报告显示的有效的治疗或预防oxaliplatin-induced神经性疼痛的症状。虽然静脉注射钙和镁治疗可能减弱oxaliplatin-induced神经病变的发展32,33),这是没有完成既定的异常性疼痛的治疗(7,34]。因此,现在需要找到潜在的治疗选项来管理oxaliplatin-induced神经性疼痛。
这项研究清楚地表明,英国有一个强有力的老鼠在oxaliplatin-injected anti-allodynic效果(数字2和3)。看到acupoint-dependent效应,我们检查了穴位最oxaliplatin-induced寒冷的异常性疼痛缓解效果。尽管BVA LI11、ST36 GV3穴位都有显著的镇痛效果,在GV3 BVA穴位有持久的影响比其他穴位(图2)。这期间anti-allodynic BVA的行动GV3(持续~ 2小时)是临床上重要的因为吗啡(1、2和4毫克/公斤,i.p)显示没有明显的镇痛效应在2小时后管理(26]。还应该注意的是,GV3穴位接近尾部,执行冷浸泡试验,比其他的穴位。有趣的是,我们发现EA刺激点的后肢有anti-allodynic效应大于EA尾巴靠近测试点(未公开的数据)。这些结果可能表明,近端穴位刺激更有效在BVA治疗oxaliplatin-induced神经性疼痛,而远端穴位刺激在EA的治疗更有效。
关于BVA的有效剂量,我们证明低剂量BVA(1.0或0.25毫克/公斤)显著anti-allodynic效应oxaliplatin-injected老鼠虽然高剂量BVA(2.5毫克/公斤)没有显著的影响(图3)。这样的结果是在先前的研究结果不同,康et al。23]表明低剂量(0.25毫克/公斤)的BVA没有产生anti-allodynic效果显著,而高剂量的BVA(2.5毫克/公斤)显著降低冷触诱发痛在大鼠坐骨神经慢性收缩模型损伤(CCI)。这种差异可能是由于不同的疼痛模型(坐骨神经CCI与铂),该地区的冷触诱发痛测试(后爪子和尾巴),和穴位(ST36与GV3)使用。在目前的研究中,然而,一个老鼠接受高剂量(2.5毫克/公斤)的TWL BVA呈逐渐下降趋势(之前BVA = 6.40秒;1小时后BVA = 4.89秒;2小时后BVA = 3.85秒),这表明更严重的疼痛。BV也被称为“双刃剑”在一起疼痛的和antinociceptive效应(35]。因此,它可能是高度重视通过disease-by-disease BVA方法的找到一个合适的浓度。在正在进行的研究中,英国的最佳剂量在不同疾病模型研究。
针灸已经使用了数千年东亚地区包括韩国、中国和日本来治疗各种疾病产生一些副作用。近年来,它已收到关注医学作为一种替代方法在西方国家(36,37]。几十年前,它已经在许多临床和动物实验证明针灸或EA镇痛的内源性镇痛系统,尤其是阿片类药物(13,16,18,38)和去甲抑制系统(14,15,17,39,40]。我们先前的研究使用周围神经损伤的大鼠模型建议的阿片类药物和去甲系统同样导致了anti-allodynic EA的影响(41- - - - - -43]。另一方面,英国一直报道减弱引起的神经性疼痛症状CCI通过激活α2肾上腺素能受体,但不是阿片受体在大鼠脊髓22- - - - - -24]。同样,目前的结果(图4)表明,BVA oxaliplatin-induced寒冷的异常性疼痛的缓解效应包括去甲,但不是阿片系统。因此,BVA和EA可能有不同的机制oxaliplatin-induced anti-allodynic行动的神经病变。然而,anti-allodynic BVA的影响在本研究中只是部分被酚妥拉明预处理()。三个科目的TWL酚妥拉明+ BV集团大幅增加与基线TWL BVA相比后,而其他三个科目的TWL没有。这可能是由于个体差异酚妥拉明,正如前面所示神经损伤模型(44]。或者,其他下行抑制系统如血清素激活的,GABA和/或胆碱能系统可能涉及[19,30.,43]。在这个问题上进一步的研究可能会增加我们对BVA镇痛的神经机制的理解。
5。结论
总之,我们的研究在目前的研究表明,英国有一个有效的缓解效应在oxaliplatin-induced寒冷异常性疼痛,GV3穴位和低剂量的BV有一个最佳的效果。这样anti-allodynic BVA部分介导的效果去,但不是阿片系统。因此,我们建议BVA治疗可能是一个潜在的治疗选择oxaliplatin-induced神经性疼痛。
利益冲突
作者宣称没有利益冲突。
确认
这项工作是由韩国国家研究基金会(NRF)授予由韩国政府(最高明的)(没有。2012 - 0005755)。作者感谢Ji-Hwan李和金Hyunseong优秀的技术支持和讨论。