文摘
目标。探讨艾烟对SAMP8小鼠的抗衰老作用。方法。使用阶乘设计,接触长度(每天15或30分钟)和浓度低,5 - 15毫克/米3;中间,25 - 35毫克/米3;高,85 - 95毫克/米3),70 SAMP8小鼠被随机分配,/组,模型组或六艾烟组:L1,我2,米1,米2H1(即H2。十SAMR1老鼠作为正常控制。老鼠在艾烟组艾烟在各自的浓度和接触长度;模型和正常控制老鼠不暴露。脑5、DA、NE水平用ELISA测定。结果。与常规控制相比,模型组明显下降5、DA、NE。与模型组相比,5 -和NE组明显高于L2,米1,米2和DA明显在L2和M1。5、DA、NE水平最高的群体1在艾烟组。明显暴露长度为5×浓度观察交互,DA、NE。结论。艾烟增加单胺神经递质水平,根据不同浓度和接触长度。我们的发现表明,艾烟的中间浓度15分钟似乎是最有益的。
1。介绍
艾灸,艾的燃烧锥或棒(艾蒿,通常艾属寻常的在穴位),是一种古老的中医疗法(中医),它用于疾病预防和治疗。在艾灸、热刺激和艾烟同时生产。艾烟目前未知的治疗效果和更普遍接受的是,热刺激的关键因素是艾灸的效果(1]。事实上,它是记录在古代文学,艾烟是用来防止流行病和现在用来消毒空气在医院病房(2]。除此之外,在体外研究表明,艾烟显示生物活性的肿瘤特异性细胞毒性(口腔鳞状细胞癌HSC-2 HSC-3和早幼粒细胞白血病HL-60)和彻底清除,,1O2,(3,4]。所有这些强烈表明,艾烟可能有一定的治疗效果,这导致了艾灸的效果。艾灸的报道是有效的抗衰老通过几种方法,包括提高抗氧化能力通过增加SOD活性和抑制MDA或没有内容和NOS活性(5,6),增强免疫功能,调节血清il - 6水平和水平[- 27),改善神经内分泌功能。作为正常的衰老过程的一部分,大脑神经递质在不同地区表现出显著变更的(8,9],如减少5 -羟色胺(5)水平在皮层,纹状体,和下丘脑多巴胺(DA)在大脑皮层和纹状体,和去甲肾上腺素(NE)含量在大脑皮层(9]。5 -艾灸显示良好的监管以来,NE、DA (10,11),我们假设艾烟也可以调节单胺神经递质与年龄相关的变更。在这项研究中,我们使用了一个衰老动物模型senescence-accelerated倾向鼠标(SAMP8)研究艾烟的影响在单胺神经递质5 - DA、NE在大脑老化。
2。材料和方法
2.1。动物的准备
SAMP8是常用的老化动物模型研究和senescence-accelerated鼠标/电阻(SAMR1)老鼠通常用作桑普正常老化控制压力。在SAMP8小鼠衰老自然发生在出生后4 - 6个月;典型症状类似阿尔茨海默病(12,13),脑单胺神经递质大大减少。我们获得70 SAMP8和10 SAMR1雄性老鼠的6个月的年龄和体重的动物中心的g到天津大学附属第一医院中医(天津)。老鼠被安置在单独的笼子里有免费的食物和水。控制环境的温度20 ~ 24°C,湿度50% ~ 60%,12小时光暗周期是维护整个研究。所有程序进行了动物实验按照世界卫生组织的国际指导原则涉及动物的生物医学研究,并经当地伦理委员会批准的北京中医药大学。
适应在动物房住一星期后,10 SAMR1老鼠作为正常的控制,和70年SAMP8小鼠被随机分配(/组)模型组或六艾烟集团之一。六个艾烟组分为L1,我2,米1,米2H1,或H2使用2×3的阶乘设计,长度的暴露(每天15或30分钟),和艾烟浓度(低,5 ~ 15毫克/米3;中间,25 ~ 35毫克/米3;或高,85 ~ 95毫克/米3)(表1)。六个艾烟组艾烟4周每周6次;模型和正常控制老鼠不是艾烟。
2.2。艾烟干预
专门设计的老鼠的笼子里,可以容纳一个鼠标和鼠标可以扭转在笼子里,让自己舒适的使用在艾烟干预措施。艾烟生成通过燃烧艾棒(三岁的纯艾,0.5厘米×12厘米,院长南洋韩艾有限公司,有限公司,中国)。艾烟就包含在一个专门设计的玻璃盒(80厘米×80厘米×60厘米)。其上盖,圆孔直径0.6厘米,可以转移。光散射数字粉尘测试仪(DT,北京BINTA绿色科技有限公司)是用于监测烟尘浓度的检测水平的点10(颗粒物< 10μ米直径)。
2.2.1。干预的六组吸烟
组接受相同浓度的艾烟接触在一起。主要过程如下。DT是放置在中间的玻璃箱监控浓度。老鼠分别放入定做的笼子里,用相同的浓度和组,如L组1L和组2放入定做的笼子里,随后,组具有相同浓度被两边的DT。燃烧的艾棒插入玻璃框从上孔,另一端在调查员的手举行。当盒子装满了预定数量的烟,历时约15,32岁,82秒低,中间,和高浓度,分别被撤回和洞很快关闭。15分钟后,老鼠属于15分钟暴露组被移除,而30分钟暴露组持续了15分钟。
确保艾烟的浓度在指定范围,艾烟尘浓度由DT动态监控每三分钟。浓度超过上面的范围时,上盖的玻璃盒子搬到释放的烟雾和当它低于低范围,燃烧艾棒插入了几秒钟。
2.2.2。干预两个对照组
模型和正常组织没有艾烟。在这两组老鼠笼,把两边的玻璃箱30分钟没有接触艾烟。
2.3。脑单胺神经递质评估
24小时后过去的干预,老鼠都牺牲了,大脑样本快速切割一个冰板上。使用酶联免疫吸附试验包5,哒,和NE(由南京建成生物工程研究所,南京,中国),吸光度的值是严格衡量标(Multiskan MK3,芬兰)在450 nm波长。5 -的浓度、DA、NE比较测定的样品标准曲线。
2.4。统计分析
数据进行了方差分析(方差分析)和事后分析使用Student-Newman-Keuls进行测试。六个烟组,使用因子数据的方差分析。所有的值被报告为±标准错误。与SPSS分析软件13.0版本;被认为是具有统计学意义。
3所示。结果
3.1。脑单胺神经递质在正常和模型组
与正常组相比,模型组显示显著降低脑5 - DA、NE水平(图1)。
(一)
(b)
(c)
3.2。艾烟对大脑的影响在SAMP8小鼠单胺神经递质
艾烟组比模型组表现出更高层次的单胺神经递质。与模型组相比,5 -和不显著增加在L2,米1,米2,而达于L显著增加2和M1(图2)。
3.3。浓度和接触艾烟的长度的影响在SAMP8小鼠的脑单胺神经递质
使用方差分析因子数据,有一个重要的接触长度和浓度之间的相互作用对脑单胺神经递质水平(图的影响3)。5和NE浓度的函数之间存在着显著的差异。单胺神经递质上没有接触长度的主要作用。
(一)
(b)
(c)
3.4。最优条件与艾烟干预
多重比较显示,艾烟干预的M1集团、中浓度为15分钟,体现最高的效果增加脑5 - DA、NE水平之间的不同组合浓度和接触长度(图2)。
4所示。讨论
在这项研究中,我们探索了艾烟的抗衰老效果,发现艾烟可能会增加SAMP8小鼠单胺神经递质水平和效果与艾烟雾暴露长度和浓度有关。这表明,艾烟可能是艾灸的有效成分之一。5、DA、NE是重要的神经递质在中枢神经系统和神经功能和衰老密切相关(14]。更具体地说,5 -激发学习和记忆的功能(15,16)可以触发便利化,DA具有兴奋作用对整体行为和参与记忆痕迹的再现。不能调节大脑皮层的兴奋和影响觉醒,感觉,情绪,和高级认知功能;增加了兴奋性不可以提高学习和记忆的17]。SAMP8小鼠被学习和记忆受损。在其他的研究中,六个月SAMP8小鼠单胺和代谢物水平明显下降,与认知障碍相关,在大脑皮层和海马(18]。大脑中DA含量也被证明与老化,减少年龄SAMP8小鼠和DA营业额低于在年轻人19]。障碍SAMP8小鼠的学习和记忆也被药物逆转,增加脑Ach和5 - PI3 K / AKT通路的激活是可能的这种影响机制(20.]。符合这些发现,我们的研究显示减少模型中的类SAMP8小鼠相比SAMR1老鼠。模型小鼠相比,SAMP8小鼠艾烟显示更高水平的脑5 - DA、NE。这表明,艾烟单胺含量增加,从而推迟衰老。
艾牙线是用艾叶(艾叶叶),它的烟包含多个精油,悬浮颗粒物质,化学氧化的产品(21]。艾牙线的化学成分可能为艾烟的影响奠定基础,如黄酮分离艾叶抑制癌细胞增殖的肿瘤细胞系(22)和Arteminolides罪犯(2 - 4)隔绝艾叶抑制通过蛋白转移酶(23]。临床上,艾牙线与高质量专门处理和保存较长时间。艾蒿叶的有效成分主要在于他们的挥发油,如石竹烯、石竹烯(24),可以简化为艾烟。这些挥发性成分是nonaromatic精油。广泛用于芳香疗法,他们没有香味的自然状态,但燃烧时分散他们的香味。精油可以通过通过皮肤吸收施加影响,通过吸入,也可以直接对中枢神经系统通过嗅觉通路(25]。考虑到行动之间的相似性精油和艾烟,我们猜想,艾烟和芳香疗法产生同样的影响。进一步研究关于艾烟的活性成分是必要的为了理解艾烟的机制。
在这项研究中,我们还发现抗衰老效果与烟尘浓度,浓度之间有一个互动的接触和长度。根据我们的结果,单胺神经递质水平是最高的1组(即。,middling concentration for 15 minutes), which suggested that these may be the optimum specifications for raising monoamine neurotransmitter levels. There is probably a nonlinear relationship between dose (concentration and exposure length) and effect of moxa smoke based on the present results, however; further study is needed to determine the dose-effect curve.
本研究存在一定的局限性。氧浓度并不干预过程监控。然而,燃烧艾叶贴在玻璃盒子里只有很短的时间从15到82秒和玻璃盒不是完全密封的。方法来监控氧气供应应该应用于后续研究。其次,学习和记忆的行为测试应该建议未来的研究。
总之,我们的初步观察表明,艾烟可能会增加单胺神经递质在中枢神经系统和中间浓度艾烟15分钟似乎最有益。然而,进一步的调查来证实我们的发现和探索可能的作用机制是必要的。
利益冲突
作者宣称没有利益冲突。
确认
作者感谢Lyn洛瑞结合医学中心的博士,马里兰大学医学院的,她的英语编辑。这项研究得到了国家自然科学基金(没有。81072862)和中国国家基础研究项目(没有。2009 cb522906)。