文摘

的果壳Gleditsia sinensis(投篮)被规定为一个传统的东亚药用治疗各种呼吸道疾病的治疗,但疗效特点和潜在机制仍然不佳。在这里,我们探讨的潜在使用投篮治疗急性肺损伤(ALI),一个高度致命的炎症性肺部疾病,急需有效的疗法,并调查机制的抗炎活性的投篮。预处理C57BL / 6小鼠的投篮明显减毒LPS-induced中性肺部炎症sham-treated相比,发炎的老鼠。记者分析,半定量rt - pcr和免疫印迹分析显示,而不会影响NF -κB,投篮Nrf2-regulated Nrf2激活和表达的基因包括GCLC NQO-1, HO-1 264.7原始细胞。此外,预处理小鼠的投篮增强GCLC的表达和HO-1但抑制促炎细胞因子的包括TNF -α和il - 1β在肺部发炎。这些结果表明,投篮有效抑制中性粒细胞肺部炎症,可以联系在一起,至少在一定程度上,Nrf2 FGS-activating抗炎因子。我们的研究结果表明,投篮可以开发作为治疗ALI的治疗选择。

1。介绍

急性肺损伤(ALI)和急性呼吸窘迫综合征(ARDS)是严重的炎性疾病,其特征是细胞和组织损伤、肺合规异常,和天然气改变损伤,这经常导致致命的呼吸衰竭(几小时内1,2]。肺或肺外的侮辱,如肺炎、愿望,创伤,和脓毒症,导致ALI / ARDS [3),脓毒症是最常见的引发剂ALI / ARDS [4]。在细菌性败血症,脂多糖(LPS),革兰氏阴性细菌细胞壁的主要成分,在诱导炎症中发挥着关键作用,因为它刺激促炎细胞因子的生产包括白介素8 (IL),引起中性粒细胞的浸润ALI患者的肺(5,6]。因此,抑制LPS-induced炎症的主要目标ALI / ARDS患者的药物治疗。

LPS受体结合,toll样受体4 (TLR4),激活促炎的关键转录因子NF -κB诱发各种促炎细胞因子和趋化因子的表达,如肿瘤坏死因子-α,il - 1β,MIP-1α(7]。的前提,阻断NF -κB活性和促炎细胞因子抑制炎症的生产,大量的临床试验,但对ALI / ARDS显示无显著影响。当前药理治疗ALI / ARDS包括吸入一氧化氮(NO)的糖皮质激素来缓解肺动脉高压和管理ARDS-related肺纤维化(8,9]。这些疗法,然而,缺乏坚定支持的临床证据,显示造成严重的副作用,如毒性活性自由基生成从没有和长期神经肌肉软弱,葡萄糖代谢的管制,脓毒症(后引起的系统性皮质类固醇激素1,10]。鉴于唯一证明治疗改善生存与肺保护性机械通气策略11],当务之急是开发有效治疗ALI / ARDS。

在东亚传统医学,水果的船体Gleditsia sinensis(投篮)林(豆科)长期以来一直用于治疗各种呼吸道症状,如呼吸困难、端坐呼吸、咳嗽痰,喉咙痛。此外,它已被管理的外部治疗皮下的化脓性感染(12]。因此,我们假设的投篮的治疗效果是归因于一个强力的抗炎活性成分。在这项研究中,我们测试了这种可能性利用ALI / ARDS动物模型。自底层机制救济的有效性在很大程度上是未知的,我们调查可能的机制的投篮利用巨噬细胞细胞株抑制炎症。我们的结果表明,投篮能够抑制中性粒细胞的肺部炎症在LPS-induced阿里小鼠模型,这是相关联的,至少部分激活NF-E2-related因子2 (Nrf2),一种抗炎的转录因子,在改善急性肺损伤中发挥着关键作用13]。

2。材料和方法

2.1。水提取物的制备g . sinensis果壳

的成果g . sinensis买来Kwang-Myoung-Dang草店(韩国釜山)和认证由c·w·汉教授医学院的韩国釜山国立大学Yangsan,韩国。凭证标本(号码:pnukh001)保存在医学院的韩国釜山国立大学。获得的一份汤是沸腾的300克的水果皮g . sinensis在蒸馏水2小时之后通过0.45过滤μm过滤器。结果汤进行了冷冻干燥过程产生60 g的粉末。适量的粉溶解成磷酸盐(PBS)之前的实验。

2.2。试剂和抗体

(3)- 4 5-Dimethylthiazol-2-yl 2, 5-diphenyltetrazolium溴化(MTT),萝卜硫素,革兰氏阴性大肠杆菌有限合伙人(血清型055:B5)动物研究从西格玛化工有限公司购买(圣路易斯,密苏里州,美国)。TLR4-specific大肠杆菌有限合伙人购买从亚历克西斯生化(美国圣地亚哥,CA)。在这项研究中使用的所有抗体都来自圣克鲁斯生物技术(圣克鲁斯、钙、美国)。

2.3。动物和ALI / ARDS模型

雄性C57BL / 6小鼠,天生的在一个特定的无菌(SPF)设施,从Samtaco生物购买韩国有限公司(乌山、韩国)。动物被安置在认证、标准实验室笼子里,和喂食物和水随意之前的实验。所有试验程序后实验动物保健和使用指南NIH的韩国,和所有的实验机构批准的动物保健和使用委员会釜山国立大学、韩国釜山。

有限合伙人管理之前,老鼠一旦与3.3或13.3毫克每千克的投篮的14天的老鼠,是一样的数量,或4倍,比投篮分别规定韩国医学诊所的病人。一剂的投篮是在250年μL (ddH₂啊,喂老鼠没有造成任何不利影响。在15天,小鼠麻醉Zoletil (Virbac)和接收一个剂量的有限合伙人10毫克/公斤体重鼻内同时控制老鼠收到无菌生理盐水。在有限合伙人管理24 h后,小鼠安乐死的有限公司₂气体。气管被暴露在中线切口,与无菌24-gauge血管内导管插管。双边支气管肺泡灌洗(BAL)是由两个连续灌注物1.0毫升的PBS。总细胞数BAL流体与血细胞计数器计数。然后,细胞BAL流体被cytospin沉淀和彩色巨噬细胞,淋巴细胞、中性粒细胞与Hemacolor(默克公司,达姆施塔特,德国)。总共三百个细胞数,每个微观领域的一百个细胞都得分。每个字段显示细胞的平均数字。

对肺组织的分析,与生理盐水灌注小鼠和整个肺膨胀固定液。石蜡包埋后,5μ米部分被削减和放置在幻灯片和染色与苏木精和伊红染色法())。三个独立H&E-stained部分进行评估200年x显微放大/鼠标。

2.4。细胞培养

264.7原始细胞(美式文化收藏,罗克维尔市,医学博士,美国)在杜尔贝科修改鹰的培养介质(DMEM)包含谷酰胺(200 mg / L)(表达载体;美国加利福尼亚州卡尔斯巴德)补充10% (v / v) heat-inactivated胎牛血清(的边后卫)和100 U /毫升青霉素和100μg / mL链霉素(表达载体)和保持在37°C和5%湿润孵化器有限公司₂之前的实验。

2.5。微量细胞培养四唑试验(MTT)

引起的细胞毒性的投篮是评估MTT-based比色测定(Skehan, 1998)。总之,格里斯反应后,MTT的解决方案(2.0毫克/毫升)被添加到每个细胞培养在96孔板。在孵化后4 h 37°C有限公司₂细胞培养孵化器,上层清液被移除,甲瓒晶体形成可行的细胞被标以540海里。对未经处理的细胞活细胞的百分比计算。

2.6。免疫印迹分析

总细胞提取5×10⁶细胞制备如前所述[14]。核蛋白质被NE-PER孤立核萃取设备和生产的协议(美国热科学,IL)。蛋白质的含量是衡量布拉德福德(Bio-Rad实验室、大力神、钙、美国)。等量的蛋白质sds - page,然后是分级分离转移到PVDF膜(Bio-Rad实验室)。屁股被封锁至少1 h和5%脱脂奶粉与Nrf2孵化之前,NF -κB (p65),核纤层蛋白A / C多克隆抗体在一夜之间在4°C。孵化后与二次抗体结合合1 h在室温下,感兴趣的乐队是由化学发光显示(SuperSignal西毫微微,热科学)。

2.7。测量一氧化氮(NO)的生产

生264.7细胞治疗2.5或5μ克/毫升的投篮前16 h有限合伙人(100 ng / mL)治疗16 h。没有决心通过测量不稳定转换的产品,亚硝酸盐()。简单地说,100年μ与100年L细胞培养基混合μL格里斯试剂(N - (1) -naphthyl-ethylenediamine 0.1%, 1.0%磺胺和2.5%磷酸)在96孔板在室温下孵化前5分钟阅读标在540海里。亚硝酸钠(纳米₂)是用于建立一个标准曲线。

2.8。记者构造,记者细胞系,荧光素酶检测

测量的Nrf2转录活动,创建一个Nrf2记者细胞系。从基因组DNA孤立QIAmp DNA迷你包(试剂盒)和指令的制造、近端1 kb-long小鼠NQO-1基因启动子,一个Nrf2绑定网站定位,扩大了与一对引物PCR: 5′-GCTATGTGGACCA GTCTGG-3′, 5′-GGCTCCAGATGTTGAGGGA-3′。PCR产物被测序验证,随后克隆到pGL4.17 [luc2/ Neo]向量(Promega)。合成矢量,NQO-1 [卢克/ Neo),是稳定转染成264.7原始细胞,候选人Nrf2记者细胞系被选下G418(表达载体)。Nrf2记者细胞系测试其响应萝卜硫素,证据确凿的Nrf2活化剂。荧光素酶活性测定的荧光素酶检测设备(Promega)和制造商的指示和归一化的细胞总蛋白的提取量。

2.9。从细胞和rt - pcr隔离的总RNA

组织的总RNA和细胞分离试剂盒RNeasy迷你包(试剂盒、希尔登,德国)根据制造商的指示。3微克的总RNA被M-MLV reverse-transcribed逆转录酶(WI Promega,麦迪逊,美国),和单链cDNA放大与一组特定的PCR引物如下:NQO-1的正向和反向引物5′-GCAGTGCTTTCCATCA CCAC-3′, 5′-TGGAGTGTGCCCAATGCTAT-3′,分别;HO-1的引物5′-TGAAGGAGGCCACCAAGGAGG-3′, 5′-AGAGGTCACCCAGGTAGCGGG-3′,分别;GCLC的引物5′cact作业者GCCAGAACACAGACCC-3′, 5′-ATGGTCTGGCTGAGAAGCCT-3′,分别;肿瘤坏死因子-的引物α5′-CTACTCCTCAGAGCCCCCAG-3′, 5′-AGGCAACCTGACCACTCTCC-3′,分别;il - 1的引物β5′-GTGTCTTTCCCGTGGACCTT-3′, 5′-TCGTTGCTTGGTTCTCCTTG-3′,分别;GAPDH的引物5′-GGAGCCAAAAGGGTCATCAT-3′, 5′-GTGATGGCATGGACTGTGGT-3′,分别。PCR扩增,TaqPCRx DNA聚合酶,重组表达载体,卡尔斯巴德、钙、美国),和制造商的协议。反应条件如下:最初在95°C变性5分钟之后,比如22 - 30变性40秒的周期在95°C,退火为40秒57°C,和扩展50秒在72°C最终在72°C扩展7分钟。扩增子在1.2%琼脂糖凝胶分离1×此种缓冲在100 V 30分钟,与溴化乙锭染色,在紫外光照射下可视化。GAPDH (Glyceraldehyde-3-phosphate脱氢酶)被用来作为内部控制评价的相对表达NQO-1, GCLC, HO-1。每个基因的相对表达GAPDH是由光密度分析软件ImageJ (Wayne Rasband研究服务部门,国立精神卫生研究所,贝塞斯达,马里兰州,美国)。

2.10。测量活性氧(ROS)的生产

细胞内ROS生成原始264.7细胞由carboxy-H决定₂DCFDA (5 - (6) -carboxy-2′, 7′二乙酸-dichlorodihydrofluorescein(分子探针,尤金,或者美国)。264.7简要,各种药物治疗后,原始细胞处理100μM carboxy-H₂DCFDA在培养中、孵化为30分钟37°C。孵化后,细胞被洗PBS然后荧光测量采用BD流式细胞仪第二章(美国BD生物科学,圣何塞,CA)的激发波长488 nm和发射波长525 nm)。

2.11。统计分析

组间比较,单向方差分析(方差分析)与图基的事后测试使用(InStat的协助下,Graphpad软件,Inc .,圣地亚哥,CA) (值< 0.05被认为是重要的)。所有的独立实验至少进行三次。

3所示。结果

3.1。投篮的水提取物抑制急性肺中性粒细胞炎症ALI / ARDS的小鼠模型

因为水果船体的水提物g . sinensis(投篮)林被用来治疗各种呼吸道疾病,我们假设的投篮是有效治疗炎症性肺部疾病通过抑制炎症。为了测试我们的假设,我们使用一个ALI / ARDS的小鼠模型,一个是中性的特征的肺部炎症。投篮的水提取物制备的口服药物,七周旧C57BL / 6小鼠14天。老鼠收到3.3毫克/公斤的投篮(),相当于每天病人的剂量,或13.3毫克/公斤的投篮(),4倍剂量的患者。在15天,老鼠分成一半,一半接受虚假的治疗,另一半做了一个鼻内滴注法有限合伙人(10毫克/公斤)诱导的急性肺部炎症。在24 h有限合伙人管理后,小鼠安乐死分析肺部炎症。组织学分析表明,小鼠肺部分收到的投篮和虚假治疗肺结构保持完整,类似于控制老鼠处理水和虚假的数字1(一)和1 (b)),这表明投篮没有激起任何治疗炎症。小鼠的肺了鼻内有限合伙人开发严重的肺部炎症,就是明证水肿的肺泡壁增厚严重炎性细胞浸润(图1 (c))。然而,肺部炎症的程度明显减少投篮治疗(数字1 (d)和1 (e))。值得注意的是,高剂量的投篮让肺部发炎返回接近控制水平(图1 (e))。

我们也进行微分计算平衡液浸润的获得各种治疗小鼠,显示的数量总细胞浸润和LPS引起的中性粒细胞在肺滴注法分别减少了53.2%和62.8%,分别时,老鼠接受的投篮(图3.3毫克/公斤1 (f))。减少炎症细胞浸润时更明显的老鼠服用13.3毫克/公斤的投篮:细胞浸润和中性粒细胞下降了77.6%和84.4%,分别列(相比第三组5组)。在一起,这些结果说明投篮强烈抑制急性肺中性粒细胞炎症。

3.2。的投篮并不影响NF -κB活动

自NF -κB是一个证据确凿的转录因子调节的表达大量的促炎细胞因子和NF -κB活动据报道,增加患者的急性肺损伤(15),我们测试的可能性的投篮发挥其抗炎功能通过抑制促炎NF -κB的活动。首先,确定一个最佳剂量的投篮没有明显的细胞毒性,我们进行MTT分析264.7原始细胞,小鼠巨噬细胞细胞系。细胞治疗各种数量,从10到100μg / mL, MTT试验前的投篮16 h。如图2的投篮,除了100年,没有任何明显的细胞毒性μg / mL,轻微的细胞毒性检测。在这项研究中,我们使用最小,但有效的投篮,2.5和5μ克/毫升。

接下来,我们测试的投篮是否会影响NF -κB的活动。264.7原始细胞,使用两个不同数量的投篮(2.5μg / mL或5μg / mL) 16 h,采用高纯度,TLR4特定有限合伙人(100 ng / mL) 15或30分钟。核蛋白质不同细胞治疗的准备和分析通过对核p65蛋白免疫印迹,NF -亚基κ如图3(一个)p65 LPS诱导治疗核本地化,表明NF -κB激活(通道1、4、7)。然而,与2.5预处理μg / mL或5μ克/毫升的投篮不明显,虽然略5μ克/毫升的投篮,影响核本地化p65(道5 - 9相对于车道4和7),这表明投篮也许不会影响NF -κB的活动。

自NF -κB在调节中发挥着关键作用促炎细胞因子的表达,如肿瘤坏死因子-α和il - 1β(7)和诱导进气阀打开,从而产生一氧化氮(NO)在巨噬细胞16),我们进一步测试是否投篮影响NF -κ通过测量LPS-induced TNF - B活动α在巨噬细胞,没有生产。264.7原始细胞使用的投篮,然后处理有限合伙人(100 ng / mL)。在治疗后24小时,TNF -的水平α(图3 (b))和(图3 (c))是由半定量rt - pcr和亚硝酸盐测量,分别。如图3 (b)有限合伙人治疗诱导TNF的表达α(二十列),没有明显影响投篮治疗(第3,第4和第5列)。在实验的投篮在il - 1的影响β表达式,得到相似的结果(数据没有显示)。如图3 (c)有限合伙人治疗诱发大量的生产没有(第四列),并没有影响投篮治疗(第五和第六列)。这些结果表明,投篮不影响NF -在我们的实验条件κB的活动。

3.3。的投篮激活Nrf2和诱发Nrf2-Regulated基因的表达

因为我们的结果显示没有明显的投篮参与NF -κ活动中,我们探索了投篮的抗炎作用的另一个可能性是由激活Nrf2,抗炎转录因子,防止从急性肺发炎13,17,18]。为了验证这一点,我们创建了一个Nrf2回应记者细胞系来源于原始264.7细胞。细胞系港口1 kb长NQO-1近端启动子融合萤火虫荧光素酶基因。如图4(一)细胞的治疗与萝卜硫素,证据确凿的Nrf2活化剂,荧光素酶活性增加,建议记者细胞系的响应性激活Nrf2(列1和2)。治疗记者细胞系的投篮,2.5或5μg / mL, 16 h诱导荧光素酶活性(4和5列),证明投篮激活Nrf2。在激活Nrf2决定投篮的功效,我们对待记者细胞的投篮(2.5μ各个时期的g / mL)。如图4 (b)、投篮治疗逐步增加荧光素酶的活动。

接下来,我们研究了荧光素酶的活动增加了投篮的治疗是否与核本地化Nrf2, Nrf2表明激活。类似的治疗后264.7原始细胞与不同数量的投篮,核蛋白质从细胞中提取和分析了核Nrf2西方墨点法。如图4 (c)投篮后,Nrf2细胞核中发现治疗。测试是否投篮治疗也引起Nrf2-regulated基因表达,我们进行了类似的实验,提取总RNA,并确定NQO-1的表达,GCLC, HO-1半定量rt - pcr分析。如图4 (d)、投篮治疗诱导Nrf2-regulated基因的表达。综上所述,这些结果表明,投篮激活Nrf2导致Nrf2-dependent基因表达。

最后,鉴于活性氧(ROS)加剧炎症和激活Nrf2 [19),我们试图排除的可能性的投篮或其他杂质,如果有的话,在投篮诱导活性氧的生产,导致Nrf2激活。为此,原始264.7细胞被接受的投篮(25μg / mL), 10倍量在这项研究中,使用了16 h,并与carboxy-H染色₂DCFDA之前流仪分析。如图5,而有限合伙人治疗诱导活性氧的生产,投篮不明显引起活性氧产量。在一个类似的实验,细胞治疗5μ克/毫升的投篮,ROS水平几乎是一样控制(数据未显示)。在一起,这些结果表明,投篮是介导的抗炎作用至少部分通过激活Nrf2没有中介的活性氧。

3.4。的投篮增强Nrf2-Dependent基因的表达而抑制NF -κB-Dependent基因在小鼠肺部发炎

测试的投篮在肺部炎症的抑制作用是否与Nrf2激活有关,我们做了类似的实验中所描述的人物1的表达水平,并确定Nrf2——和NF -κB-dependent基因在肺发炎。老鼠(在每个实验小组)与ddH喂食₂O或两种不同剂量的投篮(3.3和13.3毫克/公斤鼠标)15天前鼻内管理有限合伙人(10毫克/公斤鼠标)或虚假的。在治疗后24小时,从肺中提取总RNA进行了分析通过半定量rt - pcr Nrf2-dependnet(数据的表达6(一)和6 (b))和NF -κB-dependent基因(数据6 (c)和6 (d))。如图6(一)投篮治疗诱导的表达HO-1表达式(第二列),可能结果的过程中产生的ROS肺部的炎症反应。投篮治疗诱导HO-1表达式(第3列),这是进一步增加肺部发炎(第四和第五列)。类似的表达增加的GCLC-1观察肺发炎(图3日,第4和第5列6 (b))。另一方面,一致的结果在图1,有限合伙人大大滴剂诱导促炎细胞因子的表达,如肿瘤坏死因子-α(第二列在图6 (c))和il - 1β(第二列在图6 (c)),然而,抑制投篮方式存在剂量依赖的相关性(第四和第五列的数据6 (c)和6 (d))。这些结果表明,投篮诱发Nrf2-dependent基因的表达,抑制NF -κB-dependent基因在肺发炎。

4所示。讨论

自公元2在中国和东亚国家,水果的船体g . sinensis规定(投篮)已经被用于治疗各种呼吸道症状,如咳嗽、气喘等呼吸道条件与脓肿(20.,21]。然而,它仍然未知的投篮如何发挥其效果。鉴于这些记录的投篮对呼吸系统疾病的影响,我们假设和测试是否投篮抑制炎症炎症转录因子通过调控关键。我们演示了投篮的抑制效应在急性肺中性粒细胞炎症ALI / ARDS的小鼠模型和提供证据的投篮执行其抗炎功能通过激活Nrf2抗炎因子。我们的研究结果表明,投篮的治疗效果是由于抑制炎症反应,可能由,至少部分激活Nrf2但不是抑制促炎因子NF -κb我们最好的知识,这是第一个实验证据显示,投篮是有效调节急性肺中性粒细胞炎症和涉及Nrf2激活。

投篮是由许多成分包括单宁、树脂、蜡醇,beta-sitosterol,豆甾醇、半乳糖、甘露糖、皂甙和如gledinin gleditsia皂苷(20.,22- - - - - -25]。虽然我们的研究结果建议抗炎效应的投篮,也极有可能,一些选民有其他影响。例如,如图5投篮治疗增加治疗细胞的大小与控制相比,尺寸散射成为FGS-treated细胞扩散。此外,投篮治疗仅增加了il - 1的生产β在肺部发炎(图6 (d)),尽管LPS诱导、健壮的肺部炎症降低了投篮。然而,我们的研究结果有力地表明,投篮的集体效应的抑制炎症。最近的一项研究报道,投篮有抑菌作用金黄色葡萄球菌,枯草芽孢杆菌,和大肠杆菌(大肠杆菌)[26),是归因于gleditsia皂素的影响(27]。自从ALI / ARDS的主要原因之一是脓毒性感染由细菌和我们的研究结果表明,投篮抑制LPS-induced中性肺部炎症,ALI / ARDS的一个关键特性,投篮也很可能有效的治疗ALI / ARDS由革兰氏阴性细菌败血症引起的。

NF -κB是一个主要的转录因子管理促炎细胞因子和趋化因子的表达28]。NF -的角色κB在严重呼吸道疾病,如感染性阿里和ARDS已经有据可查的,因此许多治疗ALI / ARDS治疗策略在很大程度上抑制NF -铰链κB的活动。然而,这些策略并没有表现出显著的临床效果29日,30.]。相反,新兴证据显示Nrf2在保护中发挥着关键作用从各种呼吸系统疾病,如急性肺部炎症,烟雾诱发肺气肿、哮喘(13,17,31日,32]。成员Nrf2头儿'collar基本地区亮氨酸拉链(CNC-bZIP)转录因子家族,最初被激活细胞保护途径对氧化损伤(33]。尽管广泛表达,这个组织核转录因子坐落在排毒反应经常发生,如肠、肾脏和肺34]。因此,Nrf2监管可以有效调节炎症性肺部疾病的治疗目标。

我们的结果表明,投篮有抑制的影响肺部炎症的急性肺损伤小鼠模型。rt - pcr分析表明肺部分投篮增强依赖Nrf2基因的表达,但抑制NF -κB-dependent基因,这表明投篮抑制急性肺炎症激活Nrf2和抑制NF -κb。然而,从巨噬细胞的分子生物学分析获得的数据显示不同:投篮只有激活Nrf2没有干扰的活动NF -κ我们研究一个限制在解决Nrf2激活特定细胞类型的方式,尤其是在肺。因此,可想而知,投篮有选择性地抑制NF -的活性κB等其他实质细胞中性粒细胞在肺,但不是在巨噬细胞。自Nrf2激活巨噬细胞不能直接关掉NF -的表达κB-dependent基因位于相同的单元中(35),不太可能Nrf2激活的投篮在一个特定的薄壁组织的细胞类型是直接参与抑制NF -的表达κB-dependent基因相同的细胞类型的肺。相反,它可能Nrf2诱导基因的表达可以零促炎反应炎症的上下文环境。例如,炎症反应包括活性氧(ROS),加剧炎症(36]。同时,罗斯是一个强有力的催化剂的Nrf2增强ROS拾荒者的表达如NQO-1 GCLC,导致减少促炎细胞因子的表达,如肿瘤坏死因子-α和il - 1β。这些可能性值得进一步的研究。然而,我们的研究结果表明,投篮含铅化合物是有效的治疗ALI / ARDS,表明投篮可以选择ALI / ARDS患者的治疗。

氧化应激炎症反应激活期间达到顶峰Nrf2因为巨噬细胞和中性粒细胞,调节炎症反应的关键效应细胞,产生活性氧清除病原体。然而ROS,导致附近的细胞受损,进而激活Nrf2和诱发Nrf2-dependent造成细胞基因表达作为一种保护措施(37]。虽然有效的清除病原体,阿森纳ROS可能导致担保组织损伤。因此,治疗激活Nrf2没有生成活性氧会希望抑制炎症没有不必要的组织损伤。我们的结果表明,投篮激活Nrf2没有明显产生活性氧和诱导Nrf2-dependent保护基因,表明投篮可以调解抗炎功能无明显副作用。

5。结论

在这里,我们提供我们最好的知识,第一个实验证据表明投篮预处理保护急性肺中性粒细胞炎症,规律的标志/ ARDS,投篮激活抗炎因子Nrf2而不影响NF -κB的活动。这些结果表明,投篮在传统使用的疗效为各种呼吸道疾病源于抑制炎症反应,这与抗炎转录因子的激活有关。我们的结果也提出了这样的可能性,那就是投篮可以作为选择治疗ALI / ARDS。

确认

这项工作是支持由下一代BioGreen 21项目(没有。PJ008069),农村发展管理、韩国,和釜山国立大学科研资助2010。