文摘
2008年世界卫生组织世界癌症报告描述了全球癌症发病率飙升,许多患者生活在缺乏资源的国家癌症控制。替代治疗策略可以降低全球疾病负担在可控的成本必须开发。Polysaccharopeptide (PSP)是生物活性代理的蘑菇革盖菌属多色的。研究表明PSP具有体外抗肿瘤的活动,抑制诱导肿瘤动物模型的发展。明确证据的临床相关的PSP在癌症患者的好处,然而,缺乏。资源的投资必须完成大规模、随机对照试验的PSP在癌症患者更容易证明抗肿瘤和生存利益是否记录在一个复杂的自然发生的癌症动物模型与人类疾病。因为它的高转移率和血管起源、犬hemangiosarcoma antimetastatic和抗血管新生疗法用于调查。在这个双盲随机使用试点研究,高剂量PSP显著延迟转移的进展和提供最长的生存在犬hemangiosarcoma时报报道。这些数据表明,对于癌症患者来说,先进的治疗方法是无法访问,PSP作为一个代理可能在发病率和死亡率有显著的优点。
1。介绍
2008年世界卫生组织世界癌症报告描述了全球癌症发病率飙升,每年有2000万新病人到2020年(1]。大部分人将生活在缺乏资源的国家癌症控制。戏剧性的技术变革将继续在手术、放疗、化疗和将导致增加治愈率;然而,这些预期的进步代价通常超出了大多数癌症患者的方法。当务之急是负担得起的补充和替代治疗策略,可以大幅降低全球疾病负担在可控的成本,开发(2]。
补充和替代医学的作用继续发展在癌症患者的治疗方案。草药主要被认为促进健康通过免疫功能的增强作用。然而从1990年代开始,它已经变得越来越明显,蘑菇和蘑菇提取物免疫系统的活动之外。他们有可能直接抑制肿瘤发生[3]。
蘑菇革盖菌属多色的在中国被称为云之,用于草药2000多年。的生物活性代理蘑菇被认为是polysaccharopeptide (PSP) [2]。体外抗肿瘤药理研究表明PSP有活动,同时对正常细胞株的抑制作用很小。在实验室的动物实验,PSP抑制诱导肿瘤的生长,没有明显的毒性(4- - - - - -6]。与所有其他的临床前数据,是否这些报告发现啮齿动物模型相关性的病人护理是不确定的7,8),但似乎这膳食补充剂可能提供有益的影响生存和癌症患者的生活质量9]。明确证据的临床相关的PSP在癌症患者的好处,然而,缺乏。
随机对照试验研究PSP在癌症患者的疗效报告积极的结果标记的免疫功能,但缺乏明确的证据证明抗肿瘤活性和增加生存的终极临床相关的结果(10- - - - - -14]。这些试验在数量上很少,小样本大小,是短期的,通常是由并发症以及蒙羞的并发疗法。所需的投资相当大的资源完成大规模、长期和随机对照试验的PSP癌症患者将更容易证明抗肿瘤和生存利益是否可以记录在一个复杂的自然发生的癌症动物模型与人类疾病。Hemangiosarcoma伴侣狗就是这样一个模型。
由于其高转移率和血管起源、犬hemangiosarcoma具有显著模型在antimetastatic治疗潜力调查、特别是抗血管新生模式(15- - - - - -18]。这是一个恶性肿瘤的血管起源,发生在中年的老狗。最常见的原发部位是脾和它体现在非常积极的生物学行为与快速和广泛的转移。转移通常是血性的或通过结论植入后自发破裂脾的质量。总的来说,狗只靠脾切除术治疗的预后非常差;平均生存时间从19到86天,和不到10%存活12个月(19- - - - - -22]。本试验研究的主要目标是确定抗肿瘤存在剂量依赖的相关性和生存的影响单药Yun-Zhi PSP(我'm-Yunity)可以记录在天然犬hemangiosarcoma,队列的随机剂量,剂量调查人员失明,并发疗法不管理。
2。材料和方法
2.1。研究设计和概述
试点研究是一个随机、双盲、多剂量的研究我'm-Yunity病理诊断脾hemangiosarcoma狗。狗是从体育校本三级保健招募兽医教学医院。计算机生成的随机序列与3潜在治疗组(我'm-Yunity 25、50或100毫克/公斤/天)是在离线生成的药店。分层随机化方案根据转移性疾病的存在与否时记录诊断。序列隐藏,没有意识到研究小组的成员组一只狗会分配评估筛选过程。一旦检查完成,一只狗被认为是合格的包含在这项研究中,一个独特的研究数量是按顺序分配。研究数量和每个狗的体重被提供给药房。药房人员随机序列匹配的研究数量,制定合适的治疗,和包装胶囊分布的调查人员。胶囊是制定出现相同的。因此,研究人员和狗的主人都不知道剂量组每只狗都被分配的任务。 Owners administered the capsules to their dogs daily as prescribed until the death of the dog. In-hospital evaluations of the dogs occurred at screening, baseline, and at monthly intervals until each dog’s death. Each dog underwent a full necropsy following its death.
2.2。我'm-Yunity
我'm-Yunity(品牌名称)是一种提取的革盖菌属多色的蘑菇通常被称为云蘑菇,土耳其的尾巴,或在中国Yunzhi蘑菇。蘑菇的活性成分,产品标准化,PSP,简称polysaccharopeptide或多糖肽(文献中使用的名称)。提到品牌namewhen陈述是很重要的PSP使用在这项研究中,因为各种品牌的多糖和多肽含量不同,他们声称是PSP。在文献中,一般是执法PSP一样;然而,PSP的可能不是相同的,因为它被认为是一个一般术语多糖和多肽和潜在的PSP可能被完全孤立的从另一个蘑菇23,24]。我'm-Yunity革盖菌属多色的蘑菇提取物,尤其是cov-1应变。PSP的形式我'm-Yunity隔绝蘑菇菌丝体和子实体于与其他品牌索赔。它是由集成中药控股有限公司(中国香港)、蘑菇生产的产品,使用专有的分离方案,从深层培养的菌丝cov-1按照良好生产规范(GMP)标准。多糖中单糖的摩尔比率的一半我'm-Yunity PSP是葡萄糖,半乳糖:甘露糖:木糖:阿拉伯糖= 8.2:1.5:2.4:2.4:1.0。在我'm-Yunity PSP,可溶性polysaccharideis 46%,可溶性proteinis 31%。蛋白质中的氨基酸部分展示在表1(25]。我'm-Yunity重金属测定的质量控制内容、微生物污染,验证高压液相色谱洗脱性能,和补充bioactivity-guided化验,由独立的实验室生产设施和商业测试中心。
2.3。资格
狗筛查入学率从2008年9月到2009年11月后机构大学动物保健和使用委员会批准和书面知情同意老板的狗。入选标准是脾的病理诊断hemangiosarcoma和预期寿命≥4周。只有狗的业主选择不追求化疗后脾切除术是负责招生的资格。
2.4。评估的反应
所有的狗在基线评估,以确保他们在一般情况稳定。血液和生化测试(完整的血细胞计数、电解质、肝脏和肾脏功能),胸之中数字射线照片,对比增强谐波腹部超声(26]基线评估腹腔转移性疾病(肝、网膜、肠系膜)进行。所有诊断都重复在每月的后续访问。报告、数字图像和视频记录的基线研究比较每个月随访研究。在此基础上比较,放射科医师资格认证的决心转移性疾病的进展。过程被定义为时间的天数从基线评估第一个评价天进展的记录由放射科医师基于对比度增强的谐波腹部超声。
2.5。统计分析
描述性统计计算。连续数据被表示为均值和SD,除非不是正态分布,在这种情况下,中间值和范围被报道。分类数据被表示为频率。由于数据的nonnormality, Kruskal沃利斯测试是用来评估的变化发生在完整的血细胞计数和血清生化参数在每个剂量组和剂量组之间。曼惠特尼测试被用来比较值天进展之间的腹部转移高(100毫克/公斤/天)和低(25毫克/公斤/天)剂量组。平均生存时间由kaplan meier产品的使用限制和日志分析方法被用来比较生存曲线中剂量组。被认为是统计学意义和分析使用占据11。
3所示。结果
15日狗的基线特征与脾hemangiosarcoma参加这项研究被均匀分布在三个治疗组(25毫克/公斤/天,50毫克/公斤/天,或100毫克/公斤/天)通过随机化和展示在表2。双盲(调查员和所有者)的方式,所有的狗收到胶囊含有PSP每天从基线评估,直到死亡。一条狗,在25毫克/公斤/天剂量组,开发血钙过多次要甲状旁腺腺瘤8个月后参加了这项研究。这只狗是我维护在'm-Yunity在治疗腺瘤和后评估根据协议直到死亡。没有任何意外并发症发达的其他狗。没有显著变化任何完整的血细胞计数和血清生化参数在任何剂量组或通过研究过程中剂量组之间(表3和4)。
3.1。高剂量PSP延迟转移的进展
腹部转移时间发展或进展的中位数明显延迟的狗接受100毫克/公斤/天我'm-Yunity(112天;范围30 - 308天)相比,狗收到25毫克/公斤/天(30天;16到126天;)。狗收到50毫克/公斤/天我'm-Yunity值35天的转移(范围23到331天),没有明显不同于25或100毫克/公斤/天(图组1)。
3.2。增加剂量的PSP平均存活时间增加,高剂量PSP提供最长的中位数生存时报报道
三个剂量组的卡普兰Meier生存曲线呈现在图2。虽然没有统计上的显著差异的生存曲线在3个剂量组,两个最高剂量组中位生存时间长于最长的平均生存时间在文献中报道到目前为止,86天,117天相比狗收到50毫克/公斤/天我'm-Yunity和199天的狗接受100毫克/公斤/天。
4所示。讨论
本研究的目标是收集试验数据的潜在影响我'm-Yunity发病率(腹部转移的进展)和死亡率与自然发生的癌症在大型和复杂的物种。这项研究旨在收集数据,以便明确概念验证研究结果可以适当的动力,同时也评估一系列潜在的剂量。按预期研究目标得到满足;然而,积极成果的大小及其与剂量的关系是在这样一个意想不到的小群体,尤其是在这样一个激进的肿瘤疾病。
狗与脾hemangiosarcoma往往无症状,直到肿瘤破裂导致狗崩溃由于血性/低血压的冲击。很多车主会选择紧急手术切除脾脏救狗的生活度过了危机,尽管事实上的长期预后的狗可能是很可怜的,因为70%的狗与脾群众展示nontraumatic hemoabdomen确实有hemangiosarcoma作为底层病理学27]。尽管转移性疾病可能没有确定的脾切除术,肝转移性疾病,迅速而普遍网膜和/或肠系膜,通常会导致出血性休克的发展危及生命危机的3个月内脾切除术(图3)。考虑到高转移率和糟糕的结果仅与手术有关,辅助化疗使用单药和联合阿霉素建立协议可以使用,报告的平均生存时间为141至179天(28- - - - - -30.]。因为化疗是昂贵的,时间密集,不会增加12个月生存率高于单独使用手术,大多数车主并不选择化疗。这些狗的目标是维持他们的生活质量的最后几个月的生活。正是这群狗参加概念验证研究理想的治疗方法,有一些证据抗肿瘤作用。
我'm-Yunity表明抗癌活动在组织培养的研究中,主要是基于数据使用流式细胞仪。它会导致细胞周期阻滞和改变apoptogenic /凋亡和细胞外信号蛋白的表达,最终的结果是减少增殖和细胞凋亡增加3]。存在剂量依赖的相关性、时间增长抑制和减少细胞生存能力已经记录了HL-60白血病细胞孵化与我'm-Yunity (2]。我在HL-60 'm-Yunity出现选择性地采取行动,导致细胞周期限制通过G1 / S检查点和诱导细胞凋亡。PSP也已被证明能够抑制增长的人类肝癌细胞系(31日]。在动物模型中,PSP抑制肿瘤生长180年肉瘤接种裸鼠,减缓发展在疱疹病毒类型2-transformed小鼠肿瘤(H238)模型(32]。与所有其他的临床前数据,是否这些报告发现抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡的肿瘤细胞小鼠模型相关性的病人护理是不确定的9]。
PSP被广泛用作癌症治疗佐剂免疫疗法在中国和日本(33- - - - - -36]。阶段I和II的双盲试验在中国,PSP的使用已被证明能够促进免疫细胞增殖,化疗缓解症状,提高肿瘤浸润树突状细胞和细胞毒性T淋巴细胞(37]。在最近的一次临床试验,PSP治疗血液白细胞和中性粒细胞计数增加,血清免疫球蛋白和IgM浓度在晚期nonsmall细胞肺癌患者38]。政府PSP食道癌,胃癌、肺癌患者放疗或化疗可以减轻症状和防止免疫状态的下降(34]。没有明显变化,完整的血细胞计数和血清化学参数的三个剂量组。大多数动物在所有三组的基线白细胞和血清化学参数非常接近,或在正常范围和维护这些数据在整个研究。我们可以推测,PSP扮演了一个角色在维护这些参数的“健康”;然而,阴性对照组需要支持这样的说法。正如人们预期的那样,许多狗进入研究红细胞参数,反映了最近的流血事件,需要脾切除术。没有统计上显著的改善随着时间的推移这些参数的值,这是由于间歇性出血与网膜转移性疾病,研制开发,肠系膜和肝脏。随机对照试验研究PSP的功效在癌症患者报告这些积极的结果标记的免疫功能和可能的缓解化疗或放疗的副作用,他们缺乏明确的证据表明抗肿瘤活性和增加生存的终极临床相关的结果(10]。
可能有几个原因缺乏明确证据的临床相关的抗肿瘤作用在临床试验中,第一个是,也许没有这样的积极作用与PSP癌症患者。临床研究结果无法预测在生物医学研究和临床疗效是一个关注必须被视为一个可能的临床前和临床数据之间脱节的原因到目前为止(7,8]。第二个原因可能是最好的临床试验设计的机会识别的阳性结果肿瘤恶化和生存的临床相关的结果。很少有控制的临床试验,他们通常有小样本大小和无动力检测不同肿瘤进展或生存。他们通常是短期的,PSP管理相对有限的一段时间(数周)。此外,这些试验中的数据可以被并发症与困惑在晚期病人的疾病在大多数这些试验。第三个原因,它可能很难确定一个积极影响肿瘤恶化和生存的PSP报道临床试验,在几乎所有的研究中,病人正在接受或接受标准治疗化疗或放射治疗。PSP可能具有抗肿瘤效应”和“化疗或放射治疗,但效果是蒙面的存在这些干预的治疗和控制武器试验。最终,明确确定PSP的唯一途径可以延迟肿瘤进展和改善癌症患者的生存是大规模、长期,随机对照试验。所需的投资非常巨大的资源来完成这些试验可能更容易证明如果积极的结果在临床相关结果测量的重要性在癌症患者清楚地记录在动物模型。
使用动物作为模型来解决临床前研究的癌症疗法有着悠久的历史,和重要的信息已经获得新的和创新的治疗方法。大多数这些调查用天生的啮齿动物模型和源于实验室的犬种群。处理近交的人口在实验室环境中引发了一定程度的关注信息的适用性,因为它与自然发生的肿瘤。而选择伴侣犬模型这个概念验证试验数据收集是在传统的实验动物模式,它提供了一些有趣的和有用的优势。
狗的医疗监控程度仅次于人类。狗的健康状况是在亲密的日常细节及其疾病参加兽医专家使用所有的现代医学的诊断方法(39]。狗经常罹患癌症两倍作为人类,和表示,组织学,生物学的许多狗癌症密切平行的人类癌症(15,39]。狗与人分享的环境,因此也对疾病和潜在的环境风险因素有类似反应与细胞毒性药物治疗。大体型简化生物采样和狗的整体寿命越短允许自然病程发展和时间在一个时间框架合理有效的数据收集。hemangiosarcoma而言,一个高度自发转移性恶性肿瘤最常出现在脾脏,大多数狗在3个月内死亡的诊断由于转移性疾病19,21,22,40]。这是一个时间足够长的时间积累有意义的临床相关的发病率和死亡率信息,但足够短的调查资源的使用效率。疾病的犬hemangiosarcoma模型的价值远远超出hemangiosarcoma作为主要调查肿瘤。其价值影响人类健康躺在高转移率和血管起源,这使得它特别适合于调查antimetastatic疗法、特别是抗血管新生模式(15- - - - - -18]。这适用于本研究的目标。
并不是预期会出现如此明显的剂量依赖性模式有效性的数据或任何统计上显著的剂量相关性信息将确定在这样一个小群体。虽然有必要现在文档更健壮,在统计上有显著差异的一个适当的明确的安慰剂对照研究,令人鼓舞的是,清晰的模式,出现了明显的剂量选择试点项目。腹部转移时间发展或进展的中位数明显延迟的狗接受100毫克/公斤/天我'm-Yunity,记录在加强谐波腹部超声。也反映在这一事实,大多数的狗从不发达正常血球容积计因为低品位出血而从腹部转移,四条狗也达到一个正常的红细胞比容的过程中学习和所有四个狗是100毫克/公斤/天剂量组。另外,狗在这个剂量组平均生存时间最长的报道。这些动物没有收到辅助治疗如化疗除了PSP,允许PSP的抗肿瘤作用可能更容易实现。值得注意的是狗的平均存活时间治疗组100毫克/公斤/天(199天)以上的报告基于狗接收阿霉素化疗协议(141 - 179天)。基于这些数据,我们可以假设PSP有潜力对生存的影响类似,这是与标准化疗。证明,在生物学上激进的动物模型中,PSP提供了在大小类似于抗肿瘤和生存的影响,在常规化疗可能产生重大影响的变化从当前细胞毒性治疗的医疗水平互补的化合物,如PSP,几乎没有负面记录对正常细胞的影响。全世界最重要的是,对于那些癌症患者来说,先进的治疗和细胞毒性治疗都无法访问,凸轮,如PSP作为一个单一的代理,可以提供好处的生存和生活质量没有想象的人群。
确认
作者感谢迈克尔DiGregorio技术支持和Drs。安娜卡塞雷斯和加比西勒援助和谐波超声造影成像。西米洛布朗博士是π负责协议的研究发展,协议实现中,统计分析。和纸的发展。Reetz博士负责确定转移的进展端点通过谐波超声造影成像和纸的性能和评价审查。项目是通过拨款资助中医控股有限公司作者没有利益冲突。