Er-Xian汤比较的影响,淫羊藿药材,淫羊藿和雌激素浓度和骨和生殖组织切除卵巢的老鼠

文摘

Er-Xian汤(EXD),淫羊藿草本植物(草药淫羊藿brevicornum淫羊藿(ICA)浓度《探索黑洞》格言,),已被证明有至于antiosteoporotic活动和用于治疗骨质疏松症,更年期综合症,与年龄有关的疾病。《探索黑洞》目前的研究发现,EXD, ICA治疗,模仿雌激素,大大促进了OVX大鼠骨密度和架构,EXD类似于雌激素和产生相应影响骨形成和骨吸收在组织层面上,《探索黑洞》虽然和ICA预防骨质疏松的作用主要是通过抑制骨吸收。《探索黑洞》然而,EXD, ICA治疗表现出更少的负面影响子宫、乳腺和阴道雌激素相比政府。《探索黑洞》EXD, ICA, EXD被发现有优越的疗效和安全性。

1。介绍

绝经后骨质疏松症是一种常见的疾病,其特征是一个系统性障碍导致的骨量和微体系结构脆弱性骨折(1]。作为性激素不足在绝经后骨质疏松症的发病机制中发挥着关键作用,雌激素替代疗法被认为在过去几十年最有效的和首选的治疗这种疾病(2]。雌激素调节骨重塑通过雌激素受体α(ERα)和雌激素受体β(ERβ)。子宫、阴道和乳腺表达雌激素受体,雌激素的目标。因此雌激素可能在这些对于器官起到鼓舞人心的作用。另外,雌激素暴露提高孕激素受体(PR)的表达,通过孕激素对抗刺激雌激素对子宫内膜的影响组织(3]。妇女健康倡议全面试验共招收了150000多名妇女关于结合雌激素和黄体酮的影响。风险-效益指数强调冠心病、浸润性乳腺癌,肺栓塞,子宫内膜癌,大肠癌的副作用(4,5]。自整体健康风险超过了好处,这次审判是停了下来。因此,兴趣找到治疗骨质疏松症的有效和安全的替代品近年有所增加(4]。

中药含有multi-interactive化合物,几个世纪以来在中国用于治疗骨骼疾病,吸引了研究人员的关注对他们影响绝经期的管理和相关医疗条件(6]。Er-Xian汤(EXD),一个受欢迎的中国药用配方组成的淫羊藿brevicornum格言(《探索黑洞》小檗科、全草),Curculigo orchioidesGaertn。(石蒜科、粉末、软木),考察知母知母。(百合科、粉末、AAR),黄柏研究方面施耐德(芸香料、树皮、PCB),曼Morinda officinalis如何去做。(茜草科根,铁道部),当归(摘要)。一昼夜的(伞形科根,ASR)成分的比例9:9:6:6:9:9日已被用于治疗骨质疏松症,更年期综合症,与年龄有关的疾病在过去60年(7]。的系统性回顾和荟萃分析5 677名参与者参与临床调查表明,EXD临床有效缓解更年期综合症通过增加循环雌二醇水平(8,9]。动物实验和临床实践证明,对骨质疏松EXD有明确的保护作用引起的雌激素缺乏症(7,10,11]。

根据传统中医,淫羊藿brevicornum和黄柏研究方面是必不可少的成分EXD,似乎扮演了一个重要的角色在pmeliorating更年期综合症的症状和体征和骨质疏松症。Curculigo orchioides和Morinda officinalis帮助加强的疗效淫羊藿brevicornum,考察知母帮助黄柏研究方面发挥充分作用。当归是另一个与上述五种药物成分配合,加强治疗效果和治疗相应的疾病或症状。淫羊藿草,作为一个EXD必不可少的组成部分,据报道,淫羊藿,浓度拥有phytoestrogen-like黄酮类化合物包括incaritin, baohuoside。这些植物雌激素类黄酮已被证明在OVX大鼠骨质流失起到保护作用和绝经后妇女12,13]。然而,它已被证明淫羊藿黄酮类化合物是通过弱雌激素受体激动剂α和ERβ(14]。植物雌激素能够干扰雌激素行动通过相互作用与雌激素受体(ER)直接或间接地通过调节内源性雌激素浓度(15,16]。积累的证据在体外实验、动物实验和人体临床试验表明,除了他们的有利影响,植物雌激素也会增加几位人类激素依赖性疾病的风险17]。因此,与EXD全身治疗,淫羊藿草药、淫羊藿有望发挥弱雌激素浓度或主动对雌激素受体阳性的组织和可能产生不必要的影响与荷尔蒙相关的副作用,如子宫内膜增生和子宫内膜癌。

本研究的目的是比较与雌激素EXD骨保护作用,淫羊藿《探索黑洞》草本植物()、淫羊藿(ICA)浓度和切除卵巢的老鼠。《探索黑洞》EXD,安全,ICA也是由观察组织学结构的变化和测量ERα,呃β,公关在生殖组织中表达。

2。材料和方法

2.1。材料

化验用品的碱性磷酸酶(ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(陷阱),血清或尿液钙(Ca),无机磷(P),和尿肌酐(Cr)是购自南京建成生物工程研究所(中国南京)。放射免疫检定法(RIA)试剂盒测定雌二醇的水平购买从中国原子能科学研究院(中国,北京)。Nylestriol购买从华联制药公司(中国上海)。Icariin (ICA)和提取的淫羊藿《探索黑洞》草本植物()从慧科生物制药公司购买(西安,中国)。六个植物材料在EXD获得华宇制药公司(上海,中国)和被H.C.郑教授;《探索黑洞》凭证标本编号为(2010110601)和(2010110602),AAR (2010110603), PCB(2010110604),铁道部(2010110605),和ASR(20101106)标本的生药学、药房学院第二军医大学(上海,中国)。六个植物材料混合成分比例的9:9:6:6:9:9根据兼容理论在中医(EBH: 281.25 g,软木:281.25 g, AAR: 187.5 g, PCB: 187.5 g,铁道部:281.25 g, ASR: 281.25克;干材料)和煎煮提取的混合草药10 x (v / w)蒸馏水在100°C 2小时。过滤后,残留煮了一个额外的1小时。滤液混合在一起,冻干的冷冻干燥机(Labconco FreeZone),以及由此产生的150克的干粉都保持在4°C。

2.2。动物和治疗

48女性Sprague-Dawley (SD)大鼠年龄在12周从Slacom购买实验动物公司(中国上海,SCXK: 20070003)和前1周的适应条件实验。实验动物被安置在一个有空调的房间,12 h / 12 h昼夜光照周期恒定温度下(°C)和湿度(50%±10%)。食物和饮用水供应随意。老鼠体重每周在实验期间。骨质疏松性模型建立了双边卵巢切除术后12周。48岁的雌性SD大鼠,8是虚假的操作和治疗以去离子水为对照组(假的)。剩下的切除卵巢的老鼠双边和同样随机分为五组。老鼠用去离子水(OVX模型控制),NYL (Nylestriol, 1毫克/公斤,每周),ICA (Icariin, 20毫克/公斤,日报),EBH(提取的淫羊藿草药,100毫克/公斤,每天),或EXD (Er-Xian汤;600毫克/公斤,12周日报)胃内的政府。这个实验是生物伦理学委员会批准第二军医大学(上海,中国),和实验的过程严格遵守公认的国际规则和条例。

2.3。样品收集

在治疗结束时,老鼠被单独安置在代谢笼为1天没有食物。收集尿液样本从20:00点到8:00是第二天。通过腹部动脉血液样本收集,稳定与肝素钠,然后在5500×g离心10分钟。尿液和血清样本然后储存在生化决定−80°C。每个大鼠子宫被撤,清洗附着软组织,立即重。左股骨解剖和放置在生理盐水和存储−20°C的骨密度(BMD)测量。右胫骨被移除,neutral-buffered福尔马林固定在10%。乳腺、阴道和子宫被移除,每个同样切成两部分,一部分是储存在液氮免疫印迹分析,和其他在neutral-buffered 10%福尔马林固定,储存在4°C。

2.4。测定血清和尿液生化

血清或尿液的钙(Ca)、无机磷(Pi)浓度、血清碱性磷酸盐(阿尔卑斯山脉),抗酒石酸酸性磷酸酶(陷阱),和尿肌酐(Cr)是衡量一个自动分析仪(美国Ciba-Corning 550)使用诊断试剂盒在体外的决心。雌二醇的水平是决定使用一个特定的和敏感的伽马射线计数double-antibody RIA工具。

2.5。骨矿物质密度分析和骨骼组织学评价

骨矿物质密度(BMD, g / cm²)的左股骨测量了双能x线吸收仪(美国月球有限公司)使用小动物扫描模式。右胫骨然后在乙醇脱水,二甲苯脱脂,嵌入式和undecalcified在甲基丙烯酸甲酯。额部分被削减时4和10μ米厚度使用切片机(德国徕卡RM 2155)。4μ米部分沾戈德纳的三色的染色静态histomorphometric测量;无污点的10μ米部分被用于动态histomorphometric形态测量学的分析,进行了光和荧光显微镜(KSS电脑工程师,麦格纳,UT)。

2.6。组织学评价生殖组织

在治疗结束时,动物们牺牲了;子宫、乳腺和阴道的动物被移除。一半的组织收集并立即缓冲福尔马林固定在10% 48 h。组织被经常处理在组织处理器和5μ米厚的部分准备与苏木精染色曙红。病理检查进行了光学显微镜下(德国徕卡DMI3000)和图像分析与Image-Pro +软件(美国媒体控制论有限公司)。

2.7。免疫印迹分析α,呃β,和公关表达式

组织均质在50毫升裂解缓冲(600毫米Tris-HCl, 1毫米EDTA, pH值7.4,和两个蛋白酶抑制剂平板电脑)与polytron均质器(运动学、卢塞恩、瑞士)。这些悬浮液离心30分钟105,00×g和颗粒被丢弃。上层清液的蛋白浓度测定方法的布拉德福德。整除包含50μg的每个样本与三氯乙酸沉淀(柠檬酸、10%最终)和resuspended 100%甲醇。样本放在冰20分钟和蛋白质被离心分离回收。沉淀溶解在1 x SDS示例缓冲区,用于SDS - page。等量的蛋白质(50μ每口井的g)从每个样本被加载到预制梯度凝胶,4 - 20%的丙烯酰胺(美国NOVEX,圣地亚哥,CA) Tris-glycine缓冲系统。材料被转移到ProBlot膜(美国应用生物系统公司,培育城市,CA),和electroblotting是Tris-glycine缓冲区。Prestained精密蛋白质标准(Bio-Rad)被用作分子量标记。60分钟的孵化后阻断缓冲区(10%脱脂牛奶在PBS NP-40 0.1%)在室温下,膜在1/75稀释的ER孵化α6季,1/2500稀释的ERβ小黑裙,或1/500稀释的公关β2抗体阻断缓冲区在4°C,过夜。其次是60分钟洗在阻断缓冲区,然后孵化1/7500稀释每个物种的HRP-conjugated二级抗体阻断缓冲区在室温下60分钟。顺序洗涤后阻断缓冲区,PBS NP-40 0.1%,和PBS,信号是使用ECL + (Amersham淀粉微球的生物技术,乌普萨拉,瑞典)。乐队在暴露的电影都被富士图像分析仪las - 1000和测量光密度值与富士形象汽车(日本富士胶片影像有限公司)。

2.8。统计分析

所有数值数据提出了均值±SD从复制实验。单向方差分析Dunnett的紧随其后以及用于统计分析(PASW 18.0软件;美国SPSS Inc .,芝加哥,IL)。显著性水平是设定在所有的测试。

3所示。结果

3.1。身体和子宫重量

老鼠从六组都出现了类似的最初的意思是身体重量。在研究结束时,老鼠的平均体重OVX组显著高于虚假的组。NYL治疗完全防止体重增加与E₂《探索黑洞》缺乏,EXD,或ICA治疗不影响OVX大鼠的体重(图1(一))。正如所料,OVX动物的意思是子宫重量明显低于虚假的控制,说明手术的成功。管理NYL显著增加子宫重量相比OVX组;《探索黑洞》ICA,,或EXD治疗没有明显影响子宫重量切除卵巢的老鼠(图1 (b))。

(一)

(b)

图1

《探索黑洞》ICA的影响,,EXD, NYL身体和子宫切除卵巢的骨质疏松大鼠的体重。切除卵巢的老鼠注射NYL(1毫克/公斤),ICA(20毫克/公斤),EBH(100毫克/公斤),或EXD 12周(600毫克/公斤)。子宫和身体重量重。(一):体重;(b):子宫重量。数据提出了均值±标准差()。,,相比之下,OVX控制。

3.2。骨矿物质密度和骨骼组织学检查

如表所示1卵巢切除术引起的骨质疏松,虚假和OVX大鼠的股骨弹道导弹防御系统和分别表明卵巢切除术明显在12周BMD下降了5.7%。NYL管理(1毫克/公斤),ICA(20毫克/公斤),EBH(100毫克/公斤),或EXD(600毫克/公斤)OVX大鼠股骨骨密度明显增加。形态学观察结果被histomorphometric量化分析纵向截面从近端胫骨获得。与假组相比,有显著减少小梁面积的百分比,小梁厚度、和小梁的数字;显著增加小梁分离。矿物的动态参数率(3月),骨形成率(BFR),和在OVX大鼠破骨细胞数量也显著增加。《探索黑洞》EXD,管理、ICA或NYL小梁面积增加,小梁厚度,小梁OVX大鼠胫骨的数量。然而,有差异的影响EXD, EBH ICA或NYL动态参数。NYL EXD 3月下降,骨形成率,《探索黑洞》和破骨细胞数量,但ICA和只减少了破骨细胞数量和没有对OVX大鼠的骨形成参数的影响。


组	虚假的	OVX	NYL	ICA	EBH	EXD

弹道导弹防御(g / cm²)	0.26±0.01 *	0.25±0.01	0.26±0.01 *	0.26±0.01 *	0.26±0.01 *	0.26±0.01 *
小梁面积比(%)	21.37±3.42 * *	5.32±1.09	19.04±3.28 * *	10.69±2.22 * *	13.82±3.71 * *	18.33±2.47 * *
小梁厚度(μ米)	62.42±6.06 *	43.57±3.40	63.75±6.39 *	56.54±4.72 *	54.71±5.16 *	60.78±7.02 *
小梁数目(# /毫米)	3.17±0.47 * *	1.31±0.22	2.79±0.31 * *	1.84±0.24	2.34±0.41 * *	2.67±0.28 * *
小梁分离(μ米)	209.73±40.40 * *	1007.36±127.63	342.57±37.33 * *	631.77±58.61 *	573.75±62.31 *	441.81±51.26 *
3月(μm / d)	0.59±0.19 * *	1.18±0.24	0.77±0.11 *	1.26±0.19	1.08±0.22	0.81±0.19 *
BFR / BS (mcm / d * 100)	14.62±1.85 * *	36.88±4.71	17.62±2.02 * *	31.65±8.76	33.82±4.71	18.23±2.57 *
BFR / BV(% /年)	139.62±24.86 * *	302.55±46.37	163.18±25.72 * *	314.82±28.66	317.65±47.51	208.39±26.12 *
破骨细胞数量(# /毫米)	7.47±1.25 * *	18.84±3.67	8.84±2.24 * *	9.96±2.42 * *	9.21±1.68 * *	7.96±2.19 * *

数据代表平均值±标准偏差(),*P< 0.05,* *P< 0.01与OVX组相比。

3.3。血清和尿液生化参数

如表所示2,血清钙的测量值(S-Ca)和血清磷(s p)在大鼠组间差异不显著,而尿钙比肌酐(U-Ca / Cr)和尿磷比肌酐(U-P / Cr)水平与OVX组显著高于虚假的集团,NYL EXD, EBH, ICA显著预防urinary-Ca水平和urinary-P水平的提高OVX大鼠。《探索黑洞》,NYL EXD, ICA OVX大鼠血清雌二醇水平增加;NYL EXD减少高山和陷阱活动OVX大鼠的血清;《探索黑洞》只有ICA和陷阱活动下降,但并不影响OVX大鼠的高山活动。


组	虚假的	OVX	NYL	ICA	EBH	EXD

S-Ca(更易/ L)	2.80±0.25	2.68±0.21	2.70±0.07	2.56±0.22	2.59±0.18	2.54±0.12
s p(更易/ L)	2.88±0.55	2.99±0.64	2.61±0.43	3.12±0.74	2.85±0.78	2.61±0.63
U-Ca / Cr	0.40±0.06 * *	1.29±0.21	0.65±0.11 * *	0.43±0.05 * *	0.39±0.06 * *	0.66±0.08 * *
U-P / Cr	4.19±0.92 *	5.65±1.02	6.03±1.08	3.73±0.90 *	3.09±0.87 *	2.81±0.90 * *
雌二醇(pg / mL)	35.71±2.64 * *	16.73±1.78	28.38±2.23 * *	20.24±2.12	21.73±2.82 *	23.37±1.92 *
陷阱(IU / L)	7.22±0.91 * *	15.01±2.62	3.33±0.54 * *	4.11±0.63 * *	3.43±0.84 * *	3.08±0.73 * *
高山(IU / L)	80.59±11.12 *	109.02±17.24	85.33±14.61 *	104.04±18.71	112.32±19.42	91.82±12.24 *

数据代表平均值±标准偏差(),*P< 0.05,* *P< 0.01与OVX组相比。

3.4。组织学参数子宫、阴道和乳腺

如图2和表3,子宫腔sham-operated老鼠显示正常子宫内膜增殖。在OVX大鼠,有明显降低子宫直径和导管上皮细胞高度。子宫内膜间质与最小数量的腺体萎缩,子宫内膜的厚度和子宫厚度的比例显著下降,子宫内膜的柱状上皮是支离破碎的,宽松的,薄。NYL治疗OVX大鼠显著增加子宫、子宫内膜癌、导管上皮厚度、子宫内膜腺体数量;《探索黑洞》ICA,或EXD治疗OVX大鼠略微增加子宫的上述指标。


组	虚假的	OVX	NYL	ICA	EBH	EXD

子宫厚度(μ米)	361.27±38.78 * * *	202.16±16.04	377.41±47.17 * * *	220.31±27.22	248.41±37.35 *	253.19±32.23 *
子宫子宫内膜厚度(μ米)	259.15±43.41 * * *	111.42±19.26	290.83±47.11 * * *	128.82±28.17	143.35±41.27	148.45±37.30
子宫子宫内膜腺体数量	25.73±2.62 * * *	10.39±1.62	32.14±5.41 * * *	15.83±2.42 *	13.14±2.32	16.38±2.71 *
子宫腔上皮厚度(μ米)	10.62±1.73 * *	3.94±0.73	9.37±1.92 * *	3.44±0.61	4.94±0.63	5.25±0.74
阴道上皮细胞层	7.11±2.64 * * *	1.52±0.63	10.28±3.12 * * *	2.09±0.91	2.64±0.72	1.67±0.65
阴道上皮厚度(μ米)	23.63±0.81 * * *	4.24±0.41	26.17±1.14 * * *	5.31±0.30	6.12±0.64	4.54±0.83
乳腺上皮厚度(μ米)	3.63±0.34 * *	1.25±0.15	4.64±0.44 * *	1.14±0.12	1.52±0.21	1.51±0.20

数据代表平均值±标准偏差(),*P< 0.05,* *P< 0.01与OVX组相比。

(一)

(b)

(c)

(d)

(e)

(f)

(g)

(h)

图2

《探索黑洞》的影响NYL、ICA或EXD OVX大鼠的子宫组织学(hematoxylin-eosin染色,放大×40)。(一):虚假的控制;(b): OVX控制;(c): OVX + NYL治疗;(d): OVX + ICA治疗;《探索黑洞》(e): OVX +治疗;(f): OVX + EXD治疗;(g):子宫厚度;(h):子宫内膜子宫厚度比;数据代表平均值±标准偏差();;相比之下,OVX组。

图3显示了治疗后大鼠子宫上皮细胞的显微照片。虚假的控制老鼠的特点是大的子宫cuboidal-to-columnar上皮细胞形成高。OVX的控制被低立方上皮衬里。NYL-treated大鼠的子宫增加子宫内膜的厚度和结缔组织显著退化,在子宫肌层的厚度显著增加,大幅改变腔的面积对整个组织切片。《探索黑洞》治疗OVX大鼠与ICA或EXD稍微增加了子宫上皮高度。

(一)

(b)

(c)

(d)

(e)

(f)

图4显示了实验动物的阴道上皮细胞的显微照片。与虚假的老鼠相比,OVX大鼠阴道上皮细胞的萎缩:只有2 -细胞层被认为,这些都是没有角质化的扁平细胞组成的。NYL政府后,减少阴道上皮细胞被逆转,和三层观察:基底生发层,中间颗粒层,表面脱落的角质层。《探索黑洞》治疗EXD,或ICA不会大幅改变OVX大鼠阴道上皮细胞。NYL治疗阴道上皮高度和增加细胞层;《探索黑洞》和治疗与EXD,或ICA并不影响在OVX大鼠阴道上皮高度和细胞层(表3)。

(一)

(b)

(c)

(d)

(e)

(f)

如图5大鼠的乳腺结缔组织组成,腺泡、导管,腺泡和导管的上皮细胞展现立方或低列。在OVX大鼠乳腺上皮结构萎缩,深层脂肪垫,与稀缺的密集的终端结构的集群,其中许多没有显示明显的腔的形成。NYL治疗导致丰富的终端上皮结构。《探索黑洞》从动物乳腺EXD,处理,或ICA没有不同于OVX控制对上述结构。NYL治疗乳腺上皮厚度明显增加;《探索黑洞》和治疗与EXD,或ICA并不影响OVX大鼠乳腺上皮厚度(表3)。

(一)

(b)

(c)

(d)

(e)

(f)

3.5。ER的表达α,呃β,PR在子宫、阴道和乳腺

如图6(一)虚假的集团,而子宫PR的表达与OVX大鼠没有明显不同。NYL略微增加PR的表达;《探索黑洞》ICA和稍微降低PR的表达;EXD显著减少的表达公关OVX大鼠的子宫。与假组相比,ER的表达α没有明显改变了OVX大鼠的子宫;NYL并未改变ER的表达α;《探索黑洞》ICA,, EXD显著降低ER的表达αOVX大鼠的子宫。与假组相比,ER的表达β显著提高OVX大鼠的子宫;《探索黑洞》NYL、ICA和EXD显著降低ER的表达βOVX大鼠的子宫。

(一)子宫

(b)阴道

(c)乳腺

图6

α β β 12周的影响卵巢切除术治疗和共同NYL, ICA, EBH, EXD ER的表达,呃,PR在子宫(a)的蛋白质含量,阴道(b),乳腺的老鼠(c),蛋白质含量,被规范化肌动蛋白。值是平均值±标准偏差()。,,相比之下,OVX组。

如图6 (b)虚假的集团,而PR的表达在OVX大鼠阴道就会显著上升。NYL显著增加PR的表达;ICA对PR的表达无显著影响;《探索黑洞》EXD,显著减少的表达公关OVX大鼠的阴道。与假组相比,ER的表达α和ERβ没有明显改变;《探索黑洞》无论是NYL、ICA和EXD对ER的表达有任何影响α和ERβOVX大鼠的阴道。

如图6 (c)虚假的集团,而PR的表达没有明显改变OVX大鼠的乳腺。NYL《探索黑洞》,对公关的表达无明显影响;ICA和EXD显著减少的表达公关OVX大鼠的乳腺。与假组相比,ER的表达α略增加;NYL显著增加ER的表达α;《探索黑洞》ICA,, EXD显著降低ER的表达αOVX大鼠的乳腺。与假组相比,ER的表达β显著增加;NYL稍微降低ER的表达β;《探索黑洞》ICA,, EXD显著降低ER的表达βOVX大鼠的乳腺。

4所示。讨论

临床治疗的一个关键目标是开发有效的药物与优越的安全配置文件。本研究旨在探讨《探索黑洞》EXD及其主要成分的潜力和ICA骨骨质疏松性和生殖组织与雌激素相比。治疗的评估做了组织学、生物化学、分析α,呃β,PR的表达子宫、阴道和乳腺,除了骨矿物质密度和重量测量。

快速绝经后骨质疏松,这发生在雌性大鼠卵巢切除术后,特点是降低骨小梁密度和骨结构的恶化,与特定小梁的总数的减少和增加的穿孔。基于histomorphometric参数的值,我们发现,在这些OVX大鼠骨代谢增加;《探索黑洞》EXD,、ICA或NYL治疗减毒OVX大鼠骨小梁的恶化。小梁面积的百分比,厚度,数量增加,和小梁的分离是减少EXD, EBH - ICA和NYL-treated OVX大鼠。的比例更大的骨矿物质密度和骨小梁面积增加可能是由于小梁数目和小梁厚度。EXD OVX大鼠或NYL治疗导致减少骨吸收和骨形成的动态参数;EBH或ICA治疗OVX大鼠只有导致动态histomorphometric指数明显降低骨吸收,但不是其他骨形成参数。这个结果表明,EXD类似于NYL和产生相应影响骨形成和骨吸收在组织层面上,《探索黑洞》虽然和ICA预防骨质疏松的作用主要是通过抑制骨吸收。

老鼠的卵巢切除术导致骨质流失,导致损失的增加钙、磷、和肌酐通过尿液排泄。同样,增加水平的高山和陷阱在控制OVX大鼠。减少钙的吸收与OVX大鼠观察到类似于绝经后妇女,和血清卵巢激素缺乏症可以进一步减少肠钙吸收(18]。《探索黑洞》在目前的研究中,和ICA陷阱活动防止OVX-induced增加尿钙和不影响高山活动,《探索黑洞》表明,ICA减少骨质流失通过抑制骨吸收。EXD在骨代谢的特点类似于Nylestriol。Nylestriol和EXD都显著降低血清高山,陷阱,和尿钙/ Cr OVX大鼠的水平,表明NYL EXD防止骨质疏松症通过抑制高骨代谢调节骨形成和骨吸收。我们的生化分析的结果发现证实骨histomorphometric结果在评估骨营业额。

OVX-induced雌激素不足的特点是显著增加体重和减少子宫湿重比完整的动物。NYL抑制体重增加和提高OVX大鼠子宫的重量。《探索黑洞》EXD,, ICA没有产生任何影响治疗动物身体和子宫重量,即使EXD, EBH, ICA被证明具有雌激素活性。《探索黑洞》缺乏uterotrophic EXD,活动,和ICA可以有利于降低子宫内膜癌的风险,乳腺癌或卵巢癌与雌激素治疗。

子宫、阴道和乳腺对雌激素和代表非常敏感的关键器官雌激素制剂的临床安全性测试。定性分析的子宫增加子宫内膜厚度,标志着的结缔组织变性NYL-treated老鼠。此外,我们观察到在这个组显著增加子宫肌层的厚度和内腔的面积大幅改变对整个组织切片,和这些子宫现象报告为典型的女性激素替代疗法的不良反应(19]。因此,本研究的结果证实雌激素在子宫的刺激作用,阴道,和乳腺,因为OVX组中有显著萎缩。《探索黑洞》老鼠EXD -, -, ICA-treated团体保持一个健康的上皮细胞层,像NYL组。

子宫内膜癌是一种非常精密的皮下组织和雌激素和孕激素的主要目标。雌激素和孕激素的协调行动是必要的,以维持细胞复制的内稳态。特别是子宫细胞增殖是由雌性激素,增强,反过来,也得罪了孕酮(20.,21]。雌激素和孕激素的影响上皮细胞和子宫内膜增殖和分化是介导的直接或间接通过其同源受体,即雌激素受体α(ERα),雌激素受体β(ERβ)和孕激素受体(PR) (22]。呃α和ERβ有不同的甚至对立的生物效应在某些细胞,在雌激素配体的作用取决于之间的平衡呃α和ERβ。与ERα促进癌细胞的生长,ERβ抑制肿瘤细胞增殖(23,24]。在子宫内膜癌组织中,公关是ER的表达相关的。在增生的子宫内膜和endometrioid癌,公关与ER表达相关α,但不是与ERβ(25]。呃α促进扩散,而ERβproapoptotic和prodifferentiating功能。急诊室的故事α和ERβ是细胞内coexpressed,呃β可以抑制ER的增殖反应吗α细胞,作为主导ER的抑制剂α(24]。相比正常大鼠产生内源性雌激素,雌激素受体亚型的表达水平α和ERβ被显著提高OVX大鼠。这种效应描述在文献中是一个负面的反馈机制的结果(26]。植物雌激素干扰内源性雌激素行动通过作为受体激动剂当内源性雌激素水平很低或作为拮抗剂当内源性雌激素水平很高27]。的淫羊藿类黄酮有更强的约束力的独具特色的行动α呃,但更高的亲和力β(28]。在我们的研究中,有降低血清雌二醇水平和ER略有增加α和ERβ表达在子宫、阴道和OVX大鼠的乳腺。NYL治疗诱导更高的ERα和PR表达在子宫、阴道和乳腺,导致重大的上皮增生。《探索黑洞》ICA,, EXD治疗有更多的潜在抑制对ER的表达的影响α比在公关和ERβ表达在OVX大鼠子宫和乳腺,导致ER的比例增加β,呃α。ER的比率β,呃α与减少刺激对子宫内膜的影响(24]。《探索黑洞》因此,EXD, ICA,至于活动,可以减少骨质流失引起的雌激素缺乏和维持健康的组织形态学在子宫、阴道和乳腺。

EXD由六个草药淫羊藿草本植物是其主要成分。淫羊藿草药已报告拥有丰富的黄酮类化合物,淫羊藿(ICA),浓度包括epimedin A, B, C, hyperin。在动物实验中,使用ICA和淫羊藿类黄酮抑制骨吸收,预防骨质疏松症在OVX大鼠(13,29日岁],改善勃起功能在雄性老鼠(30.]。Icaritin, ICA的糖苷配基,雌激素的属性和刺激上细胞(31日]。Curculigo根状茎已报告有酚苷类,包括curculigoside curculigoside B和curculigine,至于,antiosteoporotic和抗氧化活性32]。毛皮根状茎含有甾体皂苷,显示具有雌激素活性,增加骨形成(33,34]。黄柏叫已被证明有生物碱、小檗碱和非洲防己碱等,减弱通过抑制破骨细胞的分化和功能受体激活核因子-κB配体在成骨细胞细胞(35]。Morinda根据报道有蒽醌化合物,减少骨吸收通过抑制破骨细胞的形成和分化诱导骨髓细胞(36]。的提取当归根展出的刺激子宫histoarchitecture,一个重要的在阴道上皮角化,和降低血清促黄体激素浓度,从而表现出雌激素活性(37]。一般来说,EXD的多个成分产生全面影响骨骼和estrogen-related器官的雌激素相比,但在生殖组织更少的副作用。

5。结论

《探索黑洞》EXD,或ICA和雌激素一样有效恢复骨密度和建筑大鼠去卵巢后的骨骼状况但造成生殖组织更少的副作用。《探索黑洞》EXD, ICA, EXD被发现有优越的疗效和安全性。

利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

承认

这项研究得到了国家自然科学基金(批准号81173191)和上海市科学技术委员会、中国(批准号12401900702)。

引用

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以证据为基础的补充和替代医学

使用药用植物和天然产物对治疗骨质疏松症及其并发症

Er-Xian汤比较的影响,淫羊藿淫羊藿与雌激素浓度草药,骨和生殖组织切除卵巢的老鼠

文摘

1。介绍

2。材料和方法

2.1。材料

2.2。动物和治疗

2.3。样品收集

2.4。测定血清和尿液生化

2.5。骨矿物质密度分析和骨骼组织学评价

2.6。组织学评价生殖组织

2.7。免疫印迹分析α,呃β,和公关表达式

2.8。统计分析

3所示。结果

3.1。身体和子宫重量

3.2。骨矿物质密度和骨骼组织学检查

3.3。血清和尿液生化参数

3.4。组织学参数子宫、阴道和乳腺

3.5。ER的表达α,呃β,PR在子宫、阴道和乳腺

4所示。讨论

5。结论

利益冲突

承认

引用

版权

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