文摘

本研究的目的是调查可能的镇痛和抗炎机制 。镇痛效果评估在两个模型包括醋酸段扭动响应和formalin-induced爪子舔。抗炎效果评估λ-carrageenan-induced老鼠爪子水肿和病理分析。结果表明, (500毫克/公斤)减少醋酸扭动反应试验和福尔马林舔时间测试。 (100和500毫克/公斤)显著减少水肿爪子卷后在4到5小时λ角叉菜胶被注入。组织病理学, 减弱的程度组织破坏和肿胀水肿爪子。这些结果表明,抗炎机制 可能是由于拒绝没有和MDA水平水肿爪子通过增加SOD的活动,在肝脏GPx,研磨。此外, 也减少了il - 1β、il - 6、NFκB,肿瘤坏死因子-α、cox - 2和伊诺的水平。两种活性成分的内容,乌索酸和羽扇豆醇,定量确定。本文展示了可能的镇痛和抗炎作用的机制 和经典的治疗提供了证据白粉藤属被在炎性疾病。

1。介绍

炎症反应,通常表现为红、肿、热、痛,是最重要的一个宿主防御机制对入侵的病原体。然而,持续的或overinflammation导致组织损伤和器官可能失败。促炎细胞因子(例如,TNF - 、il - 6和il - 1 )被激活单核细胞/巨噬细胞产生大量刺激细胞反应通过增加前列腺素(后卫)、活性氧(ROS)。另外,脂质过氧化(丙二醛(MDA)是由自由基攻击细胞膜。因此,炎症效应导致MDA的积累(1]。

白粉藤属被Lamk。属于家庭葡萄科,分布在印度南部中国,菲律宾、马来西亚和台湾。几项研究已经进行的构成c . repen,许多化合物被确定,如乌索酸,积雪草酸,羽扇豆醇,friedilin, epifriedelanol [2]。的根和茎c .被用于蛇咬,风湿疼痛,在民间医学女墙,和茎也应用于治疗肾炎,长期咳嗽,腹泻(3]。然而,没有研究调查的镇痛和抗炎机制c .被然而。

许多研究表明,在草本植物类黄酮具有抗炎活动通过清除ROS和减少促炎细胞因子(例如,NF - B,肿瘤坏死因子- ,il - 1 和il - 6),如乌索酸(4- - - - - -6和羽扇豆醇7]。这两个成分也被隔绝c .被在先前的研究2,8]。在这项研究中,我们不仅在CR确认这三个化合物的存在甲醇通过建立其指纹色谱图,但这两个活性成分定量确定的内容。

在这项研究中,我们调查了甲醇提取物的镇痛和抗炎活动c .被(CR甲醇)。的镇痛活性评价醋酸段扭动响应和福尔马林试验。抗炎活性取决于使用 -carrageenan-induced老鼠爪子水肿模型和病理分析。为了评估抗炎作用的机制,我们还分析了TNF -的水平 ,il - 1 、il - 6、NF B,考克斯,MDA,没有水肿的组织,以及活动的superoxidase歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和肝脏中谷胱甘肽还原酶(研磨)。

2。材料和方法

2.1。化学品和药物

卡拉胶,吲哚美辛,格里斯试剂购自Sigma-Aldrich化工有限公司(密苏里州,美国)。福尔马林从日本购买Shiyaku工业有限公司(台北,台湾)。小鼠il - 1 、il - 6和TNF - enzyme-link免疫吸附试验(ELISA)开发工具包从BioLegend购买,公司(美国加州)。SOD、GPx研磨,考克斯,TNF - 和NF - B enzyme-link免疫吸附试验(ELISA)开发工具从开曼群岛购买化学公司(美国密歇根州)。Anti-iNOS抗体购自圣克鲁斯(兔多克隆进气阀打开,sc - 650,加利福尼亚,美国)。吲哚美辛悬浮在0.5% (w / v)羧甲基纤维素钠(CMC)和腹腔内接种动物。LC-grade乙腈购买从默克公司(达姆施塔特,德国)。其他试剂均为分析纯。

2.2。植物材料

c .被来自台湾云林乡,被Yu-Chin林博士领导学院的科学和遍及全球的大学生物学系(TWUBIOT)。凭证标本(号码:twu -毕奥- pte - 10101)在TWUBIOT沉积。植物标本已被存入中国制药科学学院和中药资源。(1.0公斤)的干燥根c .被被切成小块,在回流提取10升的甲醇三次。合并后的提取都集中在减压给干提取(成功率7.87%)。干粗提物溶解在0.5% CMC溶液前药理测试。

2.3。CR的色谱分析甲醇

高效液相色谱系统由岛津制作所(日本京都)LC-10ATvp液相色谱仪配有DGU-14A脱气器,一个FCV-10ALvp低压梯度流量控制阀,一个SIL-10ADvp自我注射器,SPD-M10Avp二极管阵列检测器,一个SCL-10Avp系统控制器。峰面积计算采用日本岛津公司Class-LC10软件(版本6.12 sp5)。列是一个Vercopak Inertsil 7 ODS-3 (5 米, 毫米)Vercotech inc .)列。的流动相由0.2%磷酸的混合物(a)和乙腈(B)使用梯度洗脱。10的样本注入 l .以下梯度剖面是运行在1.0毫升/分钟超过60分钟。乌索酸梯度程序设置如下:0-25 min, 25% B, 25-55 min, 90% B, B则高达55 - min, 25%的峰值检测在304 nm SPD-M10AVP(日本岛津公司)检测器。羽扇豆醇梯度程序设置0-40 min,溶剂A: B = 5: 95。峰值检测在205 nm SPD-M10AVP(日本岛津公司)检测器。上述条件用于高效液相色谱法测定和CR的高效液相色谱指纹图谱甲醇。

乌索酸的内容和CR的羽扇豆醇甲醇高效液相色谱法测定合格和量化。在定性分析中,比较了保留时间和最大吸收的标准。在定量分析,比较了与峰面积的标准曲线。

2.4。实验动物

雄性ICR小鼠(20 - 25克)获得来自BioLASCO台湾有限公司有限公司的老鼠在中国医科大学动物中心的控制温度22±1°C,相对湿度55±5%和12 h光/ 12 h黑暗周期为1周之前的实验。动物们提供了啮齿动物饮食和干净的水随意。所有研究进行了按照美国国立卫生研究院(NIH)指导实验室动物保健和使用的。所有测试的指导下进行国际疼痛研究协会(9]。实验动物研究委员会批准的协议是中国医科大学。本研究采用颈椎脱位,牺牲的动物。

2.5。急性毒性研究

小鼠急性毒理学测试是根据廖的方法等。10]。雄性ICR小鼠随机分为3组(每组10老鼠)。老鼠与CR的口服药物甲醇(2.5克,5 g和10 g / kg)。提供的实验老鼠饲料和水随意,他们不停地进行定期观察14天任何死亡或行为变化。多动行为变化密切观察,震颤,共济失调,抽搐、唾液分泌,腹泻,嗜睡,睡觉,和昏迷。

2.6。Acetic-Acid-Induced扭动响应

翻滚测试在老鼠身上进行了根据科斯特的方法等。11]。扭动着是引起腹腔内注射1.0%的醋酸(v / v, 0.1毫升/ 10 g体重)。有三个不同剂量(20、100和500毫克/公斤)的CR甲醇每个组老鼠的口服药物,化学刺激前60分钟。吲哚美辛是一个积极的控制乙酸注射前30分钟服用。肌肉收缩的数量统计在一段5分钟后醋酸注入。地观察到的数据代表总数在10分钟。

2.7。福尔马林测试

福尔马林测试方法的基础上进行Tjølsen et al。12]。20微升5%福尔马林的盐水是皮下注入后每个老鼠的爪子。所花费的时间(以秒为单位)在注入爪子舔响应被作为疼痛反应的指标。反应测定福尔马林注射后5分钟(早期),20 - 30分钟后注射福尔马林(后期阶段)。CR甲醇(20、100和500毫克/公斤,订单)管理60分钟前注射福尔马林。吲哚美辛(10毫克/公斤,i.p。)注射福尔马林前30分钟服用。

2.8。 -Carrageenan-Induced老鼠爪子水肿

CR的抗炎活性甲醇是由 -carrageenan-induced爪子水肿试验后爪的老鼠。测试是根据醋的方法进行et al。13]。基底卷的后爪前确定任何药物的管理。50微升 卡拉胶悬在生理盐水注入正确的后爪,足底的一面和爪子体积测量1日,2日,3日,4日,5小时后注射使用MK101 CMP plethysmometer(室Kikai有限公司)。肿胀的程度由三角洲评估卷(a - b),在“a”的体积是正确的后爪后化学治疗和“b”是治疗前的体积。吲哚美辛(10毫克/公斤)是腹腔内接种之前30分钟 角叉菜胶注入。CR甲醇(20、100和500毫克/公斤)是口头管理60分钟 角叉菜胶注入。控制了同等体积的生理盐水。

在二级实验,另一组老鼠口服接种0.5% CMC,消炎痛或CR甲醇1小时前 角叉菜胶后爪注入他们的权利。正确的后爪动物被4 h后。爪子组织在冰冷的生理盐水冲洗,立即放置在冷生理盐水4倍体积均化之前在4°C。然后,匀浆在12000转离心5分钟。浮在表面的获得和存储在为即将到来的MDA−20°C,不,TNF - ,il - 1 、il - 6、NF 考克斯B,分析。至于整个肝组织,同样,在冰冷的生理盐水冲洗并立即放置在相同体积的冷生理盐水之前在4°C均化。匀浆是然后在12000转离心5分钟。浮在表面的获得和存储在−20°C后分析抗氧化酶(SOD、GPx和研磨)活动。

2.9。组织学分析

组织病理学检查、活检后的爪子被4 h和角叉菜胶诱导。组织切片在10%福尔马林固定3天,一夜之间脱钙,嵌入在石蜡,分为4 m组织部分。组织部分被苏木精和伊红染色(圆)染色)和检查用BX60显微镜(奥林巴斯,梅尔维尔,纽约)病理变化。引起的炎症反应 卡拉胶,包括爪肿胀、检查。CR后扩大蛀牙甲醇(20毫克,100毫克和500毫克/公斤)和吲哚美辛(10毫克/公斤)治疗也被检查。图像捕获Macrofire 599831相机。结果发现在动物疾病诊断中心(ADDC),国立中兴大学,Taichuang、台湾。

2.10。MDA测定

MDA是引起的生产 硫代巴比土酸注射角叉菜胶和评估的反应物质(TBARS)方法(14]。总之,MDA和TBARS反应在高温度和组成red-complex TBARS。的吸光度TBARS被记录在532海里。

2.11。没有分析

没有根据的方法测量Moshage et al。15]。 被转换成 通过硝酸还原酶, 随后与磺胺酸反应生成重氮离子和加上N - (1-naphthyl)乙二胺形成发色团的azo-derivative(紫色红色)可以被记录在540海里。

2.12。肿瘤坏死因子- ,il - 1 、il - 6和NF B化验

il - 1 测定的酶联免疫吸附试验(16]。il - 1的捕获抗体 被播种到每一个96孔板在一夜之间。第二天,第二组生物素化的抗体与样品或标准组织抗原孵化前板链霉亲和素终于补充道。反应的颜色由黄色和紫色是记录在450海里。il - 6、TNF - 和NF 作为il - 1 B被发现使用相同的方法 。每个样本提出了TNF - ng /毫克 、il - 6、il - 1 和NF B的浓度。

2.13。cox - 2试验

cox - 2的内容是由测量的过氧化物酶活动PGHS(前列腺素内过氧化物H2合成酶)17]。过氧化物酶的活性PGHS氧化后是由N, N, N′, N′-tetramethyl-p-phenylenediamine (TMPD) 37°C使用花生四烯酸作为衬底。增加的颜色被记录在590海里。

2.14。抗氧化酶的测定

SOD测定根据听歌的方法等。18]。黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶(XOD)超氧化物自由基反应生成2 - (4-iodophenyl) 3 - (4-nitrophenol) 5-phenyl-tetrazolium氯(I.N.T.)形成一个红色甲瓒染料,和颜色被记录在540海里。GPx测量根据Ceballos-Picot等人的方法通过检测GR和NADPH的内容19]。氧化NADPH辅酶ii+伴随着吸光度下降记录在340海里。研磨的方法测定艾哈迈德和Holdsworth20.),检测谷胱甘肽(GSSG)的降低NADPH的存在。NADPH氧化成辅酶ii+会导致吸光度下降记录在340海里。

2.15。西方墨点法对伊诺

刚被孤立的爪子组织中均质溶解缓冲区。组织匀浆的蛋白质浓度和胞质微粒体分数据的方法测定洛瑞et al。21]。一百年 从爪子匀浆或50克的蛋白质 g蛋白的纯化微粒体加载每车道在8%或12%聚丙烯酰胺凝胶电泳进行。然后转移到硝化纤维膜的蛋白质。膜在一夜之间被缓冲然后孵化主要抗体1 h使用1:1000稀释的兔子anti-iNOS(100倍稀释,2 h 25°C, Santa Cruz)。膜被洗了三次TBST解决方案包含三羟甲基氨基甲烷缓冲液解决方案(TBS)与0.1% Tween-20 15分钟,孵化1:1000稀释碱性phosphatase-conjugated anti-rabbit免疫球蛋白作为第二抗体1 h。蛋白质与一个可视化增强化学发光免疫印迹检测设备(美国Amersham,阿灵顿高地,IL),和暴露在x射线胶片为3分钟。

2.16。统计分析

所有数据均值±SEM表示。与SPSS统计分析软件,进行了使用单向方差分析其次是矫正的多个测试范围。

3所示。结果

3.1。CR的色谱分析甲醇

高效液相色谱色谱表明,乌索酸和羽扇豆醇保留时间为28.94分钟,29.18分,分别。的最大吸光度是304海里,乌索酸的相对数量在订单(69.16毫克/克)和羽扇豆醇(8.65毫克/克)。

3.2。急性毒性研究

急性毒性的铬甲醇评估在老鼠剂量的2.5,5、10克/公斤。14天的口服后,CR甲醇没有造成任何行为变化,没有观察到的死亡率。因此,LD50CR的价值甲醇结论是大于10克/公斤在老鼠身上,表明它是几乎无急性毒性。

3.3。Acetic-Acid-Induced扭动响应

图1这老鼠显示醋酸段扭动的反应作为止痛剂CR的活动甲醇。腹腔内注射产生的乙酸溶剂对照组41.67±5.28翻腾。翻滚的反应显著降低准确度和CR 500毫克/公斤甲醇(18.83±2.21, )和10毫克/公斤消炎痛(10.17±1.99, )。


图1
CR的止痛效果甲醇和消炎痛(印度)acetic-acid-induced盘绕在老鼠的反应。每个值代表均值±SEM ( = 8 )。* < 0 。 0 5 和* * * < 0 。 0 0 1 比溶剂控制(CON)组(单向方差分析其次是矫正的多个范围测试)。
3.4。福尔马林测试

CR甲醇表现出剂量依赖性关系formalin-induced疼痛的后期阶段。在早期阶段,CR甲醇(20、100和500毫克/公斤)和吲哚美辛(10毫克/公斤)治疗组没有任何明显的变化与对照组相比(图2(一个))。在后期阶段,皮下注射的formalin-induced舔反应持续时间为171.0±16.44。时间明显减少了预处理与CR 100和500毫克/公斤甲醇(99.29±4.90, 和76.89±3.47, )和10毫克/公斤消炎痛(85.67±2.74, ),如图2 (b)。

(一)早期阶段
(一)早期阶段
(b)后期阶段
(b)后期阶段
图2
CR的影响甲醇在(a)和吲哚美辛(印度)早期阶段和(b)小鼠福尔马林试验的后期阶段。每个值代表均值±SEM ( = 8 )。* < 0 。 0 5 和* * * < 0 。 0 0 1 比溶剂控制(CON)组(单向方差分析其次是矫正的多个范围测试)。
3.5。CR的影响甲醇在 -Carrageenan-Induced老鼠爪子水肿

如图3后, 卡拉胶注入,老鼠爪子的体积增加水肿发展,表明炎症活动。然而,消炎痛(10毫克/公斤)和铬甲醇(500毫克/公斤)明显降低爪子水肿在第四和第五h后管理。CR甲醇在剂量为500毫克/公斤(29.60±4.40, 显示几乎等量的抑制10毫克/公斤消炎痛(31.67±4.40, )。


图3
CR的影响甲醇和消炎痛(印度) 角叉菜胶诱导小鼠爪子水肿。每个值代表均值±SEM ( = 8 )。* < 0 。 0 5 ,* * < 0 。 0 1 和* * * < 0 。 0 0 1 而 角叉菜胶对照组(单向方差分析其次是矫正的多个范围测试)。
3.6。组织学分析

组织病理学检查,爪子活检是4 h后收获 角叉菜胶被注入。两个CR甲醇和消炎痛显著降低carrageenan-induced爪子水肿(图4)。图4(一)没有炎症、组织破坏,正常老鼠的爪子和肿胀现象。另一方面, 角叉菜胶组扩大蛀牙爪组织(图显示4 (b))。至于实验组和阳性,水肿的状况明显减弱了吲哚美辛治疗(10毫克/公斤)和铬甲醇(20、100和500毫克/公斤),如图4 (c),4 (d),4 (e),4 (f)。

(一)
(一)
(b)
(b)
(c)
(c)
(d)
(d)
(e)
(e)
(f)
(f)
图4
组织病理学检查在λ-carrageenan-induced爪子组织肿胀、水肿和中性粒细胞浸润(表皮,b:结缔组织,c:肌肉纤维):(a)正常,(b)λ角叉菜胶,(c)吲哚美辛,CR (d)甲醇(20毫克/公斤),(e) CR甲醇(100毫克/公斤),CR (f)甲醇(500毫克/公斤)。肿胀的结缔组织,距离更大的差距。
3.7。CR的影响甲醇在MDA水平

在这项研究中,MDA水平被用来表示脂质过氧化作用。在表1、MDA水平显著增加 角叉菜胶组(2.62±0.16 nmol /毫克);然而,准确度和CR 500毫克/公斤甲醇(1.274±0.065, )和10毫克/公斤消炎痛(1.376±0.096, )增加显著抑制MDA水平。

表1
CR的影响甲醇MDA和消炎痛,不,TNF -α,il - 1β、il - 6和NFκB水平水肿爪子。
3.8。CR的影响甲醇在没有水平

准确度和CR 100和500毫克/公斤甲醇(6.918±0.318, 和6.222±0.501, )和10毫克/公斤消炎痛(6.438±0.321, 显示显著抑制的增加在老鼠的爪子水肿没有水平,相比 角叉菜胶组(9.96±0.44μ米,表1)。

3.9。CR的影响甲醇肿瘤坏死因子- ,il - 1 、il - 6和NF B

肿瘤坏死因子- ,il - 1 、il - 6和NF B水平 -carrageenan-induced水肿爪子都显著提高。CR甲醇(500毫克/公斤)和吲哚美辛(10毫克/公斤)显著降低TNF -的水平 ( )。的il - 1 和il - 6水平明显增加4 h卡尔注射后( , )。的il - 1 、il - 6和NF B水平血清明显减少了治疗CR 500毫克/公斤甲醇以及10毫克/公斤消炎痛(表1)。

3.10。CR的影响甲醇在考克斯

表2表明cox - 2水平大大提高(207.273±9.984 U /毫克) -carrageenan-induced水肿爪子。然而,cox - 2水平下降了CR处理500毫克/公斤甲醇(134.936±9.918, )以及10毫克/公斤消炎痛(135.996±7.489, )。没有发现这样的结果在COX-1活动分析。

表2
CR的影响甲醇考克斯和吲哚美辛浓度老鼠爪子水肿。
3.11。CR的影响甲醇在Carr-Induced老鼠爪子水肿

结果表明,注入的CR甲醇(500毫克/公斤)抑制伊诺(71.9%)蛋白表达在Carr-induced ( )老鼠爪子水肿4 h(数字5(一个)和5 (b))。然而,10毫克/公斤吲哚美辛显示平均下调伊诺(84.0%, ,图5 (b))。

(一)
(一)
(b)
(b)
图5
通过CR伊诺抑制蛋白表达甲醇引起的 卡拉胶(卡尔)在小鼠爪子水肿4 h。组织暂停然后准备和接受西方墨点法对伊诺使用特定抗体。 肌动蛋白是作为内部控制。(一)代表免疫印迹显示从两个独立的实验。(b)相对伊诺蛋白质含量计算参照Carr-injected鼠标。数据提出了均值±s.d执行三种不同的实验一式三份。* * < 0 。 0 1 和* * * < 0 。 0 0 1 比较与Carr-alone集团。
3.12。CR的影响甲醇抗氧化酶的活动

抗氧化酶活动如SOD、GPx,和研磨intrapaw注射后4小时 卡拉胶在老鼠身上展示在表3。在肝组织SOD、GPx和接地的活动在4日显著降低 角叉菜胶管理。用CR治疗甲醇(500毫克/公斤)和吲哚美辛(10毫克/公斤)增加SOD、GPx,研磨活动显著( )。

表3
CR的影响甲醇和消炎痛对肝脏SOD、GPx和接地的活动在老鼠身上注射λ卡拉胶。

4所示。讨论

白粉藤属是一个属的200种热带和亚热带地区。在台湾,CR用于治疗许多疾病,如癫痫、中风、脓肿和糖尿病。此外,它还具有抗炎和治疗风湿病的活动(22]。

传统药物被广泛用于治疗各种疾病近年来。许多药用植物供应镇痛和抗炎活动治疗急性、慢性或反复出现的疾病。基于其在传统医学治疗声称,我们调查的可能机制CR的镇痛和抗炎作用甲醇。

CR的止痛效果甲醇被两个动物模型评估,包括醋酸段扭动响应和福尔马林试验。醋酸间接引发疼痛的内源性介质的释放(如血清素和前列腺素)和促炎细胞因子(如TNF - 和il - 1 )导致痛苦的感觉23]。这种疼痛的效果是可以预防非甾体抗炎药、镇痛药物制剂与中央的行动,例如吗啡。在目前的研究中,CR甲醇(500毫克/公斤)和吲哚美辛(10毫克/公斤)提供antinociceptive效应减轻腹部醋酸诱导的小鼠痛苦地扭动着。

福尔马林测试涉及到两相的反应。第一阶段(神经源性疼痛的响应)发生在第一个5分钟后注射福尔马林。第二阶段(炎性疼痛的反应)福尔马林注射后发生在15到30分钟之间。中央代理药物可以抑制阶段,而外围作用的药物,如非甾体抗炎药的药物,只有抑制第二阶段(24]。CR的治疗甲醇(100和500毫克/公斤)和吲哚美辛(10毫克/公斤)能够减少疼痛的反应注射福尔马林诱导的第二阶段。结果表明,CR的antinociceptive效应甲醇可能是由于它的抗炎效果。

-Carrageenan-induced爪子水肿,在活的有机体内炎症模型,也被描述为一个两相的事件(13]。组胺、缓激肽和5 -羟色胺(5 -)被释放在第一阶段的水肿(0 - 1 h)。在第二阶段(1 - 6 h)、肿瘤坏死因子- ,il - 1 、cox - 2和动力分配产生更积极,这可能反过来加剧肿胀的程度。众所周知,cox - 2的表达最大的后期阶段 随后-carrageenan-induced爪子水肿,这可能增加前列腺素水平炎症反应(25]。il - 1 和肿瘤坏死因子- 参与中性粒细胞迁移 -carrageenan-induced炎症。这些介质能够招募白细胞、中性粒细胞等报道在最近的一些实验模型26,27]。在这项研究中,CR甲醇和消炎痛(10毫克/公斤)显示显著的抗炎作用 角叉菜胶诱导小鼠爪子水肿第四和第五。此外,肿瘤坏死因子的水平 ,il - 1 ,il - 6与CR也减少了治疗甲醇和消炎痛(10毫克/公斤)。因此,一个假定的CR的抗炎机制甲醇可能与抑制炎症介质的程度有关,如肿瘤坏死因子- ,il - 1 ,il - 6。

cox - 2选择性cox - 2抑制剂是一种非甾体抗炎药,直接目标,一种酶负责炎症和疼痛(28]。选择性cox - 2降低消化性溃疡的风险和cox - 2类似,伊诺产生大量的没有和已被确认为在炎性疾病发挥了关键作用29日]。大量研究表明,没有和后卫参与炎症和疼痛的事件30.]。通过抑制抑制没有和动力生产伊诺和cox - 2表达是有益的在治疗炎症性疾病31日]。实验结果表明,CR甲醇(500毫克/公斤)对伊诺和cox - 2蛋白表达有抑制作用。CR的抗炎机制甲醇可能与抑制的动力,没有合成,所述抗炎机制的吲哚美辛在抑制炎症过程中,角叉菜胶引起的(32]。

在组织病理学检查 角叉菜胶,爪子活检显示明显的扩大蛀牙的结缔组织。然而,如图5吲哚美辛和CR甲醇组显著改善水肿的情况引起的 卡拉胶。结缔组织的细胞间隙也明显减少。

中性粒细胞迁移,刺激 角叉菜胶,释放活性氧等活性物质。一氧化氮、过氧化氢、羟自由基和过氧化物阴离子扮演主要角色的产生细胞损伤(33,34]。MDA是一个被动的醛有毒压力所引起的细胞并形成共价蛋白加合物被称为先进的脂质过氧化反应终端产品(ALE)。炎症效应将导致MDA的积累。增强谷胱甘肽和SOD水平,另一方面,可以减少MDA生产(35]。在这项研究中,SOD、GPx和接地的活动增加与CR肝脏治疗后甲醇。另一方面,CR甲醇显著降低MDA水平。因此,我们怀疑的抑制MDA生产可能相关的增加SOD、GPx,接地的活动。

CR的指纹色谱甲醇成立。它的两个三萜(乌索酸和羽扇豆醇)内容是定量确定。两种活性化合物的CR甲醇乌索酸和羽扇豆醇,之前已被证明具有抗炎和antinociceptive活动(36,37]。

本研究表明,白粉藤属被展出antinociceptive和抗炎活动。CR的抗炎机制甲醇对 角叉菜胶诱导的爪子水肿涉及两种可能的途径。第一个途径很可能降低MDA和相关水平水肿爪子通过增加SOD的活动,在肝脏GPx,研磨。其他途径缓解炎症因子的水平,如il - 1 、il - 6、TNF - ,NF B,进气阀打开,cox - 2在水肿引起的爪子 卡拉胶。这支持CR的可能机制甲醇用于减轻炎性疼痛。此外,本研究也为其提供了第一个证据镇痛和炎症的影响白粉藤属被。

确认

这项研究支持部分由美国国家科学委员会,台湾(NSC 100 - 2320 - b - 039 - 013),台湾卫生部临床试验和研究卓越中心(doh100 - td - b - 111 - 004)和委员会中药制药、卫生,行政院(ccmp100 - cp - 010和ccmp101 - rd - 002)。