文摘

背景。评估是否超表达的趋化因子receptor-7 (CXCR7)在前列腺组织获得男性Castration-Resistant前列腺癌(CRPC)与抗enzalutamide(全国)。方法。根据入选标准的CRPC淡指南,所有符合条件的患者在我们医院从2015年1月至2019年12月被包括在内。例接受根治性前列腺切除术,docetaxel-based化疗,或新的内分泌疗法(包括阿比特龙全国或)和严重的心肺疾病或其他恶性肿瘤病例被排除在外。在免疫组织化学染色CXCR7表达在前列腺活检组织中,所有注册病例分为两组,即CXCR7-positive组和CXCR7-negative组。然后,PSA响应全国治疗详细记录和比较分析。此外,Cox比例风险模型,用于确定kaplan - meier分析PSA无进展生存(PSAP-FS)和临床或影像学无进展生存(CRP-FS)在这个队列。结果。79 CRPC人登记和评估。平均随访时间24个月(范围,42)CXCR7-positive集团( )和28.5个月(范围,42)CXCR7-negative集团( )。患者低CXCR7表达式显示更好的PSA响应全国治疗。有84.4%的CXCR7 -病例显示减少PSA反应,虽然有71.4% CXCR7/1 CXCR7/2 + +组和31.2%组,分别。CXCR7/3 +组所有患者显示增加PSA应对全国治疗。和病人的PSA下降的百分比超过50% CXCR7-negative组显著高于CXCR7-positive组(68.8%比8.5%, ),和PSA下降超过90%的患者的比例也明显高于CXCR7-negative组(43.8% vs . 0, )。kaplan meier分析表明,肿瘤的结果CXCR7-negative患者更显著提高了全国治疗相比与CXCR7-positive病人。显著提高平均PSAP-FS(21个月和6个月, )和CRP-FS(27个月和9个月, )得到CXCR7-negative组。所有CXCR7-positive患者进一步分层分析表明患者更高CXCR7表达式显示更糟的结果。时间的中位数PSAP-FS CXCR7/1 +组的21个月,9个月CXCR7/2 +组和6个月的CXCR7/3 +集团,而时间的中位数CRP-FS CXCR7/1 +组的21个月,12个月CXCR7/2 +组和6个月的CXCR7/3 +组,分别。结论。过度的CXCR7诱导的AR拮抗剂CRPC全国患者显示更好的治疗反应。CXCR7可能是小说CRPC患者治疗目标基因。

1。介绍

大量研究表明,雄激素受体(AR)信号通路是最重要的调节机制管理前列腺癌(PCa)的恶性发展。激活的基于“增大化现实”技术可以提高的能力c-Myc-dependent antiapoptosis和DNA损伤修复1)通过几个下游信号通路,包括Jagged1 / Notch1 [2,3),CXCR4-CXCR7二聚体(4,5)、表皮生长因子受体/ Ras / ERK (6)、表皮生长因子受体/ JAK / STAT (7)和表皮生长因子受体/ PI3K / Akt (8]。此外,一些最近的报告表明,基于“增大化现实”技术还可以移植DNA损伤反应,促进恶性进展的PCa CDC6-ATR-Chk1通路(9)和beta-catenin-ATM-Chk2通路(10,11]。

雄激素剥夺疗法(ADT)仍然是患者的标准治疗前列腺癌(PCa)。大约80%与PCa最初回应ADT -90%的男性;然而,在几乎所有情况下,肿瘤产生耐药性ADT和进步转移性前列腺癌castration-resistant (mCRPC) [12]。Enzalutamide(全国)是一种新型的第二代雄激素受体(AR)拮抗剂,最大限度地抑制雄激素的信号和延长生存的32.4个月(13]。然而,被广泛应用于临床实践后,全国被证明并不敏感CRPC约42%的患者(14]。尽管最初响应率很高,几乎所有男人最终有了抗性全国约11.2个月后(13]。因此,克服的挑战全国抵抗已成为CRPC治疗领域的一个重要课题。同时也表明需要全国耐药性的分子机制的深入了解和更有效的发展为CRPC预测生物标志物和治疗方法。

我们之前的研究(15]证实CXCR7脱抑制与全国抗性密切相关。AR活动时被全国,CXCR7开始去阻遏从基于“增大化现实”技术的抑制作用,并进一步推动CRPC细胞通过加强antiapoptosis进展,迅速扩散,DNA修复和血管生成。后结合CXCR7拮抗剂(CCX771),全国治疗反应在CRPC显著提高细胞和动物模型。在目前的研究中,我们试图进一步确认是否CXCR7脱抑制可以预测全国CRPC患者的治疗反应和评估是否CXCR7表明一个AR-independent信号通路,这可能有助于克服全国阻力和提高肿瘤的结果CRPC病人。

2。患者和方法

2.1。病人

与CRPC所有符合条件的情况下,诊断和治疗在北京安贞医院从2015年1月至2019年12月,是加入了这项研究。2020年6月随访期结束。

2.1.1。入选标准

入选标准在本试验是基于淡的指导方针。满足以下因素在这些病人入选标准诊断为CRPC: 或1.7 nmol / L +三个连续上涨PSA至少相隔一个星期导致两个最低点和增加50% 或新病灶的出现,两个或两个以上的新骨损伤骨骼扫描或软组织损伤。

2.1.2。排除标准

排除标准包括先前的根治性前列腺切除术(RP),以前docetaxel-based化疗,以前新内分泌疗法阿比特龙(包括全国或), ,其他恶性肿瘤,严重的心肺疾病,和后续的中断。本研究经当地伦理委员会批准的首都医科大学。从每个参与者获得书面知情同意。

2.2。免疫组织化学染色

肿瘤组织样本是从CRPC获得通过超声引导下穿刺活检的病人。6个标本收集的每种情况下,然后在4%多聚甲醛固定至少24小时。随后,标本先后脱水乙醇和对二甲苯。最后,标本是由石蜡和嵌入式准备为2μ米厚的切片免疫组织化学染色。此外,CXCR7进行免疫组织化学formalin-fixed和石蜡包埋组织部分。deparaffinized组织部分后,通过分级患者酒精,他们被微波加热在0.01 mol / L柠檬酸缓冲在pH值为6.0 10分钟来检索抗原。30分钟后孵化Dako蛋白质堵塞的解决方案,组织部分在兔多克隆抗体对孵化CXCR7 (1: 250;Abcam,剑桥,妈,美国)为90分钟,其次是孵化在合polymer-conjugated二级抗体(Dako、斯特鲁普、丹麦)40分钟。免疫反应是可视化在DAB / H₂O₂。免疫反应的特异性是验证了用PBS代替主要的抗体。十大功率领域选择随机在每个样本的幻灯片,和染色分数CXCR7计算使用以下方法:胞质染色强度评估分数是0点-染色,温和的棕色染色,1点2点温和的棕色染色,强大的棕色染色和3分;和染色程度被评估为0分 ,1点为5% ~ 25%,为26% - -50%,2点和3点> 50%。最后,染色分数CXCR7强度计算分数倍程度得分如下:0点(-),(1 +)为1 ~ 3点,4 ~ 5分(2 +),并为≥6分(3 +)。

2.3。治疗和随访协议

所有注册病例接受了全国治疗(160 mg Qd)。病人被检测血清PSA水平监控每个月的头两年,每三个月在接下来的三年,然后每年。此外,颅计算机断层扫描(CT)或磁共振成像(MRI)进行访问疾病进展和复发前2年每3个月,每6个月在接下来的3年,并在随后几年每年。然后,放射性同位素骨扫描通常每12个月进行随访。

2.4。研究端点

在随访期间,我们测量PSA值的最大变化的程度与基线相比。主要终点是PSAP-FS (PSA进展时间,被确认为PSA增加超过25%,并再次确认后4周)。此外,次级终点是CRP-FS(临床或影像学进展,由恶化表示肿瘤症状,或增加20%以上的三种直径的占位性病变的总和,骨转移或新外观,或发生死亡的)。

2.5。统计分析

预后进行评估的参数多变量Cox回归分析。PSAP-FS和CRP-FS曲线得到Cox比例风险模型和kaplan meier分析。背景特征是由卡方检验评估或克鲁斯卡尔-沃利斯检验,是适当的。 显示统计学意义。美国SPSS v20.0 (SPSS)是用于统计分析。

3所示。结果

3.1。病人的特性

共有79名患者CRPC参加本研究。详细的临床病理的特点如表所示1。作为显示在图1,32例CXCR7-negative表达式可以由包含IHC染色在前列腺组织,守时,47例CXCR7-positive表达式。在所有CXCR7-positive患者中,7例CXCR7 1 +表达,16例2 +,24例3 +。之间没有显著差异CXCR7-negative组和年龄CXCR7-positive集团诊断、治疗史、PSA基线,格里森评分,淋巴结侵犯和远处转移。

3.2。CXCR7表达之间的相关性和PSA的治疗反应

作为显示在图2CXCR7低表达患者显示更好的PSA应对全国治疗。患者的百分比减少PSA CXCR7——组84.4%,71.4% CXCR7/1 +集团CXCR7/2 +组31.2%,0 CXCR7/3 +组。尤其是患者的百分比增加PSA CXCR7——组仅为15.6%,而CXCR7/2百分比是68.8% +组和100% CXCR7/3 +组,分别。病人减少超过50%的比例远高于CXCR7-negative组比CXCR7-positive组(68.8%比8.5%, ),情况下减少超过90%的比例也明显高于CXCR7-negative组比CXCR7-positive组(43.8% vs . 0, )。

3.3。CXCR7-Negative表达式表明PSA更好发展的结果

如图3(一个),PSA-free进展率CXCR7-negative组明显升高,全国治疗与CXCR7-positive组的6个月(84.4%比42.6%),12个月(65.6%比8.5%),24个月(31.2%比4.3%),和36个月(10.4% vs . 0),中位数PSA-FS * CXCR7-negative组的21个月和6个月的CXCR7-positive组,分别为( , (1.864 - -4.965))。此外,当我们分层CXCR7-positive组根据积极程度,我们发现在图3 (b)全国治疗后,CXCR7表达显著的更高的积极程度与PSA-free进展率越低。PSA-FS中位数时间为21个月CXCR7/1 +组9个月CXCR7/2 +组和6个月的CXCR7/3 +组,分别(CXCR7/1 +与CXCR7/2 +: , (0.9465 - -5.377);CXCR7/2 +与CXCR7/3 +: , (1.066 - -3.728);CXCR7/1 +与CXCR7/3 +: , (1.349 - -6.076))。

3.4。CXCR7-Negative表达式表明更好的临床/影像学进展的结果

全国治疗后,c反应蛋白之间的利率两种不同CXCR7表达式组比较。如图4(一)显著更高的价值得到CXCR7-negative组相比,CXCR7-positive小组6个月(93.8%比55.3%),12个月(75.0%比34.0%),24个月(50.6%比8.3%),36个月(32.8% vs . 0)。中值CRP-FS CXCR7-negative组明显增加而CXCR7-positive组(27个月和9个月, , (1.777 - -5.059))。作为显示在图4 (b),分层分析进一步表明患者高CXCR7表达式显示更穷的CRP的结果。CRP-FS中位数时间为21个月CXCR7/1 +组,12个月CXCR7/2 +组,分别CXCR7/3 +组和6个月。虽然CRP-FS CXCR7/2 +集团的速度显示没有区别与CXCR7/1 +集团( , (0.8065 - -5.634))或CXCR7/3 +集团( , (0.8856 - -3.272),有显著性差异之间的CRP-FS率CXCR7/1 +集团和CXCR7/3 +集团( , (1.349 - -6.076))。

4所示。讨论

全国可以最大限度地抑制基于“增大化现实”技术的信号和抑制几个AR-regulated prooncogenic信号通路,然而它也上调特定AR-independent信号通路促进恶性进展和快速发展的阻力16- - - - - -20.]。全国抵抗强烈建议选择信号通路的存在之外的基于“增大化现实”技术,引发无限CRPC的进展。

大量研究表明,激活AR-independent信号通路在转移性疾病的进展中扮演关键角色AR拮抗剂和阻力。例如,PI3K-AKT-mTOR [21),NF -κB / P52 [22HER3), HER2 / (23],TGF -β1 / STAT3 (24)信号通路被证实与全国有关抵抗。此外,一些报告还发现AR antagonist-resistant模型中糖皮质激素受体的表达升高(25),增强神经内分泌的转换(26),自噬能力(27),可能是管理的发展Enza-resistant CRPC。2013年,李等人证实,AR-v7 AR乳沟变体,负责全国抵抗CRPC细胞。被击出AR-v7,细胞增殖和分化都是抑制(28]。Antonarakis等人进一步确定积极的表达AR-v7临床CRPC循环肿瘤细胞的情况下,他们对全国(29日]。因此,基于“增大化现实”技术的变异很可能是一个重要的潜在的全国抵抗机制。

大量的研究表明,在众多的风险因素,炎症中发挥着重要作用的开发和进展主要PCa转移性疾病,趋化因子和趋化因子受体的复杂网络基本组件之间的交互炎性细胞和PCa细胞(16]。CXCL12是自我调节的内高度表达和分泌的趋化因子与肿瘤有关缺氧和proangiogenic环境和自身免疫性疾病相关活动(30.]。常规CXCL12受体,与此同时,趋化因子受体CXCR4是侵略性的肿瘤和转移性PCa中高度表达的细胞,与PCa骨转移,并已被证明是一个独立的预后生物标志物对贫困生存(31日- - - - - -34]。CXCL12-CXCR4信号已经证明是直接链接到PCa粘附、迁移、金属蛋白酶表达,和入侵35,36]。此外,CXCR12-CXCR4信号维护起着关键作用的PCa干细胞样细胞,它被激活在PCa细胞耐药,导致肿瘤复发37]。

然而,CXCR12-CXCR4信号可以显著抑制由ADT虽然PCa过程的一个关键途径。因此,替代功能信号通路ADT-treated PCa进一步理解CRPC发展变得非常重要。CXCR7,另一种CXCL12受体(38),最近被证明有9 - 10倍高亲和力的CXCL12比趋化因子受体CXCR4 (39- - - - - -41]。CXCR7表达式与格里森年级PCa有正相关,也是高PCa转移病变,包括软组织和骨(42]。CXCL12-CXCR7信号显示为PCa侵袭性通过监管CD44和cadherin-11 [42]。另外,Balabanian等人表明CXCR7可以激活一种蛋白激酶信号和移植引发和VEGF的分泌,可能导致肿瘤血管生成(42]。进一步的研究表明,引发治疗可以上调CXCR7,暗示一个IL-8-CXCR7积极的反馈循环(42,43]。值得注意的是,据报道,CXCR7与表皮生长因子受体相互作用,刺激水平的提高phospho-EGFR和phospho-ERK1/243]。这些结果进一步支持了最近的一项研究,表明CXCR7-mediated表皮生长因子受体激活在小鼠胚胎成纤维细胞(4]。CXCR7和其他细胞因子之间复杂的互动关系,潜在的IL-8-CXCR7积极的反馈循环,和十字路口PCa CXCR7-EGFR激活的细胞,表明一个特定的和潜在的治疗通道CXCR7-mediated PCa的信号通路。

我们之前的研究(15]比较分析C4-2B细胞的DNA档案(androgen-independent PCa细胞株)和Enza-treated C4-2B细胞。Enza-treated CXCR7被证明是一个重要的超表达基因细胞。后续功能试验进一步证实CXCR7抑制剂可显著抑制细胞增殖、侵袭、迁移、DNA损伤反应,血管生成在体外CRPC和在活的有机体内PDX模型。当结合治疗CXCR7抑制剂和全国,协同治疗效果可以明显观察到CRPC模型。根据这些数据,我们推测CXCR7可能代表一个重要的潜在替代信号通路和有价值的生物标志物在CRPC Enza-resistant进展。最近的出版物相似的结论证实CXCR7过度可能导致全国抵抗通过激活MAPK或Akt通路,抑制和CXCR7-targeting封锁CRPC肿瘤生长并可能防止转移(44,45]。

七十九CRPC患者没有根治性前列腺切除术被录取到目前的临床研究,发现和CXCR7的表达在前列腺活检组织。我们进一步分析了与全国治疗反应CXCR7表达的相关性。后42个月的随访中,我们证明CXCR7-positive表达式表明重大阻力全国治疗和极度贫困的结果PSA进展和clinical-radiographic进展。然而,当前的研究有一定的局限性,包括单中心试验设计和一小群大小。在未来的研究中,我们将测试的预测价值CXCR7表达全国治疗反应更大群CRPC病人ADT或放射治疗。此外,从前列腺活检样本中检测CXCR7有限CXCR7广泛使用的那些经历了RP CRPC病例治疗。虽然可以使用循环肿瘤细胞的检测CXCR7脱抑制血液样本,我们发现循环肿瘤细胞的检测率太低的进一步调查我们的初步研究。因此,如何衡量CXCR7脱抑制血液样本中仍然是一个严重的技术问题,严重限制了使用几个Enza-resistant生物标志物在那些CRPC病人RP治疗。

5。结论

仍有许多CRPC内分泌治疗抵抗机制,值得探索。CXCR7是最重要的一个新靶点,有望克服全国抵抗。深入研究和更清晰的理解CXCR7信号转导通路组件将有助于开发新的治疗药物改善全国的电阻状态与CRPC病人。

数据可用性

在研究过程中生成的数据集分析可从相应的作者合理的请求。

伦理批准

目前的研究已通过临床试验的伦理委员会首都医科大学(CMU2010003X),因此执行按照道德标准制定1964年的赫尔辛基宣言及其后来的修正案。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

作者的贡献

勇罗Yunhua林,朱镕基侯,清丽,宏宇壮族和江Yongguang参与研究概念和设计。勇罗作出了实质性的贡献目前研究的概念和设计。乾坤,Xiaobing杨有着魏、赵、韩伊利Mingchuan李,Bingfu冯导致数据收集。李罗勇,乾坤,有着魏进行了数据分析。勇罗乾坤,李、杨Xiaobing和有着魏起草了手稿。所有作者回顾了手稿。勇罗和李乾坤同样导致了这项研究。

确认

目前的研究是由北京的国家自然科学基金(7192053)。