文摘

背景。PPAR -γ单核苷酸多态性(SNPs)据报道,扮演着重要的角色在决定代谢风险多样化的人口。是否PPAR -γ单核苷酸多态性影响ESRD患者的临床课程是未知的。方法。从多中心队列研究,我们发现698 ESRD患者普遍在2002年至2003年间,782名健康受试者和其他控制。两个PPAR -γ单核苷酸多态性,Pro12Ala (rs1801282)和C161T (rs3856806), ESRD基因分型及其与检查。两组人预期之后直到2007年,和可预测性ESRD患者的长期生存的基因型进行了分析。结果。multivariable-adjusted回归后,GG基因型Pro12Ala ESRD明显更容易联想到( )患者non-diabetes-related迹象。Cox比例风险的回归表明Pro12Ala和C161T多态性在ESRD DM患者死亡率的重要预测因子(Pro12Ala: GG与其它基因型,风险比[HR] < 0.01; ;CC和TT基因型,C161T人力资源2.86; ;CT与TT基因型,人力资源1.93; )。结论。这是第一个和最大的研究来评估PPAR -γ单核苷酸多态性在ESRD患者。进一步的研究需要阐明PPAR -的作用γ在ESRD患者。

1。介绍

慢性肾脏疾病(CKD)和终末期肾病(ESRD)新兴全球流行病[1- - - - - -3]。ESRD并发症陪同CKD和带来的经济损失占总医疗支出的6%以上在大多数发达国家1,3]。糖尿病肾病(静)ESRD全球的主要原因和良好的血糖控制可以抑制ESRD DM-associated[的崛起4]。通过改善胰岛素抵抗和高胰岛素血症,二甲双胍和glitazones据称有利于缓解肾损伤在静5]。

Glitazones最常用降糖药物的患者静息。他们加强在骨骼肌葡萄糖利用率以及adipokine监管在脂肪细胞中,其中大多数效应是由过氧物酶体proliferator-activated受体(PPARs),主要是PPAR -γ(6]。PPAR -γ脂肪细胞中高度表达,在大脑的一个非常低的水平,骨骼肌和肝脏。由于广泛分布,PPAR -γ的策划者是碳水化合物和脂质代谢,影响胰岛素敏感性,扮演一个关键的角色在代谢疾病(7,8]。此外,PPAR -γ激活与抗炎和antiatherogenic效应(9,10]。

从glitazones的功效与静息和带来的炎性环境CKD, PPAR -γ可能导致慢性肾病发展和进展(11,12]。事实上,序列变异的PPAR -γ与风险相关的蛋白尿和公开的静13,14]。PPAR -γ有四个信使rna亚型(PPAR -γ1,PPAR -γ4)产生的可变剪接与常见序列编码外显子1 - 6。PPAR -γ2包含一个额外的84个核苷酸(由外显子编码B) n端,在临床上重要的单核苷酸多态性(snp)被发现15]。C-to-G替换外显子的核苷酸34 B导致Pro12Ala多态性,而C161T外显子6代表一个没有氨基酸改变的多态性。

过去文献PPAR -γ多态性和CKD主要集中在糖尿病肾病。Pro12Ala多态性与蛋白尿和静风险(ESRD)但不是这样的高度风险存在于白种人但不是亚洲人16]。然而,除了静肾病的研究非常少见。一份报告建议C161T PPAR -γ可能有一个保护作用IgA肾病的进展(9]。PPAR -的影响γsnp non-DM肾病的发展和结果还没有被调查。因此,当前的研究旨在评估2最常见的PPAR -之间的关系γsnp, Pro12Ala C161T,和他们联系ESRD患者来自台湾,在ESRD患病率高。此外,我们还研究了总体死亡率根据PPAR -这些ESRD患者γ基因多态性。

2。材料和方法

2.1。研究人群

在这项研究中,ESRD患者( )接受维护血液透析或腹膜透析是从医院招募2003年和2004年之间在台湾北部。人接受体检( )在同一时间也招募了。收集血液样本从每个主题在入学的时候。ESRD患者和健康人随访前瞻性,死亡和生存状态是由国家确定注册中心从台湾卫生部在2003年和2008年之间。本研究通过国立台湾大学医院的机构审查委员会及其附属设施和遵守赫尔辛基宣言。所有参与者提供书面知情同意。

所有参与者完成一份调查问卷关于他们社会人口状态(生日、性别、和教育)、病史(包括高血压和糖尿病),和生活方式(包括吸烟和饮酒)全科医生的协助下。糖尿病的诊断是根据过去的历史被诊断出糖尿病或两个录音查空腹血糖水平≥126 mg / dL(7.0更易/ L)。ESRD的原因和长期透析起始日期记录每个ESRD的情况。静的诊断是实现如果他们有DM的历史至少5年时间开始前维护透析,糖尿病性视网膜病变,和/或适度的蛋白尿(尿分析≥100 mg / dL)没有活跃的沉积物。

2.2。实验室化验

基因组DNA提取外周血白细胞使用Chemagic血液的DNA试剂盒(Chemagen AG, Baesweiler,德国)。两个单核苷酸多态性基因型(Pro12Ala和C161T)是由聚合酶链reaction-restriction片段长度多态性(PCR-RFLP),如前所述[17]。简而言之,一双270 -基础- (bp)从基因组DNA片段生成包括Pro12Ala使用2引物PCR,引入了BstU-I限制网站(CG / CG)只有当C G在核苷酸替换34。PCR产品消化BstU-I(美国新英格兰生物学实验室,贝弗利,MA),在2.5%琼脂糖凝胶电泳,溴化乙锭染色。Pro12Ala, 227个基点的碎片和43 bp观察GG基因型,270个基点的碎片,227个基点,和43 bp CG基因型,为CC基因型和一个270个基点的片段。

对于C161T, PCR-RFLP使用2引物和限制性内切酶国民III(美国新英格兰生物学实验室,贝弗利,MA)被用于基因分型。两个片段,245个基点和101个基点,观察对CC基因型,245个基点,204个基点,101个基点,为CT基因型和41 bp,和204个基点,101个基点,41 bp TT基因型。

2.3。统计分析

使用SAS数据分析进行,9.1.3软件(SAS研究所Inc .,卡里、数控、美国)。双面的 值≤0.05被认为是具有统计学意义。潜在的危险因素和这些ESRD患者的预后因素进行单变量分析使用卡方检验和确切概率法(分类),学生的 以及(连续),Mann-Whitney 测试(非参数),适当的。接下来,使用逻辑回归模型进行多变量分析(与ESRD的存在相关的因素)和Cox比例风险模型(因素预测死亡率)估计风险因素的影响在ESRD的概率和长期死亡率ESRD患者的预后因素。

确保分析结果的质量,基本model-fitting技术(1)变量的选择,(2)拟合优度(GOF)评估,和(3)回归诊断方法用于我们的回归分析。具体来说,逐步变量选择过程应用于获得候选人最终回归模型。所有的单变量重要的和不重要的协变量有关(ESRD)的人口统计学资料、并存病病因肌酐,和基因分型结果)和他们的交互选择和意义水平入口(SLE)和保持(SLS)被设置在0.15和0.35之间。GOF措施(估计接受者操作特征(AUROC)曲线下面积和调整广义 )和GOF测试(Hosmer-Lemeshow测试逻辑回归模型和Grønnesby-Borgan测试Cox比例风险模型)的检查。

3所示。结果

共有698流行ESRD患者和782名健康个体参与这项研究。ESRD患者的平均年龄为58.8岁,与透析的古董 年。ESRD的病因如下:慢性肾小球肾炎(33.5%)、糖尿病肾病(24.6%)、多囊肾疾病(2%),和其他(39.9%)。健康的参与者没有偏离哈迪温伯格平衡(HWE)(表1)。例中偏离HWE PPAR -γPro12Ala ( )表示这个SNP之间可能存在的相关性,存在的迹象。

表1
轻微的等位基因频率和两个PPAR -哈迪温伯格平衡γ单核苷酸多态性。

基因型分布和其他临床特征比较ESRD和健康的参与者之间(控制)表2和3。值得注意的是,平均水平的血清肌酐(mg / dL)明显高于在ESRD集团(ESRD与控制:11.2和1.0; ),而血清白蛋白(g / dL)控制价格高(ESRD与控制:3.9和4.4; )。DM患者的比例也较高情况下(ESRD与控制:37.7%和10.6%; )。分布的PPAR -γPro12Ala基因型包含病例和控制之间的显著差异,ESRD组有更少CG基因型和CC基因型。PPAR -γC161T基因型频率组(没有差异 )。此外,subanalysis根据ESRD non-DM或DM患者相关的发现,那些ESRD DM相关明显更可能PPAR -γPro12Ala CG基因型但不CC基因型( )(表3)。

表2
研究人群的特点和控制地位。
表3
基因型分布与DM研究人群的情况下,案件没有糖尿病,和控制地位。

我们下一个试图确定与ESRD的存在相关联的因素,根据他们的PPAR -γSNP的状态。如表所示4多变量逻辑回归分析确定三个重要预测因子携带迹象。空调在年龄和DM,受试者ESRD non-DM和GG基因型的PPAR -γPro12Ala有更高几率ESRD(比值比(或)> 1×106, )。

表4
ESRD的预测被拟合多元逻辑回归模型使用逐步由生存概率的倒数加权变量选择方法。

我们进一步评估ESRD患者长期生存的可预测性,PPAR -的基因型γ单核苷酸多态性。之间的分布与死亡率相关的因素比较幸存者和死者ESRD患者(表5)。的平均年龄明显高于ESRD患者死亡(幸存者, 与nonsurvivors, ; ),一个更高比例的DM nonsurvivors(与nonsurvivors幸存者,29.3%,56.2%; )。幸存者的水平明显高于有血清白蛋白( )、血红蛋白( )。没有发现明显的异质性分布的PPAR -γPro12Ala和PPAR -γC161T幸存者和nonsurvivors之间基因型。Cox比例风险模型确定了四个重要的预测死亡率(年龄,PPAR -γPro12Ala-GG, DM×C161T-CC, DM×C161T-CT ESRD患者(表)6)。空调在年龄、ESRD患者GG基因型的PPAR -γPro12Ala最低随访期间死亡的风险(风险比[HR] < 0.001; )与其他基因型。ESRD患者DM和PPAR -γC161T CT基因型和CC基因型也有很大的风险更高死亡率(前者,人力资源1.93,95%可信区间[CI] 1.36 - -2.73; ;后者,人力资源2.86,95%可信区间2.11 - -3.86; )比TT基因型。

表5
单变量分析在透析情况下死亡的危险因素。
表6
在透析时间的预测情况下通过拟合多个Cox比例风险模型 逆的生存概率加权的使用逐步变量选择方法。

4所示。讨论

我们所知,这个研究显示第一次PPAR -γsnp发挥重要作用在ESRD的发展和这些ESRD患者的结果,在一大群汉族的参与者。具体来说,ESRD患者更可能有PPAR -γ比其他基因型Pro12Ala GG基因型。然而,对于ESRD患者起源于汉,PPAR -γPro12Ala和C161T显著影响结果那些并发糖尿病,而只有Pro12Ala影响没有DM ESRD患者的结果。

常见的PPAR -单核苷酸多态性γ已报告与糖尿病风险升高,冠状动脉疾病(CAD),代谢综合症和脂肪肝疾病(18- - - - - -20.]。然而,种族之间的固有风险不同。一个荟萃分析发现,CC基因型(Pro / Pro)的PPAR -γPro12Ala与风险有关的多囊性卵巢综合征在欧洲人而不是亚洲人21]。同样,欧洲白种人Pro12Ala CC基因型的克罗恩病的风险比那些较低GG基因型,不是亚洲人(22]。与此同时,PPAR -γC161T多态性也扮演着重要的角色在决定代谢风险的亚洲人。CC基因型C161T易代谢综合症的日本年轻人发展23]。C161T-T等位基因携带者也显示26%的风险减少与其他基因型相比中国而不是白种人24]。总的来说,这些数据显示上下文和ethnicity-dependent风险测定不同PPAR -γ单核苷酸多态性。此外,即使在所谓的亚洲人口中,可能存在固有的差异单核苷酸多态性分布和生理重要性25]。

对于肾病患者,PPAR——的重要性γ单核苷酸多态性不能被夸大。元分析发现,CC基因型的Pro12Ala明显的风险增加2型DM患者静息与其它基因型(相比16]。对于1型糖尿病患者/静,GG基因型的Pro12Ala授予ESRD进展和死亡率的风险更高(26]。然而,这种风险高程静被发现只存在于白种人(16]。缺乏研究存在关于PPAR -的作用γ单核苷酸多态性non-DM肾病患者,没有在亚洲进行。姚等人发现CC基因型携带者Pro12Ala和C161T都明显高于血清炎症标记物,和CC基因型的Pro12Ala (Pro / Pro)倾向ESRD患者高死亡率(27]。在目前的研究中,我们发现Pro12Ala GG基因型,但不是C161T,更有可能是与非糖尿病患者ESRD患者的汉民族和预示着显著降低ESRD患者死亡率的风险,整合与姚明的发现(27]。虽然C161T CC基因型没有生存优势在ESRD白种人,CC基因型携带者与DM汉民族贫困生存比其他C161T基因型(表6)。

PPAR -微分的影响γ不同种族之间的snp ESRD的发展很有趣。我们提出几个解释ESRD的可能性会高的GG基因型的Pro12Ala队列。首先,如上所述,民族差异可能是一个重要的决定因素的单核苷酸多态性的生物表型。CC基因型对ESRD Pro12Ala可能发挥保护性作用发展而被有害的白种人。Pro12Ala GG和CG基因型都是亚洲人,与肥胖相关发展与CC基因型(19,28),和肥胖是一个重要的诱发因素ESRD [29日,30.]。第二,这种更高的可能性ESRD GG基因型携带者可能代表其他病人的过早死亡,从而排除他们的招生。事实上,报告建议CC基因型Pro12Ala提高CAD在汉族的风险,说明健康潜在的负面效应对航空公司(20.]。还是其他的研究表明,携带Pro12Ala C等位基因是与在亚洲人患结肠直肠癌的风险更高,过早死亡的另一个原因ESRD之前(31日]。最后,Pro12Ala被发现的罕见GG基因型预测2型糖尿病发展的亚洲人(32],GG基因型携带者的比例在我们群很低。然后ESRD的高风险Pro12Ala GG基因型可能反映部分DM和随后的风险更高(ESRD与Pro12Ala GG基因型有关。

姚等人表明,高炎症状态可以解释PPAR -更高的死亡率γPro12Ala CC基因型(27]。虽然我们还发现了CC基因型ESRD患者死亡率的危险因素的汉族血统,海拔似乎更高风险的程度(白种人和亚洲人,2和3)(表6)。过去的报告指出,亚洲人特有的基因签名诱发他们持续的炎症和心血管疾病和癌症的倾向,没有发现在白种人33,34]。因此,PPAR -引入的风险更高γPro12Ala CC基因型可能反映之间的协同效应多个Asian-specific参与炎症通路的基因的snp。

此外,我们还发现了PPAR -γC161T C等位基因携带者的ESRD患者的死亡率预测汉族的起源(表6),与研究描述,PPAR -兼容γC161T多态性与CAD的风险在中国,不是在白种人24]。香港的另一项研究还显示,T等位基因在161年位置预测更高的心血管风险和患者的全因死亡率静(35]。C161T snp的同义的输出可以代表连锁不平衡和一个潜在的协会与其他相邻的基因签名对病人的生存至关重要。因此,我们建议PPAR -γC161T多态性代表小说预后标记对ESRD患者DM的汉民族。

我们的研究有其优势和局限性。这是第一个关注的影响PPAR -γsnp ESRD患者的亚裔,极大地增强了其可信度大样本的大小。然而,确实存在一些限制。首先,只有两个snp进行调查和系统的方法,例如,haplotype-tagging snp的选择,可能使更好的可视化的全貌。第二,小的外显子B等位基因频率(ESRD患者未能满足哈迪温伯格平衡。这一发现可能部分由于保护作用对CC基因型对ESRD的发展。还需要进一步的前瞻性研究来确认我们的发现。

5。结论

我们的研究结果扩展先前发现的PPAR -γsnp表型的影响,确定他们的角色在ESRD的发展和预后ESRD患者的汉族血统。更重要的是,我们发现C161T多态性是一个独特的ESRD患者预后预测,没有报告。需要机械的研究调查PPAR -之间的关联γsnp Pro12Ala C161T,及其临床表现。

利益冲突

作者宣称没有利益冲突有关的出版。

作者的贡献

Chia-Ter曹国伟、陈Yen-Ching Chih-Kang蒋介石,黄Jenq-Wen Cheng-Chung方,Chen-Chih Chang和Chung-Jen日元构思的想法和收集所需的数据。Chia-Ter曹国伟、陈Yen-Ching Chih-Kang蒋介石,黄Jenq-Wen孚昌,Cheng-Chung方,Chen-Chih Chang和Chung-Jen日元进行统计分析,解读数据,起草。本文的作者提交批准。Chia-Ter曹国伟,陈Yen-Ching Chih-Kang蒋介石,Jenq-Wen黄了同样工作。

确认

这项工作是支持的医学研究,国立台湾大学医院。作者感谢工作人员负责卫生检查和血液透析服务收集临床资料和标本的志愿者。这项研究是由国立台湾大学医院(台大医院- 92 s027) Ta-Tung肾脏基金会,太太Hsiu-Chin李肾脏研究基金。