文摘

目标。探讨外周血树突状细胞(dc) CD86的表达,CD80和Th1 / Th2脓毒症患者和他们的生存价值的预测。方法。从2019年1月至2020年12月118例败血症被选中时,根据预后,患者分为死亡组( )和生存组( )。两组的通用数据和病原体部门收集,和外周血DCs CD86的水平,CD80、和Th1 / Th2;APACHEⅱ评分;炎症因子(原降钙素(PCT));和细胞生长趋化因子(GRO)比较两组之间heparin-binding蛋白质(HBP)和心肌酶指标(肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(水平)和乳酸脱氢酶(LDH))之间的关系,探索CD86, CD80, Th1 / Th2和各种血清学指标和预后的评估价值。结果。124株病原菌的分离出118名患者,其中78株革兰氏阴性细菌(62.90%),革兰氏阳性细菌的31株(25.00%),和15株真菌(12.10%)。CD86的分数,CD80、Th1、Th2, Th1 / Th2和APACHE II的死亡组高于生存组,差异具有统计学意义( )。PCT, GRO -αHBP、LDH水平,CK水平的患者死亡组高于生存组,差异具有统计学意义( )。外周血DCs CD86的水平、CD80和Th1 / Th2和PCT呈正相关,GRO -α6、LDH水平和CK ( )。ROC曲线分析表明,DCs CD86的AUC的联合检测,CD80、和外周血Th1 / Th2为0.951,高于0.882,0.883和0.734的单指数( )。结论。所有患者脓毒症免疫失衡,外周血CD86, CD80和Th1 / Th2死去的病人比那些幸存者。这三个指标的联合检测患者的预后的预测价值最高。

1。介绍

脓毒症是感染引起的全身炎症反应综合症,它发展迅速,可以导致休克和多器官衰竭。它是危重病人死亡的主要原因,它已经成为一个迫切要解决的问题,目前在重症监护病房(1]。有一个缺乏有效的方法来评估脓毒症患者的预后。如果病人的条件可以评估和有效的早期干预可以有效降低死亡率2]。结果表明,免疫功能的紊乱病人的疾病进展中起着至关重要的作用[3),细胞免疫功能的变化早于体液免疫,所以人们注意免疫调节。树突状细胞(dc)是重要的监管细胞免疫细胞。DCs在外周血来自骨髓,可吸收,过程,和现在的T和B淋巴细胞抗原和传递它们。如果DCs之间的亲和力和抗原不足或缺乏costimulatory信号分子,T细胞会死(4]。CD80和CD86 B7分子,costimulatory至关重要的信号分子,在免疫反应中发挥重要作用的自身免疫性疾病。CD80和CD86的表达水平异常可以引起Th1 / Th2细胞因子的失衡,然后会影响身体的免疫功能(5]。CD4 +辅助T细胞(Th)可分为Th1细胞和Th2细胞在不同细胞因子的影响。Th1细胞分泌促炎的因素,如肿瘤坏死因子-α(肿瘤坏死因子-α)和干扰素-γ(IFN -γ)。Th2细胞主要分泌抗炎介质,如interleukin-4 (il - 4)、白细胞介素- 10”(il - 4和il - 10)。Th1 / Th2通常保持动态平衡,其漂移方向可以反映的方向和程度不平衡身体的促炎和抗炎(6]。重症监护医生所面临的一个挑战是如何迅速和准确地识别脓毒症患者预后不良。显然,是迫切需要有效的预后标志物,以更好地告知病人和他们的家属潜在的临床结果和早期干预,减少死亡率。早期控制炎症和调节免疫功能是治疗的关键。在此基础上,本研究探讨了DCs CD86的表达,CD80、和外周血Th1 / Th2败血症的病人和他们的价值生存预测,为了改善患者的预后提供参考。

2。材料和方法

2.1。研究对象

118年脓毒症患者从2019年1月至2020年12月来到我们医院是选择和分为死亡组( )和生存组( )根据预后。入选标准如下:(1)满足脓毒症的诊断标准(7];和(2)病人的临床资料完整。排除标准如下:(1)对恶性肿瘤患者;(2)自身免疫性疾病患者;(3)病毒感染患者;(4)最近使用药物的患者免疫功能的影响;(5)患者精神病史;(6)患者严重营养不良;和(7)一周内病人出院或死亡。所有患者加入这项研究获得作用于血管的药物。 There is no significant difference in general data between the two groups ( ),如表所示1。本研究是医学伦理委员会批准。

表1
比较两组患者的一般信息。

脓毒症的诊断标准包含以下几点:(1)体温> 38°C或< 36°C;(2)心率> 90次/分钟;(3)呼吸率> 20次/分钟或帕科 毫米汞柱;(4)外周血白细胞> / L或 或不成熟 。

2.2。观察指标
2.2.1。通用数据采集

一般数据,如年龄、性别、心率、收缩压、舒张压在入院收集。两组分为死亡组( )和生存组( )根据生存情况后28天。急性生理和慢性健康II评分(APACHE II)被用来评估患者的疾病的严重程度。得分越高,越严重的疾病。

2.2.2。患者的病原菌的分布

入学后,样品的呼吸道、泌尿道、腹腔积液,脓,或收集的分泌皮肤损伤。BACTEC9120自动细菌培养仪(美国BD公司)是用于细菌培养,和PLEX-ID自动微生物识别系统(美国雅培公司)是用于菌株鉴定,以确定患者的病原菌的类型。

2.2.3。检测CD86、CD80和外周血Th1 / Th2水平DCs

血液样本得到入学后第一天上午。5毫升的外周血拍摄,其中100人μL是用乙二胺四乙酸(EDTA),分离、培养DCs在文献[8];4%多聚甲醛200添加到试管;μL是固定的,离心机,洗净;上层清液被丢弃;和0.1% tritonx - 100添加和孵化在4°C 5分钟;离心后,上清液被丢弃,PE-labeled CD86和FITC-labeled CD80被添加,孵化一夜之间在4°C,然后离心机。Xl-4流式细胞分析仪(贝克曼库尔特)是用于检测表面CD80和CD86的表达DCS。Xl-4流式细胞分析仪是用于检测Th1、Th2检测细胞内干扰素-γ。代表Th1细胞il - 4和il - 4的表达代表Th2细胞。

2.2.4。血清学指标

入学后,3毫升静脉血拍摄和离心机在3000 r / min 10分钟,上血清吸收和存储在冰箱里在-80°C。原降钙素(PCT) heparin-binding蛋白质(HBP)和细胞生长趋化因子是通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测α(与生长有关的癌基因α,GRO -α)。工具包是购自上海酶联生物科技有限公司,有限公司和操作进行了严格按照指令。肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(水平)和乳酸脱氢酶(LDH)血清中检测到的贝克曼au5800自动生化分析仪。

2.3。统计方法

采用SPSS 20.0统计软件统计分析,和测量数据所表达的是( )和 测试使用。表达的数据率(%)和测试 测试。皮尔森相关分析是用来分析外周血DCs CD86之间的相关性,CD80, Th1 / Th2和PCT, GRO -α6、LDH水平,CK。ROC曲线分析用于分析外周血DCs CD86的预测价值,CD80, Th1 / Th2病人的预后,与该数据具有统计上的显著差异 。

3所示。结果

3.1。脓毒症患者的病原菌的分布和组成

124株病原菌的分离出118名患者,其中78株革兰氏阴性细菌(62.90%),革兰氏阳性细菌的31株(25.00%),和15株真菌(12.10%),如表所示2。

表2
脓毒症患者的病原菌的分布和组成。
3.2。DCS CD86、CD80、T细胞亚群,Th1 / Th2表达式,和APACHE II评分两组

CD86的分数,CD80、Th1、Th2, Th1 / Th2和APACHE II死亡组显著高于生存组( ),如表所示3。

表3
DCS CD86、CD80、T细胞亚群,Th1 / Th2表达式,和Apache II评分两组。
3.3。比较两组患者之间的血清学指标

PCT和GRO患者死亡组-α。HBP的水平、LDH水平,CK生存组显著高于生存组( ),如表所示4。

表4
比较两组患者之间的血清学指标。
3.4。CD86 CD80, Th1 / Th2, PCT, GRO外周血dc -α,相关方面,LDH、水平和CK

外周血DCs CD86的水平、CD80和Th1 / Th2与PCT呈正相关,GRO -α6、LDH水平和CK ( ),如数据所示1- - - - - -3。


图1
CD86, PCT的相关性和GRO -α相关方面,LDH水平,和CK。

图2
PCT和GRO - CD80和关联α6、LDH水平,CK

图3
Th1 / Th2和PCT的相关性和GRO -α6、LDH水平,CK。
3.5。分析的预测价值的DCs CD86的表达,CD80和Th1 / Th2脓毒症患者的预后

ROC曲线分析表明,外周血dc的预后价值的AUC CD86, CD80、和Th1 / Th2脓毒症患者为0.951,高于单一指数0.882,0.883,0.734 ( )。结果如表所示5和图4。

表5
分析的预测价值的DCs CD86的表达,CD80和Th1 / Th2脓毒症患者的预后。

图4
分析DCs CD86的预测价值、CD80、T细胞亚群和Th1 / Th2表达式脓毒症患者。

4所示。讨论

脓毒症是一种常见的重要的疾病引起的感染在重症监护室。它是危险的,涉及系统性炎症网络效应,这可能会导致多器官衰竭和循环障碍(9]。尽管医疗技术已经取得了一些进展,该病的死亡率仍然很高,在中国约30% ~ 70%。因此,它的进步具有重要意义,确保病人的病情有针对性地改善患者的预后10]。生物标志物通常用于日常临床实践。ICU, PCT以外的一些生物标记已经证明了可靠性预测的脓毒症患者的死亡率,这促使寻找新的生物标志物。认为临床免疫失衡中扮演一个重要的角色在脓毒症的进展,因此,寻找合适的生物指标来评估患者的预后和实施有效的干预将有助于降低死亡率(11]。本研究回顾性分析DCs CD86的表达,CD80和Th1 / Th2外周血的脓毒症病人和他们的生存价值的预测。

4.1。脓毒症患者的病原菌的分布

早期识别病原微生物类型有利于患者的抗菌药物的选择,也可以避免的发生多药耐药性的细菌(12]。结果表明,[13)革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌感染两种血流感染的病原菌,也有类似的细胞壁结构和细胞毒性。病原菌主要通过内毒素激活宿主的免疫过程和脂多糖,从而加速炎性因子的生产。革兰氏阳性细菌还可以通过超级抗原激活T淋巴细胞增殖,导致免疫功能紊乱,抑制血液凝固,从而导致感染,进一步加重疾病的传播(14]。在这项研究中,124株病原菌的分离出118名患者,包括革兰氏阴性菌78株(62.90%),革兰氏阳性细菌的31株(25.00%)、真菌(12.10%)和15株,与先前的研究一致。

4.2。DCs CD86的表达、CD80和脓毒症患者的外周血Th1 / Th2

在脓毒症的发展,免疫功能障碍起着至关重要的作用。CD4 + T细胞可分为Th1细胞和Th2细胞。Th1分泌干扰素,γ-和- 2相关因素和调节细胞和当地inflammatory-related免疫反应。Th2分泌il - 4, IL-10-related因素和刺激B细胞增殖,分化,产生抗体,与体液免疫(15]。在正常情况下,Th1 / Th2免疫平衡,控制身体的复杂的细胞因子网络。然而,一些研究表明,脓毒症患者Th1 / Th2平衡。华盛顿是一个专职的抗原呈递细胞(APC),分为直流骨髓和淋巴。它决定了激活或抑制T细胞和有一个独特的位置调节和维持身体的免疫反应(16]。当内源性或外源性危险信号出现在组织,自然的T细胞受体获得第一个信号通过DCs识别抗原,同时,它需要提供第二个信号激活T细胞通过costimulatory因素(17]。costimulatory信号分子、CD80和CD86广泛存在于DCs的表面和NK细胞,参与细胞免疫。CD80能促进T细胞分化成Th1,虽然CD86可以诱导Th2-mediated体液免疫,这使得Th1 / Th2平衡,从而扩大异常免疫反应(18]。体外实验表明,(19单克隆抗体,阻止CD80和CD86分子B7 / CD28通路阻塞,而细胞毒性淋巴细胞相关抗原4可以结合B7,从而抑制T细胞的增殖。在这项研究中,CD86的分数,CD80, Th1、Th2, Th1 / Th2死亡组高于生存组,表明死亡组患者的免疫失衡更严重。作者认为,在脓毒症状态下,DCs CD80和CD86能引起外周血Th1 / Th2分化通过T细胞的聚集有关。从这项研究中,可以看出,Th1、Th2的水平明显增加,而转向Th2 Th1死亡组,和死亡组患者的免疫功能是比这更无序的生存,导致预后不良。因此,免疫疗法对脓毒症患者(非常重要20.]。研究[21)表明,在脓毒症患者,有免疫抑制和CD80/86导致的异常表达水平T淋巴细胞停止响应,这很容易增加患者继发感染的易感性,这与本研究是一致的。

4.3。免疫功能和炎症之间的关系,脓毒症患者的凝血功能,心肌功能

研究表明,脓毒症患者的发展与炎症及凝血功能的变化同时,和其他研究表明,有超过40%的脓毒症患者心脏功能障碍,这是预后不良的主要原因之一。PCT是降钙素的前体,由体内甲状腺没有感染。因此,在全身感染的情况下,PCT主要来自甲状腺以外的器官。在严重感染的情况下,PCT水平越高,更严重的感染,预后差。研究表明,水平与脓毒症的严重程度患者(23]。GRO -αELR-CXC的趋化因子家族最近吸引了大量关注,分子量约8骨。它扮演着一个重要的角色在中性粒细胞的诱导和激活,参与多种疾病的病理过程,可以刺激内皮细胞正常的上皮细胞的生长,并能趋化白细胞炎症网站,扮演着一个重要的角色在炎症反应的发展。研究表明,血清GRO -α显然会增加在脓毒症的早期阶段24]。凝血障碍通常存在于脓毒症患者。HBP与杀菌活动是一种蛋白质,它可以提高血管内皮通透性,减少有效循环血容量。当发生感染,中性粒细胞释放方面,其水平与脓毒症的生理过程密切相关25]。LDH、水平和CK是心肌细胞损伤的重要指标,它可以反映心肌损伤的严重程度(26]。在这项研究中,PCT, GRO -αHBP、LDH水平,死亡组CK水平高于生存组,表明炎症反应、凝血功能,心肌细胞损伤死亡组比生存组更严重。在脓毒症的发展,加重炎症反应、凝血功能和心肌损伤出现异常,功能,病人的身体变得更糟,这严重影响各种器官和增加死亡率(27]。进一步的研究表明,外周血DCs CD86的水平,CD80、和Th1 / Th2与PCT呈正相关,GRO -αHBP、LDH水平,CK,表明CD86的变化,CD80、和Th1 / Th2相关炎症水平,凝血功能,病人的心肌功能。作者认为,这主要是由于病原体入侵身体,结合相应的受体,导致大量的炎症介质,同时与脓毒症的发展,DC体内细胞凋亡,与此同时,感染导致DCs的迁移,导致外周血DC含量的减少,显示出免疫紊乱状态(28]。随着病情的发展,患者的促凝血的系统被激活的炎症反应,导致凝血和血管血栓的形成。同时,炎症因子抑制心脏功能通过各种信号通路,导致心肌损伤,恶化的患者的临床结果,增加患者的死亡风险(29日]。因此,在治疗脓毒症患者中,我们不仅要进行抗炎或免疫疗法,但也注意病人的进化免疫状态,总是注意炎性因子的变化,免疫功能,凝血功能,并实现精确治疗,这对改善患者的预后尤为重要。

4.4。预测价值的外围DCs CD86、CD80和Th1 / Th2脓毒症患者

ROC曲线分析表明,联合检测外周血dc的AUC CD86, CD80、和Th1 / Th2为0.951,高于0.882,0.883,和0.734的单指数,表明CD86 CD80和Th1 / Th2可以作为敏感标记预测脓毒症患者的预后。研究[30.)表明,脓毒症的治疗与化淤解毒汤可以改善CD80的水平,CD83、CD86和外周血cd表面,表明CD86 CD80、和Th1 / Th2可以作为新的入口点改善脓毒症患者的预后,这与本研究是一致的。当然,也有一些缺点。本研究是回顾性研究。所选案例的数量很小,而且可能有偏见。在未来,我们将与多中心开展联合研究,扩大样本包含,进行回顾性研究,以确保本研究的准确性和更好的为脓毒症的治疗提供参考。一些研究进行重复测量的动态生物标志物浓度随着时间的推移,他们相信生物标记不清楚区分幸存者和nonsurvivors在脓毒症的发病时仍然可以提供重要的预后信息评估在进一步的时间点。但生物标志物浓度随时间不太实际使用和接受额外的变化由于液体复苏等因素。因此,在这项研究中没有重复测量。

总之,所有患者脓毒症免疫失衡。DCs CD86的水平、CD80和Th1 / Th2外周血水平的相关炎症因子,凝血功能,心肌损伤。这三个指标的联合检测病人的预后预测价值最高,可作为临床治疗的一个新的切入点来改善预后。

数据可用性

标签数据集用于支持本研究的发现可以从相应的作者。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。