文摘
客观的。之间的相关性分析和研究NLR家庭卡domain-containing 4 (NLRC4)基因单核苷酸多态性与患者的预后hemophagocytic lymphohistiocytosis(通过)。方法。在这项研究中,我们回顾性研究了62名通过患者的临床资料,其中包括40岁男性和22岁女性。提取基因组DNA,基因型在rs385076轨迹和rs479333轨迹NLRC4基因进行了分析。水平的血液interleukin-18(地震)分析了酶联免疫吸附试验(ELISA)。结果。相比之下,TT基因型的NLRC4基因rs385076轨迹,通过TC基因型患者的死亡率和CC基因型高( ,95%置信区间:1.277—-4.788, ; ,95%置信区间:1.098—-4.753, )。在rs479333 CC基因型NLRC4基因作为参考,通过CG基因型和GG基因型患者有更高的死亡风险( ,95%置信区间:1.488—-5.775, ; ,95%置信区间:1.014—-5.570, )。NLRC4基因rs385076 T > C和rs479333 C > G是通过患者的不良预后显著相关。曲线下的面积(AUC)接收机操作曲线(ROC)的预后结果通过与血清的地震级别为0.6813(95%置信区间:0.5365—-0.8260, )。NLRC4基因rs385076 T > C和rs479333 C > G与血清的地震水平较高有关。结论。NLRC4基因rs385076 T > C和C rs479333 > G通过患者的不良预后相关。
1。介绍
Hemophagocytic综合症,也称为Hemophagocytic lymphohistiocytosis(通过),是由于过度的巨噬细胞的激活和增殖,伴随着活动降低自然杀伤(NK)细胞和细胞毒性T淋巴细胞(CTL), granzyme-dependent细胞毒性缺陷,进而引起一系列临床综合征引起的免疫功能障碍(1- - - - - -3]。
根据通过的不同的触发因素,通过包括主要通过和二次通过。主要通过大多出现在儿童和青少年,但很少在成人。二次通过主要是由于感染、肿瘤和免疫疾病。最近的研究表明,细胞毒性t淋巴细胞的功能障碍,NK细胞、巨噬细胞和细胞因子水平的急剧增加通过的发病机制中发挥重要作用[4]。持续关注的研究使得我们发现越来越多的基因突变参与通过的发生。例如,391年的荟萃分析结果表明通过病人和975个对照组PRF1Ala91Val多态性与通过的发生(5]。杨等人的研究。6)第一次证明了的多态性STXBP2rs2303116通过的发病机理有关。上述基因突变影响合成、运输、锚定,启动,或细胞毒性颗粒的膜融合,导致细胞毒性颗粒无法分泌细胞外;结果,造成细胞毒性t淋巴细胞和NK细胞功能受损,不能消除目标细胞,他们参与的发病机制主要通过。
的NLRC4基因位于人类2 p22.3染色体;NLRC4 multiprotein复杂的激活与炎症因子的分泌(7,8]。研究表明,NLRC4 inflammasome可以释放il - 1β和地震-促进炎症(9,10]。突变NLRC4相关基因免疫调节巨噬细胞受损;基因突变不仅激活巨噬细胞产生il - 1β和地震,而且激活巨噬细胞caspase-1,导致巨噬细胞吞噬目标细胞凋亡,减少功能的巨噬细胞的数量(7,11]。根据研究,rs385076和rs479333基因多态性与许多疾病的发生12,13]。荟萃分析的结果表明,血清的地震水平显著增加主要通过和二次通过(14]。研究已经证实,地震中发挥着重要作用的发生通过,和抑制的地震可能是一个有效的策略治疗通过(15]。研究表明,地震中起着非常重要的作用在巨噬细胞活化综合征的发病机制;患儿NLRC4突变,研究人员发现,地震循环范围内数十毫微克/毫升(16]。
在这项研究中,我们探讨了单核苷酸多态性的相关性NLRC4基因和通过患者的预后,旨在通过患者的预后提供有价值的指标。
2。材料和方法
2.1。主题
我们回顾性分析了62名通过患者的临床资料从2018年到2021年,和存储血浆样本中提取;收集患者的1年随访结果信息。其中,40是男性和22是女性,年龄在25 - 84岁。所有患者有不同程度的发热、肝肿大、高温持续时间的2 - 8周,25例脾肿大,淋巴结病的18例,皮肤和粘膜出血19例,8例黄疸。2004年通过符合通过诊断诊断标准(17]。
2.2。入选标准和排除标准
入选标准如下。(1)临床资料和实验室测试结果的数据可用为止。(2)一年随访结果数据是可用的。(3) 年。(4)进行了一系列常规实验室检测在诊断病人。排除标准如下:(1)临床资料和实验室测试结果数据不可用,(2)心脏病患者的二级以上(含二级)确定根据纽约心脏协会(NYHA)分数,(3)感染艾滋病毒的病人,(4)严重肾功能障碍患者( ),(5)严重肝硬化患者( ),(6)感染无法控制(包括肺部感染和肠道感染),(7)严重的精神疾病,肿瘤(8)的历史活跃,(9)怀孕和哺乳期患者,(10)参加其他临床研究人员同时,人员和(11)与中枢神经系统的参与。
2.3。基因突变位点的选择和分析
基因突变的网站我们选择需要满足下列条件。(1)研究报告,这是致病突变。(2)基于1000人基因工程数据库的结果,小突变的等位基因频率(加)网站在中国汉族 。(3)没有研究报道这种变体之间的相关网站和通过。桑格测序是用于分析rs385076和rs479333的基因型NLRC4基因。
2.4。实验室指标测试
我们收集的结果患者的实验室测试指标,包括白细胞(WBC)计数,绝对中性粒细胞、血小板、血红蛋白、纤维蛋白原、乳酸脱氢酶(LDH)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、甘油三酯(TG)、总胆红素(治疗组)、凝血酶原时间(PT)、活化部分血栓形成质时间(APTT),白蛋白,和interleukin-18(地震)。白细胞和PLT xe - 5000自动探测到五级贷款血液学分析仪(Sysmex、日本)。PT和APTT被自动检测凝血分析仪(Sysmex、日本)。地震的级别被酶联免疫吸附试验(ELISA)检测。水平的ALT, AST, TG,治疗组、LDH、血红蛋白、白蛋白、纤维蛋白原检测7600 x020自动生化分析仪(日立、日本)。
2.5。统计分析
在这项研究中,GraphPad棱镜(Mac OS版本8.4.0,圣地亚哥,加利福尼亚州,美国)是用于统计分析。连续的数据表示为 ,和 - - - - - -测试是用于组之间的比较和分析。分类数据所表达的(%),团体之间的测试是用于分析。逻辑回归分析用于研究之间的关系NLRC4基因rs385076 rs479333单核苷酸多态性和通过的相对危险度(RR)。年龄、性别、体重指数、高血压史、糖尿病史、冠心病史、EBV感染率协变量被用作计算相对危险度(RR)和95%置信区间(95% CI)。kaplan meier方法用于分析的差异通过不同基因型患者的预后结果。所有测试都是双尾 表明该数据具有统计上的显著差异。
3所示。结果
3.1。临床数据
62通过患者的临床资料中选择本研究如表所示1。25 - 84岁,平均的 岁了。其中,男性40例,占64.52%,女性和22例,占35.48%。随访结果表明,22例死亡,40例活了下来。分析结果显示,年龄没有显著差异,性别和身体质量指数(BMI)之间通过患者的死亡组和生存组( )。的比例高血压、糖尿病、冠心病、通过病人的死亡率和EBV感染组显著高于通过病人生存组,差异具有统计学意义( )。
3.2。实验室检测指标
通过患者的实验室指标测试结果如表所示2。分析结果表明,死亡组之间没有明显差异,生存组的白细胞,绝对中性粒细胞数量、血红蛋白、纤维蛋白原、LDH、ALT, TG,治疗组,PT和APTT ( ),通过患者的血小板和白蛋白水平在死亡组显著低于生存集团的AST水平明显高于生存组,差异具有统计学意义( )。
3.3。的单核苷酸多态性分析NLRC4基因
的基因型和等位基因频率NLRC4rs385076和rs479333通过病人的死亡组和生存组如表所示3。相比之下,TT基因型的NLRC4rs385076轨迹,在调整了年龄、性别、体重指数、高血压史、糖尿病、冠心病、通过患者EBV感染史,TC基因型( ,95%置信区间:1.277—-4.788, )和CC基因型( ,95%置信区间:1.098—-4.753, )通过患者有更高的死亡率。通过患者的死亡风险的主导模式下显著增加( ,95%置信区间:1.543—-5.029, ),但是通过患者的死亡风险在隐性模型(没有明显变化 ,95%置信区间:0.882—-3.393, )。从等位基因的角度来看,它是发现,死亡的风险通过携带C等位基因在rs385076 T等位基因携带者的2.262倍(95%置信区间:1.359—-3.347, )。
在rs479333 CC基因型NLRC4基因作为参考,在调整年龄、性别、体重指数、高血压史、糖尿病、冠心病、EBV感染史,通过CG基因型和GG基因型患者有更高的死亡风险( ,95%置信区间:1.488—-5.775, ; ,95%置信区间:1.014—-5.570, )。通过患者的死亡风险的主导模式下显著增加( ,95%置信区间:1.580—-6.092, ),但是通过患者的死亡风险在隐性模型(没有明显变化 ,95%置信区间:0.741—-3.250, )。从等位基因的角度,G等位基因是通过患者死亡的一个危险因素( ,95%置信区间:1.518—-3.607, )。
3.4。的单核苷酸多态性NLRC4基因和通过病人的预后结果
通过不同的基因型患者的预后结果rs385076和rs479333NLRC4基因在图所示1。分析结果表明,通过TT患者的预后结果,TC,在rs385076 CC基因型NLRC4基因(图1(一)),通过患者的预后结果CC, CG, GG基因型在rs479333(图1 (b))明显不同( )。总的来说,rs385076 T > C和rs479333 C > G通过患者的不良预后显著相关。
(一)
(b)
3.5。地震水平,通过患者的预后结果
我们的分析表明,通过患者的血清水平地震生存组显著低于通过病人死亡组,差异具有统计学意义( ,图2(一个))。此外,接收方操作曲线(ROC)是用于分析血液的地震水平的评估价值的预后结果通过,和结果表明,曲线下的面积(AUC)为0.6813(95%置信区间:0.5365—-0.8260, ),截止值45.75 ng / L,和相应的敏感性和特异性分别为59.09%和80.00%,分别。这一结果表明,血液的地震有一个通过患者的预后评估的重要价值。
(一)
(b)
3.6。的单核苷酸多态性NLRC4基因和血清的地震水平
通过患者的血清的地震水平与不同的基因rs385076轨迹和rs479333轨迹NLRC4基因进行了分析,结果如图所示3。分析结果表明,rs385076 T > C和rs479333 C > G相关血清的地震水平较高(数字3(一个)和3 (b))。
(一)
(b)
4所示。讨论
在这项研究中,我们回顾性分析了62患者通过NLRC4基因rs385076轨迹和rs479333位点单核苷酸多态性和通过病人的预后结果。我们发现NLRC4基因rs385076 T > C和C rs479333 > G与通过患者的不良预后状况有关。
通过包括发热的临床特征;肝脏肿大,脾脏和淋巴结;外周血细胞减少;肝功能异常;凝血障碍;和嗜血细胞在骨髓18,19]。然而,由于通过许多触发因素,其诊断仍面临巨大困难(20.]。虽然通过的死亡率已经明显改善近年来,通过患者的死亡率仍相对较高的成人和儿童;成人患者的死亡率高达22% - -59% (21- - - - - -23]。通过研究的结果显示,炎症因子风暴由不受控制的增殖和扩张导致免疫系统参与者,如巨噬细胞和T细胞的原因之一是通过病人的死亡率更高。为了进一步提高通过的理解,有必要进一步探讨相关机制通过的发生。
自穿孔素1基因缺陷被发现与家族在1999年通过,已发现多个与穿孔素相关的基因突变与家族通过有关。通过是一个高度炎症性疾病。研究表明,有大量炎症因子通过病人,包括il - 1β2、il - 6、引发TNF -α和干扰素-γ,这些细胞因子的水平越高,通过患者的预后越差(24,25]。
蛋白质编码的NLRC4基因扮演着一个重要的角色在处理外国病原体,组织损伤,先天免疫反应(26,27]。发现NLRC4 inflammasome病原体入侵后被激活并引发大地震和il - 1的表达β,导致细胞死亡,它也被证明了的地震和il - 1β参与炎症引起NLRC4突变小鼠模型(10]。事实上,NLRC4相关基因突变的发生各种autoinflammatory疾病,包括autoinflammatory综合症引起的冷(28)、婴儿肠炎和巨噬细胞活化综合征(29日,30.]。一个NLRC4突变引起的疾病的特点是高水平的血清的地震;靶向抑制地震-可能是一种有前途的治疗方案治疗NLRC4突变造成的巨噬细胞活化综合征(31日]。
在这项研究中,我们发现,相比之下,TT基因型的rs385076轨迹NLRC4基因,通过患者的死亡率与TC基因型和CC基因型高。在rs479333 CC基因型NLRC4基因作为参考,通过CG基因型和GG基因型患者有更高的死亡风险。它提示我们,NLRC4基因rs385076 T > C和rs479333 C > G是通过患者的不良预后显著相关。rs385076和rs479333都位于内含子NLRC4基因。不影响突变基因的核苷酸序列。然而,这两个SNP网站可能在基因表达调控区域,因为相关的表达水平NLRC4 [13,32];然而,我们无法收集NLRC4的表达数据,未能证实这个假说。
根据研究,rs385076 T等位基因是降低地震-浓度和心血管类的保护性因素死亡风险(11,32]。rs479333 G > C变体NLRC4的表达水平降低,最终导致减少地震-表达水平(13]。我们的研究结果表明,血清的地震水平显著相关的预后结果通过病人和有一定诊断价值通过患者的不良预后结果。地震是一种促炎细胞因子,可以诱导极化Th1、Th2和促进各种先天免疫过程33- - - - - -35]。最近的研究表明,巨噬细胞异常引起的NLRC4 inflammasome突变相关autoinflammation和巨噬细胞活化综合征36]。地震的作用可能通过介导的诱导干扰素-γ和促炎细胞因子(37,38]。此外,研究表明,在巨噬细胞活化综合征患者的地震水平显著增加,实验发现巨噬细胞活化综合征和严重的地震-转基因小鼠(39]。这证明了自由的重要性对巨噬细胞活化综合征的地震。因此,我们推测之间的相关性NLRC4基因rs385076 T > C和rs479333 C > G和通过患者的不良预后可能由地震。
一些缺陷限制我们的研究的价值。首先,这是一个回顾性研究,样本的大小的限制;我们不能忽视小样本带来的局限性,需要进一步大样本的验证。其次,我们缺乏体外和体内实验进一步证实了我们的猜测,和进一步的研究是必要的。
5。结论
的NLRC4基因rs385076 T > C和C rs479333 > G与血清地震-表达水平升高相关联,通过患者的不良预后。具体的机制需要进一步验证体外和体内模型。这项研究的结果有一定的指导价值改善通过患者的不良预后。
数据可用性
本研究中的数据可以获得相应的作者以适当的理由。
的利益冲突
作者宣称没有利益冲突。