文摘gydF4y2Ba

客观的gydF4y2Ba。研究mir - 138对骨肉瘤的功能的影响卵泡(OS) T辅助细胞(Tfh细胞)及其机制。gydF4y2Ba方法gydF4y2Ba。外周血单核细胞(PBMCs)与骨肉瘤(操作系统组)患者和健康志愿者(对照组)。CD4 + CXCR5 + Tfh细胞和CD9 + B细胞被流式细胞术进行排序。存在被用来检测mir - 138的表达和基因外周血中CD4 + CXCR5 + Tfh细胞。采用流式细胞术检测CD4 + CXCR5 + Tfh细胞的比例在CD4 + T细胞CD4 + CXCR5 CD40L水平+ Tfh细胞,和CD27和CD38 B细胞的表达。免疫印迹被用来确定基因的蛋白表达,PI3K, p-Akt, Akt, p-mTOR, mTOR。此外,dual-luciferase记者试验进行验证mir - 138和基因之间的关系。ELISA方法被用来确定IgM的水平,免疫球蛋白,il - 10, IL-21。gydF4y2Ba结果gydF4y2Ba。与对照组相比,mir - 138的表达在PBMC细胞和CD4 + CXCR5 + Tfh OS组低;mir - 138的超表达可能促进Tfh细胞的成熟和不成熟的B细胞。dual-luciferase报告实验结果表明,mir - 138可以目标和负调节基因,基因可以扭转mir - 138对Tfh细胞和成熟B细胞的功能。gydF4y2Ba结论gydF4y2Ba。mir - 138抑制mTOR / PI3K / Akt通路通过瞄准和负调节基因减轻功能障碍T卵泡辅助细胞的操作系统。gydF4y2Ba

1。介绍gydF4y2Ba

骨肉瘤(OS)是最常见的原发性恶性骨肿瘤在青少年,也是最难治性肿瘤整形外科(gydF4y2Ba1gydF4y2Ba]。据统计我国(中国),操作系统的发病率排名第一的主要恶性骨肿瘤,占所有原发性骨肿瘤的15% (gydF4y2Ba2gydF4y2Ba),高度恶性肿瘤,预后不良。它可以转移到肺内几个月(gydF4y2Ba3gydF4y2Ba],截肢后的3 - 5年生存率仅为60%左右。虽然在病因有一些进步,发展,诊断和治疗操作系统近年来,具体的发病机制尚不清楚。与此同时,它缺乏有效的诊断和治疗的目标操作系统。gydF4y2Ba

小分子核糖核酸(microrna)小单链rna - nt不编码蛋白质。其表达变化相关的发生、发展、诊断和预后的肿瘤gydF4y2Ba4gydF4y2Ba]。值得注意的是,microrna有一个重要的特点,那就是,他们是非常稳定的血浆和血清和不会退化的核糖核酸酶(gydF4y2Ba5gydF4y2Ba]。找到microrna标志物与特定的表达模式将OS早期诊断和治疗具有重要意义。gydF4y2Ba

mir - 138据报道作为一个肿瘤抑制基因低表达在不同恶性肿瘤(gydF4y2Ba6gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba8gydF4y2Ba]。研究报道,mir - 138是低表达的操作系统,和overexpressing mir - 138可以抑制增殖和入侵OS细胞,促进细胞凋亡抑制叫DEC2表达式(gydF4y2Ba9gydF4y2Ba]。同时,microrna - 138 - 5 - p可以用作生物标记对贫困儿童的预后,青少年和年轻的成年人的操作系统(gydF4y2Ba10gydF4y2Ba]。近年来,研究表明,mir - 138肿瘤免疫调节作用。例如,mir - 138治疗神经胶质瘤GL261 immune-competent老鼠显示显著的回归,小鼠平均存活时间增加了43% (gydF4y2Ba ),gydF4y2Ba和FoxP3 +调节性T细胞的表达减少。然而,这种治疗效果已经迷失在裸小鼠免疫力较差和缺乏CD4 +和CD8 + T细胞,和mir - 138的直接治疗生理没有抑制胶质瘤细胞的生长(gydF4y2Ba11gydF4y2Ba]。在口腔鳞状细胞癌(OSCC),预先免疫mir - 138——富有gydF4y2BaγδgydF4y2Batd可以抑制免疫活性的影响小鼠OSCC的发展,但对裸小鼠没有影响,这表明mir - 138 -丰富gydF4y2BaγδgydF4y2Batd有免疫调节作用[gydF4y2Ba12gydF4y2Ba]。这些结果证实,mir - 138可能发挥其抗癌效果通过调节T细胞的功能。然而,mir - 138的作用在患者T细胞OS尚不清楚。gydF4y2Ba

T卵泡辅助细胞(Tfh)目前基本免疫学的一个研究热点。最初报道Schaerli et al。gydF4y2Ba13gydF4y2Ba]2000年,Tfh从原始Th细胞细胞分化的作用下其特定转录因子B细胞淋巴瘤factor-6 (Bcl-6) [gydF4y2Ba14gydF4y2Ba],继续高度表达表面分子CXCR5和释放的细胞因子il - 10、il - 6和IL-21。IL-21和B细胞会议后彼此的淋巴滤泡,结合他们IL-21受体,他们促进了B细胞的增殖和分化在大量、IgM分泌免疫球蛋白,IgA和其他抗体(gydF4y2Ba15gydF4y2Ba]。与此同时,它将产生记忆B细胞和浆细胞,进一步协助免疫球蛋白的转换。Tfh细胞的功能检测和验证他们的交互与B细胞体液免疫的重要突破。郭的研究等。gydF4y2Ba16gydF4y2Ba)发现,非小细胞肺癌(NSCLC)患者有一个循环Tfh细胞比例明显高于正常人。Hollern et al。gydF4y2Ba17gydF4y2Ba)进一步证实,免疫疗法可以通过诱导产生抗肿瘤功效检查站Tfh激活B细胞。这些发现表明,Tfh细胞在肿瘤免疫治疗是至关重要的。操作系统有明显的内在不稳定和高免疫原性和抗肿瘤免疫反应对操作系统来说是无效的。高et al。gydF4y2Ba18gydF4y2Ba)表明,这可能是由于Tfh IL-21分泌能力的受损细胞操作系统。他等。gydF4y2Ba19gydF4y2Ba)发现了大量Tfh细胞和CD8 + T细胞在OS患者良好的免疫反应的免疫渗透分析。这些研究表明,Tfh参与免疫调节系统。然而,并没有研究的效果和机制在Tfh mir - 138细胞操作系统。因此,在这项研究中,我们首先确定mir - 138的表达在操作系统和Tfh Tfh细胞,进一步探索其影响细胞的功能和机制通过干扰mir - 138表达,为了提供一个基础的临床免疫治疗操作系统。gydF4y2Ba

2。方法gydF4y2Ba

2.1。研究对象gydF4y2Ba

15例患者的操作系统(OS),术后组织病理学诊断分析和15例健康志愿者(对照组)进行了体格检查收集东营人民医院。其中,8人是男性,7人是女性,年龄在20到50岁。所有参与者提供知情同意,这项研究是东营人民医院伦理委员会的批准。gydF4y2Ba

2.2。血清收集和隔离和文化的外周血单核细胞(PBMCs)gydF4y2Ba

从OS 4毫升的空腹血患者和健康对照组是收集并放置在柠檬酸钠抗凝血管离心机,指令后,上层的人全血单核细胞分离解决方案(Solarbio,中国)和梯度离心获得PBMCs。抗凝剂颗粒被添加进PBS。血液细胞与PBS慢慢被添加到混合淋巴细胞分离液,表面和稀释血液分离的液体的比例是2:1。在1500 rpm之后,使离心20分钟,液体分为三层,从上到下是等离子体(淡黄色),白细胞层(乳白色)和血液细胞层(红色)。我们收集了白血细胞层巴斯德吸管,离心机在10000 rpm管5分钟,然后丢弃的上层清液,resuspended细胞,添加10%胎牛血清(的边后卫)和1% penicillin-streptomycin RPMI 1640中,最后培养在37°C和5%孵化器有限公司gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba。gydF4y2Ba

2.3。中存在gydF4y2Ba

试剂盒(美国表达载体,卡尔斯巴德,CA)是用于提取总RNA,而相对地转染到互补脱氧核糖核酸的逆转录工具包(豆类、东京、日本)。PCR反应的指令进行荧光定量PCR试剂盒(SYBR绿色混合,罗氏诊断,印第安纳波利斯)。热循环参数95°C的10年代,然后对5 s 95°C, 60°C 10 s, 72°C 10年代,共有40个周期,最后在72°C扩展了5分钟。为每个定量PCR有3复制。GAPDH和U6被选为内部引用。2实验数据进行了分析gydF4y2Ba^{- - - - - -gydF4y2BaΔΔgydF4y2BaCtgydF4y2Ba}方法。基因的引物序列和其内部引用表所示gydF4y2Ba1gydF4y2Ba。gydF4y2Ba

2.4。Tfh细胞分类gydF4y2Ba

我们用40 resuspended每107 PBMCgydF4y2BaμgydF4y2Bal magnetic-activated细胞排序(mac)缓冲区并添加10gydF4y2BaμgydF4y2Bal CD4 + T细胞Biotin-Antibody鸡尾酒。在4°C孵化后5分钟在黑暗中,我们添加了1毫升mac缓冲洗,离心机在1500 r / min 5分钟,并丢弃的上层清液。resuspending细胞后30gydF4y2BaμgydF4y2Bal mac缓冲区,20gydF4y2BaμgydF4y2Bal CD4 + T细胞Microbead鸡尾酒添加和孵化在4°C在黑暗中10分钟,然后,1毫升mac缓冲区添加洗涤,离心5分钟在1500 r / min,并丢弃的上层清液。之后,排序column-MS列,磁铁块,和磁站被放置,列于500年滋润gydF4y2BaμgydF4y2Bal mac缓冲区,和细胞resuspended在500年gydF4y2BaμgydF4y2Bal mac缓冲区。细胞悬液是通过列收集废水,然后列与500年洗3次gydF4y2BaμgydF4y2Bal mac缓冲进一步收集废水。最后,我们收集了所有4次获得的细胞悬液,离心5分钟在1500 r / min,和丢弃的上层清液,细胞CD4 + T细胞。gydF4y2Ba

FITC-CD4 / APC-CXCR5抗体被用于标签CD4 + CXCR5 + Tfh细胞。CD4 + T细胞获得上面添加了与FITC-CD4 APC-55-CXCR5抗体(美国BD生物科学),在4°C的环境在黑暗中30分钟。然后,1毫升流式细胞仪缓冲区添加洗涤和离心机在1500 r / min 5分钟,和上层的丢弃。然后,这些细胞被resuspended 200gydF4y2BaμgydF4y2Bal流式细胞仪缓冲区和转移到无菌流式细胞分析仪。我们后来FACSAria流式细胞分析仪(美国BD),调整到最佳工作条件和CD4和CXCR5积极选择排序。包含30% FCS收集解决方案是PBS, 10gydF4y2Ba^6gydF4y2Ba细胞被收集在约20分钟。收集液体的一部分保持测试的纯度Tfh细胞分类,一些细胞受到存在和免疫印迹检测mir - 138的表达和基因,剩下的细胞回到文化的孵化器。gydF4y2Ba

2.5。B细胞隔离和文化gydF4y2Ba

我们使用CD19抗体标签B细胞,resuspended每10gydF4y2Ba^7gydF4y2BaPBMC与90年gydF4y2BaμgydF4y2Bal mac缓冲混合,然后添加10gydF4y2BaμgydF4y2Bal anti-CD19微,利用管底部的混合,然后在4°C孵化15分钟在黑暗中。然后,1毫升缓冲区添加冲洗细胞,然后,离心机,享年300岁gydF4y2BaggydF4y2Ba10分钟;浮在表面的被丢弃。在最后,1毫升缓冲区添加resuspend细胞MidiMACS分选机是用来排序和收集CD19 + B细胞。gydF4y2Ba

2.6。细胞转染gydF4y2Ba

当CD4 + CXCR5 + Tfh细胞脱离操作系统组增加到50 - 60%融合在一盘6井,我们转染mir - 138模拟及其负控制(数控模拟),mir - 138缓蚀剂及其负控制(数控抑制剂)和pcDNA3.1-PDK1超表达向量和空pcDNA3.1(数控向量,2gydF4y2BaμgydF4y2Bag)(中国GenePharma)进入细胞的指令Lipofectamine 2000试剂(美国表达载体,卡尔斯巴德,CA)。gydF4y2Ba

2.7。Coculture CD4 + CXCR5 + Tfh细胞和B细胞gydF4y2Ba

CD4 + CXCR5 + Tfh转染细胞和提纯B细胞混合培养的比3:1,和细胞培养上清液收集在第七天来确定免疫球蛋白的内容,IgM, il - 10, IL-21。gydF4y2Ba

2.8。ELISAgydF4y2Ba

在收集每组的细胞培养上清液,IgM的浓度,免疫球蛋白、细胞培养上清液中il - 10, IL-21检测使用酶联免疫试剂盒(研发、美国)。所有操作被酶联免疫试剂盒进行严格遵守指令。gydF4y2Ba

2.9。Dual-Luciferase记者实验gydF4y2Ba

通过在线数据库TargetScan (gydF4y2Bahttp://www.targetscan.org/vert_72/gydF4y2Ba),我们预计mir - 138的结合位点和基因。根据预测结果,野外序列和突变序列(wt-PDK1 mut-PDK1)结合位点的设计和合成。野外序列和结合位点的突变序列插入荧光素酶报告基因载体(pGL3-Basic)然后cotransfected mir - 138模拟(GenePharma,中国)和数控模拟成293 t细胞(中国科学院上海细胞库)。转染后48小时,dual-luciferase探测系统被用来检测不同组之间的相对荧光素酶活性水平。gydF4y2Ba

2.10。免疫印迹gydF4y2Ba

里帕裂解的解决方案(Biyuntian,中国)被用来溶解细胞获得蛋白质样品。在确定蛋白质浓度使用BCA试剂盒(Biyuntian,中国),蛋白质是由10% sds - page分离,然后转移到PVDF膜。被屏蔽后5% BSA屏蔽解决方案1 h在室温条件下,添加膜是与主抗体GAPDH(5174年代,1:1000),基因(5662年代,1:1000),PI3K(4225年代,1:1000),一种蛋白激酶(9272年代,1:1000),P-Akt(4060年代,1:1000),mTOR(2983年代,1:1000),和p-mTOR(5536年代,1:1000)(细胞信号,美国),孵化一夜之间在4°C。第二天,二次抗体孵育辣根peroxidase-labeled山羊anti-rabbit免疫球蛋白(CWBIO 1: 5000年,中国)在室温下1 h。洗膜后,我们添加了一个化学发光开发者一滴一滴地,用化学发光成像系统(Bio-Rad)检测和分析蛋白质波段的灰度值ImageJ软件。gydF4y2Ba

2.11。统计分析gydF4y2Ba

获得的数据进行了分析和画使用SPSS 18.0(美国、IBM公司,纽约Armonk)和GraphPad棱镜7 (GraphPad软件有限公司、美国),分别。组间比较用gydF4y2Ba - - - - - -gydF4y2Ba测试或单向方差分析(Dunnett的方法),和皮尔逊相关分析采用了分析。实验数据被表示为gydF4y2Ba (SD)。所有的实验都重复3次,差异显著时gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba

3所示。结果gydF4y2Ba

3.1。mir - 138在PBMC表达下调,Tfh细胞OS的病人gydF4y2Ba

mir - 138的表达水平的PBMC OS患者明显低于正常人检测到存在(图gydF4y2Ba1(一)gydF4y2Ba)。流式细胞仪检测的结果的比例CD4 + CXCR5 + Tfh细胞隔离PMSCs表明,CD4 + CXCR5 + Tfh细胞的比例的CD4 + T细胞OS组明显增加(数据gydF4y2Ba1 (b)gydF4y2Ba和gydF4y2Ba1 (c)gydF4y2Ba)。mir - 138的表达CD4 + CXCR5 + Tfh细胞OS的患者也明显下调,这与PBMC的结果(图是相一致的gydF4y2Ba1 (d)gydF4y2Ba)。相关分析还表明,CD4 + CXCR5 + Tfh细胞的比例负相关,mir - 138(图的表达gydF4y2Ba1 (e)gydF4y2Ba)。这些结果表明,mir - 138可能参与调节免疫反应的操作系统。gydF4y2Ba

3.2。mir - 138增加Tfh CD40L水平细胞和促进B细胞成熟的操作系统gydF4y2Ba

成熟B细胞能产生不同的B细胞池和高亲和性B细胞抗原受体(bcr)病原体清除,而T细胞可以增加亲和力成熟的B细胞和诱导B细胞(gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba]。肿瘤坏死factor-related激活蛋白CD40L表达在活化的CD4 + T淋巴细胞,诱导B细胞的激活和增殖gydF4y2Ba21gydF4y2Ba],CD27和CD38成熟B细胞的迹象。我们第一次干预mir - 138的表达和使用中存在验证转染效率。结果表明,当Tfh OS患者的细胞转染mir - 138模拟,mir - 138细胞的表达明显更高,当细胞转染和mir - 138抑制剂,表达较低(图gydF4y2Ba2(一个)gydF4y2Ba)。随后,mir - 138 Tfh细胞中过表达时,CD40L的比例更高,mir - 138被撞倒,CD40L的比例明显降低(图gydF4y2Ba2 (b)gydF4y2Ba)。经过进一步cocultivating Tfh细胞和B细胞,CD27和CD38 B细胞的比例显示,与Tfh overexpressing mir - 138细胞共培养后,CD27和CD38 B细胞的比例明显更高,击倒mir - 138后,他们的比例降低(图gydF4y2Ba2 (c)gydF4y2Ba)。同时,IgM的水平,免疫球蛋白,il - 10,和IL-21上层清液共培养后测试,结果还显示,他们的水平明显走高,此前overexpressing mir - 138(数据gydF4y2Ba2 (d)gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba2 (g)gydF4y2Ba),这表明mir - 138可以促进Tfh细胞分泌相关细胞因子促进B细胞的成熟。gydF4y2Ba

3.3。PI3K / Akt / mTOR通路抑制Tfh细胞OS患者gydF4y2Ba

mTOR / PI3K / Akt通路在肿瘤发生和发展是一种常见的原因,及其参与操作系统已经在文献中报道。与此同时,据报道,mir - 138可以抑制PI3K / Akt /以挪士途径[gydF4y2Ba22gydF4y2Ba]。因此,我们推测mir - 138是否也影响PI3K / Akt通路的操作系统。免疫印迹结果表明,mir - 138超表达后,PI3K的表达水平,p-Akt,和p-mTOR Tfh细胞OS明显减少,患者并没有明显的差异和Akt mTOR的表达水平。然而,p-Akt / Akt的比率和p-mTOR / mTOR大幅下降,但结果转向后对抑制mir - 138表达式(数字gydF4y2Ba3(一个)gydF4y2Ba和gydF4y2Ba3 (b)gydF4y2Ba)。这些结果表明,mir - 138可以抑制mTOR / PI3K / Akt通路的激活Tfh细胞。gydF4y2Ba

3.4。基因由mir - 138负调控gydF4y2Ba

我们进一步研究了mir - 138的分子机制调节Tfh细胞的功能。通过TargetScan (gydF4y2Bahttp://www.targetscan.org/vert_72/gydF4y2Ba),我们预计,mir - 138之间有一个结合位点的基因,与荧光素酶报告实验证实了这一怀疑(图gydF4y2Ba4(一)gydF4y2Ba)。随后,信使rna和蛋白质的基因mRNA的表达是调节系统患者和正常PBMC(数字gydF4y2Ba4 (b)gydF4y2Ba和gydF4y2Ba4 (c)gydF4y2Ba)。存在进行检测的功能overexpressing mir - 138在Tfh OS病人的细胞的基因,结果还显示,mir - 138的超表达可以抑制基因的表达(图gydF4y2Ba4 (d)gydF4y2Ba),及其相关分析还表示,有一个和mir - 138之间负相关的基因(图gydF4y2Ba4 (e)gydF4y2Ba),这表明mir - 138可以在操作系统目标和负调节基因。gydF4y2Ba

3.5。mir - 138对Tfh细胞功能的影响可以通过基因被逆转gydF4y2Ba

上述结果证实,mir - 138提升Tfh细胞功能和B细胞的成熟,和mir - 138目标和负调节基因。我们进一步验证是否mir - 138规范Tfh细胞和B细胞通过改变基因。mir - 138中,CD40L的比例在CD4 + CXCR5 + Tfh细胞增加,和p-Akt / Akt的比率和p-mTOR / mTOR急剧减少。coculturing后,积极CD27和CD38 B细胞变得更高,而IgM分泌的免疫球蛋白,il - 10, IL-21变得更多。然而,基因的超表达同时逆转mir - 138超表达(数据的影响gydF4y2Ba5gydF4y2Ba(一)-gydF4y2Ba5gydF4y2Ba(d)),这表明mir - 138可以影响CD4 + CXCR5 + Tfh细胞通过调节基因,从而进一步影响B细胞的成熟。gydF4y2Ba

4所示。讨论gydF4y2Ba

操作系统通常发生在青少年和儿童,主要是在他们干骨后端长骨头的四肢,以及其他部分如髂骨和脊柱(gydF4y2Ba23gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba25gydF4y2Ba]。这是一个常见的原发性恶性肿瘤发病率高、快速发展,高度恶性肿瘤,和容易转移,其长期存活率很低(gydF4y2Ba26gydF4y2Ba]。尽管手术和新辅助化疗已经取得了很大的进步,大多数病人仍有不良预后。近年来,一些学者也试图基因疗法适用于操作系统,如adenovirus-based基因转染和siRNA-based基因沉默(gydF4y2Ba27gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba29日gydF4y2Ba),在一些基础研究目前取得了一些进展。gydF4y2Ba

microrna的发现带来了世界各地的学者致力于研究其在肿瘤中的作用。目前,已经发现一些microrna能促进或抑制癌症肿瘤(gydF4y2Ba30.gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba32gydF4y2Ba]。mir - 138低表达在多种恶性肿瘤,主要抑制癌症。在非小细胞肺癌,mir - 138的超表达可以抑制细胞生存能力和入侵能力通过直接瞄准和负调节FOXC1 [gydF4y2Ba33gydF4y2Ba]。我们之前的发现表明,mir - 138明显下调在人类操作系统组织和细胞系和抑制肿瘤抑制(gydF4y2Ba9gydF4y2Ba]。在这项研究中,也发现mir - 138操作系统组织中表达下调,这与先前的发现是一致的。为肿瘤免疫治疗已逐渐成为一个研究热点及其改善疗效,在免疫疗法和免疫微环境调查是重要的。尽管众所周知,mir - 138抑制肿瘤在操作系统(gydF4y2Ba34gydF4y2Ba免疫微环境,其功能的操作系统还不清楚。gydF4y2Ba

T细胞是最重要的细胞群在人体的免疫系统。Tfh细胞、CD4 + T细胞的子群与不同的功能,是一种特殊类型的辅助T细胞可能起着重要的作用在肿瘤微环境gydF4y2Ba35gydF4y2Ba]。区别在生发中心的二级淋巴器官,是一个重要的监管机构抗原B细胞的反应,从而促进B细胞的成熟和起到免疫作用gydF4y2Ba36gydF4y2Ba]。研究表明,在慢性炎性乳腺癌的微环境,人类TFHX13的分化细胞(肿瘤浸润Tfh细胞产生CXCL13)可能是一个关键因素将Treg-mediated免疫抑制转换为自适应抗肿瘤体液反应新创激活(gydF4y2Ba37gydF4y2Ba]。在这项研究中,我们还发现Tfh细胞明显高于OS的病人,和mir - 138的表达在Tfh细胞表达下调。超表达mir - 138可以促进Tfh CD40L的表达细胞,从而促进B细胞的成熟。所有这些研究表明Tfh细胞活化的免疫微环境中肿瘤细胞至关重要。gydF4y2Ba

一项研究表明,PI3K-Akt-mTOR级联是重要的肿瘤细胞增殖,生存,血管生成,自噬和凋亡gydF4y2Ba38gydF4y2Ba,这也是一个常见的原因导致肿瘤发生和转移。根据这份报告,PI3K / Akt级联操作系统通常是应对促进发生,肿瘤细胞增殖,入侵(gydF4y2Ba39gydF4y2Ba]。李等人发现mir - 122 - 5 - p规范PI3K-Akt-mTOR通路的激活目标TP53基因,抑制OS细胞增殖和促进细胞凋亡(gydF4y2Ba40gydF4y2Ba]。在这项研究中,我们发现mir - 138超表达可以明显抑制mTOR / PI3K / Akt通路的激活Tfh细胞,而干扰mir - 138表达了相反的结果。gydF4y2Ba

Phosphoinositide-dependent蛋白激酶1(基因)是一个重要的监管机构从AGC蛋白激酶家族,也是一个重要的PI3K / AKT通路中的蛋白(gydF4y2Ba41gydF4y2Ba]。基因在癌症中发挥着关键作用;在乳腺癌中,表达下调的基因水平可以抑制乳腺癌细胞的迁移和转移(gydF4y2Ba42gydF4y2Ba]。它也证明了在非小细胞肺癌,近红外光谱- 145 - 3 - p可以通过抑制mTOR途径入侵目标基因和非小细胞肺癌细胞的迁移gydF4y2Ba43gydF4y2Ba]。mir - 1271可以通过针对负调节mTOR / AKT通路的基因促进胰腺癌细胞的细胞凋亡(gydF4y2Ba44gydF4y2Ba]。然而,很少有研究mir - 138和OS Tfh细胞的基因。在这项研究中,我们发现mir - 138可以直接目标和负调控基因抑制mTOR / PI3K / Akt通路调节免疫微环境。同时,回复实验证实基因能扭转的影响在OS Tfh mir - 138细胞,这表明mir - 138 /基因/ PI3K / Akt / mTOR轴有望成为临床治疗的一个潜在的目标操作系统。gydF4y2Ba

5。结论gydF4y2Ba

总之,mir - 138抑制mTOR / PI3K / Akt通路通过定位基因改善OS Tfh细胞的能力,从而促进B细胞的成熟,发挥免疫功能。这提供了研究指导和操作系统的临床治疗的理论基础。gydF4y2Ba

数据可用性gydF4y2Ba

使用的数据来支持本研究的发现可以从相应的作者。gydF4y2Ba

的利益冲突gydF4y2Ba

作者宣称没有利益冲突有关这篇文章的出版。gydF4y2Ba

作者的贡献gydF4y2Ba

BJ XK的构思和设计项目;广州杰,ZW获得数据;广州杰,ZW分析和解释数据;BJ和XK写道。Baoen江和Xiuqin康同样起到了推波助澜的作用。gydF4y2Ba

确认gydF4y2Ba

这项研究得到了2019年山东省自然科学基金项目批准号ZR2019MH084。gydF4y2Ba