文摘

精神分裂症(SCZ)是一种常见的和复杂的精神疾病与遗传和环境危险因素有关。小分子核糖核酸(microrna或大鹏)很小,非编码RNA分子,从内部调节基因的表达。单核苷酸多态性(snp)在相关的microrna基因与疾病的易感性有关。我们想知道如果单核苷酸多态性影响的有效性为SCZ改良电休克治疗(MECT)。rs1625579 mir - 137内,rs6577555 miR-34内和rs2296616 mir - 107测序在150例病例和150例对照检查潜在的单核苷酸多态性和SCZ之间的联系。我们的研究结果表明,等位基因G rs1625579 ( , , ),等位基因在rs6577555 ( , , ),等位基因G rs2296616 ( , , )与疾病的风险呈正相关。MECT课程并显著减少microrna的水平,除了变体的rs2296616 AA基因型。精神分裂症表型评估的积极和消极症状量表(PANSS)提高了MECT之后,之间没有显著相关性观察MECT的有效性,这些位点的变异。因此,我们的研究结果表明,内多态性位点可能参与SCZ的发病机理和MECT是有效的,无偏窝藏患者不同位点的基因型。

1。介绍

精神分裂症(SCZ)是一种常见的精神障碍表现为精神病,幻觉,错觉,减少的表达情感,奇怪的演讲,和认知能力下降的现实,约有0.7%的人一生中受到SCZ [1]。2013年,世界上大约有2360万SCZ病例(2]。尽管进步SCZ调查的确切原因精神疾病仍然是难以捉摸的。利希滕斯坦等人声称遗传因素可能发挥重要作用的发生SCZ [3]。最近,一些研究表明,异常表达的小分子核糖核酸(microrna或大鹏)观察到的血清(4和死后的脑组织5,6]SCZ患者与正常对照组相比,提供线索,microrna可能SCZ发病的一个重要元素。

microrna是短暂的和非编码rna 19-25核苷酸可与3 - - - - - -翻译区(UTR)负调节的有针对性的mrna表达在转录后的级别(7,8),被认为是调节大约60%的编码基因(9),在不同的生物过程中扮演着重要的角色10]。在研究SCZ miR-34表达式被发现与疾病相关的外周血单核细胞在一个荟萃分析包括330名患者和202名健康对照11];mir - 107也显著调节在SCZ患者的背外侧前额叶皮层6]。单核苷酸多态性(snp)在microrna可以导致异常表达或二级结构变化的产品12,13]。全基因组关联研究(gwas)表明,几个snp microrna与SCZ易感性(14]。例如,mir - 137 rs1625579被确认为一个风险位点SCZ GWAS分析执行的精神基因研究团(包括)15]。mir - 137的SNP位点1 . 3号染色体上发现的最强预测SCZ风险分析(16]。因此,它是有价值的进一步研究中snp的角色SCZ microrna。在此,我们将集中如果有关联的有效性改良电休克治疗(MECT)和相关的microrna的snp。

MECT是一种有效的治疗情绪障碍和精神病学领域的使用了七年(17]。如今,MECT用作增强抗精神病治疗和解决耐药症状SCZ [18]。病房等。据报告,大多数患者SCZ接受MECT改善(19),但有一个显著的差异在患者治疗效果。因此,我们假设相关的microrna的snp可能导致的差异在SCZ MECT治疗的有效性。

为了研究MECT microrna的多态性的影响,三个SCZ-related microrna上面提到的选择,并在miR-34 rs6577555, mir - 107内rs2296616, rs1625579 mir - 137基因分型在病例对照研究中包括150名临床诊断SCZ和150个健康人。此外,协会的单核苷酸多态性与MECT的有效性评估本研究根据PANSS评分。

2。材料和方法

2.1。参与者

在病例对照研究中,150例临床确认SCZ病人(82男性和68女性年龄 )根据精神障碍的诊断与统计手册第四版(dsm - iv)招募了甄姜精神卫生中心,江镇,中国150岁健康对照组(80男性和70女性 )从社区招募。控制是清理没有个人或家族性神经精神障碍的个体历史或任何药物成瘾。所有的参与者都是中国汉民族后裔。本研究经伦理委员会批准的甄姜精神卫生中心,和书面知情同意是获得所有的科目。

2.2。SNP基因分型

从外周血基因组DNA分离使用血液基因组DNA提取工具包(TIANGEN,北京)。3个snp基因分型结果被检测到TaqMan歧视化验,ABI棱镜7900序列检测系统(美国应用生物系统公司,培育城市,CA)是用于测定。表列出了引物1。质量控制,5%是重复的基因分析,结果是一致的99%以上。实验根据制造商的协议。

表1
snp的microrna并在测序引物。
2.3。qPCR化验

从样本中提取总RNA使用试剂盒试剂(美国表达载体,卡尔斯巴德,CA)。RNA被TaqMan然后反向转录微RNA逆转录工具包(美国应用生物系统公司,培育城市,CA)。定量结果的表达U6规范化。基因的相对表达计算使用2——∆∆Ct方法。中使用的引物如下:mir - 137 5 - - - - - -GCGCGC TTATTGCTTAAGAATAC-3 (向前)和5 - - - - - -GTGCAGGGTCCGAGGT-3 (反向);miR-34 5 - - - - - -TCTATTTGCCATCGT-CTA-3 (向前)和5 - - - - - -CAGGCAGCTCATTTGGAC-3 (反向);mir - 107 5 - - - - - -AGCAGCATTGTACAGGG-3 (向前)和5 - - - - - -GTGCAGGGTCCGAGGT-3 (反向);U6, 5 - - - - - -GCTTCGGCAGCACATATACTAAAAT-3 (向前)和5 - - - - - -CGCTTCACGA-ATTTGCGTGTCAT-3 (反向)。

2.4。改良电休克疗法

所有SCZ患者接受药物冲洗至少14天之前被投入到这项研究中。患者接受修改bifrontotemporal等使用Thymatron帕(美国体细胞LLC湖虚张声势,IL), brief-pulse,恒流装置在甄姜精神卫生中心,江镇,中国(20.]。前三个MECT课程管理在持续几天,剩下的课程进行了MECT每隔一天,它会在周末休息一下。MECT持续到12课程。麻醉诱导了琥珀酰胆碱(0.5 1毫克/公斤),得(1.5 - 2毫克/公斤)。

2.5。数值

症状严重程度评估的积极和消极症状量表(PANSS),由33项,评分从1到7的分数。所有的物品排列成一个积极的内部氧化物,消极的内部氧化物,一般精神病理学次生氧化皮,和额外的内部氧化物,以反映SCZ[的严重性21]。数值评估进行了两次后的第一个和最后一个治疗。

2.6。统计分析

三个位点的基因型频率情况下和控制是通过计算获得。哈迪温伯格平衡(HWE)验证的两组。双尾估计意义被选为评估量化结果的差异,和皮尔逊卡方检验是用于检查的等位基因和基因型的分布在两组之间。比值比(或)和95%置信区间(95% CI)被用来估计单核苷酸多态性和SCZ易感性之间的关系。所有统计数据使用SPSS软件进行18.0(美国SPSS Inc .,芝加哥,IL),和 被认为是具有统计学意义。

3所示。结果

SCZ的人口学特征和临床变量和控制组织如表所示2。无显著差异在年龄、性别、和状态之间的吸烟和饮酒两组。

表2
本研究例和对照组的临床特点。

我们第一次测序microrna的3个snp (miR-34a rs6577555, mir - 107 rs2296616,和mir - 137 rs1625579)与小等位基因频率 (表1)。之间的基因型和等位基因分布情况和对照组被记录在表中3。的 HWE snp都大于0.05的值( rs1625579值= 0.053; rs6577555值= 0.104; rs2296616值= 0.08),这表明基因座的基因型是符合HWE。TT基因型、TG和GG和T和G等位基因频率的rs1625579 mir - 137在两组分别为74.67%,84.67%,17.33%,13.33%,8.0%,2.0%,83.33%,91.33%,16.67%,和8.67%,分别。与轨迹的TT基因型相比,基因型GG的频率( , , )在病例显著增加,但不同的杂合的TG基因型两组之间的不显著。积极的协会被发现的风险位点的等位基因G和SCZ ( , , )。该协会在主导( , , )和隐性( , , )模型。基因型CC, AA和C等位基因频率的rs6577555 miR-34病例和对照组分别为54.00%,60.67%,26.00%,31.33%,20%,8%,67.00%,76.33%,33.00%,和23.67%,分别。与基因型CC相比,纯合子的AA基因型的频率( , , )显著增加了案件的轨迹。等位基因A rs6577555被表示为一个重要因素与SCZ的风险呈正相关( , , ),在隐性模型(验证 , , )。基因型AA、AG)和GG和A和G等位基因频率的rs2296616 mir - 107例和对照组分别为70.00%,88.00%,18.67%,10.67%,11.33%,1.33%,79.33%,93.33%,20.67%,和6.67%,分别。与基因型AA的轨迹相比,基因型频率AG) ( , , )和GG ( , , )显著增加的情况下,和一个积极的协会确认的风险位点的等位基因G和SCZ ( , , )。占主导地位的相关性被发现( , , )和隐性( , , )模型。这些结果表明,三个多态性位点的所有相关SCZ发生的风险。

表3
基因型和等位基因分布rs1625579, rs6577555, rs2296616病例和控制。

评估了MECT PANSS的有效性。如表所示4,总阳性症状、阴性症状,和一般症状评分在组MECT后下降,表明改进的SCZ MECT病人。

表4
PANSS评分MECT前后的组。

在表5,PANSS评分的载体与野生基因型纯合子(rs1625579 TT基因型,在rs6577555 CC基因型,并在rs2296616 AA基因型)通常是低于突变纯合或杂合的基因型。此外,成绩都明显下降后MECT不管基因型。之间没有协会观察PANSS评分的降低和单核苷酸多态性。因此,多态性位点在这些SCZ-related microrna MECT的效果没有显著影响。

表5
苏格兰民族党和PANSS评分之间的联系对于集团MECT前后。

miR-34, mir - 137水平和mir - 107显著增加SCZ患者的血清与控制(表6)。mir - 137 rs1625579的变异和miR-34 rs6577555 MECT后减少,包括所有基因型(表7- - - - - -8)。AG / GG基因型mir - 107 rs2296616下降,但AA基因型的轨迹MECT后(表没有明显改变9)。

表6
水平的microrna例和对照组。
表7
mir - 137水平rs1625579 MECT前后。
表8
的水平miR-34 rs6577555 MECT前后。
表9
mir - 107水平rs2296616 MECT前后。

4所示。讨论

越来越多的证据表明,SCZ是一种复杂的疾病,遗传、环境、心理和社会因素有关(22]。精神疾病是导致分子从故障相关的蛋白质编码和非编码基因在发病中发挥作用和发展的障碍。所有mir - 137、miR-34和mir - 107参与调制神经元发育和成熟23- - - - - -25)以及NMDAR信号通路和神经传递25- - - - - -27]。这些microrna基因变异可能较低亲和力有针对性的信使rna,然后导致编码基因的异常表达,最终引发神经障碍包括SCZ。

在当前的研究中,我们进行了病例对照研究探讨相关microrna的单核苷酸多态性与疾病风险,并进一步检查单核苷酸多态性的影响为SCZ MECT的结果。我们的研究结果表明,等位基因G在轨迹rs1625579 SCZ的风险呈正相关,与基因型和承运人TG / GG的轨迹与基因型相比有更高PANSS评分TT组,表明等位基因T rs1625579这种疾病可能是一个保护因素。这些发现与先前的报道是一致的在SCZ这个SNP。除了与SCZ, mir - 137还发现调节神经干细胞增殖和分化在胎儿和成年小鼠(28]。此外,mir - 137超表达抑制树突状形态发生,表型成熟,大脑和脊柱发展和主要培养神经元(29日]。我们的数据展示,MECT显著降低的水平mir - 137组,也许一个机制的治疗恢复神经元在SCZ畸形和功能障碍。因此,mir - 137可能参与的发生SCZ通过影响神经连接,导致异常神经传输。

数据miR-34 rs6577555显示等位基因位点的授予SCZ发病的风险根据比较对照组和病例组。病人的PANSS评分窝藏CA / AA基因型比那些野生CC基因型。过度的miR-34体外显著增加前体扩散和发展中神经元的形态和功能的影响30.]。成熟的神经元,miR-34过度降低几个突触蛋白和受体单元的水平但突触刺激会导致一个更有效的反应。然而,miR-34的影响过度只是stage-specific体内(25]。miR-34被发现显著调节SCZ患者的血液样本。不断超表达miR-34 SCZ可能产生不利影响神经功能。

多态性的rs2296616 mir - 107与易感性显著协会SCZ在当前的研究中。mir - 107是调节背外侧前额叶皮层的精神分裂症患者,会使3 NMDAR亚基的表达;因此,它有助于NMDAR信号通路的功能障碍,导致增加SCZ风险(31日]。这个分子也在高纯度通路与神经连接和突触可塑性,如Wnt和MAPK信号(32,33]。mir - 107在SCZ的确切作用还有待进一步研究阐明。

除了这些位点的基因型频率,我们检查是否存在变量之间的相关性和MECT的有效性。数值的患者的生活质量得分显著降低不管位点的基因型,所以我们并没有发现任何等位基因明显导致MECT阻力。大部分的microrna的变体的水平减少MECT之后,除了在mir - 107 rs2296616 AA基因型。这些结果证明了MECT是一个可靠的和增强治疗除了SCZ抗精神病药物的病人。

总之,我们的病例对照研究的结果提供令人信服的证据,rs6577555的多态性,rs2296616, rs1625579与SCZ相关联的风险。此外,结果MECT没有相关性的变异位点。进一步调查这些多态性的功能后果可能有助于阐明更多的分子机制的基因变异影响精神分裂症表型。

数据可用性

使用的数据来支持本研究可从相应的作者。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。