高脂饲料中低剂量链脲佐菌素诱导大鼠实验性2型糖尿病的合成、光谱表征和生化评价

摘要

鉴于锌的抗糖尿病特性，本研究旨在评价一种新的锌-diosmin复合物在高脂饲料喂养低剂量链脲佐菌素诱导的实验性2型糖尿病大鼠中的降糖特性。合成了锌-狄斯明配合物，并通过各种光谱研究进行了表征。ph电位滴定法和约伯图进一步证实了锌离子与狄斯敏的络合作用。糖尿病大鼠口服浓度为20 mg/kg b.w的锌-diosmin复合物。/鼠/天，30天。实验结束时，对大鼠进行口服葡萄糖耐量试验。此外，还分析了HOMA-IR和与葡萄糖稳态相关的各种生化参数。锌-diosmin复合物治疗可显著改善糖尿病大鼠的血糖稳态。通过提高蛋白质代谢和改变肌肉和肝糖原水平，锌-diosmin复合物治疗显著改善胰岛素敏感性，至少在一定程度上。临床标记酶检测表明该复合物无毒。肾脏组织标志物如血尿素和血清肌酐的测定表明该复合物具有肾保护性质。 These findings suggest that zinc-diosmin complex is nontoxic and has complimentary potential to develop as an antihyperglycemic agent for the treatment of diabetes mellitus.

1.介绍

2型糖尿病(T2DM)是一种异质性疾病，其特征是胰岛素敏感性逐渐下降，随后胰腺发生病变β-Cell功能障碍[1］．胰岛素抵抗和β-细胞功能障碍仍然难以捉摸[2］．由于久坐不动的生活方式、肥胖和缺乏锻炼，2型糖尿病的患病率正在惊人地增加。2013年，全球约有3.82亿人患有糖尿病，预计到2035年，这一数字可能会翻一番[3.］．这是一个最低数字，因为对于每一个确诊病例，第一世界国家将有一个未确诊病例，而第三世界国家将有八个病例[4］．关于2型糖尿病的发病机制已经提出了几种假设;然而，持续的微血管和过早的大血管并发症是糖尿病患者发病和死亡的主要原因，这不断提醒我们，我们的治疗和管理策略对大多数患者是不充分的[5］．

目前使用的大多数口服降糖药物，如磺脲类药物，α用于治疗2型糖尿病的-糖苷酶抑制剂、双胍类化合物和噻唑烷二酮类化合物在长期使用后通常与不良副作用或反应减少相关[6］．因此，寻找没有长期副作用和低浓度抗糖尿病活性的新型治疗药物是必要的。许多金属元素在生命系统中起着关键作用。一些金属离子在啮齿类动物模型中也能模仿或增敏胰岛素的作用在体外［7- - - - - -9］．有意地将金属离子引入生物系统是为了治疗或诊断的目的。金属配合物作为治疗药物的使用在过去几十年变得非常重要，产生了各种令人兴奋和有价值的金属药物[10，具有广泛的结构-药理活性关系，以及金属与细胞靶标结合的生化方面为金属配位的科学研究提供了新的可能性。在发现胰岛素并将其用于临床治疗糖尿病之前，曾有报道称口服钒酸钠治疗人类糖尿病[11］．

除钒外，锌还具有显著的胰岛素模拟和胰岛素增敏作用[12，13.］．1980年，Coulston和Dandona报告了锌²⁺离子刺激在体外大鼠脂肪细胞脂肪生成，其作用类似于胰岛素[14.］．锌是一种重要的微量元素，分布在全身(2至4克)，广泛的蛋白质和转录因子都含有这种金属离子。锌是300多种酶的稳定和功能所必需的[15.，16.］．众所周知，锌在胰岛素的合成、储存和分泌中起着重要的作用[17.］．慢性高血糖症会增加尿中锌的流失，降低体内锌的含量[18.］．锌含量的降低对人体的能力产生了不利的影响β-合成和储存胰岛素的细胞[19.，20.］．

锌离子有望发展成为一种临床有用的金属药物，就像含铂的顺铂和含金的auranofin分别作为抗癌和抗关节炎药物[21.，22.］．然而，设计新的锌配合物需要特别注意在生理条件下的稳定性和结构性能。迄今为止研究的大多数锌配合物的抗糖尿病潜力在其无机形式中吸收不足，需要高剂量，并与不良副作用相关。为了规避锌的毒性和增加胃肠道对锌的吸收，已经用生态衍生的非营养性植物次级代谢物作为有机配体配制了几种配合物，并对其抗糖尿病特性进行了研究[23.- - - - - -27.］．

类黄酮是多种多样的多酚类植物化学物质，是多种植物产生的次级代谢物，以保护它们免受环境胁迫和伤害[28.］．众所周知，大量的黄酮类化合物对人类健康的广泛的药理作用，特别是在猝灭氧化应激和预防继发性并发症中29.］．在黄酮类化合物中，黄酮与金属离子的螯合具有很大的亲和力α-羟基羰基及其抑制自由基的能力[30.］．

Diosmin (diosmetin-7-O-rutinoside)是一种天然的生物黄酮，大量存在于柑橘类植物的果皮中，如梅耶柠檬和佛手果[31.］．它最初是从Scrophularia nodosa1925年(32.]，后来橙皮苷脱氢就很容易得到[33.］．Diosmin是无毒的[34.]，并有报道显示多种药理特性，包括抗氧化剂[35,抗增殖36.,抗炎37.，以及抗糖尿病作用[38.］．鉴于这些有益的和药理的方面，在本研究中，我们设计并合成了一种新的锌配合物，以diosmin作为有机配体，并评估了其在高脂饮食喂养低剂量STZ诱导的实验性2型糖尿病大鼠中的抗糖尿病特性。

2.材料和方法

2．1．化学物质

硫酸锌[ZnSO₄h·7₂O),地奥司明(C_28.H_32.O_15.)和链脲佐菌素(STZ)均购自美国圣路易斯Sigma-Aldrich公司。大鼠胰岛素测定超敏感ELISA试剂盒购自Crystal Chem公司。生活技术,印度。所用的其他化学药品和试剂都是分析级的。

2．2．分析仪器

采用Perkin-Elmer FT-IR分光光度计(400-4000 cm)在固态KBr压片中对游离diosmin及其金属配合物进行了红外光谱研究¹)．使用Jeol Gc-mate质谱仪获得了该配合物的质谱。的¹H NMR和^13.用Bruker AM-500仪器分别在300 MHz和500 MHz下获得了双smin及其配合物的C NMR。记录光谱分析数据，没有对仪器特性进行任何修改。

2．3.Zinc-Diosmin复杂的合成

采用摩尔比法合成锌-狄斯明配合物，如之前报道的各种轻微修饰的锌配合物[39.- - - - - -42.］．简单地说，将含七水硫酸锌(0.287 g, 1 mM)的DMSO溶液(10 mL)逐渐加入到含dismin (1.217 g, 2 mM)的DMSO (15 mL)热溶液中。得到的溶液在加压旋转蒸发器中干燥，得到的络合物用乙醚洗涤，并在无水氯化钙上真空保存。

２.４.pH-Potentiometric滴定

用装有玻璃和甘汞电极的ELICO Li 120 pH计进行电位滴定，测定了新合成的锌-二硫明配合物的形成常数。甘汞电极最初是通过滴定已知量的标准盐酸和标准氢氧化钠来作为氢浓度探针进行校准的。至少在25°C±10°C进行两次独立滴定，用于探针校准。利用Origin 8.5 lab程序从pH值中计算出质子化常数和稳定常数[43.］．所有滴定，总进样量固定为20 mL，配体浓度为1-10 mM。对单独的游离diosmin进行了6次滴定，15次滴定确定了pH范围为2-10的锌配合物平衡[44.］．

2．5．实验动物

Wistar雄性白化大鼠重约160至180克，从印度钦奈的泰米尔纳德邦兽医和动物科学大学购买，并在标准饲养条件下饲养(h明暗循环，相对湿度55%±10%)。这些动物被喂以均衡的饮食(印度斯坦利华有限公司，班加罗尔，印度)和水自由．大鼠颗粒饲料由55%无氮提取物、21%蛋白质、5%脂肪和4%纤维(w/w)组成，并含有足够水平的维生素和矿物质。实验设计严格按照印度社会正义与赋权部和机构动物伦理委员会指南(批准号02.01.2012)批准的伦理规范进行，用于检测有意识动物的实验疼痛。

2．6．急性毒性和剂量固定研究

按照经合组织(OECD)对正常大鼠进行化学物质测试的指南进行了急性毒性研究。将溶解在5% DMSO中的锌-diosmin复合物按剂量(10、20、25和30 mg/kg b.w /大鼠)灌胃给大鼠。连续监测大鼠的食物消耗、液体摄入、精神运动活动、体重增加和皮肤、皮毛、眼睛、流涎、腹泻和嗜睡的变化30天。对重要器官也进行肉眼检查。分级剂量的口服zinc-diosmin复杂(10、20和30毫克/公斤b.w. /鼠/天)30天来确定剂量依赖性HFD-low剂量STZ诱导糖尿病大鼠的降糖效果监测空腹血糖水平定期修复的有效剂量zinc-diosmin复杂的治疗。

2.7。实验设计

将大鼠分为两组，分别饲喂普通颗粒饲料(NPD)和高脂饲料(HFD)，进行2周的饮食控制。HFD含NPD粉、365 g/kg、猪油、310 g/kg、酪蛋白、250 g/kg、胆固醇、10 g/kg、维生素和矿物质混合物、60 g/kg、dl -蛋氨酸、3 g/kg、酵母粉、1 g/kg、氯化钠、1 g/kg。补充HFD 2周后，II、III、IV组大鼠单次注射STZ (35 mg/kg b.w /大鼠);对照组大鼠(I组)仅腹腔注射等量新鲜制备的冷柠檬酸缓冲液(pH 4.5, 0.1 mol/L) [45.］．STZ注射1周后，空腹血糖≥300 mg/dL的大鼠视为糖尿病大鼠，选择进行进一步研究。实验动物被分为四组，每组6只，如下图所示:Ⅰ族：正常对照大鼠。II组:HFD-STZ (i.p.35 mg/kg b.w.)诱导糖尿病大鼠。III组:HFD-STZ诱导的糖尿病大鼠给予锌-diosmin复合物(20 mg/kg b.w /大鼠/d)治疗30天。IV组:高脂- stz诱导的糖尿病大鼠给予二甲双胍(200 mg/kg b.w /大鼠/d)治疗30天。

2.8。口服葡萄糖耐量试验(OGTT)

处死前一天，各组大鼠均进行口服葡萄糖耐量试验(OGTT)。在一夜无食物的大鼠侧尾静脉采集血液样本。分别于口服2mg /kg b.w后0,30,60,90,120分钟取连续血样。葡萄糖溶液[46.］．

2.9。胰岛素抵抗的稳态模型评估

由于单靠测定胰岛素或葡萄糖水平无法准确检测胰岛素异常，故采用胰岛素抵抗稳态模型评估(HOMA-IR)评估胰岛素抵抗，方法如下[47.]：

2.10。生物化学参数

实验结束时，禁食一夜的大鼠经氯胺酮(80 mg/kg b.w)麻醉。/大鼠，i.p.)，断颈处死。分别采加抗凝剂和不加抗凝剂的血样，分离血浆和血清。用于糖原的估计[48.]，取肝、肌肉组织，用冰水洗净，−70℃保存使用。基本生化指标，如空腹血糖[49.，糖化血红蛋白[50.，血浆蛋白[51.，血尿素[52.]和血清肌酐[53.的水平。尿条用来检测尿液中是否有葡萄糖。采用大鼠胰岛素测定试剂盒(Linco Research, St. Charles, MO, USA)，采用ELISA法测定血浆胰岛素和c肽水平。临床标记酶如天冬氨酸转氨酶(AST)的活性[54.]、谷丙转氨酶(ALT) [54.]、碱性磷酸酶(ALP) [55.]在血清中被测定。糖原合酶的活性[56.和糖原磷酸化酶[57]在肝脏组织中也被测定。

2.11。统计分析

结果以每组6只大鼠的均数±SD表示，采用SPSS (version 16)软件进行“单因素方差分析”(ANOVA)，然后进行最小显著性检验。的值，,被认为具有统计学意义。

3.结果

锌- dissmin配合物(C_56.H₆₂O_30.采用摩尔比法合成了锌(Zn)，真空蒸发后得到淡橙色粉末，收率约为76%。复合成的原理图表示见方案1．

游离diosmin的红外光谱数据如图S1所示[IR (KBr，ν cm⁻¹) 3435 [-OH]， 1676 (C=O)350829年http://dx.doi.org/10.1155/2015/)．锌- dissmin配合物的红外光谱如图所示1(红外(KBr,ν cm⁻¹(c-o-m)， 502 (m-o)]数字2为复合物的EI质谱(m / z): 1280。元素分析计算C_56.H₆₂O_30.锌(1280)C, 52.53;4.88 H,。发现C, 52.47;4.80 H,。的¹H NMR和^13.锌 - 二孢子复合物的C NMR分析在图中描绘了3.和4,分别。的¹对游离二甲双酚a(图S2)的核磁共振氢谱分析显示其与耦合常数的共振如下(DMSO-d)₆300赫兹)δH：6.97（D，1H，Hz)， 6.68 (d, 1H，Hz)， 6.44 (s, 1H)， 6.24 (d, 1H)Hz)， 5.84 (s, 2H)， 5.68 (d, 1H，Hz, 5.11 (d, 1H，Hz)， 4.83 (s, 2H)， 4.22 (d, 1H，3.97 (d, 1H，3.84 (t, 1H，Hz)， 3.79 (s, 3H)， 3.72 (d, 1H，Hz)， 3.54 (q, 2H)， 3.31 (t, 2H，Hz)， 3.19 (m, 2H)， 1.98 (s, 6H)， 1.46 (s, 3H)。的^13.游离二甲双酚a的C-NMR分析(图S3)显示(DMSO-d)的碳共振₆, 500 Hz): 183.2, 164.8, 163.5, 162.6, 158.7, 151.1, 145.7, 124.5, 119.7, 114.1, 112.8, 104.7, 104.4, 102.0, 97.4, 96.3, 77.0, 76.2, 74.2, 73.3, 73.1, 73.0, 71.4, 70.3, 65.4, 56.9, 18岁。

进一步，进行ph电位滴定(图5)，以了解锌离子与dismin分子之间的络合物形成，通过报道其他锌络合物的方法[58- - - - - -60］．锌- dissmin配合物的稳定常数如下(2)， (3.)， (4)和(5)．合成的配合物的电位滴定是可靠的，与前面所述的合成金属配合物的平衡模式一致[61］．对结果的分析与随后的平衡是一致的:

通过改变锌离子和配体的浓度来分析锌离子与配体的络合比²⁺离子和配体(图6)．最大点出现在0.65的摩尔分数，接近2：1配体的典型配体摩尔分数为0.66，金属复合物符合我们最近的报告[27.］．

数字7结果表明，在对照组和实验组大鼠口服葡萄糖(2 g/kg b.w.)后，锌-diosmin复合物对一定时间内血糖水平的影响。糖尿病大鼠空腹血糖明显高于对照组。口服葡萄糖负荷后，hfd - stz糖尿病大鼠的血糖水平在60分钟时达到峰值，在接下来的60分钟内没有恢复到正常的基础水平。对照组大鼠在口服葡萄糖负荷60min后血糖达到最大值，120min后逐渐恢复到接近正常水平。与未处理的hfd - stz糖尿病大鼠相比，使用锌-二甲双胍复合物和二甲双胍治疗的糖尿病大鼠在0(禁食)、30和60分钟时血糖浓度显著降低。此外，锌-二甲双胍复合物和二甲双胍治疗的糖尿病大鼠在口服葡萄糖负荷后120分钟血糖水平恢复到基础值。对照大鼠、糖尿病大鼠和使用锌-diosmin复合物治疗的糖尿病大鼠的HOMA-IR值如图所示8．糖尿病大鼠HOMA-IR显著升高，口服复方和二甲双胍治疗后HOMA-IR显著降低。

表格1描述各组大鼠的空腹血糖、糖化血红蛋白和血浆胰岛素水平，以及对存在尿糖的推断。糖尿病大鼠空腹血糖和糖化血红蛋白水平显著升高，锌-diosmin复合治疗糖尿病大鼠空腹血糖和糖化血红蛋白水平显著降低。与对照组大鼠相比，糖尿病大鼠血浆胰岛素和c肽水平显著降低，而锌-二甲双胍联合治疗的糖尿病大鼠血浆胰岛素和c肽水平显著改善。糖尿病大鼠存在尿糖。然而，在使用锌-二甲双胍复合物治疗30天后，尿糖不再检测到。

对照组和实验组大鼠肝、肌糖原含量见表2．与对照组相比，糖尿病大鼠肝脏和肌肉组织中的糖原含量显著降低，锌-diosmin复合物治疗后，糖原含量恢复到接近正常水平。二甲双胍对糖尿病大鼠肝脏和肌肉组织的糖原含量也有显著改善。表格3.显示了对照组和实验组大鼠血浆蛋白、血尿素和血清肌酐的水平。糖尿病大鼠肾脏组织标记物如尿素和肌酐水平升高，血浆蛋白水平降低，在用锌-diosmin治疗的糖尿病大鼠中显著改变。二甲双胍治疗的糖尿病大鼠的血尿素、血清肌酐和血浆蛋白水平也有类似的改善。对照组和实验组大鼠血清中AST、ALT、ALP等病理生理酶活性见表4．与对照组相比，糖尿病对照组大鼠的这些酶活性升高，而锌-diosmin复合物治疗糖尿病大鼠的这些酶活性明显降低。在二甲双胍治疗的糖尿病大鼠中也记录了类似的观察结果。

对照组和实验组大鼠肝组织糖原合成酶和糖原磷酸化酶活性见表5．糖尿病大鼠糖原合酶活性明显下降，糖原磷酸化酶活性随之升高。给HFD-STZ型糖尿病大鼠口服锌-二甲双胍复合物和二甲双胍可使糖原合成酶和糖原磷酸化酶活性恢复。

4.讨论

通过比较游离diosmin的红外光谱和锌-diosmin配合物的光谱，研究了diosmin与锌离子的结合方式。的α黄酮类化合物的-羟基羰基是金属离子的首选结合位点。在1676年和3435年观测到的峰值(ν cm⁻¹)分别对应于游离配体中羰基和羟基的存在。这些频带经历了向较低频率的转移[1653和3354 (ν cm⁻¹)]，表明羟基和羰基与锌离子的配位。在502 cm处有一条新形成的带进一步证实了键合的性质⁻¹在复合物的频谱中，它暂时被指定为M-O振动。在游离diosmin和锌-diosmin复合物中，峰值都在1500 cm左右⁻¹是由于C=C拉伸的存在。这一观察结果与Ai等人早期的报告一致[62］．

通过分子离子峰[M⁺)m / z= 1280。各种片段C_50.H_52.O_25.锌、C_44.H_42.O_20.锌、C_39.H_40.O_14.锌、C_33.H_29.O₁₀锌、C_26.H_17.O₈锌、和C₉H₅O_3.锌在m / z= 1115, 953, 796, 650, 523, 226。因此，质谱数据表明，配合物中锌与diosmin的摩尔分数为1:2，这与之前的报道一致[63］．

的¹H NMR研究在Bruker AM 500仪器上进行使用D₆-DMSO为溶剂。的¹氢核磁共振谱显示了32个质子峰。在4.82 ppm时，dismin表现出单线态信号，对应两个芳香游离羟基，而在锌- dismin配合物中，没有四个羟基质子信号，只有两个信号。这清楚地证明了去质子化的羟基参与了螯合。由于-CH的存在，游离diosmin和锌-diosmin复合物均在1.4 ppm和3.7 ppm附近出现峰值_3.-och_3.组。芳香质子峰在5.6-6.9 ppm (6 H)左右可见，糖质子的质子信号在3.1-5.1 ppm范围内可见。在合成复合物中其余的信号没有明显的变化[64］．

并对锌-狄斯明配合物及游离狄斯明进行了表征^13.C NMR光谱。的^13.C NMR谱图显示了游离diosmin和锌-diosmin配合物的相似特征。芳香碳的峰分布在119 - 164ppm之间。在65 ~ 77 ppm和18 ppm的峰表明存在葡萄糖基碳和CH_3.分别为碳。同样,哟_3.峰值在56ppm左右。约96、104和114 ppm的峰表示苯环中存在-CH基团。同样,C = O的出现大约在183 ppm信号的频谱地奥司明自由和没有这个信号的频谱zinc-diosmin复杂以及信号的出现在一个较低的价值(172 ppm)的证据支持zinc-diosmin形成了复杂的羰基碳。因此,这两个¹H NMR和^13.核磁共振波谱数据支持合成的配合物的提议结构。获得的核磁共振分析结果与早先的一份报告一致[65］．

2型糖尿病在世界范围内的日益流行，强调了开发一种没有任何副作用的有效治疗药物的必要性。近年来，某些微量元素在糖尿病及其继发性并发症发病机制中的作用越来越受到人们的关注。胰腺中总锌含量β-Cells是Zn体内最高的最高版本²⁺已发现水平与糖尿病相关[66］．为了提高锌的生物利用度和降低锌的毒性，合成了几种锌配合物，并对其胰岛素模拟和胰岛素增敏作用进行了研究。本研究以天然黄酮类苷diosmin为配体合成了一种新的锌配合物。已知Diosmin通过刺激残体分泌胰岛素来增强糖酵解酶的活性来调节葡萄糖代谢β-胰腺细胞[67］．

基于锌-diosmin复合物对空腹血糖浓度水平的剂量依赖效应，20mg /kg b.w。/大鼠/天，30 d为评价复方制剂抗糖尿病性能的最佳剂量。高脂饲料喂养低剂量链脲佐菌素诱导大鼠实验性2型糖尿病是一种理想的动物模型，因为它与人类2型糖尿病的临床和代谢特征非常相似，并被广泛用于药理学筛选[67，68］．因此，本研究将其用于评价锌-diosmin复合物的抗糖尿病性能。

血糖控制是延缓或预防急性或长期糖尿病并发症的重要组成部分。虽然胰岛素抵抗是2型糖尿病的初始致病因素，β-细胞衰竭是显性2型糖尿病胰岛素缺乏和糖耐量受损的原因[69］．在本研究中，HFD-STZ诱导大鼠中观察到的低水平血浆胰岛素表明扰动β细胞的功能。此外，高胰岛素血症和胰岛素抵抗的程度由HOMA-IR值证实。HFD-STZ大鼠HOMA-IR值显著升高。血液循环中的血红蛋白在生理条件下通过非酶、不可逆的共价键与葡萄糖结合，形成糖化血红蛋白(HbA1c)。在糖尿病中，由于持续高血糖导致血红蛋白糖化增加，HbA1c水平显著升高。糖化血红蛋白水平反映了近3个月的平均血糖水平。因此，HbA1c水平是糖尿病诊断和预后的黄金指标。锌-diosmin复合治疗的糖尿病大鼠HbA1c水平显著降低，可能是由于维持了正常的血糖稳态，OGTT和FBG的结果进一步证明了这一点。锌-diosmin复合物对大鼠HOMA-IR指数的显著降低也表明了该复合物对恢复胰岛素敏感性的功效。

以往的研究表明，口服狄斯明的浓度为100 mg/kg b.w。/rat/day for 30 days significantly reduced the blood glucose levels and controlled the secondary complications in STZ-nicotinamide induced experimental diabetes in rats. Though the dosage fixed in the present study for the treatment of diabetes is 20 mg/kg b.w. of zinc-diosmin complex, the results are comparable with the efficacy of the diosmin used in the earlier studies [38.，70］．

在正常生理条件下，过量的葡萄糖主要以糖原的形式储存在肝脏和肌肉组织中。然而，糖尿病患者的细胞内糖原沉积水平降低是因为胰岛素活性降低，因为胰岛素通过抑制糖原磷酸化酶的活性和刺激糖原合酶的活性来促进细胞内糖原的储存[71］．HFD-STZ诱导的2型糖尿病大鼠肝脏和肌肉组织糖原含量降低。然而，在锌-diosmin复合物治疗后，糖原含量增加，表明改善了肝脏和肌肉组织的胰岛素敏感性。

循环中细胞内酶如转氨酶和血清碱性磷酸酶水平升高是肝细胞损伤最敏感和最显著的指标。在组织损伤期间，这些可溶性酶从细胞中滤出，在血清中发现它们的活性增加[72］．这些酶水平的升高也表明细胞损伤和细胞膜功能完整性的丧失。血清谷丙转氨酶(ALT)水平与HOMA-IR评分之间存在很强的相关性，但与谷丙转氨酶(AST)水平无关，它被认为是人类2型糖尿病的解释因素[73］．锌-diosmin复合物可显著降低糖尿病大鼠肝细胞标志物酶(AST、ALT、ALP)活性，表明该复合物无毒、具有组织保护作用。

HFD-STZ诱导的2型糖尿病蛋白代谢异常，胰岛素抵抗增强，肌肉萎缩。这最终导致蛋白质分解代谢的显著增加和蛋白质合成的显著减少[74］．蛋白质合成代谢和分解代谢的不平衡对肾组织的代谢功能产生了显著影响。肾功能紊乱导致血尿素和血清肌酐水平升高，因为尿素是蛋白质分解代谢的主要最终产物，而肌酐是肌酸和磷酸肌酸分解形成的副产物，肌酸和磷酸肌酸被认为是肌肉组织中的能量储存化合物。血尿素和血清肌酐水平升高提示肾组织排泄尿素和肌酐异常。在复杂治疗的糖尿病大鼠中，这些标记物的水平显著下降，表明该复杂物在改善糖尿病相关肾脏并发症方面的有益作用。

5.结论

综上所述，本研究揭示了锌离子与dismin之间的络合物的形成，并通过各种光谱研究、ph -电位滴定和Job图对其进行了表征。给HFD-STZ诱导的2型糖尿病大鼠口服锌-diosmin复合物可恢复肝细胞标记酶的活性，说明复合物的无毒性质。此外，锌-diosmin复合治疗可改善胰岛素敏感性，至少部分是通过改善蛋白质代谢和改变肌肉和肝糖原水平。这些发现表明，锌-diosmin复合物作为一种治疗糖尿病及其继发性并发症的抗高血糖药物具有良好的发展潜力。进一步的研究正在进行中，以诱导锌-diosmin复合物在维持2型糖尿病血糖正常中抗高血糖作用的分子机制。

利益冲突

作者声明他们没有利益冲突。

确认

感谢印度政府大学资助委员会授予V. Gopalakrishnan先生(GCCO/A-2/UGC-MERITORIOUS/2013/378)的研究奖学金(日期:2013年5月28日)。

补充材料

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