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rayapp /gydF4y2Ba2018年gydF4y2Ba/gydF4y2Ba文章gydF4y2Ba
特殊的问题gydF4y2Ba

微生物和核酸生物技术的进步gydF4y2Ba

把这个特殊的问题gydF4y2Ba

研究文章|gydF4y2Ba开放获取gydF4y2Ba

体积gydF4y2Ba 2018年gydF4y2Ba |gydF4y2Ba文章的IDgydF4y2Ba 5827986gydF4y2Ba |gydF4y2Ba https://doi.org/10.1155/2018/5827986gydF4y2Ba

卡里姆Ennouri Olfa Ben Braiek苗条Smaoui, Khaled哈尼族Taoufik GhrairigydF4y2Ba,gydF4y2Ba ”gydF4y2Ba多态性DNA随机扩增的基因分析多个Enterocin-ProducinggydF4y2Ba肠球菌lactisgydF4y2Ba4 cp3应变及其有效的在经济增长中的作用gydF4y2Ba单核细胞增多性李斯特氏菌gydF4y2Ba生牛肉肉gydF4y2Ba”,gydF4y2Ba生物医学研究的国际gydF4y2Ba,gydF4y2Ba 卷。gydF4y2Ba2018年gydF4y2Ba,gydF4y2Ba 文章的IDgydF4y2Ba5827986gydF4y2Ba,gydF4y2Ba 10gydF4y2Ba 页面gydF4y2Ba,gydF4y2Ba 2018年gydF4y2Ba。gydF4y2Ba https://doi.org/10.1155/2018/5827986gydF4y2Ba

多态性DNA随机扩增的基因分析多个Enterocin-ProducinggydF4y2Ba肠球菌lactisgydF4y2Ba4 cp3应变及其有效的在经济增长中的作用gydF4y2Ba单核细胞增多性李斯特氏菌gydF4y2Ba生牛肉肉gydF4y2Ba

Olfa本BraiekgydF4y2Ba,gydF4y2Ba1gydF4y2Ba,gydF4y2Ba2gydF4y2Ba 苗条SmaouigydF4y2Ba,gydF4y2Ba3gydF4y2Ba 卡里姆EnnourigydF4y2Ba,gydF4y2Ba3gydF4y2Ba 哈立德·哈尼gydF4y2Ba,gydF4y2Ba4gydF4y2Ba 和gydF4y2Ba Taoufik GhrairigydF4y2Ba1gydF4y2Ba,gydF4y2Ba2gydF4y2Ba

1gydF4y2Ba实验室微生物和活性生物分子(LMBA),突尼斯的科学教师,突尼斯El-Manar大学突尼斯gydF4y2Ba

2gydF4y2Ba环境科学技术研究实验室(rl) ISSTE, Technopole de Borj Cedria,突尼斯gydF4y2Ba

3gydF4y2Ba实验室微生物和生物分子法克斯生物技术中心,突尼斯gydF4y2Ba

4gydF4y2Ba生物化学系,UR012-ES03医学院伊本El Jazzar苏塞,突尼斯gydF4y2Ba

学术编辑器:gydF4y2Ba贾迈勒亚希拉gydF4y2Ba
收到了gydF4y2Ba 2018年2月02gydF4y2Ba
修改后的gydF4y2Ba 2018年3月09gydF4y2Ba
接受gydF4y2Ba 2018年04月04gydF4y2Ba
发表gydF4y2Ba 2018年6月10gydF4y2Ba

文摘gydF4y2Ba

在这个手稿,enterocin-producing倍数gydF4y2Ba肠球菌lactisgydF4y2Ba应变,名叫4 cp3用于控制的扩散gydF4y2Ba单核细胞增多性李斯特氏菌gydF4y2Ba在冷藏生牛肉肉模型。此外,种内的遗传分化4 cp3应变进行随机扩增多态性DNA聚合酶连锁反应(RAPD-PCR)分析。gydF4y2Ba大肠lactisgydF4y2Ba4 cp3菌株被发现生产enterocins A, B, p .它展示活动gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba107776年缝隙agar-well扩散的方法。的应用gydF4y2Ba大肠lactisgydF4y2Ba4 cp3文化10gydF4y2Ba7gydF4y2BaCFU / g的生牛肉肉使用方差分析和评估ANCOVA线性模型以检验其对病原体的生长的影响gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba在冷藏库。因此,在减少一个非常有趣的结果(gydF4y2BaPgydF4y2Ba< 0.05)和抑制增长gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba在冷冻生牛肉肉了28天的存储。总之,gydF4y2Ba大肠lactisgydF4y2Ba4 cp3应变可能有助于预防的增殖和生存gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba在冷藏期间生肉。gydF4y2Ba

1。介绍gydF4y2Ba

污染和增长gydF4y2Ba单核细胞增多性李斯特氏菌gydF4y2Ba在生牛肉肉冷藏的集中报告(gydF4y2Ba1gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba4gydF4y2Ba]。有效,gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba是一个主要的肉类加工行业的关注导致人类[李氏杆菌病gydF4y2Ba4gydF4y2Ba,gydF4y2Ba5gydF4y2Ba]。这一事实是一个重大的公共卫生问题gydF4y2Ba6gydF4y2Ba]。事实上,这种致命的食源性病原体是低温微生物能够生长在温度低至0°C,适应几个食品系统和受污染的食品不出现不寻常的气味,纹理,或者味道逃避控制在人类食品和增加其危险的产品(gydF4y2Ba7gydF4y2Ba]。在这种背景下,进行了许多研究以开发自然代理除了抗生素和化学合成添加剂,以确保安全和维护食品安全的公共卫生问题(gydF4y2Ba8gydF4y2Ba]。在这些自然代理、乳酸菌(实验室)备受关注的食品安全,主要用于食品不同技术的影响,因为他们强大的通常被认为是安全的(GRAS)状态(gydF4y2Ba9gydF4y2Ba]。事实上,实验室涉及biopreservation和延长保质期的多样化的食品由于其生产的抗菌物质(gydF4y2Ba10gydF4y2Ba,gydF4y2Ba11gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

细菌素是最研究实验室(产生的抗菌物质gydF4y2Ba12gydF4y2Ba]。这些抗菌肽(细菌素)可以添加biopreservatives提高微生物chill-stored鲜肉的稳定性和安全性gydF4y2Ba13gydF4y2Ba,gydF4y2Ba14gydF4y2Ba]。研究了细菌素的肉及肉类产品我们可以把乳酸链球菌肽。所产生的gydF4y2BaLactococcus lactisgydF4y2Ba乳酸链球菌肽是成功地用作食品防腐剂在50多个国家gydF4y2Ba4gydF4y2Ba]。乳酸链球菌肽,这种纯化细菌素显示对杀菌效果gydF4y2Ba单核细胞增多性李斯特氏菌gydF4y2Ba在新鲜肉类及其应用在500国际单位/毫升产生显著减少gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba在肉gydF4y2Ba4gydF4y2Ba]。另一方面,直接使用bacteriocin-producing细胞是一种最实用的策略,似乎更可行的从经济的角度和法律限制较小而直接添加净化细菌素。这可能有利于食品工业微生物方面的质量、安全以及成本,因为它减少了食品微生物变质造成的损失。Enterococci,孤立的来自不同食物来源,是最评估实验室保护文化在不同的食品由于其产生的细菌素能够抑制食源性病原体等几个关键gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba(gydF4y2Ba15gydF4y2Ba,gydF4y2Ba16gydF4y2Ba]。实际上,有许多种gydF4y2Ba肠球菌gydF4y2Ba种虫害已经应用于控制gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba在不同的食物系统gydF4y2Ba17gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba19gydF4y2Ba]。如今,先进的技术已经开发首先和保护文化以提高其有效性和适用性等食品生物活性包装和封装(gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba]。尽管enterococci自然发现了不同类型的食品,在食品中使用是有争议的,因为他们认为是机会致病菌涉及几个院内感染和构成多个来源的抗生素抗性gydF4y2Ba16gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

这项工作的目标是描述基因多个enterocin-producinggydF4y2Ba肠球菌lactisgydF4y2Ba4使用RAPD-PCR cp3应变分析和评估其影响的增长gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba在冷藏生牛肉肉。gydF4y2Ba

2。材料和方法gydF4y2Ba

2.1。品种和生长条件gydF4y2Ba

大肠lactisgydF4y2Ba4 cp3应变是孤立的从生虾(gydF4y2BaPalaemon锯肌gydF4y2Ba)。细菌素产量的动能4 cp3应变评估在夫人(德曼,Rogosa沙普Biokar诊断,博韦,法国)汤在有氧条件下30°C (gydF4y2Ba21gydF4y2Ba]。这种隔离是一个多个enterocin-producing菌株能够产生enterocins, B, P (gydF4y2Ba21gydF4y2Ba]。同时,它已被证明显示杀菌对致病革兰氏阳性菌株的方式行动gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba107776年缝隙。在汤夫人在一夜之间成长30°C。gydF4y2Ba

大肠都有效gydF4y2Ba从意大利奶酪VC185应变是孤立的gydF4y2Ba22gydF4y2Ba]。这种隔离是non-bacteriocin-producing应变和本研究中使用的控制实验应变肉里的挑战。这也是生长在汤夫人。gydF4y2Ba

l . monocytogenesgydF4y2Ba缝隙107776菌株作为抗菌活性的指标压力测试和目标微生物的微生物挑战试验。这是生长在BHI(脑心浸液、Biokar诊断、博韦、法国)肉汤和培养ALOA(琼脂gydF4y2Ba李斯特菌gydF4y2BaOttaviani Agosti, BIO-RAD Marnes-la-Coquette,枚举(法国)媒介gydF4y2Ba23gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

大肠都有效gydF4y2Ba从突尼斯rigouta奶酪MMT21应变是孤立的gydF4y2Ba24gydF4y2Ba]。这种隔离是用作直接检测的目标菌株的抗菌活性与夫人软琼脂覆盖检查的能力gydF4y2Ba大肠lactisgydF4y2Ba4 cp3产生细菌素在牛肉样品测试的挑战。gydF4y2Ba

2.2。随机扩增多态性DNA-PCR (RAPD-PCR)分析gydF4y2Ba

提取基因组DNA用于RAPD-PCR放大从一夜之间的文化gydF4y2Ba大肠lactisgydF4y2Ba4 cp3 M17肉汤30°C根据Cremonesi et al ., 2006gydF4y2Ba25gydF4y2Ba]。RAPD-PCR放大是意识到使用通用引物M13, D8635描述Andrighetto et al ., 2001gydF4y2Ba26gydF4y2Ba]。放大在琼脂糖凝胶电泳分离的产品(1.5%)在1×TAE缓冲区为99分钟100 mV。凝胶在溴化乙锭染色和紫外线透照器拍摄的。Photo-positives扫描进电脑,并分析使用BioNumeric 5.0软件包(应用数学NV、Sint-Martens-Latem、比利时)。分组RAPD-PCR模式进行使用未加权的两组与算术平均法(UPGMA)聚类分析。的再现性价值RAPD-PCR测定,计算从两个独立的放大重复类型菌株,高于90%。RAPD-PCR配置文件获得与引物(M13和D8635)一起进行分析来获得一个单一的系统树图。gydF4y2Ba

2.3。抗菌活性对gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba

一夜之间的文化gydF4y2Ba大肠lactisgydF4y2Ba4 cp3应变孵化30°C在汤夫人是离心机10000×gydF4y2BaggydF4y2Ba10分钟获得细胞自由上层清液中和pH值6与氢氧化钠(1米)为了消除有机酸的抑制作用,通过过滤和消毒(0.22gydF4y2BaµgydF4y2Bam,微孔,贝德福德,MA) [gydF4y2Ba21gydF4y2Ba]。的抗菌活性细胞自由浮层gydF4y2Ba大肠lactisgydF4y2Ba4 cp3反对gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba107776年缝隙化验由agar-well扩散法根据本Braiek et al ., 2017gydF4y2Ba27gydF4y2Ba]。嗨琼脂板在37°C孵化24 h和抑菌圈的直径以毫米(mm)。gydF4y2Ba

2.4。的影响gydF4y2Ba大肠lactisgydF4y2Ba4 cp3应变的增长gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba缝隙107776年生牛肉肉gydF4y2Ba
2.4.1。准备和接种的生牛肉样本gydF4y2Ba

生牛肉肉从当地超市购买的苏塞(突尼斯)和运送到实验室在冷藏条件下立即进行处理。无菌准备牛肉肉切成五等分200 g (BF1-BF5)。为了减少到尽可能低的水平的固有微生物附着在表面的牛肉肉部分,每一块是在沸腾的无菌水浸泡5分钟gydF4y2Ba28gydF4y2Ba]。煮熟的肉类样品表面是消除无菌刀在无菌条件下(gydF4y2Ba28gydF4y2Ba]。这些肉部分进一步切成小块的2×2×0.5厘米。牛肉肉之前污染gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba并与实验室菌株接种,牛肉被嗜中温检查任何污染,部分psychrotrophic植物。嗜中温细菌总数测定平皿计数琼脂(主成分分析;美国Difco实验室、底特律、MI),孵化30°C 48 h。Psychrotrophic计数测定为嗜中温细菌除了如上所述的孵化是在4°C(7天gydF4y2Ba29日gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

大肠lactisgydF4y2Ba4 cp3菌株生长在汤夫人在30°C 24 h达到最大的细菌素产量(1400 AU /毫升)gydF4y2Ba21gydF4y2Ba]。gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba缝隙107776年亚文化BHI汤首先在37°C 18 h达到早期固定相同时与细胞生理状态,然后在10°C(肉的温度存储)为适应步骤3天的存储条件。的gydF4y2Ba原位gydF4y2Ba的应用程序的影响gydF4y2Ba大肠lactisgydF4y2Ba4 cp3的生存压力gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba缝隙107776年生牛肉肉根据略微修改后的方法评估Dortu et al ., 2008gydF4y2Ba6gydF4y2Ba]。短暂,BF2部分和BF3首先表面接种10gydF4y2Ba7gydF4y2BaCFU / g的肉gydF4y2Ba大肠lactisgydF4y2Ba4 cp3和gydF4y2Ba大肠都有效gydF4y2Ba分别VC185菌株。实验室在室温下接种物的吸收后,BF1, BF2, BF3肉部分表面污染的10gydF4y2Ba5gydF4y2BaCFU的gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba缝隙107776 / g的肉。无菌撒布机是用来分配均匀接种物。部分BF1担任控制(人工污染只有gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba缝隙107776)。部分BF4和BF5没有污染gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba缝隙107776但只接种4 cp3 VC185菌株,分别在10gydF4y2Ba7gydF4y2BaCFU / g的肉。gydF4y2Ba

2.4.2。存储和枚举gydF4y2Ba

生牛肉肉部分分别被放置在无菌塑料袋和存储为28天10°C。这个储存温度的选择首先依赖于使用的肠球菌的菌株的生长条件的研究中不能生长在温度低于10°C (gydF4y2Ba30.gydF4y2Ba]。其次,肉类存储10°C旨在模仿最坏的情况根据肯尼迪为冷藏et al ., 2005gydF4y2Ba31日gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

l . monocytogenesgydF4y2Ba缝隙107776板计数测定ALOA琼脂板根据NF EN ISO 11290 - 2: 2005gydF4y2Ba23gydF4y2Ba]。实验室计数测定夫人琼脂板在30°C孵化后24 h。微生物枚举被表示为日志gydF4y2Ba10gydF4y2BaCFU / g的牛肉肉。板包含25 - 250殖民地选择和计算,和CFU / g的平均数计算。这些细胞计数进行每6 h在48 h,每天每7天到第七天,直到28天。gydF4y2Ba

检测enterocin生产gydF4y2Ba大肠lactisgydF4y2Ba4 cp3生牛肉肉,从部分BF2匀浆,BF4储存在天0,7、14、21日和28日镀在琼脂夫人。在30°C有氧孵化后24 h,盘子被进一步覆盖指标压力gydF4y2Ba大肠都有效gydF4y2BaMMT21在软琼脂和孵化一夜之间在30°C。细菌素产量表示了明确的抑制区周围的殖民地。gydF4y2Ba

2.5。统计分析gydF4y2Ba

测量进行了一式三份,重复三次。单向方差分析(方差分析)申请每个参数通过使用SPSS 19统计软件包(SPSS有限公司,沃金,英国)。手段和标准误差计算和水平的概率gydF4y2BaPgydF4y2Ba< 0.05被用于测试所有实验数据的统计学意义。图基的事后测试是用来确定意义的多重比较平均值gydF4y2BaPgydF4y2Ba< 0.05。另一方面,我们使用线性混合模型假设之间的误差比较CFU值治疗不同天。混合模型使用SPSS 19岁,紧随其后的是事后对比通过原点。混合模型的统计输出的解释需要了解如何解释固定和随机效应之间的关系的层次水平。gydF4y2Ba

3所示。结果与讨论gydF4y2Ba

3.1。RAPD-PCR分析gydF4y2Ba

大肠lactisgydF4y2Ba4 cp3应变曾被不同的遗传方法:16 s rRNA基因测序,gydF4y2BarpoAgydF4y2Ba和gydF4y2Baph值gydF4y2Ba基因测序和16 s-23s rRNA基因间间隔分析(RSA) [gydF4y2Ba21gydF4y2Ba]。事实上,RSA分析证明gydF4y2Ba大肠lactisgydF4y2Ba4 cp3应变显示相同的16 s-23s概要文件类型的压力gydF4y2Ba大肠lactisgydF4y2Ba需求侧管理gydF4y2Ba (BT159),而在这项研究中,他们提出了不同RAPD-PCR模式如图gydF4y2Ba1gydF4y2Ba。因此,两个集群(I和II)可能会发现在45%的相似水平任意选择定义物种。有趣的是,gydF4y2Ba大肠lactisgydF4y2Ba4 cp3和应变类型gydF4y2Ba大肠lactisgydF4y2BaBT159被发现属于不同的集群,即使他们属于同一个物种(图gydF4y2Ba1gydF4y2Ba)。之间的遗传分化gydF4y2Ba大肠lactisgydF4y2Ba4 cp3和BT159菌株所说明的集群的系统树图可能与他们不同的隔离。实际上,我们的gydF4y2Ba大肠lactisgydF4y2Ba4 cp3应变是孤立的从一个新鲜的虾的样本gydF4y2BaPalaemon锯肌gydF4y2Ba(gydF4y2Ba21gydF4y2Ba),同时,gydF4y2Ba大肠lactisgydF4y2Ba从意大利干酪样BT159应变是孤立的gydF4y2Ba32gydF4y2Ba]。因此,RAPD-PCR分析构成分子方法能够快速检测遗传多样性水平应变与准确性。gydF4y2Ba


图1gydF4y2Ba
未加权的两组使用算术平均法(UPGMA)建立系统树图来自联合RAPD-PCR概要文件生成与引物M13 D8635gydF4y2Ba大肠lactisgydF4y2Ba4 cp3应变类型菌株和其他肠球菌的菌株。本分析中使用类型菌株gydF4y2Ba大肠lactisgydF4y2Ba需求侧管理gydF4y2Ba (BT159),gydF4y2Ba大肠都有效gydF4y2Ba需求侧管理gydF4y2Ba (281)和gydF4y2Bae·杜兰gydF4y2Ba需求侧管理gydF4y2Ba (282)从德意志Sammlung冯Mikroorganismen和Zellkulturen,布伦瑞克(德国)。其他肠球菌的菌株gydF4y2Ba大肠gilvusgydF4y2Ba(VC125),gydF4y2Ba大肠italicusgydF4y2Ba(VS434),gydF4y2Ba大肠hiraegydF4y2Ba(VC140),gydF4y2Ba粪大肠gydF4y2Ba(VC138),gydF4y2Ba大肠casseliflavusgydF4y2Ba(SV127)细菌ISPA-CNR集合(意大利米兰)。gydF4y2Ba
3.2。Antilisterial活动gydF4y2Ba

在体外gydF4y2Ba抗菌试验的gydF4y2Ba大肠lactisgydF4y2Ba4 cp3应变显示高antilisterial活动(gydF4y2BaPgydF4y2Ba< 0.05)对gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba缝隙107776具有明显的增长抑菌圈直径12毫米的BHI琼脂(表gydF4y2Ba1gydF4y2Ba)。这个结果证实了以前的发现描述gydF4y2Ba大肠都有效gydF4y2Ba压力(gydF4y2Ba17gydF4y2Ba]。这种敌对活动对gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba是由于生产enterocins (A、B、P)如前所证明了本Braiek et al ., 2018gydF4y2Ba21gydF4y2Ba]。事实上,enterocins A、B、P是细菌素和已知特征中最活跃的反对gydF4y2Ba李斯特菌gydF4y2Ba种虫害据Vandera et al . 2017gydF4y2Ba16gydF4y2Ba]和Rehaiem et al . 2014 [gydF4y2Ba33gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba
测试压力gydF4y2Ba 抑制区直径(毫米)gydF4y2Ba
大肠lactisgydF4y2Ba4保罗gydF4y2Ba 12.00±1.0gydF4y2Ba
大肠lactisgydF4y2BaCR4gydF4y2Ba 10.00±1.0gydF4y2Ba
大肠lactisgydF4y2BaCLgydF4y2Ba 5.00±0.0gydF4y2Ba
大肠lactisgydF4y2Ba5 cp2gydF4y2Ba 5.00±0.0gydF4y2Ba
大肠lactisgydF4y2BaC15gydF4y2Ba 0.00±0.0gydF4y2Ba
大肠lactisgydF4y2BaC23gydF4y2Ba 0.00±0.0gydF4y2Ba
个人电脑gydF4y2Ba 18.00±2.0gydF4y2Ba
数控gydF4y2Ba 0.00±0.0gydF4y2Ba
结果报告为意味着±标准误差三个复制。gydF4y2Ba :gydF4y2Ba与不同的字母相同的列,平均每个直径抑制区,有明显不同(gydF4y2BaPgydF4y2Ba< 0.05)。PC:积极的控制(新生霉素1毫克/毫升)和数控:负控制(noninoculated肉汤培养基夫人)。gydF4y2Ba
表1gydF4y2Ba
抑制的gydF4y2Ba大肠lactisgydF4y2Ba4 cp3 CR4 CL 5 cp2, C15、C23菌株gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba107776年缝隙。gydF4y2Ba
3.3。的影响gydF4y2Ba大肠lactisgydF4y2Ba4 cp3应变的增长gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba缝隙107776年生牛肉肉使用方差分析gydF4y2Ba

肉被认为是其中一个最经常被污染的食物gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba(gydF4y2Ba3gydF4y2Ba]。根据食品和饲料快速预警系统在2016年(gydF4y2Ba34gydF4y2Ba),20%的gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba通知是由于污染肉类家禽。在这种背景下,一个挑战测试控制的发展gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba生牛肉肉enterocin-producing接种gydF4y2Ba大肠lactisgydF4y2Ba应变。此外,重要的是要提到高水平的内在不致病的微生物可能对病原菌有抑制作用存在于以超强的竞争力将它们肉(gydF4y2Ba28gydF4y2Ba]。出于这个原因,我们的肉样品受到沸腾治疗无菌水如上所述,为了减少因素的数量增长可能涉及listerial牛肉食品模型和卵圆形干扰镀琼脂的殖民地。gydF4y2Ba

应该注意的是,分析嗜中温,psychrotrophic细菌从肉类分别对待gydF4y2Ba大肠lactisgydF4y2Ba4 cp3和gydF4y2Ba大肠都有效gydF4y2BaVC185菌株表现出抑制这些细菌(嗜中温和psychrotrophic)因为只有实验室,gydF4y2Ba大肠lactisgydF4y2Ba和gydF4y2Ba大肠都有效gydF4y2Ba确认(数据未显示)。事实上,微生物负载的有氧嗜中温板计数和psychrotrophic数是零,证明的有效过程沸腾无菌水浸法干预消除这些细菌(有氧嗜中温和psychrotrophic)肉部分。gydF4y2Ba

,证明了图gydF4y2Ba2gydF4y2Ba没有显著差异(gydF4y2BaPgydF4y2Ba> 0.05)的增长gydF4y2Ba大肠lactisgydF4y2Ba4 cp3应变和gydF4y2Ba大肠都有效gydF4y2BaVC185应变在生牛肉肉可比增长率增加3.43 3.35日志和日志,分别在28天的存储。的人口gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2BaBF1缝隙107776年部分(积极的控制:人为污染的10gydF4y2Ba5gydF4y2BaCFU / g的肉)经历了从10增加gydF4y2Ba5gydF4y2Ba2.87×10 CFU / ggydF4y2Ba9gydF4y2BaCFU / g(图28天之后gydF4y2Ba3gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba


图2gydF4y2Ba
增长实验室菌株的生牛肉肉。红色广场:gydF4y2Ba大肠lactisgydF4y2Ba4 cp3 (enterocin-producing实验室菌株)和绿色钻石:gydF4y2Ba大肠都有效gydF4y2BaVC185 (non-bacteriocin-producing实验室菌株)。gydF4y2Ba

图3gydF4y2Ba
抑制实验室文化的成长的影响gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba缝隙107776年生牛肉肉在存储10°C。蓝圆:控制(gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba缝隙107776没有enterocin-producing实验室菌株),紫钻:gydF4y2Ba大肠都有效gydF4y2BaVC185 (non-bacteriocin-producing实验室菌株)和绿色广场:gydF4y2Ba大肠lactisgydF4y2Ba4 cp3应变(enterocins A, B和P-producing应变)。gydF4y2Ba

统计学评价数据有关的生长行为gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba缝隙107776年生牛肉肉接种gydF4y2Ba大肠lactisgydF4y2Ba4 cp3应变显示显著减少(gydF4y2BaPgydF4y2Ba6.77 < 0.05)listerial人口的日志单位比未经处理的控制存储(图7天后gydF4y2Ba3gydF4y2Ba)。的增长gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba从第14天完全被抑制的实验。gydF4y2Ba

non-bacteriocin-producing的应用gydF4y2Ba大肠都有效gydF4y2BaVC185应变导致非常低的减少gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba人群。这些数量只有0.46对数单位和0.55单位低于7和28天之后控制计数的存储,分别。此外,没有明显增长(gydF4y2BaPgydF4y2Ba> 0.05)gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2BaBF4缝隙107776年观察到的部分和BF5只与实验室菌株接种10gydF4y2Ba7gydF4y2BaCFU / g和没有污染的listerial病原体。gydF4y2Ba

3.4。gydF4y2Ba原位gydF4y2Ba检测Enterocin生产生牛肉肉gydF4y2Ba

叠加分析与琼脂板夫人意识到为了检测gydF4y2Ba原位gydF4y2Ba生产的enterocinsgydF4y2Ba大肠lactisgydF4y2Ba4 cp3应变在牛肉肉样品冷藏期间。孵化后,enterocin生产表示通过观察菌落周围明显的抑制区种植在琼脂培养基夫人。一般来说,它是多个enterocin-producing显示的应用gydF4y2Ba大肠lactisgydF4y2Ba生牛肉肉4 cp3应变导致更大(gydF4y2BaPgydF4y2Ba< 0.05)抑制gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba107776比non-bacteriocin-producing缝隙gydF4y2Ba大肠都有效gydF4y2BaVC185应变(图gydF4y2Ba3gydF4y2Ba)。也正是在这个研究证明这个肠球菌的文化强烈(gydF4y2BaPgydF4y2Ba< 0.05)抑制的增长gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba牛肉肉后的前7天测试然后显著抑制病原体的挑战。这种强有力的抑制行为gydF4y2Ba大肠lactisgydF4y2Ba4保罗对gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba可以解释为enterocin如上确认生产。事实上,enterocins和P有强壮的antilisterial活动gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba;然而,enterocin B显示协同活动与enterocin [gydF4y2Ba16gydF4y2Ba,gydF4y2Ba33gydF4y2Ba]。因此,我们目前的结果证实了这些以前的发现表明enterocins A和B可能抑制增效剂gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba增长。同样,协同相互作用产生的三个enterocins (a、B、P)gydF4y2Ba大肠lactisgydF4y2Ba4 cp3可以提出反映因此其有效性在生牛肉肉保存。类似的结果报告的生物防除gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba在不同的肉类产品bacteriocinogenic实验室以前被Dortu et al ., 2008gydF4y2Ba6gydF4y2Ba),Pragalaki et al ., 2013gydF4y2Ba35gydF4y2Ba],Giello et al ., 2018gydF4y2Ba36gydF4y2Ba]。因此,很明显,应用在肉类和肉类产品bacteriocin-producing实验室已经吸引了相当大的兴趣替代天然食品防腐剂延长保质期和安全的肉类这些近年来gydF4y2Ba37gydF4y2Ba,gydF4y2Ba38gydF4y2Ba]。bacteriocin-producing实验室有效、直接的应用是最先进和实用的方法从经济和监管状态的观点。事实上,这种细菌使用不需要净化等处理步骤和有更少的法律限制和局限性的直接应用纯化细菌素(gydF4y2Ba39gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

3.5。的影响gydF4y2Ba大肠lactisgydF4y2Ba4 cp3应变的增长gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba缝隙107776年生牛肉肉使用一般线性模型(ANCOVA)gydF4y2Ba

协方差分析(ANCOVA)是一个混合的一般线性模型方差分析和回归。ANCOVA评估是否意味着因变量(11抽样天:0,1,2,3,4,5,6,7,14日,21日,28天的存储10°C)这是平等的跨层次的分类自变量(五个试验:试验1:BF1,试验2:BF2,试验3:BF3,试验4:BF4,和审判5:BF5)和反向。为了简化结果,对于每个肉类产品,首先(i)我们分析参数介于0到7天第二(2)之间的所有参数评估7和28天。gydF4y2Ba

3.5.1。ANCOVA参数分析0到7天gydF4y2Ba

在ANCOVA,写出完整的回归模型,然后简化告诉我们,天零截距为4.000(4.194436 - -0.194436),这是低于日志gydF4y2Ba10gydF4y2BaCFU在第七天组(t = -0.053)。同样,我们知道天0,1,2,3,4,5,6拦截低于gydF4y2Ba 的一天。试验1.160110系数代表的平均为每个后续试验基准7天。斜率的交互估计区分一天组相比,第七天组(表gydF4y2Ba2gydF4y2Ba(a))。我们特别感兴趣的结论,95%相信控制样品有影响的CFU不到16.611213分,-17.731432点之间治疗牛肉肉(表gydF4y2Ba2gydF4y2Ba(a))。gydF4y2Ba

(一)gydF4y2Ba生牛肉肉估计试验固定效果介于0到7天。gydF4y2Ba
参数gydF4y2Ba 估计gydF4y2Ba 性病。错误gydF4y2Ba DfgydF4y2Ba tgydF4y2Ba 团体。gydF4y2Ba 95%置信区间gydF4y2Ba
下界gydF4y2Ba 上界gydF4y2Ba
拦截gydF4y2Ba 4.194436gydF4y2Ba 2.595846gydF4y2Ba 24gydF4y2Ba 1.616gydF4y2Ba 0.119 (ns)gydF4y2Ba -1.163127gydF4y2Ba 9.551998gydF4y2Ba
一天0gydF4y2Ba -0.194436gydF4y2Ba 3.671080gydF4y2Ba 24gydF4y2Ba -0.053gydF4y2Ba 0.958 (ns)gydF4y2Ba -7.771173gydF4y2Ba 7.382302gydF4y2Ba
第一天gydF4y2Ba -0.699838gydF4y2Ba 3.671080gydF4y2Ba 24gydF4y2Ba -0.191gydF4y2Ba 0.850 (ns)gydF4y2Ba -8.276576gydF4y2Ba 6.876899gydF4y2Ba
第二天gydF4y2Ba -0.041189gydF4y2Ba 3.671080gydF4y2Ba 24gydF4y2Ba -0.011gydF4y2Ba 0.991 (ns)gydF4y2Ba -7.617927gydF4y2Ba 7.535548gydF4y2Ba
第三天gydF4y2Ba -0.064947gydF4y2Ba 3.671080gydF4y2Ba 24gydF4y2Ba -0.018gydF4y2Ba 0.986 (ns)gydF4y2Ba -7.641685gydF4y2Ba 7.511790gydF4y2Ba
第四天gydF4y2Ba 0.392455gydF4y2Ba 3.671080gydF4y2Ba 24gydF4y2Ba 0.107gydF4y2Ba 0.916 (ns)gydF4y2Ba -7.184282gydF4y2Ba 7.969193gydF4y2Ba
第五天gydF4y2Ba 0.285756gydF4y2Ba 3.671080gydF4y2Ba 24gydF4y2Ba 0.078gydF4y2Ba 0.939 (ns)gydF4y2Ba -7.290981gydF4y2Ba 7.862494gydF4y2Ba
一天6gydF4y2Ba 0.235276gydF4y2Ba 3.671080gydF4y2Ba 24gydF4y2Ba 0.064gydF4y2Ba 0.949 (ns)gydF4y2Ba -7.341462gydF4y2Ba 7.812013gydF4y2Ba
第七天gydF4y2Ba 0gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba
试验gydF4y2Ba 1.160110gydF4y2Ba 6.194913gydF4y2Ba 94193.706gydF4y2Ba 0.187gydF4y2Ba 0.851 (ns)gydF4y2Ba -10.981849gydF4y2Ba 13.302068gydF4y2Ba
一天0×试验gydF4y2Ba -0.560110gydF4y2Ba 8.760930gydF4y2Ba 94193.706gydF4y2Ba -0.064gydF4y2Ba 0.949 (ns)gydF4y2Ba -17.731432gydF4y2Ba 16.611213gydF4y2Ba
第一天×试验gydF4y2Ba -0.273876gydF4y2Ba 8.760930gydF4y2Ba 94193.706gydF4y2Ba -0.031gydF4y2Ba 0.975 (ns)gydF4y2Ba -17.445198gydF4y2Ba 16.897447gydF4y2Ba
第二天×试验gydF4y2Ba -0.233863gydF4y2Ba 8.760930gydF4y2Ba 94193.706gydF4y2Ba -0.027gydF4y2Ba 0.979 (ns)gydF4y2Ba -17.405185gydF4y2Ba 16.937460gydF4y2Ba
第三天×试验gydF4y2Ba -0.126228gydF4y2Ba 8.760930gydF4y2Ba 94193.706gydF4y2Ba -0.014gydF4y2Ba 0.989 (ns)gydF4y2Ba -17.297550gydF4y2Ba 17.045095gydF4y2Ba
第四天×试验gydF4y2Ba -0.160129gydF4y2Ba 8.760930gydF4y2Ba 94193.706gydF4y2Ba -0.018gydF4y2Ba 0.985 (ns)gydF4y2Ba -17.331451gydF4y2Ba 17.011194gydF4y2Ba
第五天×试验gydF4y2Ba -0.097362gydF4y2Ba 8.760930gydF4y2Ba 94193.706gydF4y2Ba -0.011gydF4y2Ba 0.991 (ns)gydF4y2Ba -17.268685gydF4y2Ba 17.073960gydF4y2Ba
一天6×试验gydF4y2Ba -0.067141gydF4y2Ba 8.760930gydF4y2Ba 94193.706gydF4y2Ba -0.008gydF4y2Ba 0.994 (ns)gydF4y2Ba -17.238464gydF4y2Ba 17.104181gydF4y2Ba
天7×试验gydF4y2Ba 0gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba
:gydF4y2Ba该参数设置为0,因为它是多余的。性病。错误:标准错误,df:自由度,t:学生的t统计量,和团体。:假定值(与相关)。ns:gydF4y2BaPgydF4y2Ba> 0.05。gydF4y2Ba
(b)gydF4y2Ba生牛肉肉天固定效应的估计。gydF4y2Ba
参数gydF4y2Ba 估计gydF4y2Ba 性病。错误gydF4y2Ba dfgydF4y2Ba tgydF4y2Ba 团体。gydF4y2Ba 95%置信区间gydF4y2Ba
下界gydF4y2Ba 上界gydF4y2Ba
拦截gydF4y2Ba 7.467589gydF4y2Ba 0.246726gydF4y2Ba 26.643gydF4y2Ba 30.267gydF4y2Ba 0.000 (gydF4y2Ba )gydF4y2Ba 6.961032gydF4y2Ba 7.974147gydF4y2Ba
试验1gydF4y2Ba -2.190545gydF4y2Ba 0.334916gydF4y2Ba 23.708gydF4y2Ba -6.541gydF4y2Ba 0.000 (gydF4y2Ba )gydF4y2Ba -2.882229gydF4y2Ba -1.498862gydF4y2Ba
试验2gydF4y2Ba -3.072563gydF4y2Ba 0.334916gydF4y2Ba 23.708gydF4y2Ba -9.174gydF4y2Ba 0.000 (gydF4y2Ba )gydF4y2Ba -3.764247gydF4y2Ba -2.380879gydF4y2Ba
试验3gydF4y2Ba -2.595970gydF4y2Ba 0.334916gydF4y2Ba 23.708gydF4y2Ba -7.751gydF4y2Ba 0.000 (gydF4y2Ba )gydF4y2Ba -3.287653gydF4y2Ba -1.904286gydF4y2Ba
试验4gydF4y2Ba 0.028207gydF4y2Ba 0.334916gydF4y2Ba 23.708gydF4y2Ba 0.084gydF4y2Ba 0.934 (ns)gydF4y2Ba -0.663477gydF4y2Ba 0.719891gydF4y2Ba
试验5gydF4y2Ba 0gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba
一天gydF4y2Ba 0.489768gydF4y2Ba 0.070900gydF4y2Ba 21.369gydF4y2Ba 6.908gydF4y2Ba 0.000 (gydF4y2Ba )gydF4y2Ba 0.342479gydF4y2Ba 0.637057gydF4y2Ba
试验1×天gydF4y2Ba 0.103902gydF4y2Ba 0.080060gydF4y2Ba 23.708gydF4y2Ba 1.298gydF4y2Ba 0.207 (ns)gydF4y2Ba -0.061443gydF4y2Ba 0.269246gydF4y2Ba
试验2×天gydF4y2Ba -0.836490gydF4y2Ba 0.080060gydF4y2Ba 23.708gydF4y2Ba -10.448gydF4y2Ba 0.000 (gydF4y2Ba )gydF4y2Ba -1.001834gydF4y2Ba -0.671146gydF4y2Ba
试验3×天gydF4y2Ba 0.080347gydF4y2Ba 0.080060gydF4y2Ba 23.708gydF4y2Ba 1.004gydF4y2Ba 0.326 (ns)gydF4y2Ba -0.084998gydF4y2Ba 0.245691gydF4y2Ba
试验4×天gydF4y2Ba 0.005842gydF4y2Ba 0.080060gydF4y2Ba 23.708gydF4y2Ba 0.073gydF4y2Ba 0.942 (ns)gydF4y2Ba -0.159502gydF4y2Ba 0.171186gydF4y2Ba
试验5×天gydF4y2Ba 0gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba
:gydF4y2Ba该参数设置为0,因为它是多余的。性病。错误:标准错误,df:自由度,t:学生的t统计量,和团体。:假定值(与相关)。试验1:BF1(控制样本),试验2:BF2,试验3:BF3,试验4:BF4,和审判5:BF5。ns:gydF4y2BaPgydF4y2Ba> 0.05,gydF4y2Ba :gydF4y2BaPgydF4y2Ba< 0.001。gydF4y2Ba
表2gydF4y2Ba

同样,ANCOVA表示没有显著差异(gydF4y2BaPgydF4y2Ba> 0.05)在治疗0到7天(表之间gydF4y2Ba2gydF4y2Ba(a))。gydF4y2Ba

如表所示gydF4y2Ba2gydF4y2Ba(b),写出完整的回归模型简化告诉我们的拦截试验1是5.277044 (7.467589 - -2.190545)。同样,我们知道试验的2、3、4和5。一天0.489768系数代表平均为每个后续试验的基准试验5(表gydF4y2Ba2gydF4y2Ba(b))。斜率的交互估计区分其他审判组织相比,五组(表gydF4y2Ba2gydF4y2Ba(b))。gydF4y2Ba

治疗BF1(控制样本),BF3 (gydF4y2Ba大肠都有效gydF4y2BaVC185应变在10gydF4y2Ba7gydF4y2Ba+ 10 CFU / g的肉gydF4y2Ba5gydF4y2BaCFU的gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba缝隙107776 / g的肉),BF4(只有gydF4y2Ba大肠lactisgydF4y2Ba4 cp3应变10gydF4y2Ba7gydF4y2BaCFU / g(肉),BF5(只有gydF4y2Ba大肠都有效gydF4y2BaVC185应变在10gydF4y2Ba7gydF4y2BaCFU / g(肉)没有显著差异(gydF4y2BaPgydF4y2Ba> 0.05)。然而,在gydF4y2BaPgydF4y2Ba< 0.001置信水平的治疗gydF4y2Ba大肠lactisgydF4y2Ba4 cp3应变10gydF4y2Ba7gydF4y2Ba+ 10 CFU / g的肉gydF4y2Ba5gydF4y2BaCFU的gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba缝隙107776 / g肉(BF2)统计不同,剂量比其他更敏感试验(表gydF4y2Ba2gydF4y2Ba(b))。gydF4y2Ba

是很重要的认识到给定的参数估计意思是固定效应估计的参数。并给出了协方差参数表gydF4y2Ba3gydF4y2Ba。同样,拦截的方差估计为0.134603和6.125832(表gydF4y2Ba3gydF4y2Ba)。零假设为这个参数的方差为零,这将表明,随机效应并不是必要的。统计测试被称为沃尔德Z统计量。另一方面,假设(瓦尔德Z = 0.000,gydF4y2BaPgydF4y2Ba= 1.00)和零假设(瓦尔德Z = 1.067,gydF4y2BaPgydF4y2Ba= 0.286)被拒绝了。事实上,我们得出结论,我们需要一个随机拦截(表gydF4y2Ba3gydF4y2Ba)。这表明有重要的无边无际的解释变量为每个主题,提高或降低他们的表现的方式随机出现,因为我们不知道失踪的解释变量的值。gydF4y2Ba
参数gydF4y2Ba 估计gydF4y2Ba 瓦尔德ZgydF4y2Ba 团体。gydF4y2Ba
剩余gydF4y2Ba 0.134603gydF4y2Ba 3.443gydF4y2Ba 0.001gydF4y2Ba
天(主题= id)gydF4y2Ba 方差gydF4y2Ba 0.006163gydF4y2Ba 1.067gydF4y2Ba 0.286gydF4y2Ba
剩余gydF4y2Ba 6.125832gydF4y2Ba 3.464gydF4y2Ba 0.001gydF4y2Ba
试验[主题= id]gydF4y2Ba 方差gydF4y2Ba 37.76436gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba
:gydF4y2Ba该协方差参数是多余的。无法计算的检验统计量和置信区间。团体。:假定值(与相关)。gydF4y2Ba
表3gydF4y2Ba
估计协方差参数的生牛肉肉样品0到7天之间。gydF4y2Ba
3.5.2。ANCOVA参数分析7 - 28天gydF4y2Ba

7和28天之间的一段远程存储,第七天的ANCOVA拦截是4.194435(4.664446 - -0.470011),这是低于日志gydF4y2Ba10gydF4y2Ba在28日CFU一天组(t = -0.081)(表gydF4y2Ba4gydF4y2Ba(a))。同样,7天、14和21比28天低截获。试验1.121930系数代表基线的平均为每个后续试验在28天(表gydF4y2Ba4gydF4y2Ba(a))。此外,治疗控制样本(试验1)对CFU产生影响(表gydF4y2Ba4gydF4y2Ba(a))。gydF4y2Ba

(一)gydF4y2Ba生牛肉肉之间的试验固定效应估计7和28天。gydF4y2Ba
参数gydF4y2Ba 估计gydF4y2Ba 性病。错误gydF4y2Ba DfgydF4y2Ba tgydF4y2Ba 团体。gydF4y2Ba 95%置信区间gydF4y2Ba
下界gydF4y2Ba 上界gydF4y2Ba
拦截gydF4y2Ba 4.664446gydF4y2Ba 4.093800gydF4y2Ba 12gydF4y2Ba 1.139gydF4y2Ba 0.277 (ns)gydF4y2Ba -4.255177gydF4y2Ba 13.584069gydF4y2Ba
第七天gydF4y2Ba -0.470011gydF4y2Ba 5.789507gydF4y2Ba 12gydF4y2Ba -0.081gydF4y2Ba 0.937 (ns)gydF4y2Ba -13.084262gydF4y2Ba 12.144241gydF4y2Ba
第14天gydF4y2Ba -0.239269gydF4y2Ba 5.789507gydF4y2Ba 12gydF4y2Ba -0.041gydF4y2Ba 0.968 (ns)gydF4y2Ba -12.853521gydF4y2Ba 12.374983gydF4y2Ba
21天gydF4y2Ba -0.138680gydF4y2Ba 5.789507gydF4y2Ba 12gydF4y2Ba -0.024gydF4y2Ba 0.981 (ns)gydF4y2Ba -12.752932gydF4y2Ba 12.475572gydF4y2Ba
28天gydF4y2Ba 0gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba
试验gydF4y2Ba 1.121930gydF4y2Ba 2.383010gydF4y2Ba 0.000gydF4y2Ba 0.471gydF4y2Ba 1.000 (ns)gydF4y2Ba -16.706240gydF4y2Ba 18.950100gydF4y2Ba
天7×试验gydF4y2Ba 0.038180gydF4y2Ba 3.370085gydF4y2Ba 0.000gydF4y2Ba 0.011gydF4y2Ba 1.000 (ns)gydF4y2Ba -25.174660gydF4y2Ba 25.251019gydF4y2Ba
天14×试验gydF4y2Ba 0.021102gydF4y2Ba 3.370085gydF4y2Ba 0.000gydF4y2Ba 0.006gydF4y2Ba 1.000 (ns)gydF4y2Ba -25.191737gydF4y2Ba 25.233942gydF4y2Ba
天21日×试验gydF4y2Ba 0.020506gydF4y2Ba 3.370085gydF4y2Ba 0.000gydF4y2Ba 0.006gydF4y2Ba 1.000 (ns)gydF4y2Ba -25.192333gydF4y2Ba 25.233345gydF4y2Ba
28天×试验gydF4y2Ba 0gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba
:gydF4y2Ba该参数设置为0,因为它是多余的。性病。错误:标准错误,df:自由度,t:学生的t统计量,和团体。:假定值(与相关)。gydF4y2Ba
ns:gydF4y2BaPgydF4y2Ba> 0.05。gydF4y2Ba
(b)gydF4y2Ba生牛肉肉天固定效应的估计。gydF4y2Ba
参数gydF4y2Ba 估计gydF4y2Ba 性病。错误gydF4y2Ba dfgydF4y2Ba tgydF4y2Ba 团体。gydF4y2Ba 95%置信区间gydF4y2Ba
下界gydF4y2Ba 上界gydF4y2Ba
拦截gydF4y2Ba 10.015610gydF4y2Ba 0.209103gydF4y2Ba 10gydF4y2Ba 47.898gydF4y2Ba 0.000 (gydF4y2Ba )gydF4y2Ba 9.549700gydF4y2Ba 10.481519gydF4y2Ba
试验1gydF4y2Ba -1.671006gydF4y2Ba 0.295716gydF4y2Ba 10gydF4y2Ba -5.651gydF4y2Ba 0.000 (gydF4y2Ba )gydF4y2Ba -2.329902gydF4y2Ba -1.012110gydF4y2Ba
试验2gydF4y2Ba -8.316640gydF4y2Ba 0.295716gydF4y2Ba 10gydF4y2Ba -28.124gydF4y2Ba 0.000 (gydF4y2Ba )gydF4y2Ba -8.975536gydF4y2Ba -7.657744gydF4y2Ba
试验3gydF4y2Ba -2.204440gydF4y2Ba 0.295716gydF4y2Ba 10gydF4y2Ba -7.455gydF4y2Ba 0.000 (gydF4y2Ba )gydF4y2Ba -2.863336gydF4y2Ba -1.545544gydF4y2Ba
试验4gydF4y2Ba 0.047959gydF4y2Ba 0.295716gydF4y2Ba 10gydF4y2Ba 0.162gydF4y2Ba 0.874 (ns)gydF4y2Ba -0.610937gydF4y2Ba 0.706855gydF4y2Ba
试验5gydF4y2Ba 0gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba
一天gydF4y2Ba 0.013178gydF4y2Ba 0.010908gydF4y2Ba 10gydF4y2Ba 1.208gydF4y2Ba 0.255 (ns)gydF4y2Ba -0.011126gydF4y2Ba 0.037482gydF4y2Ba
试验1×天gydF4y2Ba 0.030534gydF4y2Ba 0.015426gydF4y2Ba 10gydF4y2Ba 1.979gydF4y2Ba 0.046 (gydF4y2Ba )gydF4y2Ba -0.003837gydF4y2Ba 0.064905gydF4y2Ba
试验2×天gydF4y2Ba -0.043134gydF4y2Ba 0.015426gydF4y2Ba 10gydF4y2Ba -2.796gydF4y2Ba 0.009 (gydF4y2Ba )gydF4y2Ba -0.077504gydF4y2Ba -0.008763gydF4y2Ba
试验3×天gydF4y2Ba 0.028453gydF4y2Ba 0.015426gydF4y2Ba 10gydF4y2Ba 1.845gydF4y2Ba 0.095 (ns)gydF4y2Ba -0.005917gydF4y2Ba 0.062824gydF4y2Ba
试验4×天gydF4y2Ba 0.001487gydF4y2Ba 0.015426gydF4y2Ba 10gydF4y2Ba 0.096gydF4y2Ba 0.925 (ns)gydF4y2Ba -0.032884gydF4y2Ba 0.035857gydF4y2Ba
试验5×天gydF4y2Ba 0gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba
:gydF4y2Ba该参数设置为0,因为它是多余的。性病。错误:标准错误,df:自由度,t:学生的t统计量,和团体。:假定值(与相关)。试验1:BF1(控制样本),试验2:BF2,试验3:BF3,试验4:BF4,和审判5:BF5。ns:gydF4y2BaPgydF4y2Ba> 0.05,gydF4y2Ba :gydF4y2Ba PgydF4y2Ba< 0.05,gydF4y2Ba :gydF4y2Ba PgydF4y2Ba< 0.01,gydF4y2Ba :gydF4y2BaPgydF4y2Ba< 0.001。gydF4y2Ba
表4gydF4y2Ba

如表所示gydF4y2Ba4gydF4y2Ba(一)、没有明显差异(gydF4y2BaPgydF4y2Ba> 0.05)试验和天7、14、21、28。gydF4y2Ba

事实上,较低和平均差的置信区间的上限范围从-25.174660点,至25.251019点(表gydF4y2Ba4gydF4y2Ba(a))。完整的回归模型简化的拦截控制样本为8.344604(10.015610 - -1.671006)(表gydF4y2Ba4gydF4y2Ba(b))。类似的结果显示2,3,4,5审判组织。系数为0.013178。gydF4y2Ba

治疗的影响、时间及其交互作用的抑制gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba如表所示gydF4y2Ba4gydF4y2Ba(b)。无显著交互作用(gydF4y2BaPgydF4y2Ba> 0.05)之间治疗BF3 BF4,存储时间的肉。然而,有趣的是,在gydF4y2BaPgydF4y2Ba< 0.01置信水平,BF2和时间的存储有高度显著的影响抑制gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba缝隙(表107776年肉gydF4y2Ba4gydF4y2Ba(b))。gydF4y2Ba

此外,拦截的方差估计为0.029149和15.235632。此外,假设(瓦尔德Z = 0.000,gydF4y2BaPgydF4y2Ba= 1.00)接受了牛肉肉样品(表gydF4y2Ba5gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
参数gydF4y2Ba 估计gydF4y2Ba 瓦尔德ZgydF4y2Ba 团体。gydF4y2Ba
剩余gydF4y2Ba 0.029149gydF4y2Ba 2.236gydF4y2Ba 0.025gydF4y2Ba
天(主题= id)gydF4y2Ba 方差gydF4y2Ba 0.00000gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba
剩余gydF4y2Ba 15.235632gydF4y2Ba 2.449gydF4y2Ba 0.014gydF4y2Ba
试验[主题= id]gydF4y2Ba 方差gydF4y2Ba 4.155172gydF4y2Ba 0.000gydF4y2Ba 1.000gydF4y2Ba
:gydF4y2Ba该协方差参数是多余的。无法计算的检验统计量和置信区间。团体。:假定值(与相关)。gydF4y2Ba
表5gydF4y2Ba
估计的协方差参数生牛肉肉样品7 - 28天。gydF4y2Ba
3.6。实用方面gydF4y2Ba

肠球菌的菌株,以用作防护或起动器/兼职biopreservation文化的食物,通常必须选择的基础上的安全方面经常是没有毒性和抗生素耐药性特征。有效,gydF4y2Ba大肠lactisgydF4y2Ba4 cp3应变之前验证nonhaemolytic,白明胶酶阴性,对万古霉素敏感和其它临床相关抗生素和没有已知的抗生素抗性基因和几位重要的毒力因子gydF4y2Ba21gydF4y2Ba]。因此,的存在gydF4y2Ba大肠lactisgydF4y2Ba4 cp3肉似乎并不代表着健康风险。gydF4y2Ba

4所示。结论gydF4y2Ba

我们所知,这是第一次报告的应用enterocin-producing倍数gydF4y2Ba大肠lactisgydF4y2Ba应变控制gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba在人为污染的生牛肉肉冷藏储存。根据获得的结果,gydF4y2Ba大肠lactisgydF4y2Ba4 cp3应变可能有用biopreservative反对一样自然gydF4y2Bal . monocytogenesgydF4y2Ba在肉类产品。gydF4y2Ba

的利益冲突gydF4y2Ba

作者宣称没有利益冲突。gydF4y2Ba

确认gydF4y2Ba

这项工作是支持的资助高等教育、突尼斯。作者感谢斯特凡诺博士莫兰迪(食品生产的科学研究所、意大利国家研究委员会(CNR当前),米兰,意大利)为其提供non-bacteriocin-producinggydF4y2Ba大肠都有效gydF4y2BaVC185应变和RAPD-PCR分析。gydF4y2Ba

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