文摘
本研究的目的是评估血清转化的发病率弓蛔虫种虫害感染及相关变量。我们进行了一项队列研究的77名12岁儿童消极血清学在先前的横断面研究。单变量、双变量分析来描述群体,利用社会经济行为和健康条件变量。逻辑回归分析使用血清转化作为因变量,和其余变量作为自变量。哮喘是唯一独立变量显示血清转化有一定的联系,有优势比= 3.57 (1.01 - -12.6)。血清转化的发病率弓蛔虫种虫害感染在随后的孩子每年每100人10.4。以前的研究报告和有关哮喘协会只有使用横断面研究。因此,这项研究是仅有的几个描述血清转化的发病率弓蛔虫种虫害感染,这是相关的理解这种寄生虫的负担。
1。介绍
有关是一个世界性的疾病,发生在全球各个地区,在发展中国家更频繁(1- - - - - -4]。由于大城市的人口不断增长,与相应的犬和猫的人口增长,越来越多的这些动物的粪便污染城市环境。因此,有关目前发达国家常见的人畜共患传染病,报告发病率的13.9%在美国5)和巴西(从4.2%到65.4%不等6]。
最常报道有关的相关因素是人类和狗之间的联系(7,8]。哮喘是描述在各种研究toxocariasis-associated因素(5,8,9];然而,这种关联的方向尚不清楚。必须澄清的因素在这个协会,和适当的方法是必要的,以进一步阐明了关系。
各种研究描述有关的患病率在人类10- - - - - -13]。然而,其发病率是很少研究除非人口样本被描述。因此,本研究旨在评估血清转化的发病率弓蛔虫种虫害感染,因为它与一群随机选择孩子住在城市附近的坎皮纳斯,圣保罗,巴西。
本研究确定血清转化造成的发病率弓蛔虫种虫害感染和测试几个变量与血清转化。哮喘是唯一的变量显示一个协会。
2。材料和方法
一个封闭的前瞻性队列研究使用的样本儿童消极血清学弓蛔虫spp,其居住地附近的圣马科斯,在城市的北部地区的坎皮纳斯,圣保罗,巴西。研究伦理委员会批准的这项研究是医学科学的教员,坎皮纳斯州立大学和热带医学研究所的圣保罗大学。
第一阶段在2012年到2014年之间进行的以人群为基础的研究(6)由200名儿童在2岁之间和12年。研究人口选择通过随机抽样的房屋登记在基本注意力信息和管理系统(SIGAB, Sistema de Informacao de Atencao e Gerenciamento Basica)的坎皮纳斯卫生部门。最初,192名儿童被评估为反的存在弓蛔虫种虫害的抗体,其中28面对积极的血清学和治疗。164人-血清学示威,抗议弓蛔虫种虫害组成的队列当前的研究。因为队列是开放的,87总损失发生(图1)。这些损失主要是由于地址变更(92%)。目前的研究结果,参照已完成所有后续的77名儿童。
队列是在12个月期间。每个孩子参观了四次,都被问及皮疹的存在以及他们是否有任何呼吸的投诉。问题是制定后进行预测与数量有限的个人表现。问题被设计成符合国际研究哮喘和过敏的儿童(ISAAC)计划。问的问题在评估表中列出1。
2.1。血液样本和ELISA
一年后他们最后血清学测试中,队列的孩子接受一个新的血清学测试诊断免疫球蛋白反弓蛔虫种虫害抗体。血液收集每个孩子都使用数字穿刺和滤纸(绘画纸™年级3号)(14]。之前收集到的样本存储在笔记本电脑,准备使用宽1厘米滤纸条隔开透明带和提交样品的序列集合。孩子的无名指和70%的酒精消毒,使用一次性柳叶刀指尖刺穿。血液收集的滑动手指上的丝带滤纸,直到完全吸收。条是在室温下干燥和储存在−20°C (6]。进行处理,血液样本被送到实验室,筛选了,经过分析使用酶联免疫吸附分析(elisa)检测免疫球蛋白类使用的抗体犬蛔虫excretory-secretory (te)抗原捕获抗原。这种技术已经被德前所述萨维尼(15),随后修改Bach-Rizzatti [16]。
2.1.1。洗出液的制备
件绘画纸# 3滤纸被削减(1.0厘米大小2)从包含从指尖收集的血液带研究的参与者。滤纸和330μL (pbs - 0.01, pH值7.2,被添加到埃普多夫超小型电子管和16个小时在4°C的环境。
2.1.2。ELISA板制备
执行的反应是在平底96孔聚苯乙烯微型板块(3590年配角,绑定)。100年井被涂上一层μL te抗原在PBS溶液稀释(10μg / mL)。盘子都淹没了,孵化37°C 2小时,紧随其后的是16个小时在4°C。在使用之前,非特异性与200年被封锁的网站μL (PBS-Tween-Gelatin(0.05%)为一小时37°C。
2.1.3。洗出液的吸附
洗出液和控制血清与总吸附蛔虫suum抗原提取避免与常见的交叉反应蛔虫抗原。蛔虫suum抗原稀释1:200年PBS-Tween准备一个吸附的解决方案。正极和负极控制血清稀释1:320 (PBS-Tween -吸附的解决方案蛔虫洗出液)和孵化。
阻塞后,井的ELISA盘子洗了三次PBS-Tween(5分钟)。随后,100μL的preadsorbed洗出液被添加到井,一式两份,200μL preabsorbed已知阳性患者的血清。在随后的行,100μL PBS-T被每个好,100μL从第一组井使用多通道通过吸管以下行,导致双重的连续稀释。过去的100μL是丢弃。随后,100μL标准阴性血清的吸收与PBS-T -蛔虫以及两个空格PBS-T,放入前六井。板是孵化40分钟37°C。此外,板与PBS-T洗了三次。与过氧化物酶酶共轭anti-IgG标记是稀释1:5000年PBS-TG并应用于所有的井和孵化37°C了40分钟。如前所述执行另一个清洗周期。可视化是通过增加100μL的orthophenylenediamine在磷酸柠檬酸缓冲溶液,与5μL 30%的过氧化氢(H2O2在黑暗中)和孵化在室温20分钟。通过添加50反应停止μL 4 N H2所以4解决方案。盘子是阅读使用Multiskan™ELISA读者与492纳米过滤器。血清学检测的截止density-point变化从0.330到0.390,并决定为每个测试使用的平均光密度30从负对照组血清+两个标准差(6]。
2.2。统计分析
根据数据分析最初包括队列描述每个变量研究,计算绝对和相对频率,和各自的95%可信区间(CI)。双变量分析然后进行社会经济,行为,和卫生条件变量的函数血清转化弓蛔虫种虫害感染。确切概率法进行表示。当协会> 0.20,它包含在回归模型中。
逻辑回归了,考虑的存在弓蛔虫种虫害感染作为因变量,剩下的作为独立的变量。向前欧拉方法,添加了一个变量序列,开始呈现较高的相关性的变量值与响应变量。逻辑回归系数提出的“e”(欧拉数)为了获得优势比(或协会)。测试采用的临界极限是10%17]。所有统计分析使用SAS 9.4 v和Epi Info 7软件。
3所示。结果
本研究的结果是基于77儿童消极的血清学先前的横断面研究。血清转化的发病率弓蛔虫种虫害感染这个队列是10.4% (8/77;每年每100人10.4例儿童)。表2总结了描述符为孩子们整个随访队列中已完成( )。孩子们的平均年龄为7.7岁(范围2 -)63.6%的儿童是男性。
二元结果的研究群体根据有关血清学是否积极的展示在表3。在当前的研究中,我们无法确定血清转化之间的任何关联弓蛔虫种虫害感染和社会经济、行为或健康状况变量。逻辑回归分析表明,哮喘血清转化是一个风险因素弓蛔虫种虫害感染或3.57(置信区间:1.01—-12.6)。其余变量等类型的产权边界,居民在家里,和接触狗或猫不存在统计学意义(血清转化表相关联的风险因素4)。
4所示。讨论
从我们的研究数据表明,血清转化的发病率弓蛔虫种虫害感染或每年8/77的孩子,术后随访10.4每年每100名儿童。这发病率没有明显不同于发现科雷亚,俾斯麦(18在相同的领域。后续研究科雷亚和俾斯麦的数量已经增加房屋卫生,还有额外的沥青铺路。这加强了这种寄生虫病的国际化特征。虽然这种寄生虫感染取决于geohelminth鸡蛋的存在环境,狗或猫接触并不是一个独立变量与此相关感染,可能由于小样本大小。因此,其他因素必须被认为是相关的,一个孩子可能会接触到这些geohelminth鸡蛋。
在评估独立变量中,只有存在哮喘被发现的危险因素积极感染血清学的结果弓蛔虫。哮喘和之间的联系有关各横断面研究(之前已经报道过了8,9,19),现在这两个变量之间的关联。然而,在这些类型的研究是不可能得出结论之前,条件是按时间先后顺序。在当前队列研究中,我们发现哮喘血清转化前的存在弓蛔虫种虫害感染;因此,哮喘之前血清学的转变。一种解释是,感染之间有一段时间和血清学的转变,与呼吸道症状开始前血清学的转变。因此,哮喘就会识别,不仅作为一种疾病,而且作为“不利条件代理“促进感染的寄生虫,这是与血清转化有关。
几篇文章以前发现哮喘协会与抗体的存在弓蛔虫spp。目前的研究中,基于采用模型,允许我们识别哮喘儿童与反了弓蛔虫抗体。这个结果表明一个因素,可能与炎症有关,这将是在哮喘儿童和能够促进血清转化。一些发表的报告表明,过敏症状,如哮喘,可能是寄生虫感染的结果(5,8,20.,21]。二十多年的保健员理论表明,过敏疾病的增加是寄生虫感染的减少的结果(22,23]。
在当前的工作中,使用一个队列研究,结果是矛盾的。我们观察到哮喘儿童发展反弓蛔虫抗体。然而,这些数据可能被解释为一个观察由该种[23)引发的炎症反应的寄生虫宿主是否明确而异或paratenic主机的寄生虫。在的情况下弓蛔虫,人类是一个paratenic主机,因此炎症反应将不同引发的另一个人类的寄生虫是终宿主,这种情况曼氏裂体吸虫(24]。
然而,它是不可能避免的本研究的数据与通过Poorisrisak et al。25]。在研究协会的哮喘和呼吸道合胞病毒(RSV)感染的同卵双胞胎婴儿,他们发现哮喘易感性的影响由RSV感染。发现在这项研究数据表明,哮喘的存在可能是一个标记为谁会感染犬弓蛔虫或者,至少,现在这个寄生虫抗体。其他孩子可能感染没有产生抗体。然而,这些结论应该谨慎考虑,因为在这一点上,数据只显示假设进行测试在后续的研究中使用更多的孩子参与进来。
队列的平均年龄为7.7±3.9年,这是符合参与者的年龄在其他研究中发现有关患病率更高(26]。Anaruma球场et al。13)为同一地区发现的类型属性边界是一个因素导致感染的预防弓蛔虫。这可能与这一事实有关保护障碍如墙或栅栏peridomicile可能限制访问的狗。然而,这种关联并不在我们的研究中发现,可能是因为,几乎所有的房子都被感染和未感染的孩子提出了产权边界如盖茨、墙壁和篱笆。因此,我们无法区分主机被感染的,而不是被寄生虫感染。没有流行病学差异,加强声称这种寄生虫是世界性的,适应香港的社会条件。
风扇等。27)观察到一个高患病率有关同样发生在人与狗接触那些没有,因此建议两组存在同样的感染风险犬弓蛔虫。重要的是要强调不同的孩子们的父母/监护人报告说他们家没有狗或猫,但这孩子确实有日常接触这些动物他们的亲戚的家里。
母亲的教育水平是没有统计学意义,另一个变量,对比的结果费雷拉et al。28)认为的发病率明显降低enteroparasitosis儿童生活在城市圣保罗,巴西,母亲的受教育程度和收入提高观察过去几十年。然而,值得注意的是,这是一个研究社区的坎皮纳斯,巴西,有低人类发展指数(HDI),和25%的孕妇比20岁年轻,平均教育水平较低(29日]。
在当前的研究中一个重要的因素是大量的孩子放弃了队列。这只损失发生,因为家庭从研究地区,可能是因为社会因素,迫使他们的搬迁。这样一个重大损失是意想不到的;然而,这些损失并没有妥协的结果或影响工作。
同样重要的是要注意,进入家庭和所居住的领土是评估的知识和同意那些负责该地区的基层医疗单位和社区健康促进的代理负责这个位置。队列是评估在同一时期最大的坎皮纳斯登革热疫情的历史,给研究带来了一个重要的结果。
通过抗体检测诊断执行有关。开发的技术有很多,最常用的是ELISA的幼虫excretory-secretory产品使用(30.]。当前正在使用ELISA敏感性78%,特异性92% (31日]。这使得它可以识别真正真正积极或消极的人使用这些数据,因为敏感测试很少失败检测个体造成的疾病,而高度特定测试将很少错误分类的人没有疾病。
重要的是强调在这个讨论中,检测到反的存在弓蛔虫抗体不一定表明一个活跃的感染。假阳性反应可能发生在个人患有蛔虫病、血吸虫病、丝虫病。这不是可行的执行geohelminth调查在我们的研究,因为低依从性提供粪便样本队列的寄生虫学测试。
大部分孩子感染了弓蛔虫是无症状的。然而,由于受感染儿童的总数,发展的更严重的临床表现是可能的,这可能会影响他们的生活质量。一般来说,卫生专业人员的意识,政府工作人员和教育工作者对有关作为一个公共卫生问题是必要和急需的。同样重要的是,预防和教育措施是采用以控制这种寄生虫病。
信息披露
当前地址的Paula Mayara马托斯Fialho如下:Departamento de Saude Coletiva, Faculdade de Ciencias书,大学Estadual德坎皮纳斯,巴西。
的利益冲突
作者宣称没有利益冲突。
确认
作者感谢圣保罗研究基金会(FAPESP)必须占州政府博士奖学金PMMF(批准号2012/14134-6)。他们也感谢Guita Rubinsky Elefant,医学博士,for her valuable assistance during performance of the ELISA assays.