文摘
抗逆转录病毒疗法(ART)已被证明提高患者生存的人类免疫缺陷病毒(HIV)感染和减少HIV - 1的传播。因此,中国中央政府发起一个全国性的计划为hiv - 1患者提供免费的艺术。我们进行了横断面调查江苏省确定的耐药性(博士)的hiv - 1感染的病人和博士2012年在病毒学失败的关联。研究中大约10.4%的hiv - 1患者经历了病毒学失败后一年的艺术和被分为药物敏感和耐药组基于基因型的决心。病毒载量(VLs)的耐药组明显低于药物敏感组。有两个独立的预测因素病毒学失败:男性性别和治疗持续时间增加。主要的变异研究中观察到的人反对核苷逆转录酶抑制剂(种转录)是M184V(79.45%)和K103N(33.70%)在nonnucleoside逆转录酶抑制剂(NNRTIs)。江苏省博士的总体利率仍相对较低的治疗患者。然而,密切监测耐药性的男性患者的早期治疗是至关重要的维持和增加艾滋病毒迄今取得的艺术的好处。
1。介绍
1996 - 2012年期间,据估计,抗逆转录病毒疗法(ART)阻止了约660万人死亡,由于获得性免疫缺陷综合征(AIDS)在世界范围内,包括550万例死亡在低收入和中等收入国家1]。此外,艺术已经被证明可以减少人类免疫缺陷病毒(HIV)传播的风险(2- - - - - -4]。鉴于有效艺术治疗的潜在好处,中国中央政府推出了2002年国家自由艺术计划。该项目自2004年以来迅速扩大(5),2013年9月,全国免费艺术项目累计治疗大约260000名患者(6]。据估计,在2002年到2009年,计划减少艾滋病相关死亡率每100感染者(从39.3到14.2的情况下7]。全国免费艺术计划的初步结果导致强大的政府支持持续改进和扩展程序。中国国家自由艺术计划的治疗指南进行了与齐多夫定(AZT) /司他夫定(而)+必要(DDI) +奈韦拉平(一步法)作为2003年方案(8)和转向AZT /而+ 3 tc + EFV一步法在2005年作为一线治疗方案。因为副作用而,一线方案再次转向TDF + 3 tc +一步法/ EFV 2012年延续到现在仍与世界卫生组织(世卫组织)艺术指导,包括最新的2013年指南(9,10]。
同时增加艺术的可用性提高了生存率和艾滋病毒/艾滋病患者的生活质量,抵制抗逆转录病毒药物可以破坏艺术的成功项目11]。大量的抗hiv - 1菌株后出现了艺术在资源有限的国家,大大抵消了受益于治疗项目(12,13]。同样,这一趋势一直在观察中国。有相应数量的增加艾滋病毒患者艺术阻力的增加国家自由艺术项目(14,15]。减少免费抗逆转录病毒治疗的有效性递减,中国开始转向二线抗逆转录病毒疗法患者的一线治疗的失败(2009年8]。然而,二线抗逆转录病毒疗法是最后的选择在中国hiv - 1治疗因为缺的药物。
江苏是一个代表省东部的中国社会特点和hiv - 1的流行疾病(16]。自由艺术实现2005年在江苏作为中国国家自由艺术计划的一部分。新报告的数量从78年的2005例hiv - 1迅速增加到3841年的2012人。然而,没有全面的努力对这些病人收集数据,包括基本信息,如病毒载量(VLs)和耐药hiv - 1的流行,直到他们已经接受抗逆转录病毒治疗至少一年。在这项研究中,我们已经进行第一次全面检查2012年在江苏省的hiv - 1患者记录的病毒学失败和关联在hiv - 1博士病毒学失败接受抗逆转录病毒治疗至少12个月。这项研究的结果将有助于提供一个基线评估中国hiv - 1治疗项目和可能帮助以证据为基础的决策在中国hiv - 1患者的临床护理。
2。方法
2.1。道德的声明
这是经伦理委员会批准的江苏省疾病预防和控制中心。签署知情同意了从每个参与者的访谈和采血前。每个参与者都免费拒绝参与或在任何时候退出研究。所有方法(不仅仅是实验室实验)进行了按照有关指南,包括任何相关细节。
2.2。研究设计
我们进行了横断面调查患者目前艺术至少12个月从1月1日到12月31日,2012年,江苏省。实验室数据和人口统计信息收集评估艾滋病病毒耐药性。
2.3。样本选择和信息收集
所有的实验都进行按照批准的指导方针。根据国家自由艺术的指导手册(第三版,2012)11),CD4的hiv - 1例+t细胞数≤350细胞/毫米3有资格获得艺术。免费的CD4+t细胞计数测试每年进行两次所有治疗的病人和自由VLs测试进行每年一次对病人艺术超过12个月。患者VLs > 1000拷贝/毫升治疗12个月后被定义为病毒学失败和选择进一步耐药性的基因测试根据这一艺术手册。任何耐药突变的存在是种转录,NNRTIs或者π被定义为耐药性在这项研究。本研究的入选标准如下:(1)患者接受抗逆转录病毒治疗超过12个月;(2)他们必须VLs测试结果;(3)有访问血清样本的中心江苏省艾滋病毒/艾滋病确认实验室,江苏省疾病预防和控制中心(JSCDC)。我们允许16例曾治疗11至12个月参与这项研究。所有的实验室结果和病人的人口统计信息输入到基于web的国家艺术信息系统。人口统计信息,包括年龄,性别,和治疗所需时间和其他相关信息收集艾滋病病毒耐药性分析中国信息系统艾滋病预防和控制的。
2.4。实验室的措施
VLs和耐药性测试进行了省级艾滋病确认实验室。量化了VLs使用COBAS Ampliprep TaqMan 96(罗氏)和COBAS TaqMan hiv - 1测试v2.0工具包。hiv - 1 RNA是使用QIAamp从血浆中提取病毒RNA迷你工具包。VLs测试和hiv - 1 RNA提取进行使用的剩余血液CD4+t细胞检测。剩余血液储存在−80°C,直到分析。
Nested-PCR被用来放大逆转录酶基因(密码子1 - 230)和蛋白酶基因码(1 - 99)中分离出来的病毒等离子体(17]。PCR测序产品被送到公司豆类和由此产生的序列使用软件Chromaspro拼接在一起。进行了解释和分析生成的序列使用斯坦福大学艾滋病病毒耐药性数据库(http://hivdb.stanford.edu/)。
2.5。统计分析
VLs进行分析与测试比较差异使用Graphpad Prism4 (Graphpad软件,Inc .)和软件被认为是重要的。耐药相关的因素可能是收集中国艾滋病预防和控制的信息系统。单变量关联进行评估使用卡方检验分类变量和学生以及连续变量和双边测试估计水平的意义。所选的变量在单变量分析中输入的逻辑回归模型来确定重要性水平与SPSS 20.0版(IBM)。
3所示。结果
3.1。病人的人口统计
在2012年底,VLs已经确定了2223年hiv - 1病人收到艺术至少一年。其中,232名患者VLs > 1000拷贝/毫升,是归类为病毒学失败,他们需要进一步进行耐药性检测。病毒学失败的总体率为10.44% (232/2223)。196年232例病毒学失败,等离子体成功采集样本检测耐药基因分型。其中,101年被认为是耐药和95年药物敏感。因此,江苏博士的hiv - 1患者样本的总体率为4.54% (101/2223)。
接下来,我们比较了VLs药物敏感和耐药组之间。有一个统计上的显著差异之间的意思是VLs药物敏感(303500±201700拷贝/毫升)和耐药(75860±15080拷贝/毫升;F测试比较方差)。
3.2。与耐药相关的因素
hiv - 1治疗患者的人口学特征与病毒学失败来说,等离子体电阻测试样本可以获得如表所示1。患者最常见的男性,30 - 50岁,已婚,已经感染了艾滋病病毒通过异性恋路线,被列为我艾滋病的临床阶段,治疗1 - 2年了,经常处理AZT /而+ 3 tc +一步法/ EFV(种转录+ NNRTIs组合)。进行逻辑回归分析确定耐药的独立预测因素。患者是女性(RR = 0.362, 95%置信区间CI: 0.155 - -0.844)在低风险的艺术阻力。此外,通过比较的相对风险之间耐药性患者治疗1 - 2年(RR = 13.616, 95%置信区间CI: 1.715 - -108.109), 2 - 3年(RR = 19.556, 95%置信区间CI: 2.278 - -167.857),和3年以上(RR = 50.579, 95%置信区间CI: 4.855 - -526.891),我们得出的结论是,有一个的可能性大大提高艾滋病毒治疗持续时间较长的新兴博士(表2)。
为了更好地理解博士观察到江苏的类型,我们进一步细分的耐药情况下抵抗核苷逆转录酶抑制剂(种转录),nonnucleoside逆转录酶抑制剂(NNRTIs),或蛋白酶抑制剂(pi)基于病毒基因组的突变。频率最高的耐药突变NNRTIs(46.94%),其次是种转录(37.25%),和π(5.61%)。这些结果表明,江苏NNRTIs吸毒造成最严重的阻力。然后我们比较的频率多药耐药性(种转录+ NNRTIs种转录+π,NNRTIs +π)。结合频率最高的多药耐药性是一种转录和NNRTIs(35.17%)(图组合1)。
3.3。突变博士简介
与耐药有关的最常见的基因突变在种转录M184V (79.45%)、M41L (23.29%)、M184I(10.96%),和K70R(10.96%)(图2(一个))。K103N、Y181C G190A, V108I最常见的突变与NNRTIs阻力和频率分别为33.70%,29.35%,27.17%,和27.17%,分别为(图2 (b))。种转录的最常见的组合是M184V突变+ M41L及其频率是6.63%;然而,NNRTIs突变组合的模式是一个均匀分布。69.30%的患者(70/101)拥有两种转录和NNRTIs阻力。四PI-associated突变被观察到在11个人在本研究中没有表型耐π药物。
(一)
(b)
4所示。讨论
江苏是中国东部最大的省份;因此,不完整的数据的功效江苏国家自由艺术计划对中国影响数据的完整性。在这里,我们分析了江苏博士和特征因素的患病率与2012年在病毒学失败耐药性有关。这个特殊的选择因为有大量可用的样本和有一个更完整的数据集合针对每种情况。本研究为进一步的研究提供了一个基准的功效艺术项目。我们发现失败发生整体在大约10.44%的情况下,整体博士率约为4.54%。艾滋病的患病率较低相比博士估计表明耐药性的出现在< 30%的HIV - 1感染患者病毒学失败(18]。此外,这个数字表明,江苏艺术治疗方案是有效的。等离子体VLs和血液CD4细胞计数是最广泛使用的监控抗逆转录病毒治疗的成功。令人惊讶的是,在这些情况下,病毒学失败发生时,我们观察到更高的VLs病毒导致患者药物敏感。据报道,艾滋病毒耐药菌株的复制能力会下降过程中病毒RNA合成与野生型艾滋病病毒(19]。此外,它已被证明在其他研究的风险选择电阻峰值10000拷贝/毫升(20.]。以上这些发现符合我们的结果的VLs耐药组低于在药物敏感组。但没有证据证明与耐药发生率(VLs显示相关21]。
突变与博士发现大约一半(51.5%)的患者血浆样本病毒学失败。这估计是类似于全国性的艾滋病病毒耐药性患者治疗失败(57%)(22]。也与之前的研究一致,NNRTIs种转录,种转录+ NNRTIs组合方案显示高耐药性[22]。大多数病人登记在我们的研究中接受治疗一种转录+ NNRTIs组合方案1 - 2年。事实上,研究表明,耐药性通常出现在第一个使用抗逆转录病毒疗法(6 - 12个月后23]。然而,很难实践这种监测指南在资源有限的国家。因此,世卫组织制定了全面的耐药性监测和监控策略基于公共卫生原则(24),地址担心耐药性的出现,开发早期预警指标(EWI)在资源有限的环境中使用限制的发展和传播预防耐药(25]。因此,它可能会对中国项目介绍EWI限制进一步江苏出现耐药性的可能性。高电阻率的一线疗法也表明,我们应该意识到传播耐药性的可能性(TDR)和测试在首次治疗耐药hiv - 1感染的病人。
电阻突变确定在本研究中是一个发展中国家并不奇怪治疗项目基于种转录和NNRTIs,用二线π方案没有扩大。M184V可能导致高层抵抗3 tc和低级ddI阻力。M41L属于tam(胸苷analogue-associated突变)被AZT和而选定的。K103N Y181C是最普遍的突变与NNRTI阻力在我们的研究中。K103N引起高层抵抗一步法与EFV和Y181C会导致高层一步法和中间EFV阻力阻力。确定的突变都是按照我们的一线治疗方案。的关注,101年艺术治疗耐药突变的患者,69.30%存在抵抗NRTI和NNRTI发病率远高于约50%在中国其他研究[26,27]。的数量在非洲发病率约为60%,在西欧、北美或更低,都是大约20% (28]。这两种转录阻力和NNRTIs在我们研究的部分原因是保持特别高,永久的艺术没有新药替代方案。
逻辑回归分析表明,性别和治疗时间与博士的研究表明,男性性别和长期艺术预测耐药类似于先前的研究在中国文学29日,30.]。在江苏省,艾滋病毒传播的主要途径是在异性之间传播;然而,同性恋传播近年来超越异性传播(31日]。在我们的研究中,34.7%的男性患者病毒学失败是男性行为者(MSM)。与其他人群相比,感染了艾滋病毒,男男同性恋者往往有较高的耐药性率和治疗结果差32,33]。因此,额外的监控和耐药性的进一步评估概要文件在这个人口需要巩固艺术治疗的努力。
我们的研究是有限的几个注意事项。第一,的232例病毒学失败,只有196人成功测序,意思是15.5%(36/232)的样本缺失的序列分析,因此博士的估计患病率可能不准确和可信的。第二,我们的结论只反映2012年博士的身份,更多的研究是必要的全面评估国家自由艺术计划的后果,和耐药性的预测程度是不够的。尽管有这些限制,本研究为临床治疗提供有效的建议,不仅通过调查分析,还根据实验室数据。一线艺术的初步数据支持,使用江苏方案对患者是有效的。然而,我们应该意识到耐药性已经出现。因此,在资源有限的设置在中国大量的病人,一线的管理艺术和后续处方指南是至关重要的防止耐药性变得无法控制。
相互竞争的利益
作者声明没有潜在的利益冲突的研究,本文的作者,和/或出版。
确认
作者感谢江苏省的中心研究所的艾滋病毒/艾滋病确认实验室的艾滋病毒/艾滋病预防和控制、JSCDC,耐药性实验室测试,和所有那些参与监测、艺术治疗和研究的数据输入。作者还要感谢赵Jinkou博士获唐,Thitikarn可能Tangthanasup评论的手稿。作者透露收到中国国家自然科学基金(81373125)支持的研究,本文的作者,和/或出版。