文摘
基因变异的骨桥蛋白(OPN)已经与系统性红斑狼疮(SLE)易感性相关,在系统性红斑狼疮患者细胞因子的概要文件。目前尚不清楚这些等位基因与特定的系统性红斑狼疮的临床表型有关。我们研究了252个良好系统性红斑狼疮患者从多民族群体,rs11730582, pcr rs28357094, rs6532040, rs9138 OPN基因的单核苷酸多态性。祖先的信息标记被用来控制遗传血统。SLE-risk等位基因3′UTR地区rs9138C与光敏性红斑狼疮患者的所有祖先背景(荟萃分析,95% CI -6.5 = 1.6,)。此外,启动子变体rs11730582C演示了启发性的证据与两个血液特征:血小板减少症(,)和溶血性贫血(,)。这些临床对snp在启动子和3′UTR区域结合之前报道SLE-susceptibility snp OPN和建议潜在的角色对这些变异抗体介入血球减少对系统性红斑狼疮和皮肤炎症。
1。介绍
系统性红斑狼疮(SLE)是一种自身免疫性疾病,其特征是生产核抗原的自身抗体。疾病的严重程度、预后和表现之间是高度可变的病人。系统性红斑狼疮通常涉及造血、皮肤、骨骼、肾脏系统。参与的呼吸、心血管和中枢神经系统也会发生,和不同的病人通常表现出不同的器官系统的参与模式。大约百分之九十的病例是女性,典型的发病年龄在生育年龄(1]。
遗传因素扮演了一个重要的角色在SLE的发病机制。家族性研究表明,10 - 12%的系统性红斑狼疮患者有直系亲属的影响,这是一百二十年五十倍的增加发生与一般人群相比,(2]。在同卵和异卵双胞胎的研究表明,同卵双生的疾病共存24 - 69%的时间,只有2 - 9%的时间在异卵双胞胎3]。虽然这个数据支持一个强大的系统性红斑狼疮易感性的基因影响,相关的各种不同的研究同卵双胞胎也意味着一个重要的角色除了基因序列变化的其它因素。全基因组关联和候选基因研究已成功地识别系统性红斑狼疮的基因易感性,包括免疫球蛋白受体(FcγR) [4],和转录因子如STAT4 [5]和IRF5 [6,7]。
为了发现机制的系统性红斑狼疮发病机理,感兴趣的候选基因,产生细胞因子(8]。基因变异的骨桥蛋白(OPN或SPP1)与系统性红斑狼疮相关敏感性[9- - - - - -11]。OPN是一个分泌细胞外基质细胞粘附糖蛋白。它在系统性红斑狼疮中的作用可能通过其解释不同的免疫功能,包括巨噬细胞趋化作用、辅助1型淋巴细胞反应,和b细胞活化12]。已证实有高水平的OPN在炎症组织的活检在系统性红斑狼疮等自身免疫性疾病(13,14]。此外,研究表明,增加血浆OPN水平与系统性红斑狼疮疾病活动增加(15]。在小鼠模型,OPN是必不可少的α干扰素(干扰素的生产α)[16]。干扰素-α水平升高在许多系统性红斑狼疮患者(17,18),以及高IFN -α是一个系统性红斑狼疮的遗传风险因素(19]。在以前的工作中,我们已经表明OPN的系统性红斑狼疮风险等位基因rs9138C与高水平的血清OPN和干扰素-α青年男女在系统性红斑狼疮(20.]。这种现象在系统性红斑狼疮的遗传风险因素影响细胞因子资料已经证明的其他SLE-risk位点(21- - - - - -23]。
有一些先例SLE-risk位点与特定的系统性红斑狼疮临床特征(24- - - - - -26]虽然在这方面还有许多工作要做。虽然OPN与系统性红斑狼疮易感性的遗传变异,目前知之甚少OPN等位基因是否与特定临床表现的系统性红斑狼疮有关。一项研究表明淋巴结病与rs7687316在启动子区域在欧洲血统的人10]。81欧美血统的系统性红斑狼疮患者的另一项研究证明了一个协会之间的变化与缺血性坏死和肾功能不全外显子711]。我们推测,某些系统性红斑狼疮的临床subphenotypes会与系统性红斑狼疮的存在风险OPN基因的等位基因,和这些协会将扩展到不同的遗传背景。通过确定临床特征与OPN等位基因有关,我们希望了解潜在的系统性红斑狼疮发病机制和临床表现的多样性之间的病人。
2。材料和方法
2.1。病人和样品
252例临床诊断为系统性红斑狼疮是从大学风湿病学门诊部招募芝加哥拉什大学,包括145名非裔美国人,67年欧美,23个拉丁裔美国人,和11个亚裔患者。所有患者完成了美国风湿病学院(ACR)标准得分4或更高版本的27]。各自机构的机构审查委员会批准了这项研究中,所有受试者提供书面知情同意。表1包含在患者纳入研究的人口统计信息。
2.2。临床数据
综合病史与狼疮和其他免疫疾病是在入学的时间。ACR系统性红斑狼疮的分类标准为每个病人使用病人的历史记录和实验室测试。“血液疾病”ACR标准是复合标准组成,可以实现由白血球减少症,淋巴细胞减少,血小板减少,或溶血性贫血。我们选择研究这些血液单独的标准,而不是研究复合“血液疾病”标准。同样,“免疫疾病”的标准是一个复合anti-Smith抗体,anti-dsDNA抗体,和antiphospholipid抗体,我们分别研究了这些单个组件。自身抗体化验所有受试者在芝加哥大学的临床免疫学实验室,使用标准程序和截止点积极的价值观。抗磷脂抗体抗体测定及严重性Anti-Sm使用ELISA, anti-dsDNA测量使用短膜虫属luciliae方法。全血计数进行评估血细胞计数子集。的患病率与系统性红斑狼疮相关的各种常见临床表现在我们群见表2。
2.3。基因分型
我们组四个haplotype-tagging OPN内和/或SLE-associated snp基因区域。rs11730582和rs28357094都OPN的5′启动子区域基因位于染色体4,之前与系统性红斑狼疮有关。rs6532040内含子,以前没有与系统性红斑狼疮的易感性有关。rs9138之前已经与系统性红斑狼疮相关敏感性和对系统性红斑狼疮患者血清细胞因子和骨桥蛋白的3′UTR区域。基因分型结果进行使用ABI Taqman assays-by-design引物探针的四个snp ABI 7900 ht PCR机器。表3描述了在四个单核苷酸多态性基因型数据病人在我们的研究中。所有snp证明预期哈迪温伯格比例单独测试时每个祖先背景(HW值> 0.01),支持基因型数据的有效性。
2.4。统计分析
遗传和临床数据库合并,占据8.2被用于统计分析来确定表型之间的关联和四个snp。四个snp选择不在high-linkage彼此不平衡(平方< 0.35对于每一个成对SNP组合在每个祖先背景),因此没有形成强大的单体型在这四个单核苷酸多态性,并且每个SNP分别进行了分析。因为感兴趣的snp的频率和系统性红斑狼疮症状的频率都随种族、血统“不得不在这项研究中加以解决。控制这种潜在的混淆,我们首先分别分析每个自我祖先背景。然后,我们使用血统信息标记在主成分分析生成量化值代表比例的祖先。的全部细节分析和图所示的前两个主成分是(28]。主成分作为协变量的逻辑回归分析控制的不同比例的祖先之间的系统性红斑狼疮病例。如果在祖先背景类似的效果观察,我们执行一个荟萃分析跨组织之间使用相同的控制比例祖先群体。为categorical-dependent变量逻辑回归进行占据8.2程序。临床表现是因变量和记录作为二进制变量代表的存在与否的11个ACR分类标准。四个不同的OPN SNP作为独立变量,并且每个SNP是一种添加剂的方式建模。本文所示值未修正的多重比较。一个值< 0.0031将承受Bonferroni调整为多个比较,调整临床变量的数量在我们的研究中进行了测试。协会在本研究中发现的值小于0.05,但没有达到阈值值为0.0031时被描述为“暗示”或“可能”关联。
3所示。结果
3.1。rs9138 C等位基因与光敏性有关
光敏性存在于8.64%(21/243)的患者群。如表所示4,光敏性强与系统性红斑狼疮相关风险等位基因C rs9138所有祖先背景(荟萃分析,,95% CI = 1.609 - -6.542)。本协会将承受Bonferroni调整的数量表型分析研究。光敏性的流行祖先背景之间没有显著差异(7.59%在欧洲的美国人,非洲裔美国人,7.58表2)。光敏性不相关的主成分代表遗传祖先在每个祖先背景,支持这个想法的差异比例祖先或掺合料没有混杂的分析。此外,类似的模式之间的联系rs9138 C和光敏性观察分别在每一个祖先的背景分析。
3.2。rs11730582 C等位基因与血小板减少症和溶血性贫血
系统性红斑狼疮的风险单核苷酸多态性rs11730582 C演示了一个暗示与两种不同的血液表现(表4)。血小板减少与rs11730582 C等位基因(荟萃分析,,95% CI = 1.11 - -4.04)。溶血性贫血可供127名患者的数据,作为样本的一个网站没有评估这一血液子类。可能联系rs11730582 C和溶血性贫血患者中可观察到这些数据可用(荟萃分析的是谁,,95% CI = 1.06 - -6.13)。正如所预期的那样,血小板减少症和溶血性贫血的相互关联()。在条件分析,每个血液表型展示类似的启发性的证据与rs11730582 C当条件,和更高的优势比为协会观察rs11730582 C患者表现出血液特征(,)。
4所示。讨论
系统性红斑狼疮是一种临床和遗传异质性疾病。看起来惊人的临床异质性至少部分是由于病人疾病的遗传因素之间的差异。我们将演示一个协会之间的最一致的系统性红斑狼疮风险等位基因3′UTR区域和光敏性及另外启发性的证据表明基因的启动子区域是系统性红斑狼疮患者与血液相关的表型。这一发现的两个独立的协会发起人和3′UTR区域与OPN之前已经观察到的基因。在病例对照研究中,这个模型的两个独立的协会是最适合的10),在我们自己的以前的工作,我们观察到抗体与启动子和血清细胞因子与3′UTR SNP rs9138 [20.]。
本研究的不足之处是一个相对较小的群体与健壮的和详细的临床资料进行了分析。因此,我们只能检测对巨大的影响大小,不能排除任何潜在的中等强度关联在这项研究中,我们没有发现。使用Bonferroni调整为多个比较,光敏性协会rs9138 C仍将是重要的,而两种可能的血液对rs11730582 C不会。系统性红斑狼疮病例的基因型频率与先前发表在大规模病例对照实验(9]。
有趣的是,rs11730582 C与发病机理的两种不同的血液,分享一些表现方面:溶血性贫血和血小板减少。先前的研究已经证实,血小板减少症和溶血性贫血狼疮通常autoantibody-mediated发病机理。90%的红斑狼疮患者血小板减少症已被证明具有抗体针对糖蛋白IIb / iii a或促血小板生成素受体(29日]。溶血性贫血在系统性红斑狼疮通常是峡谷的阳性抗体介入溶血性贫血。OPN在其分泌的形式可以作为细胞因子参与b细胞活化和抗体生产中发挥作用14]。之前我们已经演示了rs11730582 C等位基因与antiribonuclear患病率的增加蛋白自身抗体(anti-RNP) [20.]。这些数据在总支持角色自身抗体形成的启动子区域在系统性红斑狼疮。
虽然rs9138 C等位基因并不是与血液相关的发现,它是在狼疮患者与光敏性密切相关。这个协会是特别有趣的鉴于我们之前出版协会发现rs9138 C水平增加的骨桥蛋白和干扰素-α在系统性红斑狼疮患者20.]。大量研究表明血浆树突细胞(髓)的核心角色及其分泌的干扰素α在系统性红斑狼疮发病机理30.,31日]。此外,OPN干扰素-至关重要α生产小鼠髓(14]。众所周知,皮肤的红斑狼疮是一种自身免疫过程具有光敏性,ultraviolet-light-induced凋亡的角化细胞,炎症浸润在皮肤表面和深层隔间30.]。病理积累PDCs及其后续的分泌干扰素-α已被证明在这些光敏损伤(25,32]。根据这些发现,OPN基因变体之间的显著关联rs9138 C和光敏性的临床表现可能支持cytokine-mediated致病机制。
OPN rs11730582 C和rs9138 C等位基因的基因之前和独立与狼疮的风险增加有关。在这项研究中,我们发现这两个等位基因是独立与系统性红斑狼疮患者不同的临床特征,支持不同角色对这些等位基因在SLE的发病机制。这项工作将告知未来基因研究的轨迹,并提供有趣的假说有关的分子发病机制系统性红斑狼疮在机械的研究中可以跟进。
资金来源
t . Trivedi收到了吉娜Finzi纪念夏天学生从美国红斑狼疮基金会奖学金;世贸组织临床试验Utset-Lupus财团;结核病Niewold-NIH R01 AR060861, NIH K08 AI083790, NIH P30 DK42086, NIAID临床研究贷款还款AI071651, NIH CTSA目前核心补贴格兰特和CTSA目前飞行员赠款UL1 RR024999,狼疮研究所小说研究资助,红斑狼疮研究目标识别格兰特,联盟和国家研究基金会Eng关节炎Tan学者奖。
利益冲突
作者报告任何财务利益冲突。