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rayapp /gydF4y2Ba2011年gydF4y2Ba/gydF4y2Ba文章gydF4y2Ba
特殊的问题gydF4y2Ba

2011年寄生虫病免疫学和细胞生物学gydF4y2Ba

把这个特殊的问题gydF4y2Ba

研究文章|gydF4y2Ba开放获取gydF4y2Ba

体积gydF4y2Ba 2011年gydF4y2Ba |gydF4y2Ba文章的IDgydF4y2Ba 504959年gydF4y2Ba |gydF4y2Ba https://doi.org/10.1155/2011/504959gydF4y2Ba

艾丽西亚Ochoa-Sanchez,卢西亚吉梅内斯,亚伯拉罕兰达gydF4y2Ba,gydF4y2Ba ”gydF4y2Ba仓鼠模型的特定抗原的识别gydF4y2Ba有钩绦虫gydF4y2Ba绦虫gydF4y2Ba”,gydF4y2Ba生物医学研究的国际gydF4y2Ba,gydF4y2Ba 卷。gydF4y2Ba2011年gydF4y2Ba,gydF4y2Ba 文章的IDgydF4y2Ba504959年gydF4y2Ba,gydF4y2Ba 9gydF4y2Ba 页面gydF4y2Ba,gydF4y2Ba 2011年gydF4y2Ba。gydF4y2Ba https://doi.org/10.1155/2011/504959gydF4y2Ba

仓鼠模型的特定抗原的识别gydF4y2Ba有钩绦虫gydF4y2Ba绦虫gydF4y2Ba

学术编辑器:gydF4y2Ba路易斯。TerrazasgydF4y2Ba
收到了gydF4y2Ba 2011年7月14日gydF4y2Ba
接受gydF4y2Ba 2011年9月21日gydF4y2Ba
发表gydF4y2Ba 2011年12月29日gydF4y2Ba

文摘gydF4y2Ba

人类获得摄取猪肉绦虫病的感染gydF4y2Ba有钩绦虫gydF4y2Bacysticerci,唯一确定的主机的成年阶段(绦虫)和负责传输人类和猪囊虫病。因此,检测人类绦虫的航空公司是一个关键的元素在可行的策略来控制这种疾病的发展。介绍了特定抗原的识别利用仓鼠感染的血清gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba绦虫分析与原油提取(CEs)和免疫印迹分析excretion-secretion抗原(E / S Ag)获得gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Bacysticerci绦虫和摘录其它单独控制。仓鼠血清感染gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba绦虫识别特定的乐队72年,48岁,36岁和24 kDa,在81年的百分比,81年,90年,和88%,分别使用gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba绦虫E / S。这些仓鼠血清可以识别的抗原候选人来改善人类的诊断gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba绦虫病。gydF4y2Ba

1。介绍gydF4y2Ba

有钩绦虫gydF4y2Ba时导致绦虫病的绦虫成人蠕虫(绦虫)提出在人类肠道和囊虫病幼虫阶段(囊尾幼虫)建立在中枢神经系统、骨骼肌肉,和其他器官猪和人的gydF4y2Ba1gydF4y2Ba]。绦虫病导致人类的载体,只有轻微的症状经常占剩下的疾病诊断,而囊虫病的中枢神经系统(脑囊尾蚴病、NCC)导致临床表现,范围从轻微症状到死亡gydF4y2Ba2gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba4gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

在住院病人进行的一项研究神经病学与神经外科研究所从1995年到2009年期间在墨西哥城透露,由于NCC住院年度频率保持不变,与大约2.4%的神经病学磋商归因于NCC,而这种疾病的死亡率已经减少,这可以解释为一个合适的诊断(gydF4y2Ba5gydF4y2Ba]。Seroprevalence研究表明,多达12%的人口在流行地区携带anticysticerci抗体(gydF4y2Ba6gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

的平均患病率gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba绦虫病流行国家的4%,尽管在一些国家患病率高达7%的被报道。一些研究表明,该疾病在女性中更为常见和个人30到40岁(gydF4y2Ba7gydF4y2Ba,gydF4y2Ba8gydF4y2Ba]。和拉丁美洲中部的流行病学研究显示,在过去的三十多年中,哥伦比亚、洪都拉斯和危地马拉的国家年度绦虫病的频率最高,而哥斯达黎加最低病例数(gydF4y2Ba9gydF4y2Ba]。另一方面,在四个社区在危地马拉(El Jocote, El图里,圣热特鲁迪斯牛)在1991年到1994年,92例阳性病例被发现在3399年研究样本(2.7%),和98%的恢复寄生虫gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba。1%的频率检测在6个月到4岁的儿童gydF4y2Ba8gydF4y2Ba,gydF4y2Ba10gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

识别的gydF4y2Ba绦虫gydF4y2Ba物种(gydF4y2Bat . saginatagydF4y2Ba,gydF4y2Bat . asiaticagydF4y2Ba,gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba)是基本的控制和预防绦/囊虫病流行地区的传播。这些研究使用的方法都是基于微观检测鸡蛋在粪便gydF4y2Ba11gydF4y2Ba和绦虫coproantigens的检测gydF4y2Ba12gydF4y2Ba]。通过coproparasitoscopic分析缺乏敏感性和特异性诊断绦虫由于不同绦虫的鸡蛋是形态学难以区分,尽管检测属coproantigens是特定的,它不区分物种。然而,在实验水平,基于DNA鉴定技术有能力区分种绦虫(gydF4y2Ba13gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

绦虫病狗一直使用ELISA诊断测试检测抗体识别组件的绦虫/排泄分泌抗原(E / S Ag) [gydF4y2Ba14gydF4y2Ba,gydF4y2Ba15gydF4y2Ba]。最近,两种血清学方法(ELISA和专业)已经被用于检测gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba绦虫病。这些方法使用两个抗原从成年期(绦虫)E / S Ag)gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba:ES33和ES38及其重组(rES33和rES38)提供敏感性和特异性高于97%和91%,分别为(gydF4y2Ba16gydF4y2Ba,gydF4y2Ba17gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

流行病学研究表明,人类gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba绦虫病的危险因素是猪囊虫病的传播和人类gydF4y2Ba6gydF4y2Ba,gydF4y2Ba18gydF4y2Ba]。然而,一些努力已经确定新的特定抗原,以开发一种低成本、可行的方法,该方法既敏感又具体检测绦虫运营商。因此,本研究以识别特定抗原进行gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba绦虫,使用gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Bataeniasis-hamster模型。gydF4y2Ba

2。材料和方法gydF4y2Ba

2.1。生物材料gydF4y2Ba

有钩绦虫gydF4y2Bacysticerci和绦虫通过解剖他们从骨骼肌自然感染猪和小肠实验感染的仓鼠。动物被处理根据官方墨西哥规范:笔名动物园- 009 - 1994进行卫生处理的肉类和笔名- 033 -动物园- 1995家畜和野生动物的人道主义牺牲。Cysticerci洗在冷无菌磷酸盐(PBS), pH值7.4。的可行性cysticerci在每批由孵化20 cysticerci 37°C的RPMI 1640介质(σ)补充猪胆汁24 h (25%gydF4y2Ba19gydF4y2Ba]。Cysticerci被认为是可行的,当幼虫的头节突出并显示收缩运动。外翻寄生虫的数量计算,建立了平均比例的可行性。gydF4y2Ba

2.2。发展gydF4y2Ba有钩绦虫gydF4y2Ba绦虫gydF4y2Ba

黄金仓鼠(gydF4y2BaMesocricetus auratusgydF4y2Ba)与吡喹酮口服治疗(PQZ 3毫克/动物)。一周后,被感染的动物口服8 cysticerci [gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba]。短暂,动物免疫抑制腹腔内政府的甲基强的松龙(2毫克/动物)每15天。五周之后,动物们被戊巴比妥钠腹腔内管理(200毫克/公斤)。gydF4y2Ba有钩绦虫gydF4y2Ba绦虫从小肠中恢复过来,用抗生素补充PBS(青霉素gydF4y2Ba U / L和链霉素2 g / L,σ),培养RPMI中获取E / S Ag)。从仓鼠感染之前获得血液样本作为负控制血清(preimmune血清),前不久杀人。血液样本在室温下孵化735年30分钟和离心机gydF4y2BaggydF4y2Ba10分钟获得血清。恢复血清被储存在−20°C,直到需要。gydF4y2Ba

2.3。抗原制备gydF4y2Ba

Cysticerci E / SgydF4y2Ba
Cysticerci孵化了6个小时在室温下包含RPMI培养皿中抗生素和EDTA(1毫米)。培养基是恢复和离心机,享年9000岁gydF4y2BaggydF4y2Ba了20分钟,上层清液过滤0.45gydF4y2BaμgydF4y2Bam膜(微孔),对PBS透析,集中在一个AMICON单位使用3000点膜(微孔)。蛋白酶抑制剂(TLCK PMSF和EDTA)被添加和抗原是储存在−20°C (gydF4y2Ba21gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

绦虫E / SgydF4y2Ba
绦虫在孵化37°C包含RPMI培养皿中使用抗生素(青霉素gydF4y2Ba U / L和链霉素2 g / L,σ)。交换的媒介是每8小时的第一天孵化期间,每12小时后3到4天。绦虫是每天监测的可行性通过显微镜观察形态和流动性。媒体从孵化池,离心机,享年9000岁gydF4y2BaggydF4y2Ba20分钟。上层清液透析与PBS,集中,蛋白酶抑制剂(TLCK、PMSF和EDTA)添加和样本冻结在−20°C到使用(gydF4y2Ba17gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

原油提取(CE)gydF4y2Ba
寄生虫(gydF4y2Ba有钩绦虫、绦虫saginata绦虫taeniaeformis,膜壳绦虫属diminutagydF4y2Ba,gydF4y2Ba蛔虫gydF4y2Ba)均质分别由polytron (Brinkmann仪器公司)在PBS的最大力量3分钟,pH值7.4,使用的比例1 g寄生虫/ 5毫升的提取方案,辅以蛋白酶抑制剂。暂停离心机在19870年gydF4y2BaggydF4y2Ba30分钟,上层清液透析对PBS在4°C,过夜。由此产生的混合物是离心器100000gydF4y2BaggydF4y2Ba30分钟;浮在表面的分布在整除,冻结在−20°C。gydF4y2Ba

重组抗原gydF4y2Ba
我们分离克隆,第29页的代码和抗原B (AgB或paramyosin)抗原的筛选表达式库gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba成年期了gydF4y2BaλgydF4y2Ba的超免疫兔血清anti-CE ZAPII向量gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba绦虫。重组AgB准备是根据先前建立的协议(gydF4y2Ba22gydF4y2Ba),gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba第29页抗原(TsP29)是使用pRSETB向量和重组抗原提纯金属亲和色谱法(吉梅内斯等,未发表的结果)。纯化蛋白质的浓度是由洛瑞法和稀释在PBS(1毫克/毫升gydF4y2Ba23gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

超免疫血清的生产gydF4y2Ba
超免疫血清对gydF4y2Ba有钩绦虫gydF4y2Ba(cysticerci和绦虫原油提取、E / S Ag) AgB,第29页抗原)准备在八周大女仓鼠。前免疫、血液样本被送往获得preimmune血清作为阴性对照在免疫印迹分析。仓鼠是皮下注射免疫50gydF4y2BaμgydF4y2Ba克每个抗原/动物,每15天。获得最后一次免疫后,血清抗体滴度测定ELISA和存储−20°C。超免疫血清对CE的单独从兔子和准备根据相同的免疫接种计划。gydF4y2Ba

十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sds - page)gydF4y2Ba
CE的电泳模式和E / S Ag)gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Bacysticerci和绦虫决定雇佣50和15gydF4y2BaμgydF4y2Bag,分别在10% sds - page添加2-mercaptoethanol还原剂(gydF4y2Ba24gydF4y2Ba]。电泳是在MiniProtean II (Bio-Rad)相机在100 V。粗提物的凝胶与考马斯亮蓝染色和E / S Ag silver-stained凝胶。gydF4y2Ba

免疫印迹分析gydF4y2Ba
我们进行了制备10% sds - page使用2gydF4y2BaμgydF4y2Bag蛋白的粗提取物或E / S Ag)和200 ng纯抗原每毫米线性凝胶以及prestained分子量标记(基准prestained蛋白质梯子,英杰公司)。在硝化纤维膜抗原被转移(Hybond-C Amersham生物科学)使用Bio-Rad迷你Transblot设备(100 V / h)在寒冷的。膜是用PBS洗净,切成2毫米宽,并存储在−20°C。gydF4y2Ba

对于特定绦虫抗原的识别,膜与不同提取面对仓鼠感染的血清gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba绦虫和preimmune血清(1:100),以及超免疫仓鼠和兔血清(1:1000)无脂牛奶稀释PBS-Tween 0.3%和5%。膜是孵化1 h在室温下不断搅拌,随后洗5分钟PBS-Tween 0.3%的三倍。第二个peroxidase-conjugated仓鼠或兔子anti-IgG抗体(酶)1:2000稀释下添加和孵化1 h在室温下不断搅拌。膜清洗是以前,抗体绑定到膜开发使用diaminobenzidine (5gydF4y2BaμgydF4y2BaH g / ml)和0.3%gydF4y2Ba2gydF4y2BaOgydF4y2Ba2gydF4y2Ba。抛弃,交叉反应到其他单独膜包含提取物gydF4y2Bat . saginata t . taeniaeformis h . diminutagydF4y2Ba和gydF4y2Ba答:蛔虫gydF4y2Ba测试对相同的血清。乐队获得的膜通过免疫印迹分析一维图像分析软件(gydF4y2Ba柯达数码科学)。gydF4y2Ba

3所示。结果gydF4y2Ba

我们得到一些很多cysticerci从自然感染猪在墨西哥从不同地区获得。很多90年提出,85年,66年,90%的头节外翻,意味着生存能力的比例83%。表gydF4y2Ba1gydF4y2Ba表明,死亡的时候(5周),恢复绦虫在每个不同的数量和长度,平均数量的三个绦虫从每个仓鼠和平均25厘米的长度。恢复绦虫和cysticerci孵化RPMI中补充用抗生素得到E / S Ag)。gydF4y2Ba


Cysticerci很多gydF4y2Ba 仓鼠使用/感染gydF4y2Ba 感染(%)gydF4y2Ba 绦虫恢复(大小)gydF4y2Ba 恢复(%)gydF4y2Ba

1gydF4y2Ba 13/9gydF4y2Ba 69.23gydF4y2Ba 37(10 - 30厘米)gydF4y2Ba 36gydF4y2Ba
2gydF4y2Ba 7/3gydF4y2Ba 42.85gydF4y2Ba 10(20 - 30厘米)gydF4y2Ba 18gydF4y2Ba
3gydF4y2Ba 10/9gydF4y2Ba 90年gydF4y2Ba 37(10 - 30厘米)gydF4y2Ba 46gydF4y2Ba
4gydF4y2Ba 18/15gydF4y2Ba 83.33gydF4y2Ba 52(15 - 40厘米)gydF4y2Ba 36gydF4y2Ba

总gydF4y2Ba 48/36gydF4y2Ba 74.35gydF4y2Ba 134年gydF4y2Ba 34gydF4y2Ba

CE的构成gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Bacysticerci和绦虫观察到10% sds - page沾Coomassie蓝色显示复杂的模式(图非常相似gydF4y2Ba1gydF4y2Ba道2和4),乐队在13至200 kDa之间。相比之下,从silver-stained模式gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba绦虫(巷3)和cysticerci(巷5)E / S Ag)是不同的自己和不同模式获得了CE的绦虫(巷2)和cysticerci(巷4)。的绦虫E / S Ag)、八个乐队从20到170 kDa被观察到,在62 - 78年,48岁,36岁和20 - 24 kDa乐队是截然不同的。cysticerci E / S Ag)的识别是在该地区的30 - 110 kDa,五个不同的乐队64年,50岁,40岁,30日和28 kDa和紧身上衣90 kDa地区(巷5)。gydF4y2Ba

当33仓鼠血清感染gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba对绦虫绦虫(车道1-33)测试gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2BaE / S Ag), 16个乐队不同的分子量很容易区分了13 172 kDa。然而,四个乐队在72年的地区,48岁,36岁和24 kDa公认的81年,81年,90年,和88%,分别。值得一提的是,preimmune血清作为阴性控制(lane−)反应温和20 kDa地区的乐队,这个乐队是丢弃的进一步分析。积极的控制(车道+),超免疫血清anti-tapeworm E / S Ag仓鼠,与乐队20至172 kDa反应强烈,以及与72年,48岁,36岁,30岁,24岁和20 kDa乐队,被仓鼠感染的血清gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba绦虫(图gydF4y2Ba2gydF4y2Ba、表gydF4y2Ba2gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba


乐队(kDa)gydF4y2Ba 血清数量gydF4y2Ba 识别(%)gydF4y2Ba

85年gydF4y2Ba 4(23日,24日,25日,26)gydF4y2Ba 9gydF4y2Ba
80年gydF4y2Ba C + 15 (2、6、8、19、22 - 33)gydF4y2Ba 45gydF4y2Ba
77年gydF4y2Ba C + 23(2、5、6、8、10、12、16、20日,23日,27日29-33)gydF4y2Ba 69年gydF4y2Ba
72年gydF4y2Ba C + 27(2 - 5、7、8、10 - 12、15、16日,像18岁到33岁这样的)gydF4y2Ba 81年gydF4y2Ba
52gydF4y2Ba C + 16(2 - 8, 19-25, 29日,32)gydF4y2Ba 48gydF4y2Ba
48gydF4y2Ba C + 27(2 - 5、7、8、10 - 14, 16岁,19-33)gydF4y2Ba 81年gydF4y2Ba
43gydF4y2Ba 4 (15、18、21、22)gydF4y2Ba 12gydF4y2Ba
36gydF4y2Ba C + 30(1 - 5、7 - 14、16、像18岁到33岁这样的)gydF4y2Ba 90年gydF4y2Ba
30.gydF4y2Ba C + 5 (19、21、24、32、33)gydF4y2Ba 15gydF4y2Ba
27gydF4y2Ba C + 4 (22、23、24、25)gydF4y2Ba 12gydF4y2Ba
25gydF4y2Ba C + 1 (19)gydF4y2Ba 3gydF4y2Ba
24gydF4y2Ba 29岁的C + (1 - 5、7、14、16、17、19-33)gydF4y2Ba 88年gydF4y2Ba
22gydF4y2Ba C + 22(1 - 14, 16 - 20, 26日,27日,31)gydF4y2Ba 66年gydF4y2Ba
19gydF4y2Ba C + 4 (2、5、27、28)gydF4y2Ba 12gydF4y2Ba
17gydF4y2Ba C + 10 (2、5、16、25 - 28、30、32、33)gydF4y2Ba 30.gydF4y2Ba
15gydF4y2Ba 4 (1、2、7,29)gydF4y2Ba 12gydF4y2Ba

免疫印迹的CE的结果gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba绦虫和仓鼠血清感染gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba绦虫表明仓鼠血清公认的乐队在40到160 kDa, 40 kDa乐队是最认可的(27%)。四个乐队(160、100、90、和70 kDa)被公认的3 - 12%的血清。消极的控制(lane−) preimmune血清,没有任何反应,而积极的控制(车道+),一个超免疫血清仓鼠antitapeworm CE、公认的一些乐队在10到170 kDa的范围(图gydF4y2Ba3gydF4y2Ba、表gydF4y2Ba3gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba


乐队(KDa)gydF4y2Ba 血清数量gydF4y2Ba 识别(%)gydF4y2Ba

160年gydF4y2Ba C + 8 10, 26岁gydF4y2Ba 9gydF4y2Ba
One hundred.gydF4y2Ba C + 8、16、20、22gydF4y2Ba 12gydF4y2Ba
90年gydF4y2Ba C +、5、7、10、24gydF4y2Ba 12gydF4y2Ba
85年gydF4y2Ba C +, 5、7、10gydF4y2Ba 9gydF4y2Ba
70年gydF4y2Ba C + 26gydF4y2Ba 3gydF4y2Ba
40gydF4y2Ba C + 11、12、13、15、18、19日,24日,25日,26日gydF4y2Ba 27gydF4y2Ba

另一方面,在仓鼠血清感染gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba绦虫的E / S Ag)gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Bacysticerci,只有四个乐队的150、85、52岁和30 kDa被公认在6日21日9,和27%,分别。应该注意的是,这些乐队和其他19 200 kDa范围也被超免疫血清仓鼠anticysticercus E / S Ag作为积极的控制(车道+)。相反,preimmune血清不承认任何乐队在膜(lane−)(图gydF4y2Ba4(一)gydF4y2Ba、表gydF4y2Ba4gydF4y2Ba(a))。gydF4y2Ba

(一)gydF4y2Ba

乐队(kDa)gydF4y2Ba 血清数量gydF4y2Ba 识别(%)gydF4y2Ba

150年gydF4y2Ba 30岁的C + 32gydF4y2Ba 6gydF4y2Ba
85年gydF4y2Ba 32岁的C + 5次33gydF4y2Ba 21gydF4y2Ba
52gydF4y2Ba 27岁的C + 28、29gydF4y2Ba 9gydF4y2Ba
30.gydF4y2Ba C + 1、3、12、14、18、20、26日,30日,33gydF4y2Ba 27gydF4y2Ba

(b)gydF4y2Ba

乐队(kDa)gydF4y2Ba 血清数量gydF4y2Ba 识别(%)gydF4y2Ba

175年gydF4y2Ba C + 32gydF4y2Ba 3gydF4y2Ba
120年gydF4y2Ba C +, 33岁gydF4y2Ba 3gydF4y2Ba
95年gydF4y2Ba C + 20 30gydF4y2Ba 6gydF4y2Ba
85年gydF4y2Ba C + 20 30gydF4y2Ba 6gydF4y2Ba

cysticerci CE抗原用于膜时,只有三个仓鼠血清感染gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba绦虫的反应与175、120、95和85 kDa乐队,这代表承认3,3、6和6%,分别。Preimmune (lane−)仓鼠血清不与任何组件的CE cysticerci反应。积极控制(车道+)承认膜乐队在10到200 kDa,显示出强烈的反响与95年,85年,70年,60岁,45岁,30岁,20日和13 kDa乐队(图gydF4y2Ba4 (b)gydF4y2Ba、表gydF4y2Ba4gydF4y2Ba(b))。gydF4y2Ba

因为仓鼠血清感染gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba绦虫经常承认乐队在85、90、29 kDa地区和因为AgB P29抗原位于这些区域,并已用于囊虫病、包虫病的诊断(gydF4y2Ba25gydF4y2Ba,gydF4y2Ba26gydF4y2Ba),我们进行了使用33仓鼠血清感染免疫印迹gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba与这些蛋白质的绦虫gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba。百分之九十六的仓鼠感染血清公认的85年和95年kDa乐队在不同强度和显示轻微的反应,一些乐队低于这个范围(图gydF4y2Ba5(一个)gydF4y2Ba相同),而血清显示有28%承认29 kDa乐队(图gydF4y2Ba5 (b)gydF4y2Ba)。超免疫anti-AgB anti-P29血清,作为积极的控制,特别是认识到85年和95年(抗原B)和29 kDa(第29页抗原)乐队,以及其他低体重乐队可能代表这些抗原的降解产物。gydF4y2Ba

免疫印迹试验的结果与CE单独显示两个仓鼠血清感染gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba绦虫承认一群大约100 kDa的CEgydF4y2Bat . saginatagydF4y2Ba(图gydF4y2Ba6(一)gydF4y2Ba)。在CEgydF4y2Bat . taeniaeformisgydF4y2Ba我们观察到,三个血清反应与一群大约100 kDa识别(图显示9%gydF4y2Ba6 (b)gydF4y2Ba)。在的情况下gydF4y2Bah . diminutagydF4y2Ba血清反应主要与乐队在100年,81年,50 kDa区域(图gydF4y2Ba6 (c)gydF4y2Ba)。此外,只有一个血清公认的乐队在80年和100年kDa CE的地区gydF4y2Ba蛔虫lumbricoidegydF4y2Ba年代(图gydF4y2Ba6 (d)gydF4y2Ba)。preimmune仓鼠(数据没有显示)和兔血清作为消极的控制(lane−)没有显示在这些单独的膜与CE反应;相比之下,超免疫兔血清(车道+)对CE单独识别乐队在20和172 kDa范围,当对CE测试gydF4y2Bat . saginatagydF4y2Ba,gydF4y2Bat . taeniaeformisgydF4y2Ba,gydF4y2Bah . diminutagydF4y2Ba和gydF4y2Ba答:蛔虫。gydF4y2Ba

4所示。讨论gydF4y2Ba

的持续威胁公共卫生由NCC,人们进行了无数次研究开发更好的和更便宜的诊断方法gydF4y2Ba27gydF4y2Ba]。目前,有不同的血清学方法,采用ELISA和免疫印迹gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba囊尾幼虫糖蛋白孤立与gydF4y2Ba镜头culinarisgydF4y2Ba或其重组。这些方法在血清(敏感性98%,特异性100%gydF4y2Ba28gydF4y2Ba,gydF4y2Ba29日gydF4y2Ba]。相比之下,诊断绦虫病没有得到同样的关注。有几个原因:绦虫病仍然经常被主机自识别症状通常是轻微的,不具体的,和高风险处理绦虫鸡蛋(gydF4y2Ba1gydF4y2Ba,gydF4y2Ba30.gydF4y2Ba]。消除接触人类粪便污染的风险gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba鸡蛋,我们使用了绦虫病模型黄金仓鼠。这模型是安全的,因为开发的绦虫仓鼠的肠不达到性成熟和不产生感染性鸡蛋gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba,gydF4y2Ba31日gydF4y2Ba]。表gydF4y2Ba1gydF4y2Ba表明,在免疫抑制动物感染8 cysticerci,建立了寄生虫的利率是34.89%,与变量永久在5周的感染,速度是符合之前的出版物(gydF4y2Ba31日gydF4y2Ba,gydF4y2Ba32gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

10% sds - page分析表明,所有分数存在很大的复杂性。CE,我们观察到类似的模式表现为囊尾幼虫和绦虫乐队在13至200 kDa。相反,我们观察到的差异条带模式E / S Ag囊尾幼虫和绦虫。绦虫的E / S Ag), 12 13至110 kDa杰出的乐队,和这些结果是类似报道威尔金斯和同事gydF4y2Ba17gydF4y2Ba),确定大约16乐队。囊尾幼虫E / S Ag),我们发现乐队在13至172 kDa范围,与64年截然不同的乐队,54岁,46岁和30 kDa。这些数据也符合先前发现的13日至19日乐队中描述囊尾幼虫E / S Ag) (gydF4y2Ba33gydF4y2Ba,gydF4y2Ba34gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

膜含有免疫印迹分析gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba绦虫E / S Ag)面对33仓鼠血清感染gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba绦虫指出了四种抗原的72年,48岁,36岁和24 kDa承认81,81,90,和88%,分别。威尔金斯和同事(gydF4y2Ba17gydF4y2Ba)表明,血清gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Batapeworm-infected病人面对成年阶段E / S Ag)检测到32.7和37.8 kDa的两个乐队。37.8 kDa乐队比赛36 kDa乐队确定本文的仓鼠血清感染gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba绦虫和可能对应于相同的抗原。gydF4y2Ba

确定特异性识别的乐队,我们进行了免疫印迹分析面临的仓鼠血清感染gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba绦虫cysticerci E / S Ag)和CE cysticerci和绦虫gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba显示四个乐队承认,150年,85年,52岁和30 kDa, 30 kDa乐队显示识别的比例最高(27%)。这个乐队不匹配的乐队确定仓鼠血清感染gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba绦虫绦虫E / S Ag)。此外,仓鼠血清感染gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba绦虫经常承认两个其他的乐队在不同强度和对应于一个95 - 85 kDa乐队的cysticerci CE和29 kDa乐队的E / S Ag cysticerci和绦虫。这些乐队与两个著名的囊虫病诊断抗原和包虫病,AgB和第29页gydF4y2Ba25gydF4y2Ba,gydF4y2Ba26gydF4y2Ba]。然而,这些特定的诊断抗原不推荐gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba,因为他们都是出现在其他单独gydF4y2Ba26gydF4y2Ba,gydF4y2Ba35gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

在本文中,我们观察到仓鼠血清感染gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba绦虫从公元100 kDa采取温和的反应gydF4y2Bat . saginatagydF4y2Ba,gydF4y2Bat . taeniaeformis h . diminutagydF4y2Ba和gydF4y2Ba答:蛔虫gydF4y2Ba。然而,有报道称缺乏交叉反应gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba绦虫E / S Ag)和人类血清和其他寄生虫感染,包括gydF4y2Bat . saginatagydF4y2Ba(gydF4y2Ba17gydF4y2Ba,gydF4y2Ba27gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

值得一提的是,tapeworm-infected仓鼠,不管是否免疫抑制,产生抗体gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba第一周的感染和浓度增加感染延长最终减少蠕虫驱逐后(gydF4y2Ba32gydF4y2Ba,gydF4y2Ba36gydF4y2Ba]。这表明这些乐队(72年,42岁的36岁和24 kDa)可以用来检测血清抗体人类绦虫以及产生抗体,检测样品绦虫病的患者。此外,这些乐队的重组形式可以改善的建议方法诊断绦虫病(gydF4y2Ba17gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

人类是唯一的终宿主gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba绦虫,因此负责导致人类和猪囊虫病(gydF4y2Ba6gydF4y2Ba,gydF4y2Ba18gydF4y2Ba]。它也知道,人类可以很容易接受这种antihelminthic寄生虫病的药物,如吡喹酮和阿苯达唑(gydF4y2Ba12gydF4y2Ba,gydF4y2Ba37gydF4y2Ba,gydF4y2Ba38gydF4y2Ba]。因此,进一步的研究应该从人类患者血清进行绦虫病或在流行地区来确定这些抗原可能是候选人的具体检测gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba绦虫病。在发展中国家,taeniasis-cysticercosis是一种流行疾病,仍然是一个重要的公共卫生问题,必须有可靠的屏幕数量和廉价的诊断工具,主要测量控制和根除计划(gydF4y2Ba5gydF4y2Ba,gydF4y2Ba38gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

5。结论gydF4y2Ba

我们确定了四个特定的抗原gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba绦虫E / S Ag)中有用的检测绦虫的仓鼠,它在人类的诊断可能会有用gydF4y2Bat .绦虫gydF4y2Ba绦虫病。gydF4y2Ba

确认gydF4y2Ba

本研究支持Consejo Nacional de Ciencia y Tecnologia CONACyT(合同80134 - m)和Direccion de Asuntos del个人Academico自治(DGAPA-PAPIIT合同在207507 - 3)。作者感谢博士Kaethe Willms帮助修改论文。gydF4y2Ba

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