铕掺杂纳米羟基磷灰石的容易合成，表征和细胞毒性活性

摘要

本研究的目的是使用简单的含水沉淀法合成铕掺杂的纳米羟基磷灰石，然后表征和浸渍具有5-氟尿嘧啶的选定样品，以探索该材料的性能和释放能力。纳米羟基磷灰石掺杂有3,5,10和20wt％的铕。在将其在80℃干燥并在120℃下在12小时后处理后，将得到的样品表征。通过透射电子显微镜，X射线衍射分析，傅里叶变换红外光谱和光致发光来分析样品。此外，在PBS中评估5-氟尿嘧啶的浸渍和释放。使用人成纤维细胞（HGF-1）对所有样品的毒性效应进行研究（HGF-1）体外．晶粒尺寸约为10 ~ 70 nm，形态不规则，呈羟基磷灰石JCPDS卡9-0432相。毒性实验结果表明，掺杂和未掺杂的粉末与成纤维细胞具有生物相容性。羟基磷灰石样品掺杂5%铕，负载5-氟尿嘧啶60分钟后，在PBS中释放近7mg /L的药物，24小时后降低HeLa细胞的活力。

1.介绍

纳米结构材料在生物医学应用中具有不可替代的作用，在过去的几年里，人们对纳米结构材料的兴趣日益增长[1］.羟基磷灰石（HAP），具有化学计量CA的组成_10.(PO₄）₆(哦)₂Ca/P = 1.67，是牙齿的主要无机成分[2，3.]化学和结构上与骨骼的矿物部分相似[4］.由于HAP具有生物相容性、骨传导性、无毒和非炎症性等特性，它已被研究成为多种药物分子的药物传递系统。研究表明，羟基磷灰石纳米颗粒(nHAP)本身对不同类型的肿瘤具有抑制作用[5，6］.

目前，多功能纳米结构系统的合成和发现为提高治疗效率提供了前景。因此，开发新型多功能纳米结构系统是一项迫切需要体内成像和治疗[7］.Hap纳米结构可能是生物体和药物递送的理想候选者。对生物医学应用的双重或多功能HAP系统的调查已成为一个趋势主题[8］.

目前，由于其潜在的生物医学应用，稀土的无机发光纳米颗粒已经获得了大量普及。最重要的应用可以在制药行业或生物和医学诊断中找到。在这种情况下，发光剂，具有很大的生物相容性，是植入，造膜学和临床应用的理想选择[9］.材料的掺杂是一种技术，包括在其他材料的晶体结构中包含杂质。羟基磷灰石的掺杂是可能的，因为如已知的，铕化学反应性与钙的相似[10.］.Ciobanu等[11.报道，在低温下合成在低温下合成的掺杂羟基磷灰石纳米颗粒，原子比Eu /（Ca + Eu）= 1％，2％，10％和20％和椭圆形形态。杨等人。[12.通过通过简单的微乳液介导的方法合成具有多种态形态的纳米粒化颗粒，辅助微波加热，并据报道，通过改变初始溶液中的pH值，可以通过改变pH值来调整所制定的样品的形态和粒径。另一方面，Graeve等人。[13.通过燃烧合成制备铕掺杂的羟基磷灰石和钙缺乏羟基磷灰石，并获得具有相似的微晶尺寸，粒度和形态的样品，但样品之间的发光行为不同。汉等人。[14.超声辅助沉淀法合成了铕掺杂羟基磷灰石;结果表明，Eu:HAP的发光性能随着热处理和Eu含量的增加而增强。Escudero等人[15.]制备了掺杂铕的羟基磷灰石，并在180℃下用聚丙烯酸PAA对其进行了一锅微波辅助水热法功能化，形成了新的体系形态。他们获得了多晶纳米粒子，呈纺锤形，主要尺寸为191 × 40纳米。虽然已经报道了一些掺杂铕的羟基磷灰石纳米粒子，但这些材料还没有被真正测试用于口腔成纤维细胞(HGF-1)和HeLa细胞，以及作为化疗药物释放系统来展示它们的潜在应用。Chen等报道了治疗用Eu的合成³⁺/ FE.³⁺双掺杂的羟基磷灰石纳米颗粒，无需高温煅烧和具有优异的荧光特性，但它们没有对口腔细胞进行这些颗粒[16.］.

如据报道并由Perera等人讨论，通过具有高温煅烧的共沉淀法的合成纳米颗粒引起了制备纳米羟基磷灰石的更多关注;在本报告中，Perera等人。提及几种作品报告磷灰石材料的合成掺杂有优异的荧光特性，但由于获得结晶粉末所需的高煅烧温度，微米尺寸为微米尺寸[17.］.微波辅助合成是克服使用高温煅烧过程的优异选择，但仍需要更简单的过程[18.］.

5-氟尿嘧啶(5FU)是一种血浆半衰期相对较短(10-20分钟)的抗肿瘤药物，由于其生物制药和药理特性，常用于治疗不同的实体肿瘤[10.］.它属于细胞毒性抗癌药物，具有攻击健康和癌细胞的有害副作用，这仍然抑制了它们的使用，尽管其对破坏癌细胞的有效性[10.］.

本研究的主要目的是使用简单的含水沉淀法合成铕掺杂的纳米羟基磷灰石，然后用5-氟尿嘧啶表征和浸渍选定的样品，以探讨该材料的性能和释放能力。使用X射线衍射分析（XRD），透射电子显微镜（TEM），能量分散X射线光谱（EDS），傅里叶变换红外光谱（FTIR），以及光致发光（PL）的制备的纳米材料。使用口服成纤维细胞和HELA细胞进行活力和药物释放试验。

2。材料和方法

2.1。羟基磷灰石纳米粒子的合成

通过湿化学沉淀法合成纳米颗粒。为了达到此，50ml 0.3M磷酸铵溶液[NH₄H₂宝₄在磁搅拌下滴加至50ml硝酸钙四水合物[Ca（不_3.）₂4 h₂O]采用不同量的铕（III）硝酸水合物[EUN_3.O₉-H₂o]（有关详细信息，请参阅表1）。一旦完全加入磷酸铵，氢氧化铵溶液[NH₄哦]加入将pH加入到10中。然后将形成的沉淀物在24小时后，用去离子水洗涤五次，以除去所有不期望的成分。在24小时内在80℃下在80℃下干燥纳米颗粒，然后在高压釜中在120℃下热处理3小时。将沉淀物在80℃下干燥，另外24小时，最后获得白色粉末。

2．2.描述

2.2.1。X射线衍射（XRD）

使用粉末记录XRD图案，并用以集成模式操作的GBC-Difftech MMA衍射仪进行记录。在2中扫描了图案θ.10-80°的范围，台阶尺寸为0.02°。镍过滤Cu K.α.（λ.= 1.54)辐射强度为34.2 mA和35 kV。使用MAUD软件对所有样品进行Rietveld细化[19.］.

2.2.2。透射电子显微镜（TEM）和元素分析（EDS）

TEM（JEOL JEM-1230）成像的样品由去离子水中的纳米颗粒悬浮液制备。将一滴纳米颗粒溶液置于200目铜网上，然后在环境条件下在显微镜上附着在样品架之前干燥样品，并在100kV的加速电压下观察。

2.2.3。傅里叶变换红外光谱（FTIR）

粉末中存在的官能团通过FTIR（Shimadzu，IradyInity-1）鉴定。一定量的纳米粉末在设备中并沉积，并且谱的范围为400-4000厘米¹分辨率为2厘米⁻¹使用衰减的全反射（ATR）方法200次扫描。

2.2.4。光致发光（PL）

使用USB4000分光光度计（海洋光学）观察PL;使用光纤用固态连续激光（532nm，100mW）激发粉末样品。

2.3。细胞培养

在37℃和5％二氧化碳中使用补充有20％的胎儿牛血清的DMEM，在潮湿的室中培养成纤维细胞（HGF-1）。使用含有胰蛋白酶的缓冲盐水溶液，在80％的汇合下胰蛋白酶蛋白化。然后，将细胞转移到96孔培养板上 cells per well and incubated for 24 hours to allow attachment [20.］.

2.3.1。细胞活力（MTT测定）

使用MTT测定评估成纤维细胞的可行性。简而言之，将成纤维细胞用Ha和Hapeu悬浮液以三份以不同浓度的浓度进行处理，以三份和48小时。Hela细胞仅在Hapeu5％+ 5Fu含量为24和48小时。此后，将重构的MTT加入到等于培养基体积的10％的量。将培养物返回培养箱4小时。在孵育期后，通过将相等量的MTT溶剂作为原始培养基体积加入相应的MTT溶剂，从培养箱中除去培养物中除去培养物。最后，使用在570nm（imark，微孔板吸光度读取器，BioRad）的微孔板读取器测量光密度。

2.4。药物储存/释放系统的制备

选择5-氟尿嘧啶作为模型药物。在室温下加入0.5g Hapeu5％样品，以氟尿嘧啶浓度为250mg / L的氟尿嘧啶浓度，并在连续搅拌下浸泡24小时。通过离心作用分离氟尿嘧啶的Hapeu5％样品，然后在80℃下干燥24小时。然后，使用2MPa的压力，将粉末在盘（各，直径10mm）的磁盘（各，直径10mm）中压缩。在药物释放实验中，将每个盘在37℃下浸入50ml PBS中，振荡摇动。将2ml溶液在265nm下取出紫外 - 可吸收光谱分析，以给定的间隔测量释放的5-氟尿嘧啶的量。

3。结果与讨论

3．1.描述

数字1显示纯HAP和Hapeu样本的XRD模式。发现了HAP的典型衍射峰;它们可以被索引为标准数据（JCPDS编号09-0432）和纯六边形阶段（P6_3./ m空间组）。在Hapeu样品中，HAP的特征衍射峰仍然存在;一般而言，当铕浓度增加时，这些数据显示出对强度的递减，表明掺杂抑制了HAP晶体生长。Rietveld改进的结果呈现在表中2；我们可以看出，将对铕原子的掺入到Hap的晶体结构中，如预期改变了细胞参数;小区参数C的值减小，而A的值的变化是随机的。

在我们的工作中，XRD峰的强度随着补充的数量而降低了XRD峰的强度;也许这种趋势与欧盟的样品在3％和5％的样品之间没有很好地理解，因为欧盟数量的差异不够大，但趋势仍然存在。Ciobanu等[11.]在制备铕型羟基磷灰石纳米晶体粉末时报道了类似的结果，并报道了具有0.01和0.02的铕的样品，从XRD的角度来看，未掺杂的羟基磷灰石;他们还发现峰值的相对强度随着铕浓度的增量而降低（0.1,0.2）。另一方面，杨等人。[12.]发现，在合成方法中，衍射峰的相对强度随着pH值的增加而增加(7,9,12);这种关系可以归因于样品结晶度的提高。在我们的工作中，我们建议pH值为10，因为它允许我们获得具有最佳结晶度、形状和尺寸的纳米粉体。进行了Rietveld分析。

可以在图中观察到TEM图像2．纯HAP(图2(一个)）由各种形态和10-50nm组成。Hapeu纳米粒子（数字2（b），2（c），2（d）， 和2（e）)呈棒状形态，粒径10-50 nm。这里值得一提的是，我们的纳米颗粒经过水热处理后，具有了明确的尺寸和形态。André等[21.]在室温下获得HA和EU掺杂的HA粉末，并在140℃下将它们提交至微波水热法处理（HTMW），对于0,1,20或40分钟，发现具有六边形结构的相位;它们还验证了在不同时间在140℃下的HTMW处理改善了HA的结晶过程与室温下获得的样品相比。Xuan等人还报道了使用水热处理以改善或改变羟基磷灰石纳米粒子的形态。[22.];它们改变了长度长达500nm的长度纳米线形态，直径小于50nm至纳米棒形态。Silva等人。[23.]报道约27nm的纳米颗粒而没有热处理，施加1200℃的温度时，163nm;然而，形状不规则，没有热处理。

我们提出的更容易的合成方法允许我们获得具有更适合于生物医学应用的尺寸和形状的羟基磷灰石纳米颗粒（蜂窝摄取需要70 nm和球形的尺寸）[16.］.

EDS光谱（图2（b），2（c），2（d）， 和2（e）)确认Ca、P和Eu的存在。完整的EDS结果如表所示1；我们可以看出(Ca+Eu)/P关系接近于报道的缺钙羟基磷灰石[24.］.

HAP和HAPEu样品的红外光谱如图所示3.．所有样品均在3570厘米处显示出吸收带⁻¹由于延伸。频段范围为1000-1100厘米⁻¹表明多面体的特征分子结构在磷灰石晶格中。的信号可在1527和2300厘米处观测到⁻¹乐队;它的存在是由于大气的吸附在成熟的时候。这种现象可以归因于溶液中的高碱性条件，其中有足够的OH^-与反应的离子．Iconaru等。[25.报道了1090和1040厘米约为2090和1040厘米的类似乐队⁻¹这可以归因于团体;此外，他们观察到，当样品中的铕浓度增加时，对应于磷酸盐带的面积的贡献降低。

数字4显示在室温下测量的纳米颗粒的光致发光。四个发射峰出现在约590,615,650和699nm。可以观察到光致发光随着欧盟的浓度而增加³⁺．正如预期的那样，HAP样品不具有光致发光特性。Sun等人[26.]报告了类似的结果;样品在592和617处出现了两个发光峰，发现随着Eu/(Eu + Ca)的摩尔比增加到0.5%、1%和5%，发光强度增加，且发射光谱没有明显改变。Chen等[5]研究了欧盟浓度的影响³⁺和Gd³⁺实验表明，掺杂剂浓度对发光峰的影响不大，但随掺杂浓度的变化，发光强度发生变化。在394 nm激发下，在590、615、650和699 nm处出现了4个发光峰。PL发射强度随Eu浓度的增加而增加^3.是增加了。

3.2。MTT测定

数字5显示MTT测定结果。将成纤维细胞与HAP样品一起温育，并在500,1000和2000时用五种不同的Hapeu样品进行孵育 μ.克/毫升。在孵育24和48小时后评估MTT测定。实验显示（图5)， HAPEu10%样品在24和48小时的存活率最低。另一方面，HAPEu5%样品在24和48小时的细胞毒性较其他样品低，且与对照组结果相似;也就是说，这个样本的细胞毒性非常低。这些结果允许我们决定使用HAPEu5%样品进行5FU的实验。数字6显示用Hap处理的口腔成纤维细胞（HGF-1）的形态（图6（a））和Hapeu10％纳米颗粒。治疗后，不欣赏形态和规模的变化。这项工作的可生存能力基于MTT测定;该测定与细胞的代谢变化有关。数字6报告细胞形态的变化;这些技术是补充，并不总是同意;这可能是Hapeu10％对图中未观察到细胞活力的影响的原因6．这些结果与Naderi等人报告的结果不同。[27.];它们在24,48,72小时以2至0.002mg / ml测试不同浓度的纳米羟基磷灰石（HgF-2）。他们得出结论，在24小时后，高剂量的纳米羟基磷灰石对牙龈衍生的成纤维细胞具有细胞毒性作用;即使在高剂量的材料中，我们的样品也较低。由于其最低细胞毒性，仅在500,1000和2000的浓​​度下，仅在Hapeu5％和5Fu中孵育HeLa细胞。 μ.克/毫升。对成纤维细胞采用同样的方法，我们观察到在最初24小时内活力下降，在48小时后活力上升。Wei等人[28.]同意我们的结果，在HAP纳米粒子不仅抑制增殖，而且诱导HeLa细胞的凋亡，并且可以为治疗肿瘤提供依据。胡等人。[6]证明了HAP材料在兔子中治疗肿瘤的能力;我们的材料在这种治疗中可能更潜力，因为它具有较低的粒径。

3.3。释放5FU.

还研究了在HAP和Hapeu浸渍的5FU的PBS中的药物释放行为。数字7显示在一小时内PBS中两种药物递送系统（片剂）的药物释放曲线。可以看出，HAP和Hapeu5％具有5-氟尿嘧啶的上释放速率。据报道，在80℃下在80℃下具有甜甜圈形状的微颗粒的药物释放行为，并揭示了在保持在生理温度（37℃）的缓冲液溶液中的5Fu的快速释放率;然而，与我们的合成相比，粒子呈现较少的结晶度，以及我们样本的药物递送能力Hapeu5％+ 5-FU更好[10.］.吉等人。[29.[还报道了羟基磷灰石纳米棒的合成并获得了良好的药物递送系统，因为5-氟尿嘧啶释放时间延长至24小时，比药物10-20分钟的生物半衰期要长得多;然而，在对骨髓干细胞的材料进行测试时，它结果在集中时，它会产生高度毒性，使其比我们更潜在的材料。

4。结论

我们报道了一种简单的水化学方法，制备具有良好结晶度的欧磷酸盐粉末，窄尺寸分布，粒径为10-70nm;这些纳米颗粒在590,615,650和699nm处存在强大的荧光。制备的样品在24至48小时孵育后，在口腔成纤维细胞上显示出低细胞毒性;活力是Hapeu10％样品中最低的。Hapeu5％+ 5Fu药物递送系统在24小时后将活力降低到20％的HeLa细胞。在释放5-氟尿嘧啶（5FU）药物时，该材料具有良好的行为。这些独特的属性使其成为可能的口服生物医学应用的理想材料。

利益争夺

提交人声明他们没有竞争利益。

致谢

这项工作得到了Consejo Nacional de Ciencia YTecnología（Conacyt Grant CB-169020），Prodep 2015（Grant DSA / 103.5/15/6988），以及FondoDe reCorsos并发（授予C13-FRC-01-12.12）。Paulina-Guadalupe Miranda-Meléndez将感谢Conacyt与奖学金没有。350365/237601。Programa Para El Desarrollo ProfeSional Docente Para El Tipo Superior（Prodep 2015）提出了对处理费用的财政支持。

参考

1. G. M. Cunniffe, F. J. O'Brien, S. Partap, T. J. Levingstone, K. T. Stanton，和G. R. Dickson，“使用新型分散剂辅助沉淀法合成和表征纳米羟基磷灰石”，生物医学材料研究杂志第95卷第1期4，页1142-1149,2010。查看在：谷歌学术
2. H. Monma和T.Kamiya，“通过黑铅水解的水解制备羟基磷灰石”材料科学杂志，卷。22，没有。12，pp。4247-4250,1987。查看在：出版商网站|谷歌学术
3. S.V.DOROZHKIN和M. EPPLE，“磷酸钙的生物学和医学意义”，《应用化学国际版》，卷。41，没有。17，pp。3130-3146，2002。查看在：出版商网站|谷歌学术
4. S. Bose和S.K.Aha，“通过乳化技术合成和表征羟基磷灰石纳米粉末，”材料化学，第15卷，第5期。23，页4464-4469,2003。查看在：出版商网站|谷歌学术
5. X.陈，C.邓，科唐，张，张，“纳米氏菌染发剂在人胃癌SGC-7901细胞中诱导的线粒体依赖性细胞凋亡”生物和药物公报，卷。30，没有。1，pp。128-132,2007。查看在：出版商网站|谷歌学术
6. j . Hu Z.-S。刘,S.-L。唐,Y.-M。He，“羟基磷灰石纳米颗粒对兔移植肝VX2肿瘤生长和p53/c-Myc蛋白表达的影响”，世界胃肠病学杂志，第13卷，第2期20，pp。2798-2802,2007。查看在：谷歌学术
7. K. Park，S. Lee，E.Kang，K.Kim，K.Choi，以及I. C. kwon，“癌症成像和治疗的新一代多功能纳米粒子”，先进的功能材料，卷。19，没有。10，pp。1553-1566，2009。查看在：出版商网站|谷歌学术
8. P. P. Yang，Z.W.Quan，C. X.LI，X. J.Kang，H.Z.IAN和J.Lin，“生物活性，发光和中美铕掺杂的羟基磷灰石作为药物载体”生物材料，第29卷，第2期32，第4341-4347页，2008。查看在：出版商网站|谷歌学术
9. A. Doat, F. Pellé，和A. Lebugle，“铕掺杂焦磷酸钙:同素异形体和光致发光特性”，固体化学杂志，卷。178，不。7，pp。2354-2362,2005。查看在：出版商网站|谷歌学术
10. C. Srinivasa Rao, K. Upendra Kumar, and C. K. Jayasankar， " Eu的发光性质³⁺在磷酸盐的生物活性玻璃中的离子，“固体科学，第13卷，第2期6, pp. 1309-1314, 2011。查看在：出版商网站|谷歌学术
11. C. S. Ciobanu, S. L. Iconaru, F. Massuyeau, L. V. Constantin, A. Costescu，和D. Predoi，“铕掺杂羟基磷灰石纳米粉体的合成、结构和发光性能”，《纳米材料，卷。2012年，第942801号，9页，2012。查看在：出版商网站|谷歌学术
12. Wang W. et al.，“Synthesis and characterization of Eu-doped hydroxyapatite by microwave - assisted microemulsion process，”固体科学，卷。11，不。11，pp。1923-1928,2009。查看在：出版商网站|谷歌学术
13. O. A. graves, R. Kanakala, A. Madadi, B. C. Williams，和K. C. Glass，“Eu掺杂羟基磷灰石的发光变化²⁺和欧盟³⁺离子，“生物材料，卷。31，不。15，pp。4259-4267，2010。查看在：出版商网站|谷歌学术
14. 韩颖，王昕，李士生，“纳米羟基磷灰石掺杂铕的生物荧光探针，”目前的纳米科学，卷。6，不。2，pp。178-183,2010。查看在：出版商网站|谷歌学术
15. A. Escudero，M. E.Calvo，S. Rivera-Fernández，J.M. de La Fuente和M.Socaña，“微波辅助合成的生物相容性铕掺杂钙羟基磷灰石和氟磷灰石发光纳米汀类化合物，”丙烯酸），“朗缪尔，第29卷，第2期6，PP。1985-1994,2013。查看在：出版商网站|谷歌学术
16. M.-h.Chen，T. Yoshioka，T.Ikoma，N. Hanagata，F。 -林和J. Tanaka，“Theranostic Eu的光致发光和掺杂机制³⁺/ FE.³⁺双掺杂的羟基磷灰石纳米颗粒，“高级材料科学与技术，第15卷，第5期。5，第2014号物品ID 055005,2014。查看在：出版商网站|谷歌学术
17. T.S.H.Perera，Y. Han，X. Lu，X. Wang，H. Dai和S. Li，“稀土掺杂磷灰石纳米材料的生物应用”，“《纳米材料文章编号705390,6页，2015。查看在：出版商网站|谷歌学术
18. F. Chen，P. Huang，Y.-J.朱，J.Wu，C.-1.张和d.-x.CUI，“多功能欧盟的光致发光，药物递送和成像性质³⁺/ gd.³⁺双掺杂的羟基磷灰石纳米棒，“生物材料，卷。32，不。34，pp。9031-9039，2011。查看在：出版商网站|谷歌学术
19. L. Lutterotti, S. Matthies, h - r。温克，A. S. Schultz，和J. W. Richardson Jr.，“利用飞行时间中子衍射谱对变形石灰岩的结构和结构综合分析”，应用物理学杂志第81卷第1期2，第594-600页，1997。查看在：出版商网站|谷歌学术
20. S. Pasquini, M. De Rosa, V. Pedani等，“对4-喹诺酮-3-羧酸基序的研究。4.对具有不同替代模式和抗小鼠痛觉过敏作用的大麻素2受体的新有效和选择性配体的鉴定，”医药化学杂志，卷。54，没有。15，pp。5444-5453，2011。查看在：出版商网站|谷歌学术
21. R.S.André，大肠杆菌，M.F.C.Gurgel等人，“通过光致发光排放监测的欧氏羟基磷灰石纳米棒的结构演变”合金与化合物杂志，卷。531，pp。50-54,2012。查看在：出版商网站|谷歌学术
22. T.-c.Xuan，N. N. Trung，V.-h。PHAM，“铕掺杂羟基磷灰石纳米粒子通过共沉淀和水热法”的比较表征，“国际光电子光学杂志，卷。126，没有。24，pp。5019-5021,2015。查看在：出版商网站|谷歌学术
23. 引用本文:张志刚，张志刚等，“铕掺杂羟基磷灰石:激发波长对Eu的影响³⁺羟基磷灰石的发光，“材料科学论坛，卷。820，pp。335-340,2015。查看在：出版商网站|谷歌学术
24. O.Kaygili，S.Keser，M. Kom等，“锶取代的羟基磷灰石：合成和测定它们的结构性质，体外和体内性能，”材料科学与工程：C，卷。55，pp。538-546,2015。查看在：出版商网站|谷歌学术
25. S.-L.ICONARU，M. MOTELICA-HEINO和D. PERVOI，“通过傅里叶变换红外光谱和抗菌性能研究铕掺杂的羟基磷灰石纳米粒子的研究及其抗菌性能”光谱学杂志，卷。2013年，第284285号，10页，2013年。查看在：出版商网站|谷歌学术
26. 孙勇，杨华，陶德华，“水热法制备稀土掺杂羟基磷灰石纳米颗粒，”陶瓷国际，卷。37，不。7，pp。2917-2920，2011。查看在：出版商网站|谷歌学术
27. N.J.Naderi，R. Yaraee，D. Jamali和M.B.Rezvani，“纳米羟基磷灰石的细胞毒性，纳米羟基磷灰石上的甘胺衍生的成纤维细胞系（HGF2）：体外研究”双月刊官方出版物医疗Daneshvar，卷。19，没有。99，第79-86,2012。查看在：谷歌学术
28. F.-x.魏，J.-B.罗，X.-c。孟和X.-S.鲁，羟基磷灰石纳米颗粒诱导Hela细胞凋亡，黑龙江医药和药房，2005。
29. 吴国栋，“不含有机修饰物的羟基磷灰石纳米棒的合成及其对5-氟尿嘧啶的释放性能”，《中国科学(d辑)》，材料科学与工程：C， vol. 57, pp. 14-23, 2015。查看在：出版商网站|谷歌学术

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