文摘
烯烃的氧化裂解是经典由化学方法,尽管他们显示几个缺点。臭氧分解需要艰苦的条件下(−78°C,一个安全的过程)和减少试剂摩尔量,而使用有毒重金属如铬,操作系统,或俄文另外饱受低收率和选择性催化剂。相反,血红素和nonheme酶可以催化氧化烯烃裂解在环境温度和大气压力水缓冲区,显示了较好的化疗在某些情况下,区域选择性。本文关注的是烯烃裂解催化了铁cofactor-dependent酶包括反应机制(众所周知的情况),这些酶在生物催化中的应用。
1。介绍
烯烃是一个被广泛使用的氧化裂解法在合成化学,尤其是引入氧功能分子,移除保护组和降低大分子。此外,大量的生物活性化合物的合成涉及烯烃裂解是一个关键步骤。臭氧分解是最采用化学方法,使烯烃裂解,因为它被认为是最有效的、最干净的。然而,臭氧分解需要低温等恶劣环境(ca−78°C),因此实施特殊设备的使用(例如,ozoniser)和减少试剂的摩尔量检查(1]。此外,在大规模的安全隐患复杂化这个反应,从爆炸已报告严重事故2,3]。替代协议设想有毒重金属如铬的使用,操作系统,或俄文饱受平庸的收益率和选择性4- - - - - -6]。相反,酶可以激活最无害的氧化剂,即分子氧,和催化烯烃裂解水缓冲环境温度和大气压力。除此之外,在某些情况下酶能够打通烯功能高化疗,特定选择的方式允许生物催化与化学方法(7- - - - - -9]。
否则,在过去的十年中天然产物的日益普及引发了非凡的研究活动有关的使用生物催化生产风味化合物(10]。事实上,产品来自自然基质的生物过程(即。,using wild-type microorganisms or isolated enzymes thereof) are defined as natural. The tag natural was one of the main reasons for seeking biochemical routes to high-priced natural flavours such as vanillin, and nowadays biocatalysis constitutes a convenient alternative to synthesise them.
本文关注的是烯烃裂解催化了铁cofactor-dependent酶包括反应机制(众所周知的情况),这些酶在生物催化中的应用。在血红素氧化酵素是检查,第一部分的烯烃裂解主要是淫乱活动。在第二部分血红素和nonheme加氧酶进行了讨论,为一个更详细的调查有关的反应机制可在文学。
2。由血红素氧化酵素烯烃裂解
氧化物酶无所不在地发现在微生物、植物和动物;这些酶命名他们的天然来源如辣根过氧化物酶、乳过氧化物酶、髓过氧物酶或后自然基质细胞色素等c、chloroperoxidase和木质素过氧化物酶。主要研究了氧化酵素是血红素的酶,因此拥有一个铁原卟啉IX(血红素)作为辅基(11]。Heme-containing酶参与的化学范围明显不同;然而所有这些酶生物氧化反应催化了涉及非常相似的高氧化态中间体的反应是由蛋白质环境(调制方案1)[12,13]。
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因此,因为它们催化氧化酵素极其滥交酶不同化学转换,如过氧化物酶、peroxygenase,和氧化酶反应,作用于大量的基质包括酚类、芳烷基胺,NAD (P) H, H2O2、过酸、烯烃、硫醚和醛(11]。特别是,表明氧化酵素催化醛的有氧氧化产生羰基的产品通过一个烯醇互变异构体,因此对形成dioxetane中间(α氧化)[14]。这种机制在某种程度上类似于烯烃裂开的活动,已观察到的各种氧化酵素的副反应。根据涉及的酶和特定的底物,一些投机的有氧烯烃裂解烯烃反应机制导致醛被提出,尽管一个催化循环尚未证明的日期。氧化物酶的烯烃裂解反应催化了调查提出了以下部分。
2.1。Chloroperoxidase
Chloroperoxidase (CPO)隔绝Caldariomyces fumago(15,16),它是一种最通用的和有前途的血红素酶合成应用程序(17- - - - - -20.]。例如,典型的各种转换为过氧化氢酶和细胞色素p - 450单氧酶也催化了CPO (21]。此外,酶催化作用halide-dependent halide-independent反应作用于各种底物以及使用过氧化氢或有机过氧化物作为氧源(11]。其他研究已经表明,CPO触媒作用functionalised或unfunctionalised烯烃的环氧化作用enantio,选择性很大的高度(22- - - - - -24]。环氧化作用往往是伴随着醛的形成以及烯丙基的羟基化(18]。Bougioukou和Smonou报道的氧化烯烃裂开活动共轭dienoic酯采用CPO和叔-butyl-hydroperoxide (t必和必拓)作为终端氧化剂(25,26]。烯烃的反应进行顺式和反式-在无氧和有氧条件下配置。在缺乏氧气的只有两种反应:发生烯丙基的氧化和环氧化作用给化合物1和2分别(计划2)。两种反应具有高度的区域选择性,自C = C债券近端酯基没有转换。令人惊讶的是,在有氧条件下反应进行的一个额外的醛3作为一个小产品(13%)通过终端C = C双键的乳沟。也在这种情况下,烯烃裂解进行完美的区域选择性。
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此外,产品的相对量依赖于立体化学的双键,自烯丙基的醛从首选产品反式-二烯烃。然而,同样的反应进行甲基- (2,4 z) -hexadecanoate提供裂解烯烃为主要产品(38%),其次是环氧(35%)和烯丙基的醛(27%)。该解释所有产品的形成,包括3有氧但不是厌氧条件下,需要一个中间的形成自由基阳离子(4)。这可能是由直接电子转移生成从基质到正式oxoiron (V)中心(复合,我看到计划1)CPO催化循环中形成12,27]。另外一个类似的生成t-BuOO•激进的可能充当中介,因此抽象的电子πC = C衬底的债券。最后,激进的中间4可以用分子氧反应,导致乳沟通过dioxetane中间产品(5)(计划3)。
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2.2。辣根过氧化物酶
辣根过氧化物酶(合)是研究最多、特征明显过氧化物酶的晶体结构(28)和催化途径阐述了在高分辨率12]。合催化氧化苯酚、苯胺类和其他各种电子的化合物的H2O2和烷基氢过氧化物11]。Ortiz De Montellano和抓住观察氧化苯乙烯氧化苯乙烯和苯甲醛(摩尔比率4:1)与合在孵化基质,H2O2,4-methylphenol cooxidant [29日]。通过移除一个化合物,苯乙烯氧化不是发现了。除此之外,18O2和标签的反应机理研究表明,苯乙烯氧化物的形成涉及到一个来源于cooxidant激进的中间。在相同的工作解释了苯甲醛的形成没有提供。
在另一项研究中,一些合突变体显示一个增强的活动比野生型苯乙烯的环氧化反应以及酶cis-β甲基苯乙烯和trans-β苯乙烯在没有任何cooxidant [30.]。同时产生了大量的苯甲醛,也在这种情况下,催化循环导致这种产品没有阐明。增加活动可能源于改进的可访问性底物的催化部位,由于更换sterically阻碍Phe-41残渣,血红素中心靠近,较小的氨基酸如亮氨酸或苏氨酸。
氧化乳沟3-methyl-indole和3-ethyl-indole相应的ring-opened昊图公司酰基甲酰苯胺和羟吲哚进行规模50毫克使用合在有氧条件下(31日]。有趣的是实际应用,衬底合的摩尔比率是10000:1。激进的氧化是由添加催化量的H2O2,需要生成化合物I和II(计划1合)从静止状态;然而,H2O2浓度一直低于30μ为了避免酶失活。在有氧条件下的主要产品是烯烃裂解羰基的化合物,而在厌氧条件下中间完全polimerised激进。吲哚的有氧氧化裂解机制最终提出,涉及氢抽象合化合物I或II (6),与分子氧导致氢过氧化物(7),最后重排买得起羰基的产品(8)(计划4)。
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被等人最近表明,一些氧化物酶(即。,辣根过氧化物酶、木质素过氧化物酶和鬼伞属cinereus过氧化物酶)催化C = C双键的乳沟毗邻的芳香一半选择基质的分子氧和酸性pH值(计划5)[32]。在三个活性氧化酵素,合是最活跃的在同等浓度的酶。反应的深入研究表明,最高的活动获得了在环境温度,pH值2,和2条纯分子氧的压力。添加DMSO作为助溶剂15% v v−1增加了转换,可能由于底物的溶解度改进水的反应介质,而进一步添加DMSO导致酶活性的逐步下降。使用反式茴香脑底物(9)(6 g L−1),合在低催化剂加载(3毫克,等于0.2 - -0.3摩尔%),定量转换在24小时之内就完成了。主要产品是帕拉茴香醛(11)(即。,92% chemoselectivity), whereas the side product accounted completely for the vicinal diol (12)。底物范围很窄,因为只有其他两个底物,也就是说,异丁子香酚(10)和茚(13),可以通过合裂解与转换,12%和72%。
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2.3。髓过氧物酶和鬼伞属cinereus过氧化物酶
髓过氧化酶(MPO)鬼伞属cinereus过氧化物酶(CiP)催化拆分苯乙烯的环氧化反应和取代衍生物在温和的收益率33]。此外,由于Cα= Cβ双键乳沟的各种取代苯乙烯前兆,MPO和CiP形成大量的取代苯甲醛。烯烃的裂解是最著名的CiP反应催化了,而更大数量的环氧MPO形式。反应的连续和控制流执行H2O2(1μ摩尔/ h)允许的形成化合物I和II化合物(计划1)。使用这样一个低流量的氧化剂的缺点是反应时间长(16 h)。CiP烯烃裂解反应机理的催化了在H2O2作为氧化剂不同于前面描述的CPO在O的存在2。事实上,不需要添加辅被用物的烯烃裂解催化了CiP使用H2O2。苯乙烯(1毫米)转化为氧化苯乙烯(18%)和苯甲醛(30%)采用CiP (20μ米)。相反,MPO的环氧化物为主要产品(17%),只有少量的其他化合物(5%)。激活的苯乙烯轴承chlorogroups代替或者没有,,元-和帕拉-位置和cis-β甲基苯乙烯也转换,产生大量的醛。
3所示。烯烃由血红素和乳沟Nonheme加氧酶
铁cofactor-dependent加氧酶构成酶的异质群体。每个家庭激活双氧酶在不同的方式,这也是假定相同的酶可能分裂烯功能使用不同的机制取决于衬底(例如,类胡萝卜素的解理加氧酶)。这个属性已经回顾了其他酶,和它被命名为催化酶滥交34- - - - - -36]。烯烃裂解主要是二次氧化酵素活动,而一般的自然和加氧酶往往独特的活动。
3.1。色氨酸2 3-Dioxygenase和吲哚胺2 3-Dioxygenase
色氨酸2,3-dioxygenase (TDO)和吲哚胺2,3-dioxygenase (IDO)是独一无二的血红素加双氧酶的依赖裂开的C = C双键色氨酸的吡咯环(14)负担N-formylkynurenine (15)[37];因此,两个氧原子结合从分子氧。TDO我催化反应本质上是相同的,不同教派仅仅反映了更广泛的底物滥交被罩。各种反应机制提出了这个有趣的烯烃解理自1930年;然而一个决定性的研究到目前为止还没有发表。第一个提案涉及的去质子化aminogroup吲哚环的高度保守的组氨酸残基在酶的活性部位(38]。相比之下,后来的研究表明,methyltryptophane也可以由酶裂解同时在降低反应速率39]。此外网站直接诱变的组氨酸残基丙氨酸和丝氨酸导致了自然变异仍裂解底物(39- - - - - -41]。这些发现与吲哚的证据确凿的化学(协议42]base-catalysed不反应的反应(),从而排除组氨酸残基的重要作用在一个可能的去质子化的步骤。连续提议包含激活的亲电除铁(II) -dioxo物种的C3吲哚环,其次是Criegee-type重排(计划6、路径(a))或dioxetane中间(方案的形成6路径(b))。(39,43]。相反,最近的隔离和描述循环aminoacetal [44(即。,probably generated by the rearrangement of a 2-3-epoxide intermediate) coupled with novel Raman studies suggested a sequential insertion of oxygen [45]。进一步计算研究支持机制一个铁(III) -superoxo物种(复合三世,看到计划1)可能参与直接激进的吲哚环的C2,紧随其后的是均裂oo的乳沟和2 - 3环氧中间的形成。在第二步中,铁(IV)含氧的中间(化合物II,看到计划1)可能打开环氧环,再次攻击的C2吲哚环,最后导致解理通过分子内重排(计划5,路径(c))46]。值得注意的是最终的建议不需要最初的去质子化的氨基吲哚。
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3.2。儿茶酚加双氧酶
儿茶酚的加双氧酶催化苯邻二酚的氧化裂解和取代苯邻二酚(16)作为中央一步的细菌降解芳香族化合物(47]。Hayaishi等人发现两个nonheme家庭这些加双氧酶,即intradiol加双氧酶(如儿茶酚1,2-dioxygenase也称为pyrocatechase)和extradiol加双氧酶(如儿茶酚2,3-dioxygenase也称为metapyrocatechase)。的intradiol加双氧酶裂解C = C双键之间的酚羟基产生粘康酸(17)[48),而extradiol加双氧酶裂解C = C双键邻酚羟基产生2-hydroxymuconaldehyde (18)[49]。在最初的一步,intradiol加双氧酶可能与分子氧和生成一个铁(II)半醌中间然后导致铁(III)物种所确认的电子顺磁共振研究。连续的步骤,最终C = C双键芳环的乳沟,以前认为通过dioxetane中间发生;然而,最近18O2实验支持另一种机制涉及Criegee重排提供一个酸酐中间然后粘康酸水解(计划7(一))50]。同样,烯烃裂解催化了机制extradiol加双氧酶最初收益又通过一个铁(II)半醌复杂,尽管不同形成一个铁(II)近端氢过氧化物中间体;后者经历Criegee重排其次是水解买得起2-hydroxymuconaldehyde(计划7(b))。几个研究结果支持这个机制:(i)的分析产品销售从反应底物类似物带着环丙基自由基(51),(2)紫外可见和喇曼光谱研究[52)和(3)18O2标签的研究(53]。
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3.3。类胡萝卜素解理加氧酶
类胡萝卜素解理加氧酶(cco)普遍存在于细菌、植物和动物和催化C = C双键乳沟的类胡萝卜素给apocarotenoids [54,55]。家庭成员需要一个铁(II)中心四个高度保守的结合和催化地必不可少的组氨酸残基(56]。cco常常表现出衬底滥交,这可能导致的自然多样性apocarotenoids衍生物,同时经常保持一个完美的区域选择性(即。乳沟的类胡萝卜素的特定C = C双键链)。因此,根据酶,烯烃裂解可以发生在中央C = C双键的类胡萝卜素基质(即。C15 = C15′位置,中央乳沟)或在另一个位置(即。偏心劈理)。在文献中,这种酶家族通常被称为类胡萝卜素解理加双氧酶(CCD)。然而,本文更广泛的定义为类胡萝卜素解理加氧酶(cco)自分类采用单链不饱和脂肪或是加双氧酶仍在科学界争论的话题。单氧酶酶活化分子氧合并一个氧原子衬底,而第二个氧气来源于一个水分子。相反,加双氧酶酶包含两个氧原子来自一个分子的分子氧。区分这两种机制依赖于实验使用isotopically贴上O2和H2O,这构成一个严重的问题在分析产品的分布的快速交换aldehydic氧气与水介质。有争议的乳沟的转让机制β领路人依旧′类胡萝卜素解理加氧酶(βcco)说明了这个问题。的βcco从鼠肝脏和鼠肠最初被称为“β胡萝卜素15、15′加双氧酶“尽管证据关于加双氧酶机制并不是之前报道(57]。后来Leuenberger等人声称解理发生通过单氧酶活性(58]。α胡萝卜素(19)被选为衬底的标签的研究,因为只有使用类胡萝卜素给不同的醛的不对称可能提供一个精确的氧原子结合的起源的信息。目的是减少氧气产品醛和介质之间的匆忙,实验进行了结合β罗经航向与马肝醇脱氢酶(HL-ADH),这样生成的醛原位减少相应的醇。实验采用标签执行17O2到标签作为反应介质和获得的产品分布显然是符合一个单氧酶通路,因为等量的17啊,18O-labelled醛公布(计划8)。
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尽管这一事实βcco被重新分配β胡萝卜素15、15′单氧酶,几个作者询问这些结果由于酶促反应的反应时间长(7.5 h)和歧化酶HL-ADH的活动,特别是在增加NADH的水平,这可能会导致一个未指明的water-derived氧气并入视黄醇(59]。在另一项研究中类胡萝卜素的解理加氧酶的反应机理拟南芥(AtCCD1)研究[60]。AtCCD1劈开β-apo-8′-carotenal (20.)天然底物在9、10双键交付的一个分子β紫罗酮(21)和一个分子的C17二醛(22),(计划9)。
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在这种情况下,利率非常低的酮基氧原子之间的交换β紫罗酮和中加上一个较短的反应时间(30分钟)由于反应的酶活性可能会提供一个准确的评价机制。实验时表现的存在18O2,获得β紫罗酮96%的标签,而在实验的存在18H2啊,同样的产品完全未标记的。C17二醛进行了部分氧气交换期间由空白实验的反应时间;然而,C的一个重要部分17二醛(27%)显示的18O原子实验时执行18O2,因此支持加双氧酶机制。此外,计算最近的一项研究基于AtCCD1的晶体结构61年)估计的能量势垒的形成环氧中间(16.6千卡摩尔−1)是仅略超过dioxetane中间的一个(15.9千卡摩尔−1),可能由于sterical效应Thr136残渣的催化部位(62年]。不过一个假定的对称二苯代乙烯氧合酶与AtCCD1分享高序列同源性被证明打通各种代替对称二苯代乙烯衍生品通过单氧酶机制(这种酶将在下次会议讨论)(63年]。因此,微妙的变化在活动网站可能支持一种机制在其他或相同的类胡萝卜素解理加氧酶可能显示反应取决于衬底。
类胡萝卜素的烯烃裂解的产物和apocarotenoids构成重要的自然风味芳香产业;因此可能利用生物催化AtCCD1吸引了学术界和产业界的利益。先令等人报道了一种改进的协议AtCCD1的表达大肠杆菌与glutathione-S-transferase融合蛋白(64年]。重组酶显示更高级别的不同的表达以及改善biocatalytic性能。在第一个报告,为上年增加活动进行的体外酶反应时被发现在胶束分散使用Triton x - 100表面活性剂(substrate-surfactant, 0.008比率)和添加甲醇作为有机助溶剂(15% v v−1)。由于改进的溶剂化作用的亲脂性的水性胶束介质衬底,β-apo-8′-carotenal被裂解β紫罗酮高转换(> 90%)和完美的区域选择性。在最近的出版物显示,最大的活动β-apo-8′-carotenal多样非独立使用的表面活性剂(65年]。测试不同apocarotenoids和类胡萝卜素结合不同表面活性剂证明最合适的表面活性剂不同非独立的亲油性基质。然而,底物浓度目前应用过低(小于1毫米),以满足一个可能的工业应用要求。
3.4。对称二苯代乙烯-α- - - - - -β加氧酶和异丁子香酚氧化酶
Kamoda等人识别和纯化的四个同功酶对称二苯代乙烯-α-β加氧酶(也叫lignostilbene -α- - - - - -β加双氧酶,LSD)Sphingomonas paucimobilisTMY 1009(以前叫假单胞菌p。)。这种酶家族任意分为加双氧酶,尽管研究阐明机制从未实施。因此,本文采用加氧酶的定义。四种酶包含一个相当于铁,它们是由两个亚基:我同工酶(αα),同工酶II (αβ),同工酶III (ββ)和同工酶IV (γγ)[66年,67年]。所有同功酶的催化活性需要stilbene-type衬底拥有反式配置和轴承hydroxylic取代基帕拉-芳环上的位置。四个同功酶裂解4,4′-dihydroxy-3, 3′-dimethoxystylbene (23)以及4,2′-dihydroxy-3, 3′-dimethoxy-5′- (2′′-carboxyvinyl)对称二苯代乙烯(24显示不同的底物特异性(方案),尽管10(一));我最活跃的酶的同工酶与偏爱23,而其他人优先裂解底物24(68年]。尤其是我的同工酶稳定在50°C和显示活动增加甲醇作为助溶剂的添加(30% v v−1)[69年]。尽管复合的乳沟23香兰素的两个分子可以直接提供重要的味道和香味的食品和化妆品行业,从来没有利用酶反应制备规模。最近的一项调查细菌基因组序列的类胡萝卜素解理加氧酶同系物允许识别两个假定的对称二苯代乙烯加氧酶Novosphingobium aromaticivoransDSM 12444 (NOV1和NOV2)63年]。有选择地NOV1 NOV2发生裂解反式-stilbene-type基质轴承羟基或甲氧基基帕拉-安置的苯基环如rhapontigenin (25),白藜芦醇(26),rhaponticin (27)和piceatannol (28),(计划10(b))。有趣的是,这两个酶无法打通类胡萝卜素。标签的研究使用18O或18H2O显示NOV1和NOV2包含只有一个氧原子从分子氧基质。因此这两个假定的对称二苯代乙烯加氧酶分为单氧酶。有趣的是,AtCCD1分为加双氧酶而NOV1和NOV2单氧酶尽管高序列同源性。
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在另一项研究中,一种新型酶揭幕假单胞菌putidaIE27培养微生物时从土壤含有异丁子香酚作为唯一碳源70年]。催化反应的酶纯化,分析体外,证明高烯烃裂解的活动异丁子香酚(29日),收益率香兰素(30.)严格的分子氧(计划11)。此外,2-methoxy-4-vinylphenol也是一个衬底尽管降低反应速率(即。两个数量级)。因此,作为异丁子香酚氧化酶酶底物命名。有趣的是分析氨基酸序列的异丁子香酚氧化酶和前面提到的对称二苯代乙烯-显示高的同源性α- - - - - -β加氧酶从Sphingomonas paucimobilisTMY 1009同工酶和第三身份(42%)和一个假定的对称二苯代乙烯加氧酶Novosphingobium aromaticivoransDSM 12444身份(40%)。异丁子香酚的烯烃裂解是假定发生通过单氧酶机制基础上,香兰素包含一个标签18O原子反应进行时在标签18O2或18H2o .然而单氧酶机制不能视为结论性的,由于缺乏有关同位素的数据产品销售;数据交换氧原子从基质到水介质没有报道。
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3.5。其他加氧酶
其他公认的加氧酶分离作用于不同的基质。在这最后一段,最有前途的酶biocatalytic应用程序将检查。酶C = C双键的乳沟天然橡胶(即。,聚(独联体1,4-isoprene)) (31日观察)和合成橡胶使用的纯化蛋白、黄sp。目前,命名为橡胶加氧酶(RoxA)、(计划12)[71年]。RoxA是借助紫外可见光谱特征和基因序列分析,揭示两个血红素辅基成蛋白质支架和一个保守序列基序是一种独特的细胞色素的特性c氧化物酶。酶活性严格需要分子氧和完全停止当血红素抑制剂如氰化钾和一氧化碳被添加到反应混合物,从而确认必要的金属中心的催化作用。RoxA显示高区域选择性自能打通保利- (独联体定期4-isoprene),主要是切断每一步三个异戊二烯单元(32)。数量有限的主要和次要的降解产物也被检测到,但是总是显示一个羰基的一部分在终端结束。进一步将研究显示RoxA分裂后加双氧酶机制(72年]。
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两种酶还可以配合实现烯烃裂解。例如,在第一步中,大豆粉的脂肪氧合酶活化分子氧使烯集团的攻击。在第二步中氢过氧化物的中间是由脂肪酸裂解裂解(HPO裂合酶)青椒。因此,正式的两步解理的亚麻油酸的混合物(33)和亚麻酸(34)产生乙醛(35),反式己烯醛(36),分别进行了规模制备与ca的生产力。300毫克L−1(计划13)。C6醛产品的重要风味芳香产业(73年]。
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最后,即使是正式单碳碳键可以裂解后加双氧酶机制。这是铁(II)端依赖的情况下β二酮加双氧酶从不动杆菌johnsonii(Dke1)。Dke1劈开的烯醇形式2、4-pentanedione (37)(加上相关β二羰基化合物),丙酮醛的克分子数相等的金额(38)和乙酸(39)和消费只有一个相当于分子氧(计划14)[74年]。
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4所示。结论和展望
在研究血红素氧化物酶进行化学转换等不对称环氧化作用或不饱和的立体选择mono - dihydroxylation功能,烯烃裂解被发现是一个次要的副反应。在一些情况下,烯烃裂开活动成为了主要反应条件时,适当调整(即。、pH值、双氧压力,添加助溶剂)。因此,这种淫乱活动可能利用有机合成。相比之下,iron-dependent通常加氧酶催化烯烃裂解为自然和独特的反应。然而,这些酶在有机合成的开发受到无极的底物的溶解度有限水媒体。
另一方面,特别是在血红素氧化酵素的情况,全面了解烯烃裂解的反应机制需要更精确的研究。事实上,该机制仅仅是根据实验的观察,也就是说,产品分布的分析,要求分子氧和辅被用物,等等,或依赖于研究的选择性抑制血红素辅因子。
详细了解烯烃裂开机制加上进步在基因克隆、蛋白质工程在过去的十年里将使我们能够操纵这些酶改善化疗和区域选择性,增加他们的宽容苛刻的反应条件。的设计改进的变异终于可以为酶的应用铺平道路大规模烯烃裂解。
确认
本文作者希望把他的前导师教授米歇尔Gullotti的记忆。他是一个鼓舞人心的导游在他的博士研究的时间和一个亲爱的朋友。