文摘

Plumbagin及其铜(II)复杂(铜(Plumbagin)₂]·H₂O已经合成,及其抗氧化活动对DPPH自由基的抑制作用,减少权力,总抗氧化能力,抑制脂质过氧化作用。Plumbagin及其铜(II)复杂被发现具有清除DPPH自由基活动的抑制率为41%和24%,分别。plumbagin的还原能力突出浓度的1.0,1.5,和2.0毫克/毫升,比铜(II)复杂和合成抗氧化剂2、6-di-ter-butyl-4-methylphenol(二叔丁基对甲酚);plumbagin最高达到了1.333和0.581铜(II)复杂。同时,对脂质过氧化的抑制plumbagin高于复杂铜(II)和二叔丁基对甲酚,46.4%,plumbagin为24.5%,铜(II)复杂。结果设计抗癌药物提供一个强大的影响,结合他们的潜在的细胞毒性和抗氧化活动,可以有针对性的有选择性地针对癌细胞,提高治疗指数和额外的优势其他抗癌药物。

1。介绍

最近,大量的金属配合物抗癌活动设计和测试和支持性疗法在癌症患者,包括抗癌药物阿霉素、米托蒽醌、博来霉素、羟基脲(1- - - - - -3]。目前存在的主要争议,具有各种生物活性的天然产物成为一个重要的潜在来源(pro)药物螯合剂4,5]。许多天然分子如类黄酮、酚类、醌类金属螯合性能、细胞毒性、抗氧化性能,包括自由基的抑制作用和其他有害的氧激活产品,如氢氧自由基、过氧化物、过氧化氢、脂质过氧化物(6,7]。因此,设计的前景螯合高活性化合物可以有针对性的选择性和激活癌细胞结合他们潜在的细胞毒性和抗氧化活动提高治疗指数和其他抗癌药物提供了额外的优势8- - - - - -10]。

我们之前的研究已经报道的合成和抗癌活动plumbagin(计划1)及其铜(II)复杂(计划2)。Plumbagin结构来源于萘醌提取石墨zeylanica L,中国传统医学。发现plumbagin及其铜(II)复杂表现出显著的抗肿瘤活动对七个人类肿瘤细胞系(bel - 7404, NCI-H460 CNE-2 786 - o, MCF-7, hct - 116和Hep-G2),和铜(II)复杂的具有显著增强抗肿瘤对自由配体铜(II)离子起着重要的作用11]。所有这些使它有趣的研究结果的抗氧化活动plumbagin及其铜(II)复杂。

2。材料和方法

紫外可见吸收光谱进行了瓦里安Cary100紫外可见分光光度计。2,2′-Diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH)从西格玛化工有限公司购买所有的金属盐从阿尔法有限公司购买的溶剂是分析级。所有的材料被用作收到没有进一步纯化,除非特别指出。

植物的根p . zeylanica收集到广西,被唐教授(生命科学学院、广西师范大学)。

2.1。PLN的分离和结构鉴定

的根源p . zeylanicaEtOH(15公斤)提取95%。溶剂集中在真空和残渣之间先后分区H₂O和正己烷层紧随其后。层提取(252克)受到硅胶cc的梯度层的正己烷,淋洗与n-hexane-EtOAc(9: 1)屈服桔子水晶,plumbagin (1.33 g)。

2.2。(铜的合成(Plumbagin)₂]·H₂O

这黄棕色plumbagin铜(II)复杂的合成由同样的方法描述的参考陈et al。11]。

2.3。清除DPPH自由基活动

探讨自由基清除活性,plumbagin或铜(II)复杂的解决方案是允许和一个稳定的自由基反应,2,2′-diphenyl-1-picrylhydrazyl自由基(DPPH) [12]。1毫克/毫升plumbagin或复杂铜(II)在不同的反应时间(10、20、30、40、50、60分钟)化验,和1毫克/毫升的合成抗氧化剂2,6-di-ter-butyl-4-methylphenol(二叔丁基对甲酚)用于比较。反应混合物孵化在25°C。清除DPPH自由基活动是由测量吸光度在每10分钟515海里,直到反应达到稳定状态。抗氧化活性被表示为一个百分比的清除DPPH自由基活动:SC % =[1−(样品的吸光度)/(控制)的吸光度)×100%。

2.4。还原能力

还原能力的测定进行了如Oyaizu所述13]。各种plumbagin的还原能力和铜(II)复杂的解决方案(0.5,1.0,1.5,和2.0毫克/毫升)研究;二叔丁基对甲酚还比较的决定。各种样本混合磷酸盐缓冲剂(2.5毫升,0.2 M, pH值6.6),铁氰化钾(2.5毫升,1%)在25°C孵化20分钟,添加了三氯乙酸,混合物在3000转离心10分钟。解决方案(2.5毫升)的上层与蒸馏水混合(2.5毫升)和氯化铁(0.5毫升,0.1%),然后吸光度测量在695海里一片空白。

2.5。总抗氧化能力的测定

总抗氧化能力测定的方法-普列托[14]。Plumbagin或铜(II)复杂(0.5毫克/毫升)在不同的反应时间(20、40、60、80、100、和120分钟)结合0.3毫升的试剂溶液(0.6 M硫酸,28 mM磷酸钠,钼酸铵和4毫米)。反应混合物是150分钟在95°C的环境。混合物被冷却到室温后,混合物的吸光度测量在595海里一片空白。阅读是每个30分钟。抗氧化活性的二叔丁基对甲酚(0.5毫克/毫升)也比较的化验。

2.6。的抗氧化潜力Plumbagin或铜(II)复杂的花生油

计算数量的plumbagin或铜(II)复杂的解决方案添加到50毫升的花生油。添加剂是用电磁搅拌器混合到石油。样品的氧化变质研究使用Schaal烤箱测试方法所描述的Economou et al。15]。石油样品(每50毫升)被放置在开放的100毫升烧杯和放置在60±0.5°C烤箱24 h。样本(1毫克/毫升)准备在相同条件下处理不同反应时间(1、2、3、4、5、6天),二叔丁基对甲酚(1毫克/毫升)也比较的化验。抗氧化的速率花生油估计的增加2-thiobarbituric acid-reactive物质(TBARS)使用古典稍后通知程序。治疗和治疗的TBARS值样本用于计算抑制脂质氧化如下:抑制(%)=(控制条件)/控制×100%。

2.7。统计分析

所有的实验结果都集中在使用三个平行测量平均±标准差。方差分析是由方差分析过程。邓肯的多个测试用于确定方法的差异。P值< 0.05被认为是重要的P值< 0.01是非常重要的。

3所示。结果与讨论

3.1。清除DPPH自由基活动

抗氧化性能,特别是自由基清除活动,非常重要,由于自由基的有害作用在生物系统。DPPH自由基是一种稳定和接受电子或氢自由基成为一个稳定的抗磁性分子(6),现在被广泛用于调查自由基清除活性的缓解和经济的优势。在DPPH自由基清除实验,抗氧化剂可以降低稳定的黄色的DPPH自由基,抗氧化能力是由变色的程度表示这可能是由测量吸光度下降在515海里。

如图1显示,在1毫克/毫升的浓度plumbagin或铜(II)复杂具有清除DPPH自由基活动的抑制率为41%和24%,分别扫随着反应时间的增加而增加,而plumbagin清除活动是漂亮,更高于其复杂铜(II)和二叔丁基对甲酚,表明铜(II)的存在降低了清除DPPH自由基的影响。

3.2。还原能力

化合物的还原能力可以作为潜在的抗氧化活性的一个重要指标(16]。试验,在抗氧化还原剂的存在样本会导致铁的减少^{3 +}铁/铁氰化物复杂^{2 +}/亚铁形式[17),因此样品的还原能力可以通过测量监控Perl的普鲁士蓝的形成在695纳米18]。如图2所示,减少plumbagin和铜(II)复杂的性质在不同浓度表现出相关性随着浓度增加。plumbagin的还原能力是优秀的在1.5和2.0毫克/毫升的浓度相比复杂铜(II)和二叔丁基对甲酚。在2.0毫克/毫升的浓度,减少plumbagin和铜(II)复杂的力量达到1.333和0.581,分别。推测是减少铜(II)复杂的抗氧化功效,plumbagin相比,可能是缺乏酚醛集团由于组成复杂,因此酚羟基的活性氢的存在可能造成了相当的抗氧化作用。

3.3。总抗氧化能力测定

分析是基于减少莫(VI)通过plumbagin莫(V)和铜(II)复杂的在不同的反应时间(20、40、60、80、100、和120分钟)和随后的形成一个绿色磷酸/ Mo (V)复杂酸博士高吸光度值表明,样本具有显著的抗氧化活性。如图3所示,plumbagin和铜(II)重要的总抗氧化活性和二叔丁基对甲酚相比,和影响反应时间的增加而增加,而铜(II)的总抗氧化能力优于plumbagin复杂。

3.4。花生油中脂质过氧化反应

水平2-thiobarbituric acid-reactive物质(TBARS)、脂质过氧化的产物,通常是为了评估测量发生在生物系统的氧化程度。花生油是plumbagin处理,铜(II)和二叔丁基对甲酚复杂在1毫克/毫升的浓度在不同的反应时间(1、2、3、4、5、6天)。如图4,脂质氧化的抑制率plumbagin和铜(II)之间复杂的显著影响,增强随着反应时间增加,达到46.4%的最高水平,plumbagin为24.5%,铜(II)复杂的后6天,和脂质氧化抑制铜(II)复杂低于PLN和二叔丁基对甲酚在同一时期。

4所示。结论

在这项研究中,我们调查了抗氧化的可能性plumbagin及其铜(II)复杂。结果表明,化合物表现出一些抗氧化的活动,包括对DPPH自由基的抑制作用,减少权力,总抗氧化能力和脂质过氧化反应,plumbagin拥有高能力比铜(II)在同一条件复杂和二叔丁基对甲酚对DPPH自由基,还原能力和脂质过氧化作用。推测,减少铜(II)复杂的抗氧化功效比plumbagin可能缺乏酚醛集团由于组成复杂,因此酚羟基的活性氢的存在可能造成了相当的抗氧化作用。此外,本研究对抗癌药物设计的强烈影响,结合他们的潜在的细胞毒性和抗氧化活动,可以有针对性的选择性与癌症细胞,提高治疗指数和额外的优势其他抗癌药物。

确认

这项工作是由中国国家自然科学基金(没有。81060360),广西自然科学基金(没有。2010 - 013064和2009 - 0991284),化学与分子工程重点实验室的药用资源(广西师范大学),中国教育部(没有。CMEMR2011-09),广西的科学研究基础教育委员会(没有。200808 lx407)。