文摘

合成和表征的氯化银(I)复杂的公式 (1)(CMBZT = 5-chloro-2-mercaptobenzothiazole TPTP =三羟甲基氨基甲烷(p-tolyl)磷化氢液)。水合物的结构衍生品 (2)相应的已知无水银复(Zartilas et al ., 2009),和变形3已知的 复杂(Zartilas et al ., 2009)测定并与已知的。此外,已知一银的结构(I)集群 (4)(Meijboom et al ., 2009)在120 (2)K匡正,可能Ag-Ag互动进行了分析。的化合物1 - 4在x射线晶体学在r的特征。t (1)和120 K (2 - 4)。所有这些设施和 (5)(Hmna = 2-mercaptonicotinic酸)对细胞毒性和抗炎活动进行评估。的在体外细胞毒性的测试活动1 - 5癌细胞对平滑肌肉瘤(LMS),进行评估和台盼蓝和噻唑基蓝色四唑溴化溴化或3 - (4.5 -dimethylthiazol-2-yl) -2.5 -diphenyltetrazolium (MTT)化验。流式细胞术分析的复杂1和显示,15岁 的1,62.38%的LMS细胞凋亡,而7%的LMS细胞经历细胞坏死。的抗肿瘤活性3可以与它的报道变形(Zartilas et al ., 2009)。抗炎,复合物的活性1 - 3和5也进行了研究。对细胞生存能力的活动 ,而抑制细胞生长增殖活动的顺序遵循的顺序, 。另一方面是抗炎活动 。

1。介绍

银(I)与含硫配体配合物表现出广泛应用在医学上,在分析化学和聚合物工业(1- - - - - -5]。生物医学应用程序和使用的银(I)复合物有关他们的抗菌作用6,7],似乎包括DNA的相互作用,8]。磺胺嘧啶银是一种局部抗感染,全球用于真皮损伤,经美国食品和药物管理局(9]。它有一个广泛的抗菌谱包括几乎所有微生物物种可能感染烧伤创面(9]。最近,Ag) (I)复合物也为他们的抗肿瘤活性研究10- - - - - -12]。结果表明,[AgBr (TPTP)3复杂拥有最强的活动对白血病(L1210),人类早期(Molt4 / C8和CEM)和LMS细胞(12]。的确切机制Ag) (I)的化合物的抗肿瘤作用仍然是未知的。然而,众所周知,许多药物抑制肿瘤细胞的生长行为通过干扰DNA碱基和/或核苷酸或近年快速增长所必需的恶性肿瘤细胞(13,14]。因此,分子设计和结构特征的银(I)复合物是一个有趣的方面和金属药物生物无机化学研究[15,16]。银(I)复合物的能力与变量nuclearities采用几何图形和结构的多样性也使得银(I)化学的研究非常有吸引力3- - - - - -5,17]。金属离子和配体之间的自组装过程是依赖于空间和交互式信息存储在配体,是由金属离子通过的要求协调几何(18,19]。最近,一种新型的芳香性,由于一个循环移位的d以及(基于) 类型轨道电子密度而不是通常的p轨道上metal-ligand戒指,据报道(20.- - - - - -29日),这可能会带来更大的稳定性的高阶结构。

本文报道新的混合配体的合成氯化银(I)复杂的杂环硫代酰胺5-chloro-2-mercaptobenzothiazole (CMBZT C7H4ClNS2)和三(p-tolyl)磷化氢(TPTP C21H21P)(计划1)的公式 [AgCl CMBZT) (TPTP)2] (甲醇) (1)。的水合物 [AgCl (TPTP)3] (0.5 H2O) (2)已知的无水银色的复杂的10)和变形,3已知(AgI (TPTP)3]复杂[10,30.)也被孤立。的晶体结构4 (AgI (TPTP))4 之前已经报道过了在100 K (2) (31日]但我们扩展我们的研究在quasiaromaticity的决心,从而导致Ag-Ag交互,从而更大的稳定性强,使用收集的数据在120 K。复合物1- - - - - -4和已知的银(I)集群 ( [(等3NH)+]2 (Ag)6( 3- - - - - -Hmna)4( 3- - - - - -mna)2]2 - (DMSO)2 (H2O) (5)(H2MNA = 2-mercaptonicotinic酸,C6H5没有2S) (32)测试对平滑肌肉瘤癌细胞体外抑制细胞生长的活动从Wistar鼠。最后,复合物的抗炎活性1- - - - - -3和5也评估结果与他们的抗肿瘤活性。

386860. sch.001
方案1

2。结果与讨论

2.1。通用特性

复杂的1被加热在50°C合成乙腈/甲醇溶液中氯化银(I), TPTP和CMBZT 1: 2: 1 mol / l比值(反应):

复合物2- - - - - -4(10,30.,31日)被加热合成,回流的情况下,银(I)的甲苯溶液与TPTP卤化物适当的摩尔比率。最后,水溶性集群5准备根据此前报告的方法(32]。复杂的1特点是首先通过元素分析和光谱方法。配合物的晶体1- - - - - -3在空气中是稳定的,但在黑暗中。复合物1 - 3是溶于MeCN, CHCl3,CH2Cl2DMSO, DMF和CH3哦,而复杂的4略溶于DMSO溶液。复杂的5高度溶于水,在DMSO和DMF。

2.2。振动光谱

的振动硫代酰胺乐队I和II,出现在1496和1305厘米−1在复杂的红外光谱1和躺在低波数的相应振动乐队相比自由配体CMBZT,观察到1504和1313厘米−1(33]。硫代酰胺乐队iii iv观察在1040 - 918厘米−1光谱的自由配体c p和出现在1026和905厘米−1分别的光谱1。乐队在1093厘米−1的红外光谱1和2 - 4被分配到的对称振动ν(c p)债券10]。那些在515,509厘米−11,515年,509厘米−12、516、505厘米−13到516年,505厘米−14被分配到的反对称振动ν(c p)债券10]。相应的ν(c p)乐队的免费tri-p-tolylphosphine配体被发现在1089厘米−1的对称振动和516厘米−1,505厘米−1反对称振动。乐队在169年、179年、125年和127厘米−1远红外光谱的复合物1 - 4被分配到的振动Ag-X债券(X = Cl, I),分别,10]。振动在248厘米−1光谱的1是由于Ag-S债券(34]。

2.3。晶体和分子结构 [AgCl CMBZT) (TPTP)2]·(甲醇) (1)和结构的性质 [AgCl (TPTP)3]·(0.5·H2O) (2)以及(AgI (TPTP)3](3)

我们最近报道脱水的晶体结构复杂(AgCl (TPTP)3在293 K []10]。的结构 [AgCl (TPTP)3]·(0.5·H2O) (2),这里描述,已经决定在120 K。的结构(AgI (TPTP)3)(3),决定在120 K,是一种新的变形复杂的报道以前在293 K和140 K (10,30.]。强Ag-Ag交互,由于quasiaromaticity计算,发现在复杂的结构4匡正120 K (Ag-Ag债券距离为3.1182 (3) )(图3)。

配合物的晶体结构1- - - - - -2如数据所示1和2,而选择债券的长度和角度1 - 3给出了在表1相比,那些在10]。

表1
选择债券的长度( )和角度(度)的化合物1 - 3e.s.d。在括号里的相比,那些[10,30.]。
(一)
(一)
(b)
(b)
图1
(一)ORTEP图复杂的晶体结构1。(b) (N33分子内的相互作用 Cl4, S31 o1群和o1群 Cl4)1。
(一)
(一)
(b)
(b)
图2
(一)ORTEP图复杂的晶体结构2。(b)包装图和氢键相互作用(Cl1 O1)2。
(一)
(一)
(b)
(b)
图3
(一)C2轴的Ag)4我4集群的核心4,沿着nic值计算。(b)沿着三块网卡值计算C2轴。

两个从TPTP P原子配体,一个年代CMBZT和一个氯原子形成四面体Ag)离子在复杂的安排1。这两个Ag-P债券长度Ag1-P1 = 2.4357 (18) 和Ag1-P2 = 2.5013 (16) 这对应与那些[Ag (PPh吗3)(L) Br)2(PPh3=三苯基膦和L = 2 pyrimidine-2-thione) Ag (1) - p (1) = 2.4390 (7) (34]和[Ag)2X2(l-S-pySH)2(PPh3)2)(X = Cl, Br和l-S-pySH = pyridine-2-thione) Ag-P债券距离是2.435 (1) 和2.441 (1) 分别为,35]。

Ag-S债券距离1(Ag1-S32 = 2.6486 (16) )比对应的终端Ag-S债券债券距离报道[Ag (PPh中找到3)(L) Br)2(PPh3= triphnylphosphine和L = 2 pyrimidine-2-thione) (Ag) (1) - s (1) = 2.5548 (9) (34)和(Ag)2X2( -S-pySH)2(PPh3)2)(X = Cl, Br和 -S-pySH = pyridine-2-thione) (Ag) 2.583 (1) 和2.608 (1) ,分别地。,(35])。Ag-S债券距离1接近桥接Ag-S债券的债券长度测量(Ag)2X2( -S-pySH)2(PPh3)2)(X = Cl, Br和 -S-pySH = pyridine-2-thione) (Ag) 2.721 (1) 和2.631 (1) ,分别地。,(35])。这可能是由于分子内S31联系 O1S_ (i) = 3.240 (6) (图1 (b))(对称变换用于生成相当于原子(i) = )。

Ag1-Cl4债券距离12.6736 (13) 和相应较长Ag-Cl债券距离(Ag)中找到2Cl2( -S-pySH)2(PPh3)2)(pySH = pyridine-2-thione) (Ag-Cl = 2.530 (1) (35])。这是由于氯原子参与两个强烈的氢键相互作用,一个分子(N33 Cl4 = 3.083 (4) )和一个分子内(o1群 Cl4 = 3.147 (5) )(图1 (b))。氢键相互作用涉及到甲醇的O原子导致二聚体的形成(图1 (b))。

Ag原子周围的键角变化与理想的四面体和从P1-Ag1-P2 = 129.05(5)°到P2-Ag1-Cl4 = 95.13(5)°(见下表1)。

绝对的结构的改进2表明,它由一个对映体的混合物比例为0.81:0.19。债券距离和角度之间的显著差异复杂2在120 K和293观察无水形式,表中给出的值1进行比较。虽然,Ag-P债券长度缩短减少温度(表1),Ag-Cl债券距离保持不变(表1)。这是由于强烈的氢键的形成涉及氯原子的相互作用2(H1B (O1群) Cl1 = 2.42 (10) ,O1-H1B Cl1 = 150(18)°)(图2 (b)),与此形成鲜明对比的是脱水的情况下复杂[AgCl (TPTP)3),不形成此类债券。

复杂的晶体结构3决定在120 K(这项工作)是一种新的多态形式的相应的结构决定在140 K和293 K (10](120 K:单斜晶体的空间群C2 / c一个= 22.7429 (10) ,b= 11.0093 (3) ,c= 44.8281 (18) , = 102.9780(10)°和140 K。在293 K:三斜在空间群p - 1 (140 K)一个= 11.0058 (5) ,b= 11.4509 (5) ,c= 22.9459 (8) , = 99.461 (3)°, = 91.648 (3)°, = 106.350 (4)°(10]。在复杂的总体趋势3债券的长度的增加;通过增加温度,例如Ag-P债券平均长度在不同的多晶型物是:2.511 120 K(新变形) 2.537,在140 K(老变形) 在293 K(老变形)2.547 。更重要的变化观察之间的键角三个多晶型物(见表1)。

强Ag-Ag交互中存在复杂的结构4由四个银离子桥接(我) 3碘离子,形成一个移动核心(图3这里描述),第一次(Ag-Ag = 3.1182 (3)), Ag-Ag债券距离是短于其范德华半径之和(4.20 [-4.7436指示d])10- d10交互。

2.4。计算研究

计算研究利用的方法nucleus-independent化学变化(nic)是用于4为了验证Ag-Ag键相互作用。芳香性的理论以及实验证据全金属系统(20.- - - - - -29日,37- - - - - -39引起了巨大的关注。这种类型的分子包含一个芳香周期完全由金属原子(40]或ligand-stabilized芳香集群终端或桥接相邻的金属原子的配体(41,42]。此外,芳香集群涉及d轨道pseudo-octahedral和四面体的三维金属笼子被全面研究了DFT方法的使用(43]。在这项工作中,我们扩展我们的芳香性应用于实验室的研究数据10,29日)通过磁标准,使用的方法nucleus-independent Corminboeuf等人提出的化学变化(nic) 1996年(21)评估芳香环结构的特点。网卡计算指标的分析计算,得到负面的各向同性的价值绝对NMR屏蔽Ag)4我4集群中心(P1),在距离不等 3.0 + 1.0在所有三个维度的步骤导致19鬼原子加上一个鬼魂原子位于中心(P2)平面分隔的三个最近的Ag原子(NICS-3Ag)(图3(一个))。显著负(即。,magnetically shielded) NICS values (in ppm) indicate aromaticity while small (close to zero) NICS values represent non-aromaticity.

核磁共振的变化沿三个屏蔽C2集群重心轴的距离如图3 (b)。内部区域的保护 ppm的距离±1而nic(0)是-7.1 ppm。苯的相应值,在相同级别的理论 ppm。结果表明diatropic地区归因于电子离域d或(基于) 类型四Ag)和我之间的轨道电子密度原子(10,25,26,29日,44)也证明了均衡的Ag-I债券homometallic集群。网卡的对称波动值以及类似的获得X和Y轴的解释年代4对称图案采用Ag)4我4片段。发现在低nic值Z轴由于弱键相互作用两个Ag原子坐落在3.539分开;这个距离是接近银范德华半径的两倍(4.20 [-4.7436])。NICS-3Ag值是 ppm,与上面的结果一致。这准芳香性导致强劲Ag-Ag交互和Ag)的稳定性更高4我4核心。

2.5。生物测试
2.5.1。细胞毒性

复合物1 - 4集群和水溶性银(I)的公式 [(等3NH)+]2·(Ag)6( 3- - - - - -Hmna)4( 3- - - - - -mna)2]2 -·(DMSO)2·(H2O) (5)(H2MNA = 2-mercaptonicotinic酸,C6H5没有2S) (32),体外细胞毒性检测他们的活动对平滑肌肉瘤癌细胞(LMS)从纯种老鼠(间充质组织),多环芳烃(多环芳烃、苯并[a]芘)致癌作用。细胞生长增殖的细胞生存和活动进行评估与台盼蓝和噻唑基溴化四唑蓝(MTT)化验,分别。的集成电路50细胞生存能力值:8±0.39 (1),0.8±0.08 (2),1.5±0.06 米(3),13.2±0.42 米(4)和4.5±0.23 (5)。因此,小区活动的顺序对细胞生存能力2>3>5>1>4,这表明复杂2是最强的一个。的集成电路50细胞生长增殖的值是:13.7±3.06 (1),1.3±0.2 (2),2.9±0.31 米(3),21.2±1.93 (4)和40.3±2.62 (5)。的复合物在细胞生长增殖的抑制活性2>3>1>4>5。因此,包含复杂的氯2对LMS细胞显示最强的活动。的集成电路50对细胞生存能力决定价值2类似于对应的价值发现de-hydrated复杂(0.7 米)(10]。然而,集成电路50对细胞生存能力决定价值3显著变化(两个)从相应的价值发现的多态形式(0.8 )[10]。更高的集成电路50细胞生存的价值4(13.2 )与相应的的1 - 3(0.8 8 )可能是由于高的稳定性4由于quasiaromaticity检测(见上图)。

复合物的活动2,3,5,对细胞生存能力与顺铂,与相应的(IC50)值对LMS顺铂细胞4 - 5 米(12]。然而,复合物的抑制活性1 - 4,在细胞生长增殖是高于顺铂,IC50对LMS细胞25 。

更值得注意的是所有的复合物1 - 5显示任何活动MRC-5细胞生长增殖的细胞(正常的人类胚胎肺成纤维细胞)。

2.5.2。流式细胞术

流式细胞术分析是用来量化凋亡或坏死细胞治疗化合物1。处理和未经处理的LMS细胞沾膜联蛋白V-FITC和Propidium碘(π)。图4,显示了LMS的剂量依赖性细胞毒性反应细胞通过细胞凋亡时处理1。比未经处理的LMS细胞显示总共9.22%的背景细胞死亡,细胞处理复杂18点 显示,10.37%细胞凋亡(早期凋亡细胞(安+ /π−)和晚期凋亡细胞(安+ / PI +))和1.20%的坏死。当LMS细胞被处理12 米的1细胞死亡是细胞凋亡增加到29.37%(早期和晚期凋亡细胞)和3.84%的坏死。在高于IC50的浓度1(15 ),62.38%的LMS细胞早期和晚期凋亡细胞和7.05%是坏死。因此,1导致剂量依赖性细胞毒性反应LMS细胞通过细胞凋亡。虽然没有直接的比较可以由于使用不同的细胞系,33.75海拉细胞诱导的细胞凋亡 解决organogold (III)包含“军”iminophosphorane配体的配合物(2 c6H4产后大出血2=(非盟正烷烃)的公式 κ2- c, c6H4(PPh2C = N (6H5)2 Cl2]23.3% [45),相比之下,62.38%的1对LMS细胞,这可能表明更强的相互作用1与DNA。

(一)
(一)
(b)
(b)
(c)
(c)
(d)
(d)
图4
LMS细胞,流式细胞仪分析总结结果与不同浓度的处理1(8、12和15 )48小时的潜伏期,与未经处理的细胞相比(控制)。
2.5.3。抗炎活性

凋亡细胞死亡需要配合物与DNA的相互作用,其结果为抗菌活性和烧伤伤口恢复的复合物(9]。复合物1 - 3和5检测他们的抗炎活性。图5展示了动物的燃烧表面的变化在21天治疗后溶剂(丙三trioctanoate)和复合物1 - 3和5与燃烧表面在0天,未经处理的动物相比,对应的值(控制)。对照组的动物显示下降7.38%的燃烧表面,而溶剂组的动物显示下降15.67%的燃烧表面。此外,动物的组织处理1,2和5减少显示,51.33%、39.32%和26.76%的燃烧表面,分别。因此,anti-inflamatory活动的顺序由银(I)复合物1>2>5 > > 3。因此,包含复合物的氯1和2被发现减少燃烧表面最有效。混合配体Ag) (I)与磷化氢thione CMBZT,复杂1显示,最强的anti-burn活动可能是由于氯和硫代酰胺配体的协同效应。


图5
21天治疗后改变燃烧表面的溶剂和复合物1 - 3和5与燃烧表面在0天。

3所示。结论

卤化银(I)复杂1合成和单晶x射线衍射分析的特征。复杂的2另一方面,x射线晶体结构表明,从复杂的结构(AgCl延迟(TPTP)3][10包含一个水分子)。重新确定的结构(AgI (TPTP)3)(3)决定在120 K是一个新的复杂的多态形式报道之前在293 K和140 K (10]。计算研究中使用的方法nucleus-independent化学变化(nic)表明,Ag)4我4核心的复杂4展品quasiaromaticity强劲,内部区域的保护 ppm,导致形成的强劲Ag-Ag债券。

测试中心的结果1 - 5体外细胞毒性,因为他们的活动对平滑肌肉瘤癌细胞(LMS)从纯种老鼠(间充质组织),多环芳烃(多环芳烃、苯并[a]芘)致癌作用,表明包含复杂的氯2有最强的活动对LMS细胞。复合物的顺序活动对细胞生存能力2>3>5>1>4的顺序,而复合物在细胞生长增殖的抑制活性2>3>1>4>5。的集成电路50对细胞生存能力决定价值2类似于对应的价值发现de-hydrated复杂(10]。然而,集成电路50对细胞生存能力决定价值3 (在单斜结晶,C2 / c空间群),对应值的显著变化(两个)发现的多态形式(三斜晶系的结晶,p - 1空间群)10]。生物活性较低4可能是由于其高稳定性由于quasiaromaticity检测到。细胞死亡的类型的情况复杂1也评估了使用流仪测定。

结果表明,1导致剂量依赖性细胞毒性反应LMS细胞通过细胞凋亡。凋亡细胞死亡需要配合物与DNA的相互作用,结果到他们的抗菌活性和烧伤创面恢复(9]。

含氯配合物1和2也发现减少燃烧表面最有效。anti-inflamatory活动的顺序由银(I)复合物1>2>5 > >3。混合配体Ag) (I)与磷化氢thione CMBZT,复杂1,显示最强的抗炎活性可能是由于氯和硫代酰胺配体的协同效应。在配合物1 - 3和5、复杂的2,显示对细胞生存能力最强的活动与细胞增殖抑制活性最高,还发现展示燃烧木头强劲复苏活动。

4所示。实验

4.1。材料和工具

使用的所有溶剂试剂级。氯化银(I)和银碘化(I)是由混合AgNO的水溶液3适量的氯化钠和奈(默克公司或奥尔德里奇),分别。沉淀过滤掉,干在黑暗中。Tri-p-tolyl-phosphine和5-chloro-2-mercaptobenzothiazole(丙烯酰胺,奥尔德里奇)使用没有进一步净化。熔点测定在开管斯图尔特科学仪器和未修正的。红外光谱在该地区的4000 - 370厘米−1从KBr光盘,远红外光谱区域的400 - 30厘米吗−1从聚乙烯获得光盘,一个优秀的频谱GX傅立叶变换红外分光光度计。

4.2。合成和结晶的 [AgCl CMBZT) (TPTP)2]·(甲醇) (1), [AgCl (TPTP)3]·(0.5·H2O) (2)(AgI (TPTP)3](3)和 (AgI (TPTP))4 (4)

复杂的1合成如下:0.202 g CMBZT溶液(0.5更易)在10毫升甲醇添加到0.072 g AgCl暂停(0.5更易)和0.304 g TPTP 10毫升(1更易)乙腈和混合搅拌1小时50°C。明显的解决方案是过滤,滤液保持在黑暗中。几天后,促成了一种淡黄色粉末。晶体的复杂1得到了适合x射线晶体分析从甲苯/氯仿的解决方案。复合物2 - 4是由标题的甲苯溶液适量银(I)与TPTP卤化物回流3小时。明显的解决方案是过滤,滤液在黑暗中。无色晶体的复合物2 - 4适合x射线晶体分析从滤液。

1:收益率:44%;m。p: 178–181°C; [C49H46P2AgCl2NS2]·(CH3哦) (MW = 985.7);元素分析:发现C = 60.75%, H = 5.21%, N = 1.39%, S = 6.87%;计算的:C = 60.92%, H = 5.11%, N = 1.42%, S = 6.50%。MID-IR (cm−1)(KBr): 3013, 2915, 1496, 1305, 1093, 1026, 802, 658, 515, 509,远红外(cm−1)(聚乙烯):248、169。2:收益率:80%;m。p: 199–205°C; [C63年H63年P3AgCl]·(0.5小时2O) (MW = 1065.4);元素分析:发现C = 70.55%, H = 6.24%;计算的:C = 70.43%, H = 6.09%。MID-IR (cm−1)(KBr): 3013, 2911, 1093, 800, 516, 509,远红外(cm−1)(聚乙烯):179。3:收益率:83%;m。p: 145–152°C; C63年H63年P3美国国际集团 (MW = 1147.8);元素分析:发现C = 65.30%, H = 5.87%;计算的:C = 65.92%, H = 5.53%。MID-IR (cm−1)(KBr): 3008, 2915, 1093, 802, 516, 505,远红外(cm−1)(聚乙烯):125。4:收益率:56%;m。p: 278–283°C; C84年H84年P4Ag)4我4 (MW = 2156.5);元素分析:发现C = 46.28%, H = 3.88%;计算的:C = 46.79%, H = 3.92%。MID-IR (cm−1)(KBr): 3013, 2911, 1095, 802, 516, 505,远红外(cm−1)(聚乙烯):127。
4.3。x射线结构测定

从晶体的x射线衍射数据1收集在一个KUMA KM4CCD四个圆圈状的衍射仪(46用CCD探测器),使用graphite-monochromated 辐射( 在293 (2)K = 0.71073)。晶胞参数由最小二乘合适(47]。所有数据被修正Lorentz-polarization效应和吸收47,48]。结构通过直接的方法解决了使用shelxs - 97 (49)和精制全矩阵最小二乘方法F2shelxl - 97 (49]。non-hydrogen原子都是精制anisotropically当氢原子位于计算位置和精制使用“骑模式”与各向同性位移参数基于等效各向同性位移参数( 原子)的母公司。

从晶体的x射线衍射数据2和3收集在一个力量APEXII CCD从晶体的衍射仪和数据吗4收集在一个力量CCD衍射仪,在窗前的力量FR591旋转阳极( 在120 (2)K = 0.71073)。数据收集是由收集(50由DENZO[]和加工51]。吸收修正应用使用SADABS [52]。的结构2和3解决了使用shelxs - 97 (49)而4解决了在SIR2004 [53)和三个结构在shelxl精制- 97 (49]。non-hydrogen原子都是精制anisotropically。在2有一个水分子结构中50%的入住率的氢原子的位置是位于电子密度。其余的氢原子2和所有的3和4精制使用“骑模式”在类似的方式与结构1。对结构2精制绝对结构参数为0.19(3),表明对映体的结构包括一个混合比例为0.81:0.19。大量的晶体数据表2。

表2
配合物的晶体结构数据和细化细节1 - 4。

补充数据可从CCDC 12联盟路,剑桥CB2 1易之,英国(电子邮件:(电子邮件保护)),根据要求,引用沉积数字CCDC 715884 (1),717733 (2),717734 (3)和717735年(4),分别。

4.4。计算的细节

基于分子几何计算获得通过x射线衍射方法进行Gaussian03W程序包(54]。磁屏蔽张量鬼原子附近放置在不同的内部和外部的位置4我4集群计算使用gauge-independent原子轨道(GIAO) DFT方法(55- - - - - -57]在B3LYP理论水平。的核独立化学位移(nic)值估计B3LYP函数使用洛斯阿拉莫斯ECP +双泽塔(LANL2DZ)基础设置Ag原子和6 - 311 g (d, p)的所有人。

4.5。生物测试
4.5.1。台盼蓝试验

台盼蓝染料排斥分析是用来确定细胞生存能力。一个细胞悬液制备使用简短的胰蛋白酶化(250 trypsin-incubation 37°C, 95%的L O2,5%的公司2)。同等体积的增加了PBS和悬架和500 L 0.4%台盼蓝溶液在室温下和左5分钟。染色(死)细胞和细胞室的总细胞每平方计算使用纽鲍尔血细胞计数器24小时后的孵化与不同浓度的复合物1 - 4和5。

4.5.2。MTT试验

细胞生长抑制进行了分析使用3 - (4 5-dimethylthiazol-2-yl) 2, 5-diphenyltetrazolium溴化(MTT)测定。LMS在96孔细胞培养板和PBS洗。一个解决方案含有不同浓度的复合物1 - 4和5随后补充道。培养24小时后,50 l (MTT添加在每个从股票的解决方案(5毫克/毫升),和孵化一个额外的4个小时。通过添加50个蓝甲瓒是从细胞筛选了 l DMSO在温柔的震动和吸光度测定的570海里(减去背景吸光度测量在690海里)使用一个微型板块分光光度计(Multiskan光谱,Therno费舍尔科学、沃尔瑟姆,美国)。

4.5.3。流式细胞术

LMS细胞被播种到six-well板的密度6 104细胞每口井和孵化24小时之前的实验。细胞用PBS,对待媒体含有不同浓度的1在DMSO(8、12和15 )和孵化48小时。上层清液和细胞收集离心机和细胞颗粒悬浮在缓冲钙1 速度105细胞/ 100 l。细胞沾膜联蛋白(BD 556420)和Propidium碘(σP4864)在一个黑暗的房间15分钟。DNA内容确定FACScan流式细胞分析仪(Partec毫升,Partec GmbH,德国)。比例的凋亡、坏死和细胞代谢失调计算在所有可行的细胞(100%)。

4.6。抗炎活性
4.6.1。物质准备

的复合物1 - 3和5溶解在丙三trioctanoate最低99%(从Sigma-T9126), 2的浓度 10−4M和解决方案在实验中保持在4°C。

4.6.2。动物的准备

所有动物麻醉了1毫升的麻醉鸡尾酒(Midazolame 50下/ 10毫升、50下/氯胺酮10毫升、氯化钠0.9%至1.5比例/ 0.5 / 3)进入腹膜。麻醉后和5厘米2皮肤切除,所有动物都烧5秒在特定区域的白热的钢铁般的邮票。这张邮票是在本生灯灯至少10分钟。平均总燃烧表面积的代表总数的1.6%的身体表面。燃烧区域被消毒清洗干燥纸和印象清晰的永久性标记,为了估计燃烧表面积。求积仪也用于确定燃烧表面。

燃烧后,动物被分为6组(每组6动物)。第一组是对照组(CG)的6动物没有治疗。第二组是溶剂组(SG),所有的动物在治疗只有甘油基trioctanoate作为溶剂。其他4组实验组(EG1-EG4),动物被处理的解决方案在丙三trioctanoate复合物。治疗是由1.75毫升/堂一天在燃烧领域的解决方案。所有组的治疗持续了20天。在21天最后燃烧表面积是估计的。

4.6.3。动物和它的治疗

女性Wistar鼠(36),年龄5个月和权重几乎190 gr在实验室在社区的笼子里饲养控制室温(20±2°C),以控制照明(12 h光/ 12 h黑暗)。标准纯种老鼠的饮食和水随意在所有的实验中使用。

实验动物是处理人类保健按照美国国立卫生研究院的指导方针和欧盟指令的护理和使用实验动物(希腊总统法令160号1991)。

承认

这项工作进行了部分的实现要求的研究生学习的监督下l . k . s . k . H。