三镓（III）唑类配合物的合成，结构，和抗增殖活性

摘要

作为我们的兴趣的一部分进入镓的生物无机化学，唑的镓（III）配合物的配体-2,1,3-苯并噻二唑（BTD），1,2,3-苯并三唑（BTAH），和1-甲基-4，5二苯基（L）已被分离。BTAH的反应或与BTD要么导致单核配合(1）和(2），分别，同时治疗的与L-导致阴离子络合物(3.)。用单晶x射线晶体学和红外光谱对三种配合物进行了表征，并对一系列人和小鼠癌细胞进行了抗增殖活性研究。

1.简介

镓的配位化学（III）已成为越来越多的研究活动的区域，因为它与这两种材料科学的相关性[1- - - - - -6]和生物医学的发展[7- - - - - -21]。在材料科学领域，例如，复杂的[Ga]₂(伟人)₂问₂),伟人²⁻是席夫碱配体的双（亚水杨基 - 邻 - 氨基苯酚）（ - 2）和q^-是8-喹啉酸（-1），是一个很好的候选作为一种新型的电子输送和发光材料用于有机发光二极管（OLED）[4]。[Gaq_3.]也有希望的电致发光（EL）材料中，除铝类似物表现出更高的功率效率，[将Alq_3.] [5,6]。镓（Ⅲ）的生物兴趣从镓（III）的放射性核素的结合（复合物起源⁶⁷遗传算法³⁺,⁶⁸遗传算法³⁺）成诊断放射性药物[7]。另外，镓盐的GaCl_3.和Ga(不_3.)_3.以及少量镓(III)配合物[8- - - - - -19]已经表现出抗肿瘤活性，而镓（NO_3.)_3.有些的GaCl_3./L复合物(L =各种唑)在体外显示抗HIV (HIV =人免疫缺陷病毒)活性[20]。镓的生物学活性（III）配合物经常被归因于一个事实，即镓（III）是反磁性生物模拟物的铁（III）[的21]。值得一提的是，[GAQ_3.]，它是当前感兴趣的材料科学[5,6]，也正在临床试验中进行评估，与其他镓（III）配合物，如麦芽酚镓沿[三（3-羟基-2-甲基-4H-吡喃-4- onato）镓（III）]，用于抗癌活动[22- - - - - -24]。

继我们在镓（III）的配位化学的兴趣[25- - - - - -31]，其被聚焦在合成，结构表征，物理/光谱研究，并与生物相关和非相关的配体镓（III）复合物的生物（抗肿瘤和抗病毒）的活性的评价，我们在此报告的合成，结构表征，和抗增殖的基础上，唑3个镓络合物配体的活性-2,1,3-苯并噻二唑（BTD），1,2,3-苯并三唑（BTAH）和1-甲基-4,5-二苯基咪唑（L）。

2.实验

2.1。试剂和物理测量

所有操作均在二氮气氛下进行，使用标准的惰性气氛技术和纯化的溶剂，除非另有说明。所有其他化学品从商业渠道购买且未经进一步纯化使用。L的如其他地方所述合成[32]。微量分析（C，H，和N）被约阿尼纳微量分析实验室大学使用EA 1108卡罗Erba的分析仪进行。我R spectra (4000–450 cm⁻¹）上记录在Perkin-Elmer 16 PC谱仪作为KBr压片制备的样品。Far-IR spectra (500–50 cm⁻¹)在Bruker IFS 113v FT光谱仪上以聚乙烯小球的形式记录。

2.2。复方制剂

2.2.1。准备(GaBr_3.（BTAH）₂)(1)

GaBr的一个解_3.(0.3 g, 0.9 mmol) in 3 ml of toluene/diethyl ether (80 : 20, v/v) was added dropwise to a stirred solution of btaH (0.3 g, 2.5 mmol) in toluene (20 ml). The resultant solution was refluxed for about 3 hours and then left undisturbed at room temperature. Upon standing, X-ray quality colorless crystals of1形成在3天时间。将晶体通过过滤收集，用甲苯洗涤并在真空中干燥。Yield: 0.31 g (63%);肛交。计算器。对于C₁₂H₁₀N₆Br_3.GA：C，26.32;H，1.84;N，15.34。实测值：C，26.28;H，1.82;N，15.33％。选择的IR数据（厘米⁻¹):3238 m [(N- h)],1222 mb [(N=N)]， 1116 s [(n n)], 291年代(Ga-Br)]，及224w [（GA-N）]。

2.2.2。准备(GaCl_3.(btd)₂)(2)

的GaCl的解决方案_3.(0.25 g, 1.40 mmol) in 5 ml of toluene/diethyl ether (80 : 20, v/v) was added dropwise to a stirred solution of btd (0.6 g, 4.4 mmol) in toluene/diethyl ether (60 : 40, v/v) (10 ml). The resultant solution was refluxed for about 2 hours and then left undisturbed at −10°C. Upon standing at low temperature for several days, X-ray quality yellowish crystals of2形成。将晶体通过过滤收集，用乙醚洗涤并真空干燥。Yield: 0.60 g (95%); m.p.: 112°C.肛交。计算器。对于C₁₂H₈N₄年代₂Cl_3.GA：C，32.14;H，1.80;N，12.49。实测值：C，32.13;H，1.78;N，12.49％。选择的IR数据（厘米⁻¹): 1612条及1528条[(C=C)],1482 s [(C=N)],961 m and 922 s [(s (n)], 382年代(遗传算法- - - - - -Cl)], and 207 w [（GA-N）]。

2.2.3。(LH)的制备₂[GaCl₄] Cl（上3.)

的GaCl的解决方案_3.(0.2 g, 1.13 mmol) in 5 ml of toluene/diethyl ether (80 : 20, v/v) was added dropwise to a stirred mixture of L (0.6 g, 2.6 mmol) in diethyl ether (1 ml). The resultant mixture was stirred until a clear yellowish solution was obtained. Slow evaporation of the resultant solution afforded a microcrystalline solid. The solid was collected by filtration, washed with toluene and diethyl ether, and dried in vacuum. The product was recrystallised three times from toluene to give crystals of3.适于X-射线结构分析。将晶体通过过滤收集，用甲苯洗涤并在真空中干燥。Yield: 0.18 g (45%);肛交。计算器。对于C₃₂H_三十N₄Cl₅Ga: C, 53.56;H, 4.21;7.81 N,。发现:C, 53.36;H, 4.17;N, 7.78%。选择的IR数据（厘米⁻¹）：3146-2620 SB [(N- h)],1622 m [(C=N)],1578 w [(C=C)]，及369s [（GA-CL）。

2.3。单晶x射线晶体学

晶体的1和2被安装在空气中，而晶体3.安装在空气中，环氧胶覆盖。衍射测量1和2在晶体逻辑双角度计衍射仪上使用石墨单铬钼辐射，而对3.在P21 Nicolet衍射仪上使用石墨单色铜辐射制成。完整的晶体数据和数据采集和处理的参数在表中报告1。晶胞大小进行测定，通过在范围用25所自动居中反射的角度设置精对于1和2和对于3.。三个标准反射监测每97个反射显示少于3%的变化和没有衰减。洛伦兹、极化和型扫描（仅适用于1）校正用CRYSTAL LOGIC软件应用。结构通过使用直接法解SHELXS-86 [33]并且通过在全矩阵最小二乘法精用SHELXL-97 [34]。所有氢原子通过差异图定位并各向同性地精制，除了那些上的甲基基团3.它们在计算位置被引入，比如骑在键合原子上。对于所有的三种结构，所有的非氢原子都用各向异性热参数进行了细化。

2.4。体外细胞毒活性

2.4.1。测试物质

所有的测试物质（复合1,2，和3.)以200毫米的甲醇稀释。甲醇在培养中的最终浓度始终小于0.5%，实验证实该浓度对细胞的生长和增殖没有影响。

2.4.2。细胞系

所用细胞系为HeLa [35]（人宫颈癌），OAW-42 [36]（人类卵巢癌细胞），HT29 [37]（人结肠癌），MCF-7 [38](人类乳癌)，T47D [39]（人乳腺癌），和L929（929是分离的克隆[40从小鼠的正常皮下乳晕和脂肪组织中提取的亲本菌株L [41]）。将细胞在T-75烧瓶（Costar）中，进行了一个星期两次传代培养于含有5％CO的气氛中生长为单层培养物在37℃下₂空气中的相对湿度为100%。培养基为Dulbecco改良Eagle’s培养基(DMEM, Gibco Glasgow, UK)，添加10%胎牛血清(FBS, Gibco, Glasgow, UK)， 100g/ml链霉素和100iu /ml青霉素。

2.4.3。细胞生长和增殖测定

Adherent cells at a logarithmic growth phase were detached by addition of 2-3 ml of a 0.05% trypsin (Gibco, 1 : 250) −0.02% EDTA mixture and incubation for 2–5 min at 37°C. Cells were plated (100 在96孔平底微量滴度板(Costar-Corning, Cambridge)中，细胞密度为5,000 (HeLa和L929)或10,000 (HT-29、OAW-42、MCF-7和T47D)。细胞在37℃下放置24小时，恢复指数增长。等体积(100l) 24 h后加入完全培养基(对照孔)或完全培养基最终稀释物浓度的两倍。每个浓度的6个复制孔用于sulforhodamine B (SRB)试验，3个复制孔用于溴脱氧尿苷(BrdU)试验。背景控制井含有完全培养基的体积相同，被包括在每个实验。细胞生长或DNA合成是由SRB或BrdU的测定手段48小时后进行评价。所有实验均至少进行两次。

2.4.4。SRB化验

SRB分析法，通过修改下进行42]。[43]。简言之，培养液固定之前使用微孔板-多次洗涤设备（三洲Scientific公司的Grass Valley，CA）和50吸出 将10%冷(4℃)TCA轻轻加入孔中。微板在4℃下放置30分钟，用去离子水清洗5次，在室温下干燥至少24小时。随后,70升0.4％（W / V）磺酰罗丹明B（Sigma）的1％乙酸溶液加入到每个孔中并在室温下放置20分钟。SRB除去并且将板空气干燥前被洗涤5次，用1％的乙酸。绑定SRB用200溶解 l 10 mM unbuffered Tris-base solution (E. Merck, Darmstadt, Germany) and plates were left on a plate shaker for at least 10 min. Absorbance was read in a 96-well plate reader (Anthos-2001, Anthos labteck instruments, A-5022, Salzburg) at 492 nm subtracting the background measurement at 620 nm. The test optical density (OD) value was defined as the absorbance of each individual well, minus the blank value (“blank” is the mean optical density of the background control wells,)。从六个重复孔平均值和CV自动计算。结果表示为“存活分数”（SF），从下式导出：（其中ODX和ODC代表测试和对照光密度，RESP）SF = ODX / ODC。

2.4.5。BrdU的分析

DNA合成通过BrdU的测定法估计[44]使用标准比色ELISA（Boehringer Mannheim公司）。After 47 h exposure to test substances, cells were incubated at 37°C for further 60 min in the presence of 10 M BrdU。用含乙醇固定液固定细胞，加入过氧化物酶偶联的抗brdu小鼠单克隆抗体，37℃孵育60 min，洗涤后加入过氧化物酶底物(四甲基联苯胺)，10 min后1 M H停止反应₂所以₄和一个bsorbance was read at 450 nm subtracting the background measurement at 620 nm. Results from each triplicate well (ODBrdUx/ODBrdUc) were divided by the results of a parallel experiment estimated with the SRB assay (ODSRBx/ODSRBc) and they were expressed as the "DNA synthesis fraction" (fDNA) (derived from the following equation: fDNA = (ODBrdUx×ODSRBc)/(ODBrdUc×ODSRBx), where ODx and ODc represent the test and the control optical density resp.), resulting in an estimation of the DNA synthesis per cell number.

2.4.6。通过流式细胞仪细胞周期分析

细胞周期实验（HeLa和L929）或(HT-29, OAW-42, MCF-7 and T47D) cells were seeded in 75 cm²flasks and left for 24 h in incubator to resume exponential growth. Cells were exposed to test substances (at concentrations that produced 50% inhibition of cell growth—estimated by the SRB assay) and after 48 h they were harvested (using trypsin/EDTA as above), washed in PBS and counted in a hemocytometer chamber; 3×10⁶将细胞重悬于125细胞 l冷“盐水GM”(g/ l:葡萄糖1.1;氯化钠8.0;氯化钾0.4;Na₂HPO₄ 12H₂O 0.39;KH₂PO₄0.15;和0.5 mM EDTA) followed by the addition of 375 的95％的升非变性，冰冷的乙醇[45]。细胞在4℃中保存最多3天(实验证实短期保存不会改变结果)，直到进行分析。

细胞周期分析中加入10%的标准鸡红细胞核作为对照。样品在dna制备Epics工作站(Coulter, El)中处理。用碘化丙啶测定细胞DNA含量[46,47]。为了通过对双链RNA染色工件避免增加信号，将细胞用DNA酶的无RNA酶A [消化48]。

细胞DNA含量使用在Epics II流式细胞仪（Coulter公司，埃尔）测量。从10,000-20,000细胞的荧光信号，收集，将其结果显示为频率分布直方图（DNA直方图）。平均通道，细胞计数，标准偏差（SD），波动（CV）的系数，DNA指数（DI），和细胞周期分布，计算用于使用多周期细胞周期分析软件（菲尼克斯流系统公司）各样品中。小心地排除在评估任何双峰或细胞碎片的噪音。

3。结果与讨论

3.1。介绍研究述评

配合1和2通过贾布尔的简单反应制得_3.或GaCl_3.和btaH or btd in toluene/diethyl ether under nitrogen employing 1 : 3 molar ratios, respectively. A similar reaction involving GaCl_3.和BTAH已经产生[的GaCl_3.（BTAH）₂] [25]。An 1 : 1 complex of GaCl_3./btaH也被孤立，其结构特征[25]。An attempt to isolate the 1 : 1 GaBr_3./ BTAH复杂是不成功的，导致1在一个较低的产率。复杂2也是从所得的GaCl唯一的产品_3./在各种摩尔比BTD反应混合物。复杂3.可被视为水解产物，其是很平常通过在Ga（III）在水中的化学或含水溶液[三十]。

3.2。红外光谱

的红外光谱1表现出在中等强度带3238 cm⁻¹可转让的,(h)。条纹在1222和1116厘米⁻¹归因于(N = N)(N-N)振动，和移动到更高的波数相对于自由配体的光谱(1208对和1084 m, resp.)。的红外光谱2exhibits three strong intensity bands at 1612, 1528 and 1482 cm⁻¹可用于拉伸碳-碳和碳-氮振动。这些波段相对于自由配体的光谱[1608 w, 1518 s和1476 s]没有明显的位移。条纹在950和916厘米⁻¹在BTD的频谱，其被分配给该(S-N)模，已被移到谱中的高波数2[961和922厘米⁻¹]。A set of broad bands in the region of 3146–2620 cm⁻¹在频谱3.可以被分配到的所述质子化的配体，LH的（N-H）⁺。的(C = N)(C=C)of the free L at 1602 and 1575 cm⁻¹have shifted to 1622 and 1578 cm⁻¹在频谱3.由于质子化作用。

预计三种配合物的远红外光谱均显示一种Ga-X (X = Cl或Br)拉伸模式[25]这些模式出现在291s [(Ga-Br)1),382年代(（GA-CL）的2]，和369S [（GA-CL）的3.]。配合物的远红外光谱1和2exhibit one more band at 224 and 207 cm⁻¹分别，这归因于(Ga-N)模式(25]。

3.3。结构的描述

的ORTEP图1如图所示1。选择的键的距离和角度列于表2。复杂1是同结构[的GaCl_3.（BTAH）₂] [25]。其结构由单体离散的[贾布尔_3.（BTAH）₂] 单位。镓协调的几何形状是trigonalbipyramidal与溴配体限定在赤道平面。有沿着Ga的的Br 2键的两倍晶轴。在复合物中的镓-N键长度1(2.212（3） Å] is longer than that of [GaCl_3.（BTAH）₂] [2。169(2) Å]. The dihedral angle between the best planes of the btaH molecules is 10.90 Å and is larger than that of [GaCl_3.（BTAH）₂][7.4°]。N1质子与相邻分子[N1]的Br1原子以氢键连接Br1′(,,)3.。425(4) Å, HN1Br1′2。64(7) Å and N1–HN1BR1“149（6）°]创建氢键合胶带到正在运行的并行轴（图2)。这些磁带是在晶格中通过抱团-互动。这些交互相邻磁带[质心的协调BTAH分子的苯基基团之间形成心'（,,) 3.658(4)和3.906(4)A](图2)。

复杂2结晶单斜晶系空间群C2 / C。的ORTEP图2如图所示3.，而选择键的距离和角度列于表3.。其结构由单体离散[GaCl]组成_3.(btd)₂] 单位。镓协调几何与脉络膜定义配体与赤道面再次trigonalbipyramidal。有沿着Ga的CL1键的两倍晶轴。中的Ga-Cl键长度在复杂2[2.171(2)和2.180(1)A]可与[GaCl]的相比_3.（BTAH）₂[2.204(1)和2.178(2)A]。在复合物中的镓-N键长度2[2.201(3) A]比[GaCl]长_3.（BTAH）₂] [2。169(2) Å], but compares well with that of1(2.212（3） Å]. The dihedral angle between the best planes of the btd molecules is 52.51 Å and is much larger than that of1和[GaCl_3.（BTAH）₂]（10.90和7.4°，RESP）。似乎有近平行BTD配体分子间堆积作用。这些交互同时涉及噻二唑和BTD配体的苯基如图4。

的不对称单元的ORTEP图3.如图所示5。所选键距和键角列于表中4。的水晶3.包括原化的LH⁺配体阳离子、四氯没食子酸(III)阴离子和Cl^-阴离子。在四面体[GaCl]中的Ga-Cl距离₄]^-离子在2.152(1)-2.173 (1)A的较窄范围内^˚Cl-Ga-Cl角度从107.1(1)°到110.9(1)°。这些值与其他含四氯没食子酸(-1)离子的配合物的观察值相似[13,29]。(LH)的晶体结构₂[GaCl₄] C1被由N-H的混合液为主Cl和- h氢键，Ga的氯和-相互作用(图6)。有机的部分⁺通过N-H连接Cl和碳氢键形成链的相互作用;数据如下N3CL5“（,,) 3.088(3) A, HN3Cl5′2。24(4) Å and N3–HN3CL5'160（4）°;N13Cl5′′(,,)3.。066(4) Å, HN13Cl5 " 2.19(5) A和N13-HN13CL5''177（5）°;C38质心'（,,)3.。691(5) Å, H38ACentroid′ 2.85(1) Å and C38–H38A质心'147（1）°。将有机链通过Ga的氯桥连相互作用以形成层[CL1质心'（,,) 3.455(2) A及Cl4重心′′′(,,) 3.550(2) A]，两者进一步进行了桥接-在第三维的相互作用[质心心'（,,）3.778（3）和形心质心''''（,,)3.878 (3)]。

3.4。抗增殖活动

配合1(图7）和2(图8）对对HeLa细胞，HT29和OAW-42肿瘤细胞株的细胞增殖和对L929成纤维细胞的正常细胞系的影响小无显著抑制。与此相反，复杂3.对所有细胞系均有抑制作用₅₀浓度75和125之间变化的 M（图9)。

当HT29、HeLa、MCF-7和L929细胞株暴露于不同的环境中时，它们的DNA合成没有受到抑制3.浓度达到100时M.较高的浓度只在HeLa中对每个细胞的DNA合成产生抑制作用，而在L929细胞中则表现出较低的抑制作用(图)10)。

治疗IC₅₀浓度3.对于48fh对HeLa和T47D细胞的细胞周期分布没有影响（表5)。HT29和MCF-7在G1期被部分被捕，OAW-42均在G1期的87.2％的百分比被捕和L929成纤维细胞表现出一个局部G2期停滞。然而，整体效果3.对细胞周期分布（除与OAW-42细胞）不显著，在音乐会的观察与BrdU的测定中，没有观察到抑制DNA合成的结果。

4.总结评论

在这项研究中，三个镓（III）络合物唑合成和结构特征，而它们的抗增殖活性进行了研究。三种不同的唑配体，以便能够得出结构，性能关系的选择。在两个复合物（1和2) Ga(III)原子处于三角-双锥体配位环境中，末端的唑配体占据轴向位置。第三个复合体(3.）由[的GaCl的₄]^-阴离子，氯阴离子和质子化的咪唑阳离子。从只测试了3个配合3.表现出对所有测试的细胞系中的强效的抗增殖活性。的细胞系在相对于它们的灵敏度的顺序3.（在IC₅₀值）如下：将HeLa> MCF-7> T47D> L929> HT29> OAW-42。复杂3.不抑制DNA合成在那个发挥抗增殖活性的浓度（IC₅₀也不会对细胞周期分布产生重大干扰(OAW-42细胞除外，其抗增殖活性最强)。

5.补充信息

CCDC 717554, 717555，和717553包含补充的结晶数据1,2和3.。这些数据可以从剑桥晶体学数据中心免费获得http://www.ccdc.cam.ac.uk/data_request/cif。

致谢

作者承认帕特雷大学（批准“K.右端是Carathéodory”，2004- 2007年）的研究委员会支持这项工作。G. S. Papaefstathiou感谢研究资助雅典国立与Kapodistrian大学的特别帐户（特区政府）的支持。这项工作是致力于尼克Hadjiliadis教授退休。

参考文献

1. S.中村和G. Fasol，蓝色激光二极管，施普林格，纽约，NY，USA，1997年。
2. F. A.庞塞和D. P. Bour，“用于蓝色和绿色发光器件的氮基半导体，”自然，第386卷，第2期。1997年，第351-359页，6623。查看在：出版商网站|谷歌学术
3. Y.邱和L.高“从镓（III）纳米晶氮化镓粉末的新型合成 - 脲复合物，”化学快报卷。32，没有。8，第774-775页，2003。查看在：谷歌学术
4. J.巧，L. D.王L.段，Y.李，D. Q.章，和邱Y.，“合成，晶体结构，和双核镓络合物具有混合配位体的发光特性，”无机化学第43卷，no。16，第5096-5102页，2004。查看在：出版商网站|谷歌学术
5. P. E.挖洞，L. S. Sapochak，D. M.麦卡蒂，S. R.福雷斯特和M. E.汤普森，“在金属的金属离子依赖性的发光效果TRIS羟基喹啉的有机异质结发光器件中，”应用物理快报第64卷，no。1994年，2718-2720页。查看在：出版商网站|谷歌学术
6. “三(8-羟基喹啉)镓的x射线晶体结构:分子间结构。π-π堆叠在固态相互作用，”材料化学卷。11，没有。3，第530-532，1999。查看在：谷歌学术
7. S. Jurisson，D. Berning，W.佳，和M.沓，“配位化合物在核医学中，”化工点评第93卷第2期3, 1993年1137-1156页。查看在：谷歌学术
8. P. Collery和C. Perchery, in金属配合物在癌症化疗中的应用，B。K.开普勒，版，第249-258，VCH，Weinheim中，德国，1993年。
9. T.皮珀，K Borsky和B. K.开普勒，在生物和无机化学的主题卷。1，P。177，1999年。
10. M. J. Clarke, F. Zhu, D. R. Frasca，“非铂化学治疗金属药物”，化工点评，第99卷，第2期。1999年，2511-2533页。查看在：谷歌学术
11. “肿瘤模型与抗癌药物开发之相关性”，国立中山大学肿瘤研究所硕士论文对肿瘤的贡献卷。54，第439，1999年。查看在：谷歌学术
12. L. R.伯恩斯坦，T.唐纳，C.戈弗雷，和B.诺尔，“化学与麦芽酚镓，具有很高的口服生物利用度镓的化合物的药代动力学，”金属类药物第7卷，no。1期，第33-47，2000。查看在：谷歌学术
13. V. B. Arion, M. a . Jakupec, M. Galanski, P. Unfried，和B. K. Keppler，“新型镓(III)配合物的合成、结构、光谱和体外抗肿瘤研究”，[无机生物化学卷。91，没有。1，第298-305，2002。查看在：出版商网站|谷歌学术
14. A. V. Rudnev, l.s. Foteeva, C. Kowol等，“抗癌镓(III)复合物的临床前特性:溶解性、稳定性、亲脂性和与血清蛋白的结合，”[无机生物化学卷。100，没有。11，页。1819年至1826年，2006年。查看在：出版商网站|谷歌学术
15. A. Dobrov，V. B.阿里昂，N. Kandler等人，“在体外高的抗增殖活性的第一金属基paullone衍生物，”无机化学卷。45，没有。5，第1945-1950，2006年。查看在：出版商网站|谷歌学术
16. 一，奥特和R.阵风，“非铂金属配合物作为抗癌药”档案der Pharmazie卷。340，没有。3，第117-126，2007。查看在：出版商网站|谷歌学术
17. C. R. Chitambar，《镓化合物作为抗肿瘤剂》，肿瘤学的当前观点卷。16，没有。6，第547-552，2004。查看在：出版商网站|谷歌学术
18. P. Collery, B. Keppler, C. Madoulet, B. Desoize，“镓在癌症治疗中的应用，”在肿瘤学/血液学重要评论第42卷，no。2002年，第283-296页。查看在：出版商网站|谷歌学术
19. M.弗雷扎，C.N。Verani，D.陈，和Q. P.窦，“抗肿瘤的药物设计基于镓复合物的治疗潜力，”《药物设计与发现快报》，第4卷，第2期。5，第311-317页，2007。查看在：出版商网站|谷歌学术
20. F.克拉茨，B. Nuber，J.韦斯和B. K.开普勒，“合成和潜在的抗肿瘤和抗病毒镓（III）的N-杂环的复合物的表征，”多面体卷。11，没有。4，第487-498，1992。查看在：谷歌学术
21. “金属结合对肠肌动蛋白构象的影响”，国立中山大学化学与化学研究所硕士论文。质子和碳-13核磁共振研究。”生物化学第12卷，no。1973年，第3836-3843页。查看在：谷歌学术
22. M. A. Jakupec，M. Galanski，V. B.阿里昂，C. G.哈廷格，和B. K.开普勒，“抗肿瘤金属化合物：比主题和变化更多，”道尔顿交易,没有。2，第183-194页，2008。查看在：出版商网站|谷歌学术
23. C. G.哈廷格和B. K.开普勒，“CE在抗癌metallodrug研究-的更新，”电泳第28卷第2期19，第3436-3446页，2007。查看在：出版商网站|谷歌学术
24. M. A. Jakupec和B. K. Keppler，《镓在癌症治疗中的作用》，药物化学的当前主题，第4卷，第2期。15，第1575-1583页，2004年。查看在：出版商网站|谷歌学术
25. S. Zanias，C.P。Raptopoulou，A. Terzis和T. F. Zafiropoulos，“镓（III），氯化苯并三唑化学：产品的变化作为金属到配体的反应比的函数;制备，结构和四面体加合物的性质和的GaX3L2三角-双锥复杂的第一个例子，”无机化学通讯卷。2，没有。2，第48-51，1999年。查看在：谷歌学术
26. G. S. Papaefstathiou, S. Manessi, C. P. Raptopoulou, E. J. Behrman, T. F. Zafiropoulos，“第一个5-羟化耳酸的金属配合物:二甲基胺二(N,N-二甲基甲酰胺)二(5-羟化耳tato(-2)没食子酸(III)”，无机化学通讯第7卷，no。1，第69-72页，2004。查看在：出版商网站|谷歌学术
27. A. Manessi, G. S. Papaefstathiou, C. P. Raptopoulou, A. Terzis, and T. F. Zafiropoulos, “Synthetic analogue approach to metallobleomycins: syntheses, structure and properties of mononuclear and tetranuclear gallium(III) complexes of a ligand that resembles the metal-binding site of bleomycin,”[无机生物化学，第98卷，no。12, 2052-2062页，2004。查看在：出版商网站|谷歌学术
28. “晶体结构的制备、晶体结构与光谱表征”，国立台湾大学化学与化学研究所硕士论文$(\text{遗传算法}(\text{哦})({\text{所以}}_4)(\text{terpy})({\text{H}}_2\text{O})]$· ${\text{H}}_2\text{O}$($\text{terpy}=2,2$“：$6^{\prime }$，2-三联吡啶）：第一特性镓（III）硫酸根合络合物，”（杂志）毛皮Naturforschung第59卷，no。3，第291-297，2004。查看在：谷歌学术
29. A. Terzis, T. F. Zafiropoulos，《镓的结构依赖性(III)/4》，$4^{\prime }$二甲基-2，$2^{\prime }$在无机阴离子本的性质联吡啶（dmbpy）络合物：制备和表征$({\text{的GaCl}}_2{(\text{dmbpy})}_2]$ $({\text{的GaCl}}_4]$,$({\text{的GaCl}}_2{(\text{dmbpy})}_2]$ $({\text{CIO}}_4)$和$(\text{遗传算法}{(\text{dmpby})}_2{({\text{H}}_2\text{O})}_2]{({\text{没有}}_{3.})}_{3.}$”Inorganica化学ACTA卷。359，没有。10，第3389-3395，2006年。查看在：出版商网站|谷歌学术
30. G. S. Papaefstathiou, a . Manessi, C. P. Raptopoulou, a . Terzis，和T. F. Zafiropoulos，“甲烷解法合成镓(III)簇:十核分子轮的合成和结构表征”，无机化学卷。45，没有。22，第8823-8825，2006年。查看在：出版商网站|谷歌学术
31. G. S. Papaefstathiou, A. Sofetis, C. P. Raptopoulou, A. Terzis, G. A. Spyroulias和T. F. Zafiropoulos " 2，$2^{\prime }$联吡啶，1,10-菲咯啉和2，$2^{\prime }$:$6^{\prime }$,$2^{”}$镓(III)中的-叔吡啶化学:含有${\{{\text{遗传算法}}^{\text{III}}{}_2{(\mu \text{-哦})}_2\}}^{4+}$核心，”[分子结构卷。837，没有。1-3，第5-14，2007年。查看在：出版商网站|谷歌学术
32. J.麦克马斯特，R. L.贝多斯，D.科里森，D. R.厄德利，M. Helliwell和C. D.加纳，“A双（二咪唑）铜络合物具有可逆${\text{铜}}^{\text{2}}$/${\text{铜}}^{\text{我}}$夫妇具有高氧化还原电位，”欧洲化学杂志卷。2，P。685，1996年。查看在：谷歌学术
33. g·m·谢尔德里克SHELXS-86：结构解决方案哥廷根，德国哥廷根，1986年大学。
34. g·m·谢尔德里克SHELXL-97：晶体结构精修程序，德国哥廷根大学，1997年。
35. G. O. Gey中，W. D.科夫曼和M. T. Kubicek，“宫颈癌和正常上皮细胞的增殖能力的组织培养研究中，”癌症研究一九五二年第12卷第513页查看在：谷歌学术
36. A. P.威尔逊，“从与卵巢的乳头状浆液性囊腺癌患者的腹水的细胞系的表征，”国家癌症研究所卷。72，没有。3，第513-521，1984。查看在：谷歌学术
37. J.福格和G. Trempelln，在人类肿瘤细胞在体外张建民，页151-141，高压压力出版社，纽约，美国，1975。
38. H. D.索尔，L. Vasquez的，A.龙，S.阿尔伯特和M.布伦南，“从一胸腔积液从乳腺癌衍生的人细胞系”国家癌症研究所卷。51，没有。5，第1409年至1416年，1973。查看在：谷歌学术
39. I. Keydar，L.陈，S Karby等人，“建立和人类乳腺癌来源的细胞系的表征，”欧洲癌症杂志卷。15，第659-670，1979。查看在：谷歌学术
40. K. K. Sanford, W. R. Earle，和G. D. Likely，“体外单个分离组织细胞的生长”，国家癌症研究所卷。9，没有。3，第229-246，1984。查看在：谷歌学术
41. 席林，史塔克，斯特劳斯，布朗，谢尔顿，《体外恶性肿瘤的产生》。小鼠成纤维细胞培养和活细胞中的变化，”国家癌症研究所卷。4，第165-212，1943。查看在：谷歌学术
42. P. Skehan, R. Storeng, D. Scudiero等，"抗肿瘤药物筛选的新比色细胞毒性分析"，国家癌症研究所第82卷，no。1990年，第1107-1112页。查看在：谷歌学术
43. K. T. Papazisis，G. D. Geromichalos，K. A. DIMITRIADIS，和A. H. Kortsaris“的磺酰罗丹明乙比色测定的优化”免疫学杂志的方法第208卷，no。第151-158页，1997年。查看在：出版商网站|谷歌学术
44. J.P。Magaud，一萨金特和D. Y.梅森，“通过溴脱氧尿苷摄取的免疫酶测定人类白细胞增殖反应检测，”免疫学杂志的方法第106卷，no。1, 1988年，95 - 100pp。查看在：出版商网站|谷歌学术
45. H. A. Crissman，在细胞生长和凋亡。一个实用的方法张德明，《北京大学出版社》，北京:北京大学出版社，1995年。
46. H. A. Crissman和J. A. Steinkamp，“快速、同步测量来自大型哺乳动物细胞群的单细胞中的DNA、蛋白质和细胞体积，”细胞生物学杂志第59卷，no。1973年，第766-771页。查看在：谷歌学术
47. A. Krishan，“碘化丙啶快速流式细胞荧光分析哺乳动物细胞周期”，细胞生物学杂志卷。66，没有。1，第188-193，1975。查看在：谷歌学术
48. M. A.范迪拉，T. T.略，P. F. Mullaney，和J. R.库尔特，“小区microfluorometry：用于快速荧光测量的方法，”科学卷。163，没有。3872，第1213至1214年，1969年。查看在：谷歌学术

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