HIV-1感染男性和HIV-1感染高危男性中XMRV核酸和抗体的流行情况

摘要

异嗜性mlv相关病毒(XMRV)最近被报道与前列腺癌和慢性疲劳综合征(CFS)有关。在健康人群中也报告了3.7%的感染。这些高度报道的感染频率引起了人们对一种新的、广泛的逆转录病毒流行病的担忧。多中心艾滋病队列研究(MACS)提供了一个评估与男性发生性行为的男性中XMRV感染流行率及其与HIV-1感染的关系的机会。XMRV感染的可靠检测需要多种诊断方法的应用，包括人类对XMRV抗体的检测和XMRV核酸的检测。因此，我们对332例患者的血浆和PBMC样本进行了检测，这些患者来自MACS队列的一个子集，使用Abbott原型ARCHITECT化学发光免疫分析(CMIAs)检测XMRV抗体，使用XMRV单拷贝qPCR检测(X-SCA)检测XMRV RNA和前病毒DNA。尽管332份样本中有9份(2.7%)对CMIA中的单一抗原呈低阳性反应，但X-SCA检测结果显示，这些样本或匹配对照的XMRV RNA或PBMC XMRV DNA均无阳性反应。因此，无论HIV-1血清状态如何，我们没有发现MACS中男性XMRV感染的证据。

1.介绍

异嗜性小鼠白血病病毒相关病毒(XMRV)是一种最近发现的γ病毒，据报道与前列腺癌和慢性疲劳综合征(CFS)有关[1，2]．Urisman等人于2006年首次在一组前列腺癌患者中发现XMRV [2]，其次是Lombardi等人报告了严重CFS患者中67%的XMRV感染和健康个体中3.7%的XMRV感染[1]．这些初步报告为进一步调查XMRV在人群中的流行情况提供了令人信服的依据。然而，当随后的研究未能在类似队列中检测到这种病毒时，引发了争议[3.- - - - - -7]．提示患者样本XMRV检测不一致可能是由于不同人群感染发生率不同，患者选择标准不同，检测方法不同[8]．也有人提出，患者血浆或组织中的病毒水平可能长期低或间歇性低，使病毒检测困难[8]．更复杂的是，由于小鼠基因组中密切相关的内源性小鼠白血病病毒(MLVs)的扩增，以及在许多标本和试剂中污染小鼠基因组DNA的高流行率，用PCR检测XMRV极易产生假阳性结果[9，10]．此外，研究表明，XMRV检测是受感染细胞系实验室污染的结果[11- - - - - -14]．Paprotka等人提出XMRV起源于实验室伪产物，当两种内源性小鼠原病毒在人前列腺癌肿瘤裸鼠传代过程中重组时，这种事件不太可能发生不止一次。因此，这组作者得出结论，从患者样本中获得的已发表的XMRV序列一定来自于被病毒污染的样本或被这种重组病毒感染的细胞系的DNA [14]．为了调查人类XMRV感染的流行情况，很明显，可靠的检测需要多种诊断方法的联合应用，包括不受核酸污染影响的方法，以避免报告潜在的高假阳性率。

因此，我们分析了最近采集的MACS队列参与者的血液样本，使用新的检测XMRV抗体和血液中的核酸[15]．MACS队列提供了评估XMRV与HIV-1感染和其他临床结果的关联以及评估其可能的传播方式的机会。我们假设，获得HIV-1感染的男性中XMRV感染的患病率高于血清阴性对照。先前的研究评估了来自hiv感染队列的样本是否存在XMRV核酸，结果为阴性[7，16，17，但没有人寻找XMRV抗体的存在。

在目前的研究中，我们首先筛选样本对XMRV的抗体反应性。这种方法消除了核酸污染导致阳性结果的风险，并降低了因低水平或偶发性病毒血症而错过感染的风险。为了进一步降低报告XMRV感染假阳性的风险，我们要求抗体和核酸(病毒RNA或DNA)必须同时存在，以报告患者为XMRV感染。这些标准得到了对接种XMRV的猕猴进行的研究的支持，这些研究证实，在XMRV感染后采集的纵向血液样本中，抗体和核酸都很容易检测到(Kearney等人在报道中;Del Prete等人在准备中)[15，18]．来自MACS队列的血浆样本通过CMIAs进行抗体反应性筛查，并通过Western blot进行确认。然后，对来自同一队列的反应性样本和盲匹配抗体阴性对照进行检测，以检测血浆中XMRV RNA和PBMCs中前病毒DNA的存在。这种确定XMRV感染流行率的方法最大限度地降低了因血液中交叉反应抗体或样本或试剂中核酸污染而报告假阳性的风险。

2.方法

2．1．临床样本

从332名MACS队列患者中获得血浆和PBMC样本。所有样本都是从2006-2009年的临床访问中收集的。332名男性中有一半是HIV-1血清阳性，其中89人使用抗逆转录病毒疗法(ART)， 77人使用ART naïve。hiv -1血清阴性的男性与hiv -1血清阳性的男性从相同的访问中选择年龄、进入研究的日期、中心和肝炎状态相似的男性。HIV-1血清阳性和阴性男性的中位年龄(四分位数(25%，75%))均为50岁(45,55.5)，HIV-1血清阳性男性的中位(IQR) CD4细胞计数和HIV-1 RNA水平为578(418,786)细胞/mm^3.和<50 (<50,12408)copies/mL。雅博实验室新研发的XMRV CMIAs (ARCHITECT平台)对血浆样本进行XMRV抗体检测[15]．Western blot检测CMIA阳性样本[15]．CMIA检测出XMRV抗体阳性的样本在年龄、艾滋病毒血清状态、抗逆转录病毒治疗和已开始治疗的art前CD4细胞计数方面与CMIA阴性样本进行1:3匹配。然后采用高灵敏度XMRV qPCR方法(X-SCA)对所有样本进行盲法检测，以确定pbmc中是否存在XMRV血浆RNA和前病毒DNA (Kearney等人已提交相关报道)。

2．2．XMRV化学发光免疫分析(CMIAs)和Western Blot

详细的程序已在前面描述过[15]．简单地说,100年μ使用两种原型ARCHITECT化学发光免疫分析法(CMIAs;Abbott Diagnostics, Abbott Park, IL)。CMIAs利用了一种直接分析格式大肠杆菌-表达的XMRV p15E或哺乳动物表达的XMRV gp70作为捕获和检测抗原。实验阳性对照来自感染xmrv的恒河猴1:1000 (PC1)或1:4000 (PC2)血浆。用正常人血浆作为阴性对照(NC)。建筑师CMIA的截止值(CO)根据以下公式计算:对于p15E CMIA, CO = 0.45 × (PC2平均相对光单位(RLU));对于gp70 CMIA, CO = 0.078 × (PC1平均相对光单位(RLU))。分析结果报告为每个样本的样本RLU与临界值RLU (S/CO)的比值。S/CO值<1.00的标本被认为是无反应的;S/CO值>1.00的标本被认为是初始反应。反应性标本进一步通过ARCHITECT p30 CMIA和研究性western blot分析。

ARCHITECT p30 CMIA也采用了直接分析格式大肠杆菌-表达的XMRV p30(衣壳蛋白)捕获和检测抗p30抗体[15]．相同样品体积(100μL)、校准器和对照组用于p30 CMIA。p30 CMIA的CO按公式计算:CO = 0.27 × (PC1 Mean RLU)。

Western blot (WB)分析使用纯化的XMRV病毒裂解液和重组gp70蛋白进行，如所述[15]．简单地说，病毒裂解物(65μG /凝胶)或重组gp70蛋白(25μ在十二烷基硫酸钠(SDS)存在下，用4-12% NuPAGE Bis-Tris二维凝胶(Invitrogen, Carlsbad, CA)进行电泳分离。凝胶上的蛋白带被电泳转移到聚偏二氟乙烯(PVDF)膜上(Invitrogen)。封闭后，将PVDF膜切成2mm条状。条带与稀释为1:10 0的人血浆样本或感染xmrv的猕猴血浆一起孵育[18稀释1:250过夜在2-8°C。去除未结合的抗体后，将条带与碱性磷酸酶标记的山羊抗人IgG (Southern Biotech, Birmingham, AL)在室温下孵育30分钟。将条带洗净，加入显色底物溶液使活性条带显现。

2．3.XMRV单拷贝检测(X-SCA)

类似于HIV-1单拷贝分析(SCA) [19， XMRV的实时PCR和RT-PCR检测，称为X-SCA (XMRV单拷贝检测)，被开发用于定量血浆中的XMRV RNA和PBMCs中的前病毒DNA (Kearney等在出版)。X-SCA是利用扩增引物针对一个保守的呕吐XMRV和内源性mlv之间的先导区，允许检测两个模板。TaqMan探针被设计成跨越签名15-24 nt缺失(源自PreXMRV-2 [14与其他MLV序列相比，XMRV gag先导区存在明显差异)。这种探针设计导致非XMRV模板比XMRV模板的荧光平台水平更低，从而区分检测中检测到的产品来源(Kearney等人在报道中)。为了确认任何阳性结果，PCR产物在2%琼脂糖凝胶上运行，允许区分86 nt XMRV X-SCA产物和110 nt非XMRV产物。

X-SCA对来自MACs队列的患者样本进行了三次重复的无模板对照(NTC)检测，以监测常见小鼠基因组DNA污染造成的假阳性水平。如前所述，将内部RCAS(禽逆转录病毒)控制插入每个血浆样本，以量化从血浆样本中提取的核酸回收率[19]．X-SCA在0.1-0.2 mL血浆上进行，检测限为9-18个RNA拷贝/mL，在1 × 10上进行⁶检测限为1个DNA拷贝/1 × 10⁶细胞。

２.４.判断XMRV感染状态的标准

从CMIAs和PCR诊断测试获得假阳性结果的风险很高[9，10]．因此，我们制定了严格的标准来宣布样本为XMRV阳性。我们要求样本必须经CMIAs或Western blot检测XMRV抗体阳性，X-SCA检测核酸(RNA或DNA)阳性。X-SCA试验阳性需要在所有三重复PCR反应中检测病毒。如果三口井的结果不一致，则认为结果不确定。

2．5．数据分析和样本量计算

最初选择200名HIV-1血清阳性和200名血清阴性的参与者，使用反正弦近似提供86%的能力来检测XMRV流行率的差异，假设HIV-1血清阳性的XMRV流行率为12%，血清阴性的为4%α= 0.05。HIV-1血清阴性的4%比率与已发表的对照系列中观察到的3.7%患病率相对应[1]．在当前ART时代对hiv -1血清阳性男性的选择限制了ART-naïve男性的纳入，而对未解冻PBMC颗粒和EDTA血浆的需要进一步将样品量减少到332人。由于正结果的数量很少，所以用简单的频率来描述数据。

3.结果

3．1.用ARCHITECT CMIAs和Western Blot检测XMRV血清学

使用直接格式ARCHITECT p15E和gp70 CMIAs，对近期从MACS队列中收集的332例患者血浆样本进行XMRV血清学评估。9份样本(5份HIV-1血清阳性，4份HIV-1血清阴性)对XMRV蛋白有反应，1份对p15E跨膜蛋白有反应，8份对gp70包膜蛋白有反应(见表)1)，导致p15E的频率为0.3% (1/332)，gp70的频率为2.4%(8/332)。然而，值得注意的是，没有一个样本对p15E和gp70都有反应。随后对9例p30 CMIA阳性样本进行检测，未检测到抗p30抗体(见表)1）.

通过病毒裂解物WB, p15E cmia阳性样品222对p15E蛋白有反应(见表)1,图1）.然而，8份gp70 cmia阳性样本中只有1份(215份)在重组gp70 WB中有反应。低的确诊率可能是由于gp70 CMIA的敏感性较高，或者检测到的抗体可能主要识别对SDS或热变性敏感的构象表位。虽然在p30 CMIA中没有反应，但222和227两个样本在病毒裂解液WB中有明显的p30条带(见表)1,图1）.然而，随后对cmia阴性的正常献血者的WB分析显示p30带的存在，表明非特异性或交叉反应(数据未显示)。其他人也观察到WB对XMRV p30蛋白的非特异性反应[20.]．

3．2．XMRV单拷贝检测(X-SCA)

对9名cmia反应性抗体患者和25名cmia阴性对照的血浆和pbmc进行XMRV单拷贝检测(X-SCA)，这些对照匹配MACS进入日期、HIV血清状态、使用ART、开始ART时间和ART前CD4+ t细胞计数(见表)2）.X-SCA检测的样本均未发现XMRV核酸(RNA或DNA)阳性，包括9份CMIA反应的样本。考虑到可供检测的样本量，X-SCA对血浆中XMRV RNA的检测限为9.2拷贝/mL，对100万个pbmc中XMRV DNA的检测限为1拷贝。在218份样本的3个副本中的一个中检测到61个RNA副本，导致该受试者的X-SCA结果不确定。同样的样本CMIA无反应，在100万个pbmc中未检测到XMRV DNA。因此，该样本不符合XMRV阳性结果的标准。由于环境小鼠基因组DNA的高频率很容易与X-SCA引物进行扩增，X-SCA运行中的单个阳性井并不高于XMRV实时PCR检测的假阳性水平(Kearney等人正在报道)。

4.讨论

Lombardi等人于2009年10月发表的XMRV研究表明，即使在健康对照组中，XMRV的血清流行率也高得惊人[1]．因此，我们开始评估XMRV感染在一个可能的高危队列中的患病率。我们采用了一种多诊断分析方法来确定患者样本的XMRV状态，以尽量减少通过单个分子或血清学方法获得假阳性结果的可能性。由于XMRV与小鼠原病毒的密切关系，环境小鼠基因组DNA的偶然扩增可能导致PCR结果假阳性[9，10]．非特异性或交叉反应性人类抗体可能导致血清学结果假阳性[15]．事实上，最近的一项研究报道，约4%的htlv -i感染个体具有对XMRV p15E蛋白交叉反应的抗体[21]．因此，我们对XMRV阳性采用了严格的标准，旨在限制报告假阳性结果的风险。我们对XMRV感染的标准要求:(1)X-SCA的所有复制必须是阳性的，(2)抗体必须通过CMIA和/或Western blot检测到，(3)核酸和抗体都必须是阳性的。X-SCA重复结果不一致的样品被报告为不确定。应用这些标准，我们没有从MACS队列中识别出任何与XMRV感染一致的样本。9份样本血清学呈阳性，但未检测到XMRV核酸。虽然X-SCA检测的一个样本不确定XMRV RNA，但抗体阴性。在所有检测的样本中均未检测到XMRV DNA。由于我们没有发现任何患者对多种XMRV抗原有反应，而且所有9名患者的血清反应性均为XMRV核酸阴性，因此我们得出结论，不需要通过病毒培养等附加方法进行后续检测。我们认为，敏感抗体筛查和敏感特异性核酸检测相结合的方法排除了研究队列中XMRV感染。

此前的研究表明，X-SCA能够在加钉的对照样本和接种猕猴的样本中检测XMRV RNA和DNA，具有很高的敏感性[22(科尔尼等人出版;Del Prete等人在准备中)。在这里分析的样品中，检测的灵敏度受到可供检测的小样本量的限制。尽管如此，在检测XMRV感染后恒河猴PBMC样本中持续存在的XMRV DNA时，检测的限度仍然足够(Del Prete等人在准备中)。因此，在最近感染XMRV的任何受试者中，前病毒DNA都可能被检测到。有人认为，由于低水平或偶发性病毒血症，XMRV核酸可能在来自感染个体的临床样本中缺失。通过对一大群hiv感染者进行XMRV免疫测试，而不是仅对病毒核酸进行测试，我们降低了报告XMRV感染假阴性的风险。

尽管早期的报告显示，在大约20%的前列腺癌患者中发现了XMRV感染的证据[2，23- - - - - -25]和67%的慢性疲劳综合症患者[1，我们没有在HIV-1感染或HIV-1感染高危人群中发现XMRV感染的明确证据。这些结果与之前在hiv -1感染患者中检测不到XMRV核酸的报道一致[7，16，17，26]．

以往研究报告的XMRV感染在队列中较高患病率的结果通常涉及单一诊断方法的检测。在目前的研究中，如果我们将XMRV感染建立在单一的诊断方法上(PCR或血清学)，XMRV的明显流行率将是1.2%;PCR检测0.3%(1/332)，血清学检测0.9%(3/332)。考虑到XMRV的PCR和血清学检测可能出现假阳性结果，我们的结果表明，应用多种诊断方法，包括测量血细胞中前病毒DNA水平，为调查XMRV感染流行率提供了更可靠的方法。我们假设，获得HIV-1感染的男性中XMRV感染的患病率高于血清阴性对照。我们研究的负面数据清楚地驳斥了这一假设。有感染HIV-1和性传播感染风险的个体没有感染XMRV的风险。

致谢

作者感谢Frank Maldarelli和Stuart Legrice的有益讨论，以及Connie Kinna、Susan Jordan和Susan Toms的行政支持。这项研究的资金由国家癌症研究所的内部癌症研究中心和艾滋病研究办公室提供，并由国家癌症研究所(SAIC 25XS119)与匹兹堡大学(JWM)的外部合同提供。柯芬是美国癌症协会的研究教授，得到了柯比基金会的支持。本文的数据是由多中心艾滋病队列研究(MACS)与中心(主要调查者)在约翰霍普金斯大学彭博公共卫生学院(Joseph B. Margolick, Lisa P. Jacobson)，霍华德布朗卫生中心，Feinberg医学院，西北大学，库克县卫生服务局(John P. Phair, Steven M. Wolinsky)、加州大学洛杉矶分校(Roger Detels)和匹兹堡大学(Charles R. Rinaldo)。MACS由美国国家过敏和传染病研究所资助，美国国家癌症研究所提供额外的补充资金:UO1-AI-35042, UL1-RR025005 (GCRC)， UO1-AI-35043, UO1-AI-35039, UO1-AI-35040, UO1-AI-35041。网站位于http://www.statepi.jhsph.edu/macs/macs.html．本出版物的内容不一定反映卫生与公众服务部的观点或政策，也不提及商品名称、商业产品或组织暗示美国政府的认可。

参考文献

1. V. C. Lombardi, F. W. Ruscetti, J. Das Gupta等人，“慢性疲劳综合征患者血细胞中感染性逆转录病毒XMRV的检测”，科学第326期5952，第585-589页，2009。视图:出版商的网站|谷歌学者
2. a . Urisman, R. J. Molinaro, N. Fischer等人，“R462Q RNASEL纯合子变异患者前列腺肿瘤中新型γ病毒的鉴定”PLoS病原体， 2006年第2卷第25条。视图:出版商的网站|谷歌学者
3. B. C. Satterfield, R. A. Garcia, H. Jia, S. Tang, H. Zheng, and W. M. Switzer，“美国慢性疲劳综合征患者的血清学和PCR检测显示与异嗜性或多性鼠白血病病毒相关病毒无相关性，”Retrovirology， 2011年第8卷，第12条。视图:出版商的网站|谷歌学者
4. O. Hohn, K. Strohschein, A. U. Brandt等人，“没有证据表明德国疲劳CFS和MS患者中存在XMRV，尽管该病毒能够在体外感染人类血细胞。”《公共科学图书馆•综合》，第5卷，第5期。文章编号e15632, 2010。视图:出版商的网站|谷歌学者
5. M. Cornelissen, F. Zorgdrager, P. Blom等人，“在荷兰HIV-1感染男性的精液中缺乏XMRV检测，”《公共科学图书馆•综合》，第5卷，第5期。8、文章编号e12040, 2010。视图:出版商的网站|谷歌学者
6. O. Erlwein, S. Kaye, M. O. McClure等人，“在慢性疲劳综合征中未能检测到新型逆转录病毒XMRV，”《公共科学图书馆•综合》，第5卷，第5期。1、文章ID e8519, 2010。视图:出版商的网站|谷歌学者
7. E. R. Gray, J. a . Garson, J. Breuer等，“在伦敦hiv -1阳性患者队列中没有XMRV或相关逆转录病毒的证据，”《公共科学图书馆•综合》，第6卷，第2期3、文章ID e18096, 2011。视图:出版商的网站|谷歌学者
8. M. Kearney和F. Maldarelli，“慢性疲劳综合症和前列腺癌中异嗜性小鼠白血病病毒相关逆转录病毒的现状:获取记分卡，而不是处方笺”传染病杂志号，第202卷。10, pp. 1463-1466, 2010。视图:出版商的网站|谷歌学者
9. B. Oakes, A. K. Tai, O. Cingoz等人，“人类DNA样本与小鼠DNA污染可能导致xmrv样序列的错误检测，”Retrovirology， 2010年第7卷第109条。视图:出版商的网站|谷歌学者
10. M. J. Robinson, O. W. Erlwein, S. Kaye等人，“人类组织中的小鼠DNA污染检测XMRV，”Retrovirology， 2010年第7卷，第108条。视图:出版商的网站|谷歌学者
11. J. A. Garson, P. Kellam和G. J. Towers，“来自人类前列腺癌组织的XMRV整合位点分析表明PCR污染而不是真正的人类感染，”Retrovirology2011年，第8卷，第13条。视图:出版商的网站|谷歌学者
12. S. Hué， E. R. Gray, A. Gall等人，“与疾病相关的XMRV序列与实验室污染一致，”Retrovirology， 2010年第7卷第111条。视图:出版商的网站|谷歌学者
13. K. Knox, D. Carrigan, G. Simmons等人，“没有证据表明先前被确认为xmrv感染的CFS患者中存在鼠样γ病毒，”科学第333期6 .石玉林，2011。视图:出版商的网站|谷歌学者
14. T. Paprotka, K. A. Delviks-Frankenberry, O. Cingöz等，“逆转录病毒XMRV的重组起源”，科学第333期6 .石玉林，2011。视图:出版商的网站|谷歌学者
15. X. Qiu, P. Swanson, K. C. Luk等，“XMRV感染引起的抗体的特性和用于流行病学研究的免疫分析的发展，”Retrovirology， 2010年第7卷，第68条。视图:出版商的网站|谷歌学者
16. E. Barnes, P. Flanagan, A. Brown等，“在血液传播病毒感染高危个体的血液中检测不到异嗜性小鼠白血病病毒相关病毒”，传染病杂志号，第202卷。10, pp. 1482-1485, 2010。视图:出版商的网站|谷歌学者
17. S. Tang, J. Zhao, R. Viswanath等人，“在非洲感染人类免疫缺陷病毒1型的献血者或个人的血浆或外周血单个核细胞中缺乏可检测到的异嗜性小鼠白血病病毒相关病毒，”输血第51卷第1期3, pp. 463-468, 2011。视图:出版商的网站|谷歌学者
18. N. Onlamoon, J. Das Gupta, P. Sharma等，“恒河猴暴露于人类γ病毒XMRV的感染、病毒传播和抗体反应”，病毒学杂志第85卷第1期9，第4547-4557页，2011。视图:出版商的网站|谷歌学者
19. S. Palmer, A. P. Wiegand, F. Maldarelli等，“血浆中对人类免疫缺陷病毒1型RNA具有单拷贝敏感性的新的实时逆转录酶启动PCR检测方法”，临床微生物学杂志号，第41卷。10，第4531-4536页，2003。视图:出版商的网站|谷歌学者
20. R. A. Furuta, T. Miyazawa, T. Sugiyama等人，“在日本，异嗜性小鼠白血病病毒相关病毒与前列腺癌或慢性疲劳综合征没有关联，”Retrovirology， 2011年第8卷，第20条。视图:出版商的网站|谷歌学者
21. 邱晓霞，唐宁等，“献血者、HTLV和HIV人群中XMRV的流行情况”第15届人类逆转录病毒:HTLV和相关病毒国际会议论文集。比利时鲁汶，6月5日至8日, 2011年。视图:出版商的网站|谷歌学者
22. G. Simmons, S. A. Glynn, J. A. Holmberg等人，“血液异嗜性小鼠白血病病毒相关病毒科学研究工作组:任务、进展和计划”，输血第51卷第1期3, pp. 643-653, 2011。视图:出版商的网站|谷歌学者
23. R. S. Arnold, N. V. Makarova, A. O. Osunkoya等，“前列腺癌患者的XMRV感染:新的血清学分析和PCR和FISH的相关性，”泌尿外科，第75卷，第5期4, pp. 755-761, 2010。视图:出版商的网站|谷歌学者
24. R. Schlaberg, D. J. Choe, K. R. Brown等，“XMRV存在于恶性前列腺上皮，并与前列腺癌，特别是高级别肿瘤相关。”美国国家科学院学报，第106卷，第2期。38, pp. 16351-16356, 2009。视图:出版商的网站|谷歌学者
25. B. P. Danielson, G. E. Ayala，和J. T. Kimata，“在美国南部前列腺癌患者的正常和肿瘤组织中检测异嗜性小鼠白血病病毒相关病毒依赖于特定的聚合酶链反应条件，”传染病杂志号，第202卷。10, pp. 1470-1477, 2010。视图:出版商的网站|谷歌学者
26. K. J. Kunstman, T. Bhattacharya, J. Flaherty等人，“在有感染HIV风险的男性血细胞中缺乏异嗜性小鼠白血病病毒相关病毒，”艾滋病，第24卷，第2期第11页，1784-1785页，2010。视图:出版商的网站|谷歌学者

版权

版权所有©2011 J. Spindler等人。这是一篇发布在知识共享署名许可协议，允许在任何媒介上不受限制地使用、传播和复制，但必须正确引用原作。