文摘

这个实验的目的是确定维拉帕米,nicardipine,硝酸甘油(1)梗塞size-limiting效果和(2)抗心律失常的作用在活的有机体内在缺血/再灌注兔的心。兔子收到区域缺血30分钟的左前降枝冠状动脉闭塞后的3个小时再灌注在氯胺酮和甲苯噻嗪麻醉。动物被随机分配到以下4个治疗组:对照组,维拉帕米组,nicardipine集团和硝酸甘油组。连续注入维拉帕米、nicardipine或硝酸甘油发起缺血前5分钟。梗死面积大小/在维拉帕米的风险降低,和硝化甘油。在nicardipine ischemia-induced心律失常的发生率降低,维拉帕米和硝化甘油。reperfusion-induced心律失常的发生率下降在维拉帕米和硝化甘油。从目前的实验结果,维拉帕米和硝化甘油,而比nicardipine负担显著保护心脏缺血和再灌注兔模型。

1。介绍

心肌缺血/再灌注损伤及其预防已成为相当多的关注的焦点。据报道,细胞内钙超载是公认的共同通路,可以解释缺血/再灌注损伤(<一个href="#B1">1]。

多项研究表明, 类型对缺血性心肌钙拮抗剂有有益的影响通过抑制钙离子跨膜流入心脏和血管平滑肌(<一个href="#B2">2,<一个href="#B3">3]。

另一方面,以往的实验研究研究一氧化氮(NO)的影响捐赠者减少心肌缺血/再灌注损伤(<一个href="#B4">4,<一个href="#B5">5]。

这个心脏保护的机制是由于硝化甘油在血管平滑肌细胞没有转换,放松血管冠状动脉大血管和肌肉。因此,硝化甘油降低预加载,也可以提供增加血液流向心脏。

很明显,钙拮抗剂和没有捐赠者的心血管效应。然而,没有研究这些药物的心肌保护的强度指标的梗塞大小和心律失常。

这个实验的目的是确定维拉帕米,nicardipine,硝化甘油梗塞size-limiting效果和抗心律失常的作用在活的有机体内在缺血/再灌注兔的心。

2。材料和方法

本研究按照指导方针执行的动物保健和使用委员会神奈川牙科学院。

2.1。一般手术准备

雄性新西兰白兔重2.7 - -3.2公斤是允许的随意访问标准实验室饮食和水。动物最初与氯胺酮麻醉(35毫克公斤1)和甲苯噻嗪(5毫克公斤1)肌内。5毫升1%利多卡因皮下注射作为额外在首次手术局部麻醉。气管切开术是执行和兔子插管与uncuffed气管导管(ID 3.5毫米)。动物是通风与室内空气补充额外的氧气使用机械通风(Shinano, sn - 480 - 5、东京、日本)和半封闭式呼吸电路(Shinano, sn - 487,东京,日本)。End-tidal有限公司2部分压力持续监控使用multigas监控(Datex Capnomac,芬兰赫尔辛基)。通风率-呼吸每分钟30至35毫升之间和潮汐成交。频繁调整呼吸速率保持P一个O2大于100毫米汞柱,P一个有限公司2在35 - 45毫米汞柱,pH值7.35 - -7.45,和基地−3 + 3之间的过度。左颈静脉被曝光后,与聚乙烯导管插管,0.9%氯化钠(0.15毫升·分钟1在实验)持续管理。颈动脉的解剖和充满液体的聚乙烯管放置在它并立即连接心电图监测(Nihon-kohden有限公司生活范围11日,东京,日本)通过压力传感器(Nihon-kohden有限公司,tp - 400 t,东京,日本)对动脉压记录。心电图记录整个实验通过铅II标准心电图。缺血或reperfusion-induced心律失常包括过早心室收缩(PVC)和室性心动过速(VT)。毕竟手术已经完成,15分钟内被允许的稳定。麻醉维持与氯胺酮和甲苯噻嗪溶液(氯胺酮35毫克公斤1·h1甲苯噻嗪5 mg·公斤1·h1坜;K / X)与室内空气补充额外的纯氧。

左胸和心包执行公开开放的心。丝线(k - 890 h, Ethicon,萨默维尔市,NJ)与锥颈- 1针通过左冠状动脉前降在结束(小伙子)和领带是穿过一个小乙烯管形成一个陷阱。小伙子被拉网罗阻挡,当时由夹紧固定管的蚊子止血剂。兔子有500单位的肝素预防血栓形成后的冠状动脉再灌注。证实了心肌缺血区域黄萎病,ST段抬高,降低血压。再灌注证实了反应性充血后表面释放陷阱。

2.2。学习小组和实验协议

在当前的研究中使用的实验设计见图<一个href="//www.newsama.com/journals/arp/2011/521084/fig1/" target="_blank">1。兔子收到区域缺血30分钟的小伙子闭塞紧随其后3小时再灌注在氯胺酮和甲苯噻嗪(K / X)麻醉。在此之前,兔子被随机分配到下面的4个治疗组( 、职责):对照组(C组),维拉帕米(V)组,nicardipine (NC组),和硝化甘油(元组)治疗组。连续注入·维拉帕米(0.1毫克公斤1·h1),nicardipine·kg(0.06毫克1·h1),或硝酸甘油(0.06 mg·公斤1·h1开始前5分钟缺血。治疗剂量的药物管理。


图1
原理图的协议。C组:对照组( = 9 )。集团数控:nicardipine组( = 5 )。V:维拉帕米组( = 8 )。集团NT:硝酸甘油组( = 1 0 )。
2.2.1。确定风险和梗塞区域的大小

完成实验协议后,在活的有机体内可视化的心肌风险reocclusion来完成冠状动脉和静脉插管注射10%伊文思蓝,直到眼睛变成蓝色。伊文思蓝允许循环大约30秒风险和nonrisk区域的界线。心中深麻醉下迅速切除5%七氟醚和冷冻。冰冻的心被切成六横片厚度相等。该地区的风险与伊文思蓝由负染法。15分钟的片被孵化彩色1%氯化三苯四唑(TTC)等张pH值7.4磷酸盐缓冲剂。染色后,部分被放置在福尔马林保存,和度量风险的区域,左心室梗死区,是用计算机辅助形态测量学。从每个部分,缺血性风险区域(没有被蓝色染料)和梗塞的面积(TTC)清白的概述,以平面几何。每个区域的面积是平均的片。梗死面积的大小被表示为一个百分比的风险。

2.3。血流动力学测量

血流动力学测量包括收缩压、舒张压、平均动脉血压、心率。速度压力产品计算心率和动脉压峰值的产物。基线血流动力学测量之前被任何实验操作。随后,preischemia进行了测量,缺血30分钟,30和60分钟的再灌注。

2.4。限制部分

兔子不能存活到最后的实验等致命的心律失常心室颤动(VF)已经被排除在进一步的数据分析,不考虑。

2.5。统计分析

差异在风险/左心室区域,梗塞大小/区域风险,和持续时间的心律失常被克鲁斯卡尔-沃利斯检验评估之后,邓恩的过程作为一个多重比较过程。

统计比较个人之间血流动力学参数组是由使用单向方差分析(方差分析)以及Fisher保护有显著差异。Bartlett测试平等的方差是用来确保使用单向方差分析统计比较的有效性。

发病率的差异百分比的心律失常进行了分析 测试。

报告所有数据组平均数±标准差和被认为是统计显著性概率值( )小于0。。

3所示。结果

血流动力学在缺血和再灌注期间如表所示<一个href="//www.newsama.com/journals/arp/2011/521084/tab1/" target="_blank">1。心率(HR)显著降低在NT组再灌注后30分钟。平均动脉血压(地图)是显著降低在V组和组元在任何时候测量并在数控组再灌注后60分钟和preischemia。速度压力乘积(RPP) C组之间没有显著改变,集团数控和组v .然而,C组和组之间有显著差异NT缺血30分钟后,再灌注后,30 - 60分钟。

表1
缺血和再灌注期间血流动力学。

风险的比率( )左心室( )范围从 来 所有组间无显著差异(图<一个href="//www.newsama.com/journals/arp/2011/521084/fig2/" target="_blank">2)。图<一个href="//www.newsama.com/journals/arp/2011/521084/fig3/" target="_blank">3显示梗塞面积百分数表示的区域风险四组。意思是梗塞大小 的 在C组和V组显著降低( )和组元( )( 与控制)(图<一个href="//www.newsama.com/journals/arp/2011/521084/fig3/" target="_blank">3)。与C组比较,观察心肌保护作用组V和组元。


图2
图中显示R / L值(%),这意味着该地区的风险表示为左心室的比例。数据表示为±s.d区域风险披露所有组之间无显著差异,表明梗塞大小的变化观察各组之间没有依赖R / L。C组:对照组。组数控:nicardipine组。V:维拉帕米组。组NT:硝酸甘油组。

图3
图中显示I / R值(%),这意味着梗塞大小区域风险的百分数表示。C组:对照组。组数控:nicardipine组。V:维拉帕米组。组NT:硝酸甘油组。#明显不同( < 。 0 5 美国南达科他州)从C组(平均±)。

心律失常的发生率在C组心肌缺血是33.3%,0%在NC组和组V, 14.3%在NT组(图<一个href="//www.newsama.com/journals/arp/2011/521084/fig4/" target="_blank">4)。在再灌注心律失常的发生率为88.9%,80.0%,60.0%,50.0%,C组,组数控,V组,分别和组元(图<一个href="//www.newsama.com/journals/arp/2011/521084/fig5/" target="_blank">5)。心律失常在心肌缺血持续时间是48.4秒,0秒,0秒,0.2秒在C组,组数控,V组,分别和组元(图<一个href="//www.newsama.com/journals/arp/2011/521084/fig6/" target="_blank">6)。在再灌注心律失常是453.7秒,持续时间63.8秒,97.1秒和73.0秒在C组,组数控,V组,分别和组元(图<一个href="//www.newsama.com/journals/arp/2011/521084/fig7/" target="_blank">7)。


图4
该图显示了心肌缺血期间心律失常的发生率。C组:对照组。组数控:nicardipine组。V:维拉帕米组。组NT:硝酸甘油组。#明显不同( < 。 0 5 美国南达科他州)从C组(平均±)。

图5
该图显示了在再灌注心律失常的发生率。C组:对照组。组数控:nicardipine组。V:维拉帕米组。组NT:硝酸甘油组。#明显不同( < 。 0 5 美国南达科他州)从C组(平均±)。

图6
的图中显示持续时间心肌缺血期间心律失常。C组:对照组。组数控:nicardipine组。V:维拉帕米组。组NT:硝酸甘油组。#明显不同( < 。 0 5 美国南达科他州)从C组(平均±)。

图7
在再灌注心律失常的图中显示时间。C组:对照组。组数控:nicardipine组。V:维拉帕米组。组NT:硝酸甘油组。#明显不同( < 。 0 5 从C组(意思是美国南达科他州±)

4所示。讨论

目前的研究表明,维拉帕米和硝化甘油,而比nicardipine负担显著保护心脏缺血和再灌注心肌梗塞的兔子模型作为索引的大小和持续时间在缺血和再灌注室性心律失常。

协议来防止calcium-blocker坏死可能因人而异研究者对药物的选择,剂量,时间管理,抵押品的动物的血液流动,和不同的实验系统<一个href="#B2">2,<一个href="#B6">6]。在这个实验中,我们使用抵押品兔心脏的冠状动脉血流几乎是零像人类的心<一个href="#B7">7,<一个href="#B8">8]。

雷蒙和詹宁斯称,维拉帕米减少梗塞大小40分钟缺血引起的在活的有机体内狗,但未能限制梗死大小段缺血时延长到3个小时。然而,与维拉帕米预处理前15分钟缺血阻止坏死细胞,尽管治疗开始后15分钟缺血发作未能限制梗死大小(<一个href="#B2">2]。维拉帕米的能力,减少梗塞大小似乎受到缺血期间的起始时间和治疗。在这项研究中,维拉帕米前5分钟缺血预处理诱导缺血30分钟的减少梗塞大小。似乎与维拉帕米在缺血预处理可能需要减少梗塞大小在兔子的心。

类型钙拮抗剂维拉帕米对收缩功能有积极作用等缺血性细胞在缺血和改善了缺血后恢复功能(<一个href="#B9">9]。合理使用维拉帕米,以减少心肌梗塞大小包括(1)减少需氧量的能力通过降低后负荷,预加载和收缩性;(2)加强氧气供应,缓解冠状动脉血管痉挛,vasocontraction缺血区,(3)防止ischemia-induced钙超载;(4)保护线粒体结构和功能(<一个href="#B9">9,<一个href="#B10">10),(5)减少的可用性钙刺激腺苷三磷酸酶、蛋白酶和脂酶(<一个href="#B6">6]。我们的研究表明,利率产品的压力,这是心肌需氧量指标之一,控制和维拉帕米组没有显著差异。这表明梗塞size-limiting效果维拉帕米并不取决于心肌氧供需。

相反,nicardipine未能减少梗塞大小。Nicardipine dihydropyridine导数和一个强有力的冠状动脉和大脑血管舒张药<一个href="#B3">3]。尽管在狒狒和狗,梗塞size-limiting nicardipine曾被报导过的影响(<一个href="#B3">3,<一个href="#B11">11],nicardipine没有明显的活动在我们的兔模型。这可能是由于nicardipine接受能力的差异,物种,抵押品的管理、缺血的长度,和程度血流量(<一个href="#B7">7,<一个href="#B8">8]。维拉帕米主要影响心肌,而nicardipine施加更大的影响在外围血管平滑肌。它可能会引起反射性心动过速如果标志外围血管舒张,导致血压大幅度降低(<一个href="#B12">12]。假设nicardipine-induced心动过速与维拉帕米不同,可能会增加心肌耗氧量,减少梗塞size-limiting效应(<一个href="#B13">13]。然而,它似乎并没有这种机制因为nicardipine没有显著影响人力资源和RPP在这项研究。

硝化甘油已经用于治疗心绞痛和心脏衰竭。假设硝化甘油转换在血管平滑肌细胞或不同类(S-nitrosothiol SNO),激活鸟苷酸环化酶,从而放松血管平滑肌(<一个href="#B14">14]。他们的血管舒张活动减少心肌需氧量减少静脉回到心脏。因此,没有在心脏保护中起着至关重要的作用(<一个href="#B15">15]。在治疗剂量硝酸甘油有两个主要的影响。首先,它导致大血管的扩张,导致池静脉血液。这减少预加载,减少心脏的工作。第二,硝化甘油扩张冠状血管,增加心肌血液供应。硝化甘油降低心肌耗氧量,因为减少了心脏的工作(<一个href="#B12">12]。我们的实验数据也表明,硝酸甘油降低齿槽。因此,心肌梗塞大小也可能被解释成小耗氧量。

硝化甘油已经证明,在人类和动物研究,诱导潜在表型,限制缺血和再灌注后组织损伤。这种现象类似于缺血性预处理,一些报道认为硝酸盐的分子通路参与这种保护作用是相同的,确定缺血预处理(<一个href="#B16">16]。

之前从我们实验室的调查表明,与硝化甘油预处理缺血前30分钟未能限制梗死大小(<一个href="#B17">17]。然而,同一剂量硝酸甘油降低梗塞大小管理时缺血前5分钟。这表明硝化甘油的能力减少梗塞大小取决于政府的时机。

心肌缺血/再灌注损伤可能显著影响心脏功能和通过细胞Ca诱发心律失常2 +过载(<一个href="#B18">18]。一般来说,ischemia-induced心律失常的主要原因是在脉冲畸变生成或缺陷在冲动传导<一个href="#B12">12阻止calcium-blocker]。另一方面,reperfusion-induced心律失常的主要原因是缺乏研究。延迟后depolarization-induced活动和Ca的增加2 +浓度被认为扮演一个角色。挡住了 类型Ca2 +频道已被证明是有效地预防大鼠再灌注心律失常(<一个href="#B18">18,<一个href="#B19">19]。在这项研究中,维拉帕米、nicardipine和硝化甘油在心肌缺血有抗心律失常的作用。建议维拉帕米和nicardipine可以通过减少大量减少心律失常 型钙电流。只有nicardipine没有减少在再灌注心律失常的发生率。Nicardipine,用于治疗高血压,产生更强的影响比心脏血管肌肉[<一个href="#B12">12]。因此,它不是临床用于抗心律失常的药物。至于硝化甘油,一份报告,没有,从硝化甘油转换,街区 型钙通道(<一个href="#B20">20.]。有可能硝化甘油心室性心律失常的发生率和持续时间减少了阻碍钙通道。

5。结论

在这个调查、维拉帕米和硝化甘油降低心肌梗塞大小和室性心律失常的发生率和持续时间在缺血和再灌注。根据目前的实验结果,维拉帕米和硝化甘油,而比nicardipine承受重大保护心脏缺血和再灌注兔模型。