古细菌生产Polyhydroxyalkanoate (PHA)有限公司,并从生物柴油Industry-Derived Terpolyesters副产品gydF4y2Ba

文摘gydF4y2Ba

的archaeongydF4y2BaHaloferax mediterraneigydF4y2Ba被选为生产PHA的合作和terpolyesters使用廉价的粗甘油阶段(本金保证产品)从生物柴油产量作为碳源。本金保证产品评估相比纯甘油的应用。应用纯甘油,共聚酯的摩尔分数3-hydroxybutyrate (3 hb) 0.90摩尔/摩尔和3-hydroxyvalerate 0.10摩尔/摩尔(3高压),产生0.12克/ Lh的容积效率和细胞内PHA 75.4 wt的内容。- %在生物蛋白质+ PHA的总和。本金保证产品的应用导致了相同的聚酯成分和容积效率,表明应用本金保证产品为原料的可行性。摩尔质量分布的分析表明体重平均摩尔质量gydF4y2Ba150 kDa,多分散性gydF4y2Ba纯甘油和253 kDa的2.1和2.7对本金保证产品,分别;融化温度介于130和140°C之间设置。提供gydF4y2BaγgydF4y2Ba丁内酯作为4-hydroxybutyrate (4 hb)前体导致聚[(gydF4y2BaRgydF4y2Ba)3-hydroxybutyrate -gydF4y2Ba有限公司gydF4y2Ba- (gydF4y2BaRgydF4y2Ba)3-hydroxyvalerate-co-4-hydroxybutyrate] (PHBHV4HB) terpolyester包含3高压(0.12摩尔/摩尔)和4 hb(0.05摩尔/摩尔)聚[(gydF4y2BaRgydF4y2Ba)3-hydroxybutyrate] (PHB)矩阵;此外,这一过程不经消毒的生物反应器运行。terpolyester显示减少融化(电热融化在122和137°C)和玻璃转变温度(2.5°C),增加了摩尔质量(391 kDa),类似的共聚酯的多分散性。gydF4y2Ba

1。介绍gydF4y2Ba

biobased Polyhydroxyalkanoates (pha)吸引越来越多的关注,生物相容性和生物可降解的“绿色塑料。“这是由于他们有前途的材料特性和良好的集成的生命周期为自然封闭的碳平衡;无论是生产还是他们的应用程序或退化导致了负面生态影响gydF4y2Ba1gydF4y2Ba]。这些polyoxoesters羟基烃酸(已经)构成为碳和能量累积储备不同原核中属真细菌和古菌(gydF4y2Ba2gydF4y2Ba]。通常支持细胞内PHA合成因素,类似于其他微生物的积累储存糖原等化合物,细胞内的能源费用高,特点是高池的乙酰辅酶a, ATP或NAD (P) H。这种情况造成足够供应的碳基质与次优growth-determining组件的可用性,如氮、磷酸盐或growth-essential微量元素(gydF4y2Ba1gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

根据提供的碳源和微生物生产菌株,PHA的材料性能与结晶热塑性塑料的灵活的弹性体,乳液,甚至是高性能、功能聚合物;因此,他们对可销售的物品可以用于进一步的处理。之后,他们的寿命,pha是完全可生物降解的有限公司gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba和水作为矿化的最终产品(gydF4y2Ba3gydF4y2Ba]。具体材料特性高度取决于组成单体的水平。而水晶,热塑性短链长度pha (gydF4y2BascigydF4y2Ba-PHAs),与3 - 5碳原子组成的,是区别于弹性介质链长度pha (gydF4y2Ba制程gydF4y2Ba-PHAs)构成的聚酯6到14个碳原子组成。因此,他们表现出的潜力取代各种petrol-based竞争对手在一些散装和利基领域的塑料市场在不久的将来gydF4y2Ba4gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

实施“白色生物技术”等常用材料的生产生物塑料可以被看作是真正鼓励可持续工业发展,不过,对于一系列产品,特别是散装材料,生物技术生产战略仍然尚未通过经济可行性的门槛。特别是PHA生产的经济很大程度上,即50%的整个生产成本,成本定义为满足原材料的供应,特别是碳基质。这可以很容易地理解考虑到PHA积累发生在有氧条件下,导致高碳基质细胞内呼吸的损失。因此,主要是由于碳通过公司的巨大损失gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba水溶性代谢产物的形成和排泄,只有最高金额低于一半的碳源是针对细胞生物量增长和PHA积累。经典,pha生产从珍贵的基板的高营养价值,如葡萄糖、淀粉、食用油(gydF4y2Ba5gydF4y2Ba]。类似于当代“燃料和食品”或“水箱板”的争议,这将导致严重的伦理冲突考虑全世界大量的人挨饿。应用基质营养价值的生物聚合物或生物燃料的生产有一个毋庸置疑的对食品价格的影响,通货膨胀作为驱动力,从而使食品附近对无数人高不可攀。作为户外,pha可以产生从廉价的可再生资源作为碳原料。为此,纯糖类,脂类,农业的和工业的废弃物如水解的产物(ligno)纤维素制品,淀粉、粗甘油阶段(本金保证产品)从生物柴油生产或甘油从石化,脂质,乳清乳糖乳制品行业,醇如甲醇、甲烷从有机废物厌氧消化,和有限公司gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba从工业废水可以在足够的数量gydF4y2Ba6gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba9gydF4y2Ba]。利用废料作为PHA合成原料构成一个可行的战略有成本效益的生物高聚物生产和支持各种农工业的分支来克服现有的垃圾处理问题。gydF4y2Ba

在过去的几年,生物柴油的生产造成了相当大的增加大幅降低成本的甘油,生物柴油的主要副产品制造;大约10%的甘油产生考虑油脂作为原料的数量(gydF4y2Ba10gydF4y2Ba,gydF4y2Ba11gydF4y2Ba]。因此,甘油已经成为一个非常有吸引力的“白色生物生长的基质。“此外,由于碳原子在碳水化合物,降低甘油高于细胞使用甘油更减少生理状态,有利于胞内聚合物的合成。一般来说,甘油可以被视为一个最有利的基质生成的PHB前体乙酰辅酶a。本金保证产品从生物柴油生产含有高达60%的甘油和水等杂质,甲醇,氢氧根残留,盐、脂肪酸和酯类gydF4y2Ba12gydF4y2Ba]。作为甲醇构成严重的细胞毒素对许多微生物菌株,选择一个适当的生产菌株,容忍一定浓度的酒精。这是理由gydF4y2BaMethylomonas extorquensgydF4y2Ba有机体,如果种植在本金保证产品,首先将甲醇利用甘油作为碳基质,如前所报道Braunegg和他的同事们(gydF4y2Ba13gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

使用甘油进行微生物分析了PHA合成在自然PHA生产商,如,gydF4y2BaMethylobacterium rhodesianumgydF4y2Ba和gydF4y2BaRalstonia eutrophagydF4y2Ba(gydF4y2Ba14gydF4y2Ba),gydF4y2BaMethylomonas extorquensgydF4y2Ba(gydF4y2Ba13gydF4y2Ba),gydF4y2BaAzohydromonas拉塔病gydF4y2BaDSM 1124gydF4y2Ba15gydF4y2Ba),几个假单胞菌菌株gydF4y2BaPs. putidagydF4y2BaKT2442 [gydF4y2Ba11gydF4y2Ba),最近描述gydF4y2BaZobellella denitrificansgydF4y2Ba(gydF4y2Ba16gydF4y2Ba),gydF4y2Ba贪铜菌吊钩虫拿gydF4y2Ba(gydF4y2Ba17gydF4y2Ba,gydF4y2Ba18gydF4y2Ba),gydF4y2BaNovosphingobium capsulatumgydF4y2Ba(gydF4y2Ba19gydF4y2Ba),而gydF4y2Ba芽孢杆菌gydF4y2Basp。gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba]。甘油也被调查了PHB作为底物合成的重组gydF4y2Ba大肠杆菌gydF4y2Ba携带PHB生物合成基因gydF4y2Ba链霉菌属aureofaciensgydF4y2Ba(gydF4y2Ba21gydF4y2Ba),gydF4y2Ba伯克不过gydF4y2Ba写明ATCC 17759gydF4y2Ba22gydF4y2Ba),古生菌gydF4y2BaHaloarculagydF4y2Basp。IRU1 [gydF4y2Ba23gydF4y2Ba),gydF4y2BaHalomonasgydF4y2Basp。KM-1 [gydF4y2Ba24gydF4y2Ba),而gydF4y2BaHaloferax mediterraneigydF4y2BaDSM 1411gydF4y2Ba25gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

旁边一个方便廉价的原料,高效PHA生产需要稳定、健壮、和快速增长的微生物生产菌株。的archaeongydF4y2BaHaloferax mediterraneigydF4y2Ba被隔离在地中海沿岸,首先详尽描述为PHA生产商Rodriguez-Valera和签约gydF4y2Ba26gydF4y2Ba]。在Euryarchaeota的门,生物属于一类halobacteria,极喜盐生物领域的分支古生菌。这种压力不仅容忍高盐度,但即使增长需要2 - 5 M氯化钠。属gydF4y2BaHaloferaxgydF4y2Ba由于快速增长的特殊利益和相关生物相比,其高PHA-productivity, PHA的高质量产生的应变,和更广泛的底物谱特性;众所周知把几个mono - di -和多糖gydF4y2Ba26gydF4y2Ba,gydF4y2Ba27gydF4y2Ba),gydF4y2Ba在其他事物之外gydF4y2Bawhey-derived糖,和一些富含淀粉的原料(gydF4y2Ba28gydF4y2Ba,gydF4y2Ba29日gydF4y2Ba]。除了biopolyesters,据报道,应变产生高附加值的胞外多糖(EPS)可能被应用于食品技术由于其xanthan-like属性(gydF4y2Ba2gydF4y2Ba,gydF4y2Ba25gydF4y2Ba]。这是可见的粘液的性格gydF4y2Bah . mediterraneigydF4y2Ba菌落生长在固体介质;由于bacterioruberins高含量,网一群类胡萝卜素,这些殖民地是粉红色红色阴影(gydF4y2Ba30.gydF4y2Ba]。EPS生产负面影响PHA合成由于部分碳转向biopolyester生产的EPS相反。最近,它被击出演示了如何解决这个问题负责EPS的生物合成基因簇的一部分;相对于野生型菌株,这novel-engineeredgydF4y2Bah . mediterraneigydF4y2Ba应变以增强PHA合成率约为20%。(gydF4y2Ba31日gydF4y2Ba]。直到最近,的完整序列gydF4y2Bah . mediterraneigydF4y2Ba基因组破译和报道gydF4y2Ba32gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

1.1。这项研究的目的gydF4y2Ba

基于第一次的重复结果热点PHA生产本金保证产品(gydF4y2Ba24gydF4y2Ba),提出了工作比较PHA共聚酯合成纯甘油和本金保证产品的生物合成PHA terpolyesters使用本金保证产品一起4-hydroxybutyrate (4 hb)前体gydF4y2BaγgydF4y2Ba丁内酯(GBL ()。gydF4y2BaHaloferax mediterraneigydF4y2Ba被选为强大的古细菌生产菌株。工作包括动力学过程分析和获得的材料特性的详细描述关于热分析和摩尔质量分布。阐述了数据与文献数据比较中讨论PHA生产gydF4y2Bah . mediterraneigydF4y2Ba乳清,葡萄糖和淀粉基材料,应当进一步用于设计一个半工业规模生产工厂半成品热点PHA从本金保证产品生产。gydF4y2Ba

2。材料和方法gydF4y2Ba

2.1。生产压力gydF4y2Ba

一个冻干的文化gydF4y2BaHaloferax mediterraneigydF4y2BaDSM 1411年购买从DSMZ文化集合(德国布伦瑞克)。gydF4y2Ba

2.2。原材料gydF4y2Ba

本金保证产品从tallow-base生物柴油生产从银色能量(英国)有限公司,英国。gydF4y2Ba

2.3。媒体成分和培养条件gydF4y2Ba

应变是种植在10 L生物反应器(1523 L,生物工程,瓦尔德,瑞士)生产的聚((gydF4y2BaRgydF4y2Ba3 -羟基丁酸-gydF4y2Ba有限公司gydF4y2Ba- (gydF4y2BaRgydF4y2Ba3-hydroxyvalerate) (PHBHV)共聚酯或聚(gydF4y2BaRgydF4y2Ba)3-hydroxybutyrate -gydF4y2Ba有限公司gydF4y2Ba- (gydF4y2BaRgydF4y2Ba)3-hydroxyvalerate -gydF4y2Ba有限公司gydF4y2Ba4-hydroxybutyrate) (P (HBHV4HB)。gydF4y2Ba

基本的生理盐水介质由如下(g / L):氯化钠,150;MgClgydF4y2Ba_2gydF4y2Ba* 6小时gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba啊,13.0;氯化钾,4.00;CaClgydF4y2Ba_2gydF4y2Ba* 2 hgydF4y2Ba_2gydF4y2Ba啊,13.0;FeClgydF4y2Ba_3gydF4y2Ba0.0025;微量元素溶液SL6 [gydF4y2Ba33gydF4y2Ba),1;MgSOgydF4y2Ba_4gydF4y2Ba* 7小时gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba啊,20.0;NaHCOgydF4y2Ba_3gydF4y2Ba0.20;NaBr 0.50;复杂的氮源(酵母提取物/酪蛋白胨,1:1),5.0;碳源(甘油或本金保证产品、职责),10 g / L。在P (HBHV4HB)生产(发酵F3),gydF4y2BaγgydF4y2Ba丁内酯(GBL()添加逐步增加共有14一小部分主要PHA合成阶段期间为了保持实际GBL(浓度范围约为0.5 g / L(从58小时直到168 h的培养;整个的GBL(: 60.5毫升)。gydF4y2Ba

培养液文化准备在1 L困惑摇动烧瓶内包含250毫升生理盐水介质,从10 g / L甘油作为唯一碳源和5 g / L复杂的氮源。pH值调整到7.0,文化不断动摇了48 h在37°C。生物反应器发酵开始10 g / L碳源(纯甘油或本金保证产品)的发酵F1和F2和F3 2 g / L的发酵;5 g / L复合氮源(酵母提取物/酪蛋白胨[1:1)为每一个发酵的设置。为了实现磷限制条件是引发PHA合成最有效的因素gydF4y2Bah . mediterraneigydF4y2Ba(gydF4y2Ba25gydF4y2Ba磷酸磷酸),唯一的来源来自内容呈现在酵母提取物。必要时进一步增加基质进行甘油浓度保持在一个范围10至20 g / L。实验进行了受控条件下在pH值为7.0,温度37°C,空气和氧气张力约20%的饱和控制搅拌器的搅拌速度和曝气速率。gydF4y2Ba

2.4。甘油和GBL(的决心gydF4y2Ba

高效液相色谱设备组成的恒温器Aminex HPX 87 h列(80°C),惠普7673控制器,880 - pu JASCO智能高效液相色谱泵,和一个比肖夫RI-Detector 8110人使用。洗脱溶剂为0.005 M HgydF4y2Ba_2gydF4y2Ba所以gydF4y2Ba_4gydF4y2Ba、最小流量为0.60毫升gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}。纯甘油和GBL(被用作外部标准。gydF4y2Ba

2.5。PHA的确定gydF4y2Ba

PHA内容分析了细胞内酸性甲醇分解根据Braunegg的方法(gydF4y2Ba34gydF4y2Ba]。气相色谱分析,6850年网络GC系统(安捷伦科技),配有25米×0.32毫米×0.52gydF4y2BaμgydF4y2Bam HP5毛细管柱和火焰离子化检测器(FID)。氦(林德;纯度= 4.6)作为载气的分流比1:5、氢(林德;纯度= 5.0)和合成空气(林德;碳氢化合物的纯度=“免费”)作为探测器气体和氮(林德;纯度= 5.0)作为辅助气体。gydF4y2Ba

使用以下协议:初始温度:50°C;率1:15°C /分钟;最终温度1:60°C;率2:2°C /分钟;最终温度2:80°C;最终温度3:300°C;最后一次3:5分钟。gydF4y2Ba制程gydF4y2Bapha确定如下:初始温度:50°C;率1:15°C /分钟;最终温度1:200°C;最后一次1:10分钟;率2:15°C /分钟;最终温度2:240°C;最后一次2:4分钟最终温度3:300°C;最后一次3:5分钟。所有样品的测定是在重复做。分析了甲基酯PHA-building块使用火焰离子化检测器(FID)。 Helium acted as carrier gas, the applied split ratio amounted to 1:5, 2 µL were used as injection volume.

参考资料、保利((gydF4y2BaRgydF4y2Ba)3 hb -gydF4y2Ba有限公司gydF4y2Ba-15.6% (gydF4y2BaRgydF4y2Ba英国ICI) 3高压](是)和聚(gydF4y2BaRgydF4y2Ba)3 hb -gydF4y2Ba有限公司gydF4y2Ba-11.2% 4 hb] (GreenBioTM、天津绿色生物科学& DSM公关中国)被用作PHA引用;己酸作为内标。gydF4y2Ba

2.6。PHA提取gydF4y2Ba

停止后的生物反应器查看,细胞gydF4y2Ba原位gydF4y2Ba巴氏杀菌、离心机、冷冻及冻干24小时。生物质被与乙醇索氏提取脱脂一夜之间,风干,随后索氏提取与CHCl一夜之间gydF4y2Ba_3gydF4y2Ba;聚合物和剩余的生物质中提取终于由GC分析确定提取的纯度和完整性。gydF4y2Ba

2.7。摩尔质量分布的测定和热分析表征gydF4y2Ba

摩尔质量,表示为体重平均摩尔质量gydF4y2Ba和数量平均摩尔质量gydF4y2Ba,测量Jasco pu - 1580高效液相色谱连接到一个Jasco 830 - ri探测器,配备两个PLgel 5gydF4y2BaμgydF4y2Ba米混合C列,CHClgydF4y2Ba_3gydF4y2Ba作为溶剂的流量1.0 mL / min。单分散聚苯乙烯作为外部标准。多分散性gydF4y2Ba被定义为的比例gydF4y2Ba来gydF4y2Ba。gydF4y2Ba

热分析表征是梅特勒助教4000系统上执行仪表组成的DSC-30微分扫描量热计和M3微量天平TGA-50炉,TA72 GraphWare软件。在80毫升分钟测量进行了gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}氮气的流量按照下列协议:第一,第二,第三从−30到200°C加热10°C mingydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}第一个冷却(淬火后第一个加热)从200年到−30°C 100°C分钟gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}从200年开始,第二个冷却−30°C 10°C分钟gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}。gydF4y2Ba

2.8。测定蛋白质gydF4y2Ba

破坏细胞通过超声治疗后,蛋白质被监控根据洛瑞的方法(gydF4y2Ba35gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

3所示。结果与讨论gydF4y2Ba

3.1。外国游客1:生产P (HBHV)从纯甘油gydF4y2Ba

作为单一碳源纯甘油(10 g / L),酵母提取物/酪蛋白[1:1](5 g / L)作为复杂的氮和磷源。Preexperiments由作者的研究表明,底物浓度超出的超过20 g / L,不会表现出任何负面影响由于osmophilicity较高的有机体。甘油浓度在发酵因此一直大约10至20 g / L。甘油的时间课程以及PHA的浓度和残余生物质(表示为蛋白质)是发酵模式如图所示gydF4y2Ba1gydF4y2Ba。发酵结束时,最大PHA浓度为15.2 g / L和蛋白质浓度为5.0 g / L,对应于一个最大内容PHA的生物量(表示为蛋白质和PHA的总和)的75%。动力学数据如表所示gydF4y2Ba1gydF4y2Ba,比较的结果发酵F1与其他完成实验和文献数据使用不同的主要碳源。由于特定的产量gydF4y2Ba早期生产阶段明显不同gydF4y2Ba在生产阶段,gydF4y2Ba和gydF4y2Ba介绍了描述这一现象。在这里,gydF4y2Ba相当于0.03 g / gh,而gydF4y2Ba分别计算了0.02 g / gh,。gydF4y2Ba


最大程度上的特定的比率gydF4y2Ba	F1gydF4y2Ba^{一个gydF4y2Ba}	F2gydF4y2Ba^bgydF4y2Ba	F3gydF4y2Ba^cgydF4y2Ba	PHBHV4HB乳清和gydF4y2BaγgydF4y2Ba丁内酯(gydF4y2Ba32gydF4y2Ba]gydF4y2Ba^dgydF4y2Ba	PHBHV从乳清gydF4y2Ba32gydF4y2Ba]gydF4y2Ba^dgydF4y2Ba	从米糠PHBHVgydF4y2Ba29日gydF4y2Ba]gydF4y2Ba^egydF4y2Ba	PHBHV从葡萄糖gydF4y2Ba28gydF4y2Ba]gydF4y2Ba^fgydF4y2Ba	PHBHV从葡萄糖gydF4y2Ba26gydF4y2Ba]gydF4y2Ba^ggydF4y2Ba

(1 / h)gydF4y2Ba	0.10gydF4y2Ba	0.06gydF4y2Ba	0.20gydF4y2Ba	0.14gydF4y2Ba	0.10gydF4y2Ba	0.098gydF4y2Ba	0.09gydF4y2Ba	~ 0.10gydF4y2Ba
(g / gh);早期刺激阶段。gydF4y2Ba	0.03gydF4y2Ba	0.04gydF4y2Ba	0.08gydF4y2Ba	0.23gydF4y2Ba	0.15gydF4y2Ba	n.r。gydF4y2Ba	n.r。gydF4y2Ba	0.06gydF4y2Ba
(g / gh);刺激。相gydF4y2Ba	0.02gydF4y2Ba	0.02gydF4y2Ba	0.01gydF4y2Ba	0.01gydF4y2Ba	0.11gydF4y2Ba	n.r。gydF4y2Ba	n.r。gydF4y2Ba	~−0.006gydF4y2Ba
收益率gydF4y2Ba
Y (PHA /碳源)(g / g)gydF4y2Ba	0.37gydF4y2Ba	0.19gydF4y2Ba	0.16gydF4y2Ba	0.20gydF4y2Ba	0.29gydF4y2Ba	n.r。gydF4y2Ba	n.r。gydF4y2Ba	0.26gydF4y2Ba
max。蛋白(g / L)gydF4y2Ba	5.0gydF4y2Ba	5.5gydF4y2Ba	5.6gydF4y2Ba	2.10gydF4y2Ba	4.60gydF4y2Ba	65.1gydF4y2Ba	44.1gydF4y2Ba	3.61gydF4y2Ba
max。PHA (g / L)gydF4y2Ba	13.4gydF4y2Ba	16.2gydF4y2Ba	11.1gydF4y2Ba	14.7gydF4y2Ba	12.20gydF4y2Ba	77.8gydF4y2Ba	41.7gydF4y2Ba	5.13gydF4y2Ba
PHA / CDM[%](结束)gydF4y2Ba	- - - - - -gydF4y2Ba	- - - - - -gydF4y2Ba	- - - - - -gydF4y2Ba	- - - - - -gydF4y2Ba	- - - - - -gydF4y2Ba	55.6gydF4y2Ba	48.6gydF4y2Ba	58.7gydF4y2Ba
PHA (PHA +生物蛋白质)[%](结束)gydF4y2Ba	75.0gydF4y2Ba	76.0gydF4y2Ba	66.2gydF4y2Ba	87.5gydF4y2Ba	72.8gydF4y2Ba	- - - - - -gydF4y2Ba	- - - - - -gydF4y2Ba	- - - - - -gydF4y2Ba
生产力gydF4y2Ba
卷。生产力(g / Lh) (PHA)gydF4y2Ba	0.12gydF4y2Ba	0.12gydF4y2Ba	0.10gydF4y2Ba	0.14gydF4y2Ba	0.11gydF4y2Ba	0.65gydF4y2Ba	0.36gydF4y2Ba	~ 0.08gydF4y2Ba^我gydF4y2Ba;~ 0.15gydF4y2Ba^jgydF4y2Ba
聚合物表征gydF4y2Ba
1日。恒温动物(融化gydF4y2Ba),(°C)gydF4y2Ba	130.2gydF4y2Ba	128.7gydF4y2Ba	122.4gydF4y2Ba	139.0gydF4y2Ba	150.8gydF4y2Ba	n.r。gydF4y2Ba	134.8/131.2gydF4y2Ba^kgydF4y2Ba	n.r。gydF4y2Ba
2日。恒温动物(融化gydF4y2Ba),(°C)gydF4y2Ba	140.6gydF4y2Ba	138.8gydF4y2Ba	137.1gydF4y2Ba	140.0gydF4y2Ba	158.9gydF4y2Ba	n.r。gydF4y2Ba	144.4/140.7gydF4y2Ba^kgydF4y2Ba	n.r。gydF4y2Ba
冷结晶峰(°C)gydF4y2Ba	67.2gydF4y2Ba	64.5gydF4y2Ba	64.3gydF4y2Ba	n.r。gydF4y2Ba	62.2gydF4y2Ba	n.r。gydF4y2Ba	64.0 /−50.0gydF4y2Ba^kgydF4y2Ba	n.r。gydF4y2Ba
玻璃化转变温度(°C)gydF4y2Ba	4.3gydF4y2Ba	7.0gydF4y2Ba	2。5gydF4y2Ba		6.0gydF4y2Ba	n.r。gydF4y2Ba	1.56 /−0.68gydF4y2Ba^kgydF4y2Ba	n.r。gydF4y2Ba
出现分解(gydF4y2Ba)(°C)gydF4y2Ba	~ 240gydF4y2Ba	~ 280gydF4y2Ba	~ 285gydF4y2Ba	236年gydF4y2Ba	241年gydF4y2Ba	n.r。gydF4y2Ba	n.r。gydF4y2Ba	n.r。gydF4y2Ba
3-HV / PHA(摩尔(%)gydF4y2Ba	10gydF4y2Ba	10gydF4y2Ba	11 - 12gydF4y2Ba	21.8gydF4y2Ba	6 - 9gydF4y2Ba	n.r。gydF4y2Ba	10.7/12.3gydF4y2Ba^kgydF4y2Ba	n.r。gydF4y2Ba
4-HB / PHA(摩尔(%)gydF4y2Ba	- - - - - -gydF4y2Ba	- - - - - -gydF4y2Ba	5gydF4y2Ba	5.1gydF4y2Ba	- - - - - -gydF4y2Ba	n.r。gydF4y2Ba	- - - - - -gydF4y2Ba	n.r。gydF4y2Ba
(kDa)gydF4y2Ba	150年gydF4y2Ba	253年gydF4y2Ba	391年gydF4y2Ba	986年gydF4y2Ba	1057年gydF4y2Ba	n.r。gydF4y2Ba	570/72gydF4y2Ba^kgydF4y2Ba	n.r。gydF4y2Ba
多分散性指数gydF4y2Ba(gydF4y2Ba/gydF4y2Ba)gydF4y2Ba	2。1gydF4y2Ba	2。7	2。6gydF4y2Ba	1.5gydF4y2Ba	1.5gydF4y2Ba	n.r。gydF4y2Ba	1.22/1.44gydF4y2Ba^kgydF4y2Ba	n.r。gydF4y2Ba

从纯甘油生产P (HBHV)。gydF4y2Ba
从原油生产P (HBHV)甘油(本金保证产品)从生物柴油生产阶段。gydF4y2Ba
PHBHV4HB本金保证产品和生产gydF4y2Ba丁内酯。gydF4y2Ba
从水解乳清生产PHBHV4HB乳糖+额外的3高压前体和戊酸酯钠gydF4y2Ba丁内酯。gydF4y2Ba
生产P (HBHV)从挤压米糠挤压玉米淀粉(1/8 g / g)。gydF4y2Ba
从葡萄糖生产P (HBHV)。gydF4y2Ba
在磷酸盐有限条件下;聚酯报告为”的PHB,“根据今天的知识:P (HBHV)。值与“gydF4y2Ba”指的是,本研究的作者估计这些值从图中提供的原始数据gydF4y2Ba1gydF4y2Ba(gydF4y2Ba26gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba
退化的PHA在后期阶段的发酵葡萄糖限制(批处理设置)。gydF4y2Ba
整个过程。gydF4y2Ba
在葡萄糖限制。gydF4y2Ba
两个分数的共聚酯具有不同3高压摩尔分数被孤立。gydF4y2Ba
n.r。:Not reported.

PHA的容积效率达到0.12克/ Lh整个过程大大低于葡萄糖(报告gydF4y2Ba29日gydF4y2Ba),但高于价值报告whey-stemming基质(gydF4y2Ba33gydF4y2Ba,gydF4y2Ba36gydF4y2Ba]。最高的生产力之间的观察gydF4y2Ba和80 h (0.21 g / Lh)。直到结束的过程(gydF4y2Bah)、生产力明显下降到0.06克/ Lh。对PHA转化甘油的产量gydF4y2Ba相当于0.37 g / g,非常类似于数据半成品eubacterial PHA生产从水解蔗糖(0.33 g / g) (gydF4y2Ba37gydF4y2Ba相比),明显高于如果报道PHA生产葡萄糖和无机氮和磷酸盐(0.26 g / g)[来源gydF4y2Ba26gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

研究生物体能够直接产生3-hydroxyvalerate从甘油(3高压)单位,导致的累积PHBHV包含约10 mol - % 3高压。在大多数情况下,3高压生产要求应用程序相关的结构性前体基质如丙酸和戊酸;这些前体细胞显著提高生产成本。在的情况下gydF4y2Bah . mediterraneigydF4y2Ba,聚酯3-HV的比例保持在一个恒定水平10摩尔- %在生产阶段。这种罕见的共聚酯生产从无关的基质可以解释为基因簇的特征(gydF4y2BaphaECgydF4y2Ba_HmegydF4y2Ba)编码gydF4y2Bah . mediterraneigydF4y2BaPHA合成酶。鲁和他的同事们发现gydF4y2Bah . mediterraneigydF4y2Ba小说第三类PHA合成酶的成员,组成的gydF4y2BaPhaCgydF4y2Ba_HmegydF4y2Ba和gydF4y2Ba阶段gydF4y2Ba_HmegydF4y2Ba,gydF4y2Ba占PHBHV合成(gydF4y2Ba38gydF4y2Ba]。最近,韩寒和他的同事们发现,应变使用多个通路为propionyl-CoA生物合成前体3高压生物合成,包括citramalate / 2-oxobutyrate通路,天冬氨酸盐/ 2-oxobutyrate通路,methylmalonyl-CoA通路,小说3-hydroxypropionate通路(gydF4y2Ba39gydF4y2Ba]。提供所需的细胞内的代谢途径前体PHBHV生产gydF4y2Bah . mediterraneigydF4y2Ba首先调查和详细描述了冯和同事(gydF4y2Ba40gydF4y2Ba]。通过全基因组分析揭示了八个潜在的额外的调查gydF4y2BaβgydF4y2Ba-ketothiolase基因gydF4y2BaHgydF4y2Ba。gydF4y2BamediterraneigydF4y2Ba,其中PHBV-specific BktB和PhaA被确定通过基因敲除和互补分析(gydF4y2Ba41gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

对于大多数应用程序,3-HV份额至少10多20摩尔%是必要的为了充分低结晶度的产品(gydF4y2Ba42gydF4y2Ba),从而促进聚酯处理。3高压的形成相当大的股票,而不需要前体基质高质量的biopolyesters有助于降低生产成本。gydF4y2Ba

摩尔质量分布在发酵的最后决定gydF4y2Ba重量平均分子量gydF4y2Ba kD和多分散性指数gydF4y2Ba2.1。接收到的摩尔质量是低于公布了聚酯生产的摩尔质量,例如,从碳水化合物如葡萄糖gydF4y2Ba28gydF4y2Ba)或乳清乳糖(gydF4y2Ba33gydF4y2Ba]。Madden和同事证明,物质如甘油或乙二醇导致终止传播链的共价连接的羧基末端PHA“结束描述效应”,导致低摩尔质量(gydF4y2Ba43gydF4y2Ba]。聚合物的热分析揭示了玻璃化转变温度gydF4y2Ba4.3°C,冷结晶温度gydF4y2Ba67.2°C,和两个电热融化gydF4y2Ba和gydF4y2Ba在130.2和140.6°C。多个电热融化的外观是一个典型的发现gydF4y2Bah . mediterraneigydF4y2BaPHA也是报道PHA生产乳清或葡萄糖等其他碳基质gydF4y2Ba25gydF4y2Ba,gydF4y2Ba28gydF4y2Ba]。分别用氯仿/丙酮,并和他的同事透露,产生PHBHV包含两个不同的共聚物组成,不同的熔点,不同的摩尔质量gydF4y2Ba44gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

3.2。F2:生产甘油的PHBHV液相(本金保证产品)生产生物柴油gydF4y2Ba

在这种情况下,纯甘油被取而代之的是本金保证产品为唯一碳源。图gydF4y2Ba2gydF4y2Ba显示了发酵模式,包括时间曲线为甘油,PHA和蛋白质。gydF4y2Ba

比较的结果与前面的发酵F1揭示特定的增长率gydF4y2Ba0.06 hgydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba},明显低于纯甘油(0.10 hgydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba})。这可能是由于抑制化合物GGP剩余的酯基转移的过程,如甲醇或脂质残留。此外,特定的产量gydF4y2Ba早期生产阶段略低于纯甘油,而具体的生产速度gydF4y2Ba在生产阶段都是平等的(见表gydF4y2Ba1gydF4y2Ba)。收益率对PHA PHA转换gydF4y2Ba(0.19 g / g)是低于纯甘油(0.37 g / g)。看着最后的蛋白质浓度(5.5 g / L和5.0 g / L)和PHA (16.2 g / L和13.4 g / L),获得使用本金保证产品浓度明显高于纯甘油的情况;容积效率对整个过程都是相同的两个过程(0.12 g / Lh;表gydF4y2Ba1gydF4y2Ba)。最高的生产力之间的观察gydF4y2Ba和147 h (0.16 g / Lh);直到结束的过程中,生产力下降到0.03 g / Lh。gydF4y2Ba

共聚酯的合成产生的本金保证产品是类似于一个由纯甘油(F1)和葡萄糖(文献数据gydF4y2Ba28gydF4y2Ba)和乳清乳糖(gydF4y2Ba33gydF4y2Ba]。也在这里,压力能够产生3-HV单位P (HBHV)共聚酯合成共聚酯的摩尔3-HV分数为0.10。摩尔质量和摩尔质量分布测定的最后发酵gydF4y2BakDa,gydF4y2Ba。类似于F1聚酯的值,显示聚合物玻璃化转变温度的热分析gydF4y2Ba7.0°C,冷结晶温度gydF4y2Ba64.5°C,和两个电热融化gydF4y2Ba和gydF4y2Ba在128.7和138.8°C(见表gydF4y2Ba1gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

3.3。F3:生产P (HBHV4HB)本金保证产品和GBL (gydF4y2Ba

为了进一步提高热机的聚酯的属性,它的目的是产生一个PHBHV4HB terpolyester组成的积木3 hb, 3高压,4 hb。本金保证产品作为主要碳源生产生物质、3 hb和3高压和GBL(作为前体4 hb生产。这是一个类似的方法,直到今天,只报道热点terpolyester生产gydF4y2Bah . mediterraneigydF4y2Ba在水解乳清乳糖+ GBL ((gydF4y2Ba33gydF4y2Ba]。据文献报道,PHA terpolyesters窝藏4 hb积木显示有利属性如果相比PHBHV共聚酯,尤其是减少二次结晶(典型的PHB和PHBHV)和增加伸长打破和抗拉强度gydF4y2Ba45gydF4y2Ba,gydF4y2Ba46gydF4y2Ba]。GBL(添加逐步作为辅被用物后的指数增长阶段(58小时后培养;见材料和方法)达到大约5% 4-HB聚合物;最后,terpolyester保利- [(gydF4y2BaRgydF4y2Ba)3 hb -gydF4y2Ba有限公司gydF4y2Ba-10% (gydF4y2BaRgydF4y2Ba)3高压-gydF4y2Ba有限公司gydF4y2Ba4 hb)获得了-5%。此外,这种发酵是在减少不育的预防措施(没有生物反应器设备的消毒;只有媒体组件热消毒在高压釜)展示的高鲁棒性应用生产菌株对受微生物污染的竞争对手。在整个发酵期间,文化保持monoseptic,调查了显微镜下。这是由于栽培介质的高盐度抵消大部分微生物的生长。考虑到微生物污染是一个主要的技术风险连续生物技术过程,gydF4y2Bah . mediterraneigydF4y2Ba似乎特别适合这样的过程模式,正如前面已经建议(gydF4y2Ba26gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

甘油的初始浓度2 g / L;额外的本金保证产品是由饲料添加脉冲为了维持这个浓度。后停止增长阶段(48小时),甘油浓度增加15 g / L(见图gydF4y2Ba3gydF4y2Ba)。酵母提取物和酪蛋白水解物(1:1的比例)添加6后,18日,26日,31.5,35.5,42.5,52岁,68年,76.5小时。gydF4y2Ba

图gydF4y2Ba3gydF4y2Ba说明了甘油浓度,蛋白生产、细胞干质量(表示为蛋白质和PHA的总和),和聚合物生产。很短的迟滞期后,指数增长6小时后开始。24小时后得到蛋白质含量为1.5 g / L;随后,蛋白质成为线性的时间曲线。在指数增长的阶段,马克斯。比生长速率gydF4y2Ba0.20 hgydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}是观察到的最高价值构成进行设置。这表明低浓度开始的甘油是有益的迟滞期短、细胞生长速度快。最后添加复杂的氮和磷源后76.5小时后,蛋白质含量增加。聚合物生产和聚合物在CDM开始增加的百分比在早期12小时后,达到了68.5%的水平PHA在68小时后清洁发展机制,和维护这个数量直到最后。最后一个蛋白质浓度的5.6 g / L获得发酵结束时(191 h),而最终的聚合物浓度达11.1 g / L。体积生产率计算为0.10 g / Lh考虑整个发酵过程相比略低,如果之前PHBHV作品和terpolyester生产乳清和GBL ((gydF4y2Ba33gydF4y2Ba]。最高的生产力之间观察到58和191 h的培养;在早期阶段的发酵(gydF4y2Ba观察58 h),只有低生产率(0.07 g / Lh)由于碳源限制供应在这个阶段,有利于蛋白质的形成。收益率gydF4y2Ba相当于0.16 g / g低于的共聚酯生产及文献报道(见表gydF4y2Ba1gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

GBL(第一次添加不断为了获得均匀分布的4 hb terpolyester;GBL(除了完成从58小时直到结束的过程。发酵结束时191小时后,产生HA-building块的浓度达到9.3 g / L 3 hb, 1.3 g / L 3高压,和0.5 g / L 4 hb,分别;图gydF4y2Ba4gydF4y2Ba反映了在发酵过程中聚合物的组成。3高压PHA的摩尔分数达到稳定值为0.09 - -0.12摩尔/摩尔。4 hb积木被发现后立即开始GBL(喂养;摩尔比例稳步增长达到最后一个值为0.05摩尔/摩尔发酵结束时,几乎相同的价值whey-stemming terpolyester [gydF4y2Ba33gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

摩尔质量(gydF4y2BakDa;最高价值的三个描述设置)和摩尔质量分布(gydF4y2Ba;类似的值产生的共聚酯在F1和F2)测定发酵结束的时候。热分析的terpolyester DSC揭示了玻璃化转变温度gydF4y2Ba2.5°C,冷结晶温度gydF4y2Ba64.3°C,和两个电热融化gydF4y2Ba和gydF4y2Ba在122.4和137.1°C。聚合物分解的开始是285°C。这类似于价值获得F2,但明显高于共聚酯的共聚酯的获得的纯甘油设置F1 (240°C)。比较数据与F1和F2的共聚酯,terpolyester显示较低的玻璃化转变温度和分解点高出5°C。gydF4y2Ba

4所示。结论gydF4y2Ba

介绍实验结果证明昂贵的碳源古PHA生产便宜的剩余产品可以更换的本金保证产品的生物柴油生产过程。比较本金保证产品和纯甘油相不透露任何负面影响的生产率或聚酯属性。应用生产菌株gydF4y2Bah . mediterraneigydF4y2Ba功能优势利用廉价的剩余产品的工业来源,降低能源需求由于微不足道的不育的预防措施和生产3 hv-containing共聚酯等不相关的碳源甘油。进一步,类似于糖的应用从水解乳清为主要碳源,有机体能够积累PHBHV4HB terpolyesters时提供足够的4 hb前兆。gydF4y2Ba

未来工作的重点应该放在生产提出了聚合物在大范围内的详细评估其生物降解性,加工性能和适用性的生产biobased混合与其他生物相容性材料和复合材料。此外,简便的方法来恢复古细菌生物量的PHA为大规模应用程序优化;在这里,人们可以从细胞内压力高获利gydF4y2Bah . mediterraneigydF4y2Ba细胞,扰乱他们暴露于低渗的媒体(去离子水)biopolyester颗粒释放到水媒体。对于流程设计,应该首先评估基于连续生产模式尝试描述在文献中使用这个有机体。连续模式会导致增加生产力在延长的时间常数和可再生的产品品质。特别是4 hb积木的定制分布PHBHV4HB可以促进优化连续喂养策略。最后,提出了实验室规模的结果被认为是计划和半成品尺寸设施和单位操作热点PHA生产从本金保证产品生物柴油生产的废物流。为了节省费用,原材料本金保证产品的运输,这个工厂应该直接集成到现有的生产线为生物柴油,在本金保证产品直接产生。gydF4y2Ba

缩写gydF4y2Ba

本金保证产品:gydF4y2Ba	粗甘油相gydF4y2Ba
每股收益:gydF4y2Ba	胞外多糖gydF4y2Ba
F1-F3:gydF4y2Ba	发酵1 - 3gydF4y2Ba
哈:gydF4y2Ba	HydroxyalkanoategydF4y2Ba
制程gydF4y2Bapha:gydF4y2Ba	中等链长PHAgydF4y2Ba
:gydF4y2Ba	重量平均摩尔质量gydF4y2Ba
:gydF4y2Ba	数量平均摩尔质量gydF4y2Ba
:gydF4y2Ba	最大比生长速率gydF4y2Ba
PHA:gydF4y2Ba	PolyhydroxyalkanoategydF4y2Ba
PHB:gydF4y2Ba	保利((gydF4y2BaRgydF4y2Ba)3-hydroxybutyrate]gydF4y2Ba
PHBHV:gydF4y2Ba	保利((gydF4y2BaRgydF4y2Ba3 -羟基丁酸-gydF4y2Ba有限公司gydF4y2Ba- (gydF4y2BaRgydF4y2Ba3-hydroxyvalerate)gydF4y2Ba
PHBHV4HB:gydF4y2Ba	保利((gydF4y2BaRgydF4y2Ba)3-hydroxybutyrate -gydF4y2Ba有限公司gydF4y2Ba- (gydF4y2BaRgydF4y2Ba)3-hydroxyvalerate -gydF4y2Ba有限公司gydF4y2Ba4-hydroxybutyrate]gydF4y2Ba
:gydF4y2Ba	多分散性指数gydF4y2Ba
:gydF4y2Ba	最大的特定产品的形成率gydF4y2Ba
scigydF4y2Bapha:gydF4y2Ba	短链长度PHAgydF4y2Ba
:gydF4y2Ba	冷结晶温度gydF4y2Ba
:gydF4y2Ba	开始分解温度gydF4y2Ba
:gydF4y2Ba	熔化温度gydF4y2Ba
:gydF4y2Ba	收益率PHA转化底物gydF4y2Ba
3 hb:gydF4y2Ba	(gydF4y2BaRgydF4y2Ba)3-hydroxybutyrategydF4y2Ba
3高压:gydF4y2Ba	(gydF4y2BaRgydF4y2Ba)3-hydroxyvalerategydF4y2Ba
4 hb:gydF4y2Ba	4-Hydroxybutyrate。gydF4y2Ba

利益冲突gydF4y2Ba

作者宣称没有利益冲突有关的出版。gydF4y2Ba

确认gydF4y2Ba

这项工作是由BIODIEPRO欧盟项目NNE5/2001/832和ANIMPOL EU-FP7项目(批准号245084)。作者感谢英国工业伙伴银色能量无限提供原料本金保证产品。gydF4y2Ba

引用gydF4y2Ba

t . Keshavarz和罗伊,“Polyhydroxyalkanoates:生物塑料的绿色议程,”gydF4y2Ba目前看来在微生物学gydF4y2Ba,13卷,不。3、321 - 326年,2010页。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba出版商的网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
波里,p . Di Donato g . r . Abbamondi和b . Nicolaus”合成、生产、和生物技术应用的胞外和polyhydroxyalkanoates古生菌,”gydF4y2Ba古生菌gydF4y2Ba文章ID 693253卷,2011年,13页,2011。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba出版商的网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
g .问:陈“塑料完全由细菌合成:polyhydroxyalkanoates,”gydF4y2Ba塑料从细菌:自然功能和应用程序gydF4y2Ba,14卷,17-38,2010页。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba出版商的网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
m·辛b Witholt, t·艾格力”发生,合成和医疗应用细菌polyhydroxyalkanoate,”gydF4y2Ba先进的药物输送的评论gydF4y2Ba,53卷,不。1,5 - 21日,2001页。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba出版商的网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
j·g·c·戈麦斯b·s·门德斯p i Nikel m . j . Pettinari m·a .普列托和l·f·席尔瓦,“让绿色聚合物更环保:对可持续生产的polyhydroxyalkanoates农业的和工业的副产品,”gydF4y2Ba应用生物技术的进步gydF4y2Ba,2012年。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
郑胜耀李,“塑料细菌?进展和前景polyhydroxyalkanoate生产细菌。”gydF4y2Ba生物技术的发展趋势gydF4y2Ba,14卷,不。11日,第438 - 431页,1996年。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba出版商的网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
m·科勒a·萨勒诺·m·d·s·迪亚斯a . reiter和g . Braunegg“现代生物技术合成聚合物:复习一下,”gydF4y2Ba食品技术和生物技术gydF4y2Ba,48卷,不。3、255 - 269年,2010页。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
k . Sudesh k . Bhubalan j . a . Chuah et al .,“合成的polyhydroxyalkanoate棕榈油和一些新的应用程序,”gydF4y2Ba应用微生物学和生物技术gydF4y2Ba,卷89,不。5,1373 - 1386年,2011页。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba出版商的网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
m . Titz k h .锅状k .沙赫扎德·m·科勒h·施尼策尔和m . Narodoslawsky“流程优化的高效biomediated PHA生产动物性废物流,”gydF4y2Ba清洁技术和环境政策gydF4y2Ba,14卷,不。3、495 - 503年,2012页。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba出版商的网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
g·p·达·席尔瓦,m . Mack, j . Contiero“甘油:一个有前途的工业微生物学和丰富的碳源,”gydF4y2Ba生物技术的进步gydF4y2Ba,27卷,不。1 - 39,2009页。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba出版商的网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
d .刘贤美Solaiman r·d·阿什比t . a . Foglia和w . n . Marmer村”农业原料和副产物转化为保利(hydroxyalkanoates)”gydF4y2Ba应用微生物学和生物技术gydF4y2Ba,卷71,不。6,783 - 789年,2006页。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba出版商的网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
m . Hajek和f . Skopal治疗甘油阶段形成的生物柴油生产的。”gydF4y2Ba生物资源技术gydF4y2Ba,卷101,不。9日,第3245 - 3242页,2010年。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba出版商的网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
g . Braunegg k . Genser r·博纳g . Haage f . Schellauf和e·温克勒,“生产pha的农业废弃物,”gydF4y2Ba大分子座谈会gydF4y2Ba,卷144,不。1,第383 - 375页,1999。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba出版商的网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
e·j·鲍曼和m .罗斯”polyhydroxybutyrate的生产gydF4y2BaMethylobacterium rhodesianumgydF4y2Ba和gydF4y2BaRalstonia eutrophagydF4y2Ba在媒体含有甘油和酪蛋白玉米胚芽蛋白酶解物。”gydF4y2Ba生物技术信gydF4y2Ba,21卷,不。12日,第1063 - 1059页,1999年。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba出版商的网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
g . Haage e . Wallner r·博纳f . Schellauf poly-3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxy-valerate和g . Braunegg”生产gydF4y2Ba产碱杆菌属弦gydF4y2BaDSM 1124在不同碳源”gydF4y2BaBiorelated聚合物gydF4y2Ba施普林格,页147 - 155年,纽约,纽约,美国,2001年。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba出版商的网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
m·h·a·易卜拉欣和a . Steinbuchel保利(3-hydroxybutyrate)生产的甘油gydF4y2BaZobellella denitrificansgydF4y2Ba通过通过MW1馈料式发酵和简化溶剂萃取,”gydF4y2Ba应用与环境微生物学gydF4y2Ba,卷75,不。19日,6222 - 6231年,2009页。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba出版商的网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
j·m·b·t·Cavalheiro m c m . d . de Almeida c . Grandfils和m·m·r·塞卡”保利(3-hydroxybutyrate)生产gydF4y2Ba贪铜菌吊钩虫拿gydF4y2Ba使用甘油浪费。”gydF4y2Ba生物化学过程gydF4y2Ba,44卷,不。5,509 - 515年,2009页。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba出版商的网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
诉Špoljarić,m . Lopar m·科勒et al .,“聚[(数学建模gydF4y2BaRgydF4y2Ba)3-hydroxyalkanoate]合成了gydF4y2Ba贪铜菌吊钩虫拿gydF4y2BaDSM 545基质源于生物柴油生产。”gydF4y2Ba生物资源技术gydF4y2Ba卷,133年,第494 - 482页,2013年。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba出版商的网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
j . Teeka t . Imai a Reungsang et al .,”表征polyhydroxyalkanoates (pha)生物合成孤立Novosphingobium sp。THA_AIK7使用粗甘油,”gydF4y2Ba工业微生物学和生物技术杂志》上gydF4y2Ba,39卷,不。5,749 - 758年,2012页。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba出版商的网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
美国诉Reddy, m . Thirumala和s·k·马哈茂德,“小说杆菌sp.积累保利(3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxyvalerate)从单一碳底物”gydF4y2Ba工业微生物学和生物技术杂志》上gydF4y2Ba,36卷,不。6,837 - 843年,2009页。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba出版商的网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
l . h . Mahishi g . Tripathi s . k .拉瓦尔大声回答,“保利(3-hydroxybutyrate) (PHB)合成重组gydF4y2Ba大肠杆菌gydF4y2Ba窝藏gydF4y2Ba链霉菌属aureofaciensgydF4y2BaPHB生物合成基因:各种碳和氮源的影响。”gydF4y2Ba微生物研究gydF4y2Ba,卷158,不。1,19-27,2003页。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba出版商的网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
野村c·t·c·朱,j . a .佩罗塔,a . j . Stipanovic和j.p.纳卡”,从biodiesel-glycerol poly-3-hydroxybutyrate的生产和表征gydF4y2Ba伯克不过gydF4y2Ba写明ATCC 17759。”gydF4y2Ba生物技术进展gydF4y2Ba,26卷,不。2、424 - 430年,2010页。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba出版商的网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
e . m . Taran阿齐兹,s . Taran和n . Asadi”古保利(3-hydroxybutyrate)聚合物生产甘油:优化通过田口方法,”gydF4y2Ba聚合物和环境杂志》上gydF4y2Ba,19卷,不。3、750 - 754年,2011页。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba出版商的网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
y Kawata和s . i Aiba“保利(3-hydroxybutyrate)生产的孤立gydF4y2BaHalomonasgydF4y2Basp, KM-1使用甘油浪费。”gydF4y2Ba生物科学、生物技术和生物化学gydF4y2Ba,卷74,不。1,第177 - 175页,2010。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba出版商的网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
m·科勒r·博纳g . Braunegg et al .,“从农业废弃物生产polyhydroxyalkanoates和剩余材料,”gydF4y2Ba《生物高分子gydF4y2Ba》第六卷,没有。2、561 - 565年,2005页。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba出版商的网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
f . Rodriguez-Valera和j·a·g·签约“Halobacteria polyhydroxyalkanoates生产商。”gydF4y2Ba《微生物学检查gydF4y2Ba,卷103,不。2 - 4、181 - 186年,1992页。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
m·科勒a . Salerno a reiter et al .,“甘蔗为原料在biomediated聚合物的生产”gydF4y2Ba甘蔗:生产、种植和使用gydF4y2Ba,第136 - 105页,2012年。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
c·w·陈,t . m ., h . f .日圆,“酶挤压淀粉作为碳源聚(3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxyvalerate)的生产gydF4y2BaHaloferax mediterraneigydF4y2Ba”,gydF4y2Ba生物化学过程gydF4y2Ba第41卷。。11日,第2296 - 2289页,2006年。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba出版商的网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
黄t . y . k . j .段郑胜耀黄和c·w·陈,“生产polyhydroxyalkanoates从廉价的挤压米糠和淀粉gydF4y2BaHaloferax mediterraneigydF4y2Ba”,gydF4y2Ba工业微生物学和生物技术杂志》上gydF4y2Ba,33卷,不。8,701 - 706年,2006页。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba出版商的网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
f . Rodriguez-Valera g . Juez, d·j·库什纳。”gydF4y2BaHalobacterium mediterraneigydF4y2Ba规范,11月,一个新的carbohydrate-utilizing极端数据,”gydF4y2Ba系统和应用微生物学gydF4y2Ba,4卷,不。3、369 - 381年,1983页。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba出版商的网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
d .赵l . Cai吴j . et al .,“改善的polyhydroxyalkanoate生产胞外多糖的生物合成有关的基因gydF4y2BaHaloferax mediterraneigydF4y2Ba”,gydF4y2Ba应用微生物学和生物技术gydF4y2Ba,卷97,不。7,3027 - 3036年,2013页。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba出版商的网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
j .汉f·张,j .侯et al .,“完整基因组序列的新陈代谢多才多艺的嗜盐的archaeongydF4y2BaHaloferax mediterraneigydF4y2Ba保利(3-hydroxybutyrate -gydF4y2Ba有限公司gydF4y2Ba3-hydroxyvalerate)生产商。”gydF4y2Ba细菌学期刊gydF4y2Ba,卷194,不。16,4463 - 4464年,2012页。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba出版商的网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
m·科勒p . Hesse r·博纳c . Kutschera a . Atlić和g . Braunegg生物合成高质量的polyhydroxyalkanoate合作和terpolyesters archaeon潜在的医学应用gydF4y2BaHaloferax mediterraneigydF4y2Ba”,gydF4y2Ba大分子座谈会gydF4y2Ba卷。253年,33-39,2007页。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba出版商的网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
g . Braunegg b Sonnleitner, r·m·拉弗蒂“快速气相色谱法测定聚gydF4y2BaβgydF4y2Ba微生物生物量、羟丁酸”gydF4y2Ba欧洲应用微生物学和生物技术杂志》上gydF4y2Ba》第六卷,没有。1,29-37,1978页。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
o·h·劳里:j . Rosebrough a . l . Farr, r·j·兰德尔“蛋白质测量Folin酚试剂,”gydF4y2Ba《生物化学》杂志上gydF4y2Ba,卷193,不。1,第275 - 265页,1951。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
m·科勒h . Niebelschutz和g . Braunegg”策略恢复和净化聚[(gydF4y2BaRgydF4y2Ba)3-hydroxyalkanoates] (PHA) biopolyesters从周围的生物量、”gydF4y2Ba工程生命科学gydF4y2Ba,35卷,不。7,1023 - 1028年,2013页。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
r . v . Nonato p e . Mantelatto, c, e . v . Rossell”综合生产生物可降解塑料、食糖和乙醇,”gydF4y2Ba应用微生物学和生物技术gydF4y2Ba卷,57号1 - 2、1 - 5,2001页。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba出版商的网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
问:陆,j .汉l .周j .周和h .香”,遗传和生化特性的聚(3-hydroxybutyrate -gydF4y2Ba有限公司gydF4y2Ba3-hydroxyvalerate)合酶gydF4y2BaHaloferax mediterraneigydF4y2Ba”,gydF4y2Ba细菌学期刊gydF4y2Ba,卷190,不。12日,第4180 - 4173页,2008年。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba出版商的网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
j .汉j .侯f . Zhang et al .,“多为生产生物塑料聚丙酰辅酶A-supplying通路(3-hydroxybutyrate -gydF4y2Ba有限公司gydF4y2Ba3-hydroxyvalerate)gydF4y2BaHaloferax mediterraneigydF4y2Ba”,gydF4y2Ba应用与环境微生物学gydF4y2Ba,卷79,不。9日,第2931 - 2922页,2013年。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba出版商的网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
b·冯Cai, j .汉h . Liu j .周和h,“伤健基因识别和分析PHBV的前体供应途径gydF4y2BaHaloferax mediterraneigydF4y2Ba”,gydF4y2BaMicrobiologica学报gydF4y2Ba,50卷,不。10日,1305 - 1312年,2010页。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
j .侯,冯,j·汉et al .,“Haloarchaeal类型gydF4y2BaβgydF4y2Ba-ketothiolases参与保利(3-hydroxybutyrate -gydF4y2Ba有限公司gydF4y2Ba3-hydroxyvalerate)合成gydF4y2BaHaloferax mediterraneigydF4y2Ba”,gydF4y2Ba应用与环境微生物学gydF4y2Ba,2013年。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba出版商的网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
郑胜耀李,“细菌polyhydroxyalkanoates”,gydF4y2Ba生物技术和生物工程gydF4y2Ba卷,49号1、1 - 14,1996页。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba出版商的网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
l·a·马登a·j·安德森的d·t·沙阿和j . Asrar”链终止polyhydroxyalkanoate合成:参与外源性hydroxy-compounds链转移剂的作用,“gydF4y2Ba国际期刊的生物大分子gydF4y2Ba,25卷,不。1 - 3,利润率达到,1999页。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba出版商的网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
t m堂,c·w·陈,t·h·陈”的制备和表征聚(hydroxyalkanoate)发酵的gydF4y2BaHaloferax mediterraneigydF4y2Ba”,gydF4y2Ba生物材料科学杂志》上,聚合物版gydF4y2Ba,17卷,不。12日,第1438 - 1425页,2006年。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba出版商的网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
l·a·马登a·j·安德森的j . Asrar p·伯杰,“生产和保利(3-hydroxybutyrate -的特性gydF4y2Ba有限公司gydF4y2Ba3-hydroxyvalerate -gydF4y2Ba有限公司gydF4y2Ba4-hydroxybutyrate)合成了gydF4y2BaRalstonia eutrophagydF4y2Ba馈料式文化。”gydF4y2Ba聚合物gydF4y2Ba第41卷。。10日,3499 - 3505年,2000页。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba出版商的网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
d·p·马丁和美国威廉姆斯,“poly-4-hydroxybutyrate医学应用:一个强大的灵活的可吸收的生物材料,”gydF4y2Ba生化工程杂志gydF4y2Ba,16卷,不。2、97 - 105年,2003页。gydF4y2Ba视图:gydF4y2Ba出版商的网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

古生菌gydF4y2Ba