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研究文章|开放获取
Jin-Suk汉族的石川彦, ”活性部位的锌2 +端依赖sn-glycerol-1-phosphate脱氢酶从Aeropyrum pernixK1”,古生菌, 卷。1, 文章的ID257264年, 7 页面, 2005年。 https://doi.org/10.1155/2005/257264
活性部位的锌2 +端依赖sn-glycerol-1-phosphate脱氢酶从Aeropyrum pernixK1
文摘
这种酶sn-glycerol-1-phosphate脱氢酶(Gro1PDH, EC 1.1.1.261)对映体的形成是关键的配置甘油磷酸盐骨架(sn-glycerol-1-phosphate)的热点醚脂质。这种酶催化磷酸二羟丙酮和glycerol-1-phosphate之间的可逆转换。迄今为止,没有信息这种酶的活性部位和催化机理已被报道。使用甘油脱氢酶的序列和结构信息,我们建造六个突变体(D144N、D144A D191N, H271A, H287A和D191N / H271A) Gro1PDH从Aeropyrum pernixK1和检查了他们的特点,阐明这种酶的活性部位。酶被发现是一个zinc-dependent金属酶,包含一个锌离子为每个单体蛋白是必不可少的活动。定点诱变D144增加酶的活性。突变体D144N D144A表现出低亲和基质和活动高于野生型,但他们对锌离子的亲和力是野生型的一样。突变体D191N H271A和H287A低亲和力的锌离子和低活动与野生型相比。双突变,D191N / H271A,没有酶活性和绑定没有锌。从这些结果,澄清,残留D191, H271 H287参与酶的催化活性通过绑定锌离子,而D144影响衬底绑定。Gro1的活性部位的结构PDH从答:pernixK1似乎与甘油脱氢酶相似,尽管不同的底物特异性和生物作用。
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