文摘
背景和目标。伤口是一种高发疾病,影响人们的生活身体上,精神上和经济上。这项研究调查了黄芪小头者Willd。伤口愈合过程中在活的有机体内和在体外条件通过专注于植物雌激素活性的提取。方法。methanolic根提取物是由浸渍,类黄酮进行评估LC / MS。在网上考试进行了基于LC / MS的结果,和这些化合物与雌激素受体的亲和力(人)α和β被评估。伤口愈合评估在两种在体外(NHDF细胞系,到500年μ克/毫升浓度的提取、24 h)和在活的有机体内每天(纯种老鼠,局部处理的1.5%提取药膏,21天)条件与对照组相比。老鼠的对照组包括磺胺嘧啶银盐,凡士林,参与组织。结果。十一个黄酮类化合物被发现使用LC / MS。的在网上研究表明,芒柄花黄素、kaempferol-based结构quercetin-3-O-neohesperidoside, calycosin-7-O-beta-D-glucoside高亲和力(< 6.3−)人α和β。伤口关闭测量显示在提取治疗组显著改善在体外和在活的有机体内化验与对照组相比。组织病理学结果证实这些发现;炎症因素减少,纤维母细胞增殖、纤维化和上皮形成增加,尤其是在提取组。结论。这项研究表明,黄芪小头者伤口愈合活动在体外和在活的有机体内由于黄酮类化合物的存在较低的毒性,尤其是isoflavonoids,显示高亲和力结合人队α和β在皮肤组织。
1。介绍
皮肤是一个重要的屏障,保护身体免受环境危害如感染、辐射、和组织的创伤。伤口是高发的并发症之一。2018年,据报道,有820万人有或没有伤口感染和普通人群为2.21每1000人患有慢性伤口(1,2]。
潜在疾病,如糖尿病或使伤口感染危及生命的问题3]。伤口护理一直追溯到最早的文明,和古希腊人是最早强调伤口愈合的重要性。充足的伤口护理可预防感染和其他并发症,帮助加速愈合过程通过减少疤痕(4]。
伤口愈合包括一个安排的事件进展建立受损组织的完整性。愈合过程由四个生物过程:止血,炎症扩散,装修5]。皮肤和免疫细胞都参与这个过程。免疫细胞包括中性粒细胞、巨噬细胞和淋巴细胞;真皮细胞包括角质细胞、成纤维细胞和内皮细胞(6]。
地方和系统因素影响伤口愈合的过程。局部因素包括静脉是否充足,异物感染和氧化。系统因素可以潜在疾病,药物,老化,性激素,任何抑制免疫反应的条件。包括雌激素在内的性激素(雌激素酮和17β雌二醇)和雄激素和相关激素(睾酮和5α二氢睾酮脱氢表雄酮),影响伤口愈合过程(7]。岁之间的基因表达差异的伤口和年轻个人监管几乎完全由雌激素(8),而雄激素影响伤口愈合(9]。
雌激素在伤口愈合中发挥作用通过调节多种基因参与再生,矩阵生产、蛋白酶抑制,表皮功能,主要与炎症相关的基因10]。
伤口的治疗包括支持性疗法,如清洗伤口,去除死皮手术,关闭大伤口缝合或主食,包扎伤口,减轻疼痛,与药物治疗感染的迹象。许多研究已经评估各种化学和天然化合物为伤口并发症找到适当的和有效的解决方案。尽管所有的努力找到解决的办法,仍然是一个需要找到一种有效的治疗加速伤口愈合过程,愈合的伤疤,并返回组织功能。
黄芪是一个大属全球有超过3000个物种,特别是在北半球。超过800种的属(约10%的伊朗的植物)生长在伊朗11,12]。这些物种属于豆科或家人和构成中最丰富的属豆科植物物种。这些物种包括草本和灌木,含有年度和长期形式。种化合物的叶子,花蝴蝶(13]。黄芪历史悠久的使用传统医学在大多数国家,它已经能够生长。在伊朗的传统医学,这种植物被称为“海港”,“Ghatad”,“Taraghafitha”,“Targhaqia”,“Targhaghia,”和“Targhaghant”[12,14]。最重要的药理内容蝶形花科家族的根是多糖、皂苷、黄酮类化合物,特别是isoflavonoids。
Isoflavonoids是类黄酮类基本3-phenylchromen-4-one结构;他们以两种形式存在:糖苷和nonglycoside(糖苷配基)。这些化合物有雌激素样结构。Isoflavonoids可以绑定到人类雌激素受体(人)和展览部分激动剂效果15,16]。
在最近的研究中,黄芪小头者Willd。(麦克风)是植物化学的评估。的在体外和在活的有机体内对伤口愈合的影响是由关注的活动可能isoflavonoids和植物雌激素的属性。此外,债券的亲和力识别isoflavonoids人队α和β研究了分子对接。
2。材料和方法
2.1。植物材料
黄芪小头者收集根桑姜省从日益增长的地区,北部斜坡Qeydar山脉(纬度36°07′N;经度48°34 E′)根据相关文献[17,18]。植物标本样本制备和保存在大学的植物标本伊斯法罕(标本代码:23020),桑姜省。
2.2。提取
黄芪小头者的根(2.5千克)被浸渍提取与无水甲醇室温下为3天,重复三次。提取旋转蒸发器是在真空下干燥。提取被保持在−15°C。
2.3。准备草药药膏
准备1.5%的药膏黄芪小头者提取,提取的7.5 g在最少的水溶解,加入优塞林(羊毛脂醇、挑选代理),然后逐渐药膏基地,凡士林,500 g。
2.4。总类黄酮含量测定
分光光度法的方法被用来评估总黄酮含量与氯化铝比色法(19]。
2.5。染料木素的高效液相色谱分析
隔离的异黄酮是由Lozovaya等的方法。20.]。维度的C18柱使用53×7毫米。的梯度溶剂系统是由water-acetic酸(1升去离子水与1.2毫升乙酸)和乙腈。注射量是20毫升,乙腈溶剂添加从0%到12% 6分钟,然后从23%提高到100%,持续15分钟。溶剂流进行2.5毫升/分钟使用紫外探测器在280海里。标准高金雀花碱(外部标准;德国默克)和标准混合提取(内部标准)分别注入系统比较和衡量这种化合物在植物的数量。
2.6。LC / MS评估
黄芪小头者用最少的水溶解,然后过滤,0.45μ米孔隙大小过滤器。10μL提取的注入安捷伦6100四极LC / MS系统检测类黄酮,是检查图书馆标准色谱系统中使用二极管阵列检测器SL(微流单元:2μL, 3 mm路径长度)。
根据林LC / MS进行了方法(21]。为了这个目的,一个安捷伦6100系列LC / MS系统(美国圣克拉拉安捷伦科技),光电二极管阵列检测器被设定为260海里。紫外光谱检测在200 - 500海里获得最大吸收波长。150×3.0毫米,3.5μ米水域XTerra女士与一个哨兵守卫(对称C18, 5列μ米,使用20×3.9毫米)。包含(1)水流动相为0.25% (v / v)醋酸和(2)乙腈0.25% (v / v)乙酸使用线性渐变的17% - -42% (v / v)为38分钟。(2)温度和流量设置为45°C和0.2毫升/分钟,分别。
LC系统加入到质谱仪直接使用电喷射流分裂和惠普59987接口模型。的得到了质谱正离子模式。喷雾器的压力(N2)是5.5×105 Pa,和死亡的温度气体(N2)被设置为350°C,气体流速的40毫升/分钟。
2.7。分子对接
人队的晶体结构α和β蛋白质数据库(PDB)的ID 1 r5k和1 x7b,分别从蛋白质数据库中检索(https://www.rcsb.org)。晶体结构是由删除现有的配体而失踪的氢原子被添加使用BIOVIA发现Studio 2020。此后,非极性氢合并,而极地氢被添加到酶。酶是保存到可停靠的蛋白质数据银行,部分费用,和原子类型(PDBQT)格式为分子对接做准备。
此外,自卫队芒柄花黄素结构(CID 5280378), kaempferol-3-O-glucoside (CID 5282102), kaempferol-3-O-sophoroside (CID 5282155), kaempferol-3-O-neohesperidoside (CID 5318761), quercetin-3-O-neohesperidoside (CID 5748416), calycosin-7-O-beta-D-glucoside (CID 71571502),雌二醇(CID 5757)标准受体激动剂和非那雄胺57363 (CID)作为标准拮抗剂从PubChem检索数据库(https://www.pubchem.ncbi.nlm.nih.gov)。化合物转化为使用BIOVIA发现Studio 2020 PDB格式。这些配体分子进一步转化为可使用Autodock PDBQT格式的工具。
分子对接过程是由对接芒柄花黄素,kaempferol-3-O-glucoside, kaempferol-3-O-sophoroside, kaempferol-3-O-neohesperidoside, quercetin-3-O-neohesperidoside,和calycosin-7-O-beta-D-glucoside ERα和β,使用在网上对接方法。
进行验证和现实的结果,本研究采用雌二醇和非那雄胺作为比较标准的配体。每一个分析重复三次,计算平均值和标准偏差。
为此,PyRx。lnk软件使用,和绑定亲和力测定。
酶和配体被拖进各自列PDBQT的形式,和软件。
更好的计算方法来确定绑定模式使用对接之后,自由能的计算。这个预测化合物与受体的结合22]。
集群分析最终执行基于均方根偏差(RMSD)值与参考几何开始,和能量最低构象更密集的集群被认为是最可信赖的解决方案。配体的结合亲和力和酶都被记录下来。分子化合物和人之间的相互作用α和β被认为与BIOVIA发现Studio 2020软件。绑定配置文件确定使用受体蛀牙确定使用发现工作室可视化工具。
2.8。在体外药物释放研究
两个老鼠麻醉,腹部皮肤头发被移除。腹部皮肤分离和在生理盐水12 h,然后应用到透析袋。选择1.5%的浓度。
的黄芪药膏应用表面的透析管,下面是保存在与去离子水接触,密封,密封,浸泡在一个管包含35毫升的去离子水。连续摇动加热器搅拌器和应用内部的磁铁。温度是37±0.5°C, 2, 4, 6, 8, 10, 12, 24小时传递过程的开始。5毫升的样品溶液换成5毫升的去离子水透析管保持水平。样品评估分光光度计在415 nm根据槲皮素测量(23]。
2.9。MTT细胞生存能力分析
正常的人类皮肤成纤维细胞(NHDF)细胞是干细胞生物学研究所从鲁瓦扬购买技术和细胞被播种在96孔酶标(1×104)rpmi - 1640年(中国Biosera)培养基补充10%胎牛血清(Biosera的边后卫,中国),0.01米的玫瑰(4 - [2-hydroxyethyl] 1-piperazineethanesulfonic酸)(Biosera,中国),1%的混合抗生素/抗真菌的(美国Gibco), 0.001米的丙酮酸钠(美国Gibco),和0.02的谷酰胺(Biosera,中国),然后在一个孵化器孵化与湿润的气氛中5%的股份有限公司224 h。24小时后,介质被替换为介质补充与不同浓度的提取125年,500年,1000年和2000年μ克/毫升。
MTT测定24和48 h后执行。因此,10μl (3 - 4, dimethylthiazole-2-yl 2, 5-diphenyl溴化四唑(MTT试剂)添加到微型板块和孵化4 h,和90年μL(福尔马林缓冲区被添加到每个。此外,100年μL (10%) SDS(十二烷基硫酸钠、Gibco美国)在0.01 M盐酸溶解的解决方案是添加到每个好,保持在37°C的孵化器。紫色甲瓒产品溶解后一夜之间,微型板块吸光度测量与伊丽莎读者(570海里一个1)(24]。
一个1:生存能力的细胞比例=(吸光度的提取处理文化−吸光度的背景控制)/(吸光度的控制文化−吸光度的背景控制)×100。
2.10。细胞培养条件和伤口划痕试验
NHDF细胞系rpmi - 1640培养基中维护了补充材料包括10%的边后卫,1%的混合抗生素/抗真菌的,0.01米的消息灵通的,0.02米的谷酰胺,0.001丙酮酸钠。随后,在孵化器孵化(37°C,调湿大气CO2)为5% (25]。
的在体外伤口愈合活性提取被伤口评估划痕试验(26)通过测量面积的大小挠extract-treated组相比,参与集团在48 h。NHDF细胞被播种在6井12-well板(4×104细胞/)和与上述条件获得单层细胞培养在每个盘子里。中被删除,和中央刮了使用p200的尖端微量吸液管。井是用PBS的不依从细胞和细胞抓挠后残留物。特定的浓度黄芪小头者提取被选中后MTT试验(500 ppm提取粉),混合和溶解在rpmi - 1640中,添加到井中。作为对照组,三个井处理补充rpmi - 1640培养基。板块在孵化37°C(5%二氧化碳),在时间为0,2、8、24 h,划痕在显微镜下进行评估;伤口愈合的进步与对照组(参与组)。伤口状态计算IC手动测量软件版本2.0.0.286,成像来源、德国软件(26]。
2.11。实验和实验设计受伤
健康雄性小鼠体重200 - 220克的实验动物研究所马赞达兰大学的医学科学。动物可以免费获得食物和水,并保持在标准条件下(12 h在室温下光暗周期)。动物权利的原则是尊重动物权利保护协会(23]。
ketamine-xylazine混合物的动物麻醉剂量为0.1毫升/每100克体重通过腹腔内注射。动物的背头发被削减,2.5×2.5厘米圆形面积测量。然后,伤口是由全层切除背表面的所有的动物。
四十个受伤的老鼠分成四组(n= 10,每个动物都保存在一个单独的笼子里)。21天,治疗组每日如下:第一组是局部治疗的1.5%提取黄芪小头者软膏(提取组),第二组是局部治疗与磺胺嘧啶银(银集团)标准的医学组三个局部软膏治疗基地(凡士林组),和组4个没有收到任何正常的控制(自由组)治疗21天。
的1.5%提取黄芪小头者软膏治疗组被选中。这个选择是基于发表的文章在这属和动物实验中使用的有效的提取程序(以前的文章27,28]。
2.12。伤口大小分析
伤口尺寸测量在1、4、7、11、14和21。为此,伤口大小被吸引在透明纸和转移到坐标纸。伤口愈合的比例是按照下列公式计算:
一个2:伤口愈合的比率=(原来的伤口面积−面积的伤口)/原始伤口面积×100。
2.13。组织病理学评价
天4、7、14和21日的每组三只老鼠被氯仿吸入安乐死,收集和组织。此外,老鼠的正常健康的皮肤被进一步比较。所有样品都保存在单独的容器装满10%福尔马林和苏木精和伊红染色,马森的三色的染色。样本发送到组织病理学实验室检查的因素包括拥堵、水肿、坏死,纤维母细胞增生,胶原蛋白的形成,血管增生,上皮形成。
2.14。统计分析
26使用SPSS统计分析软件。显著性水平为0.05 ( )被认为是在所有情况下,结果是由意味着±SEM。变量的正常使用Shapiro-Wilk测试评估。单向方差分析和图基事后测试也被使用。非参数克鲁斯卡尔-沃利斯测试分析数据不是正态分布。
3所示。结果
3.1。总黄酮类化合物的决心
槲皮素的标准曲线方程(y= 0.0067x+ 0.2365,R2= 0.9712),类黄酮的提取测定,并考虑提取效率(9%),它是计算为0.0921 g / 1克的根源黄芪小头者。
3.2。提取染料木素的高效液相色谱分析
标准高金雀花碱的图,提取,提取的组合与标准给出的数字1- - - - - -3,分别。染料木黄酮保留时间为14.167和13.483分钟出现在标准的图提取的染料木黄酮和组合与标准,分别为(数字1和3)。可以观察到的保留时间为13.353分钟提取组,用红色箭头在图所示2。此外,标准曲线的标准染料木黄酮(Y= 2751.9X+ 7414,R2 = 0.9905),提取曲线下面的面积在染料木黄酮峰出现的时间是1.2449 ppm的提取浓度100 ppm。
3.3。LC / MS评估
的黄芪提取LC-ESI-MS分析如图4。识别个人的巅峰,保留时间,浓度,米+H]+表中列出1。基于这些值与系统库数据的比较,11类黄酮峰,如图4和表1。芒柄花黄素和kaempferol-3-O-glucoside最大浓度,分别是异黄酮和黄酮醇。
3.4。对接结果
结果在网上研究(表2和3)透露,kaempferol-3-O-glucoside影响人最高α和β相比其他组件。然后kaempferol-3-O-sophoroside,芒柄花黄素人有很高的亲和力α和β。绑定的亲和力kaempferol-3-O-glucoside−8.5(千卡每摩尔),和芒柄花黄素和kaempferol-3-O-sophoroside−8(千卡每摩尔),ERβ。Kaempferol-3-O-neohesperidoside结合能−7.9显示ERα的亲和力,quercetin-3-O-neohesperidoside−7.8(千卡每摩尔)。
3.5。在体外药物释放研究
槲皮素吸光度在415 nm (y= 0.0166x+ 0.143,R2= 0.997),这个公式,类黄酮是通过膜以恒定速率,和考试期间是0.142毫克/毫升(24小时)(图5)。
3.6。MTT试验
细胞生存能力结果表明提取毒性剂量的2000μg 48 h后细胞生存能力(0.97%),和剂量的250年,500年和1000年μg细胞的异常都超过100%,表明细胞生长。的最大细胞生存能力在剂量的百分比250年和500年μg,分别在24和48 h(图6)。这些结果,500μg剂量被选为伤口愈合速度的研究中。
3.7。评估在体外伤口愈合的活动
的在体外抓关闭分析显示没有死亡率;此外,提取组显示增加的数量成纤维细胞与对照组相比。提取组显示更好的伤口愈合活动在每一集的时间( )。提取组封闭在起跑线上优于对照组,特别是在治疗后8 h ( )。在24小时期间,两组完全封闭(图7和表4)。
3.8。伤口大小分析
伤口评估显示,有超过90%的所有组伤口愈合后14天。最初,自由组伤口愈合率是最高的,但是随着时间的推移,加速伤口愈合,并显示所有组相比自由组更好的效果。遵循集团的两两比较,我们使用了图基测试,结果表明,平均伤口愈合率在4天的免费组高于提取组( )。7天,提取组高于自由( )和银( )组。凡士林组超过银( )和自由( )组。第十天,提取组高于自由组( ),和凡士林组高于自由组( )。第14天,各组之间没有统计上的显著差异。此外,研究小组的治疗后,提取显示最低伤口疤痕(表5和6)。
3.9。组织病理学评价
组织病理学结果表明,充血、水肿、炎症、坏死,血管生成在考试有所下降,纤维母细胞增殖、纤维化和上皮形成增加,尤其是在提取组相比,磺胺嘧啶银盐和自由组织。克鲁斯卡尔-沃利斯检验结果显示显著差异在上皮形成组( )。通过执行事后测试中,我们发现了一个提取和自由之间的显著差异,银( ),和凡士林( )组织;上皮形成更高的提取。
团体之间的纤维母细胞增殖是重要的,根据克鲁斯卡尔-沃利斯检验的结果( )。的事后测试两组比较显示,银和提取组织之间纤维母细胞增殖显著( )在某种程度上,这个指数提取组高。纤维母细胞增殖凡士林组高于银集团( )。克鲁斯卡尔-沃利斯检验组也显著纤维化( )。纤维化的自由组高于银集团( ),和提取组高于银集团( )。此外,提取组纤维化的数量高于凡士林组( )。血管生成治疗组之间的显著( )。血管生成在提取组高于凡士林组( ),和提取组高于银集团( )。此外,自由组高于银集团( )。
后一个重要的克鲁斯卡尔-沃利斯拥堵测试组间( )与一个事后测试,发现拥挤在提取组低于免费( )和银( )组和凡士林组小于自由组( )和银( )。水肿的克鲁斯卡尔-沃利斯检验结果显示组(之间的显著差异 )。这个指数提取组低于自由( ),凡士林( ),和银组( )。炎症组(之间也是重要的 ),所以这个指数提取组低于凡士林( ),银色( ),和自由( )组。坏死也显著的组间( )。通过检查两个比较,我们发现大量的坏死提取组比凡士林( )和银( )组。
马森的三色的染料样品,蓝色区域显示组织扩散,可以归因于债券形成胶原蛋白。14天,凡士林和提取组表现出更高的蓝区(表7)。
4所示。讨论
伤口是一种高发的并发症,影响社会。其治疗变得更加重要与伤口的长度和深度等因素,伤口感染和其他潜在疾病,如糖尿病(5]。
一般来说,影响伤口愈合的因素分为本地和系统性因素。当地因素直接影响伤口,和系统的影响个人的健康状况或条件和恢复的能力。此外,许多其他因素有关本地和系统性因素(29日,30.]。当地感染是一个重要的因素,和微生物通常存在于皮肤表面。当皮肤受伤,他们访问底层组织。因素如感染,复制状态,和微生物加载在组织代表伤口感染的分类,如微生物污染、殖民、局部感染和系统性分离侵入性感染(6,31日]。
炎症是一个正常的身体反应在伤口愈合过程中,微生物污染延长这个反应。细菌和类毒素提升促炎细胞因子如TNF -α和interleukin-1。此外,炎症增加组织蛋白酶酶,降解迅速生长因子。如果这种情况继续在伤口,它会导致治疗的失败。金黄色葡萄球菌(年代。葡萄球菌),铜绿假单胞菌(P。绿脓杆菌)是伤口感染的重要原因32,33]。人体内各器官分布。雌激素的皮肤是一个重要的目标,两人(α和β)。研究表明,雌激素增加表皮细胞有丝分裂活动,可用于伤口并发症(34]。研究报道,伤口愈合的速度在女性比男性更高。此外,伤口愈合的速度在老年人有所下降;这个观察雌激素荷尔蒙(直接相关35]。
类黄酮和糖甙是第二重要的代谢产物通常存在于大多数植物。他们尤其发现根的豆科的家庭。isoflavonoids子分类的类黄酮。他们有一个类似的结构,雌激素和可以绑定estrogen-related受体。黄芪物种据报道,属于豆科植物的家人和类黄酮(30.]。在当前的研究中,草药的分析提取显示大量的类黄酮含量高,和LC / MS评价代表一些黄酮类化合物和糖苷isoflavonoids芦丁的基础结构,槲皮素、山柰酚、calycosin。虽然在文献中染料木黄酮高的演讲,可以隔绝这属36),在这项研究中,染料木素的提取是追踪;这是1.2449 ppm的提取。
ER的目标是身体的雌激素。这些受体可以用于设计与高亲和力分子estrogen-related疾病的人使用它们。函数体内不同受体激动剂和拮抗剂机制的基础上,设计结构。
各种化合物可以影响人α和β(雌激素、雄激素,植物雌激素、抗雌激素和环境雌激素),因为内在的人α和β配体结合域(精神的小黑裙)可塑性(37]。
呃α小黑裙结构包含11α螺旋线。附件这个酶与类固醇激素/配体的氢键和疏水相互作用的非甾体类配体。雌二醇羟基的位置3和17一个和D戒指有氢连着Glu353 H3,从H5 Arg394,水分子,从H11 His524。呃β可以债券染料木黄酮和雌二醇的氢键受体的羟基与组氨酸团体半个。
研究表明,如果一个特殊的物质往往影响人α和β作为一个激动剂或亲戚,应该放置在距离交互Glu353活性部位的氨基酸,Arg394, His524。然而,不同的对手,一个失踪的交互可以有相反的效果38]。估计附近的配体酶的生理行为,配体受体的亲和力很重要。在这项研究中,雌二醇(身体雌激素)作为受体激动剂和非那雄胺拮抗剂的人找评估人的亲和力α和β为进一步调查与标准化合物和LC / MS建议化合物。此外,在当前的研究中,我们观察到H从ER债券之间的活性部位的氨基酸αGlu353、Arg394 His524。此外,呃β,债券与最低能量构象(最高亲和力)被选中。对ERα,所有化合物构象活性位点的相互作用距离附近。此外,由于人的柔性结构,化合物显示H债券497年阿拉巴马州的再保险β。
雌二醇的亲和力的人α和β−6.822±0.03−6.544±0.13(千卡每摩尔),分别。非那雄胺的值是6.956±0.06−−6.578±0.12(千卡每摩尔)。Kaempferol-3-O-glucoside影响人最高α和β与其他组件相比,鉴于这种亲和力高于非那雄胺和雌二醇。
Kaempferol-3-O-glucoside、kaempferol-3-O-sophoroside kaempferol-3-O-neohesperidoside, quercetin-3-O-neohesperidoside亲和性显著高于绑定(能量更低的债券)α相比,雌二醇和非那雄胺。此外,这些化合物,包括calycosin-7-O-beta-D-glucoside明显高于绑定亲和力ERβ相对于雌二醇和非那雄胺(表2)。绑定关联化合物可以在表的详细信息2。在彭日成等人的研究中,染料木素、大豆苷、山柰酚表现出不同程度的敌对活动对ERα(39]。在其他的研究中,发现山柰酚函数作为雌激素竞争对手,这种化合物是−7的亲和力,这是−6.7(千卡每摩尔)雌激素。这一发现类似于当前的研究(40]。Ganguly等人评估一些多酚和类黄酮对雌激素受体。他们发现,儿茶素和表儿茶素显示最好的亲和力对ERα并暗示他们可能影响生殖激素体内平衡(41]。你们等人发现Caco-2细胞的增殖(ERβ表达细胞)增加异黄酮处理时,它将由羟化更异黄酮生物转化产品。这可能调解ER的进展β表达肠道癌症(如结肠癌)。
尽管口服使用的矛盾影响雌激素的化合物(黄酮类化合物,特别是isoflavonoids),目前的研究表明,这些化合物在这两方面都明显影响伤口愈合在活的有机体内和在体外条件。这伤口愈合效果的机理是由于人的存在α和β在目标组织(皮肤)和这群的特定结构的化合物。此外,在网上研究证实,这些化合物的高亲和力的人可能是一个可能的机制这一效应。这些发现符合Ozay et al。”年代研究表明,山柰酚可以治愈伤口在糖尿病和非糖尿病的模型42]。
其他的研究评估的影响黄芪(费)。Bunge伤口愈合的影响在体外和在活的有机体内在两种情况下,显示伤口愈合活动(43,44]。大鼠、小鼠和豚鼠通常被用于伤口愈合试验在活的有机体内条件。试验持续时间通常是7、14和21天根据观察和每个研究的考虑参数(45,46]。磺胺嘧啶银盐和苯妥英药膏通常被用作标准医学团体(47- - - - - -49]。其他一些研究使用莫匹罗星和聚乙烯吡咯酮碘软膏50,51]。在这项研究中,一个21天的试验进行评估的伤口愈合在活的有机体内药物和磺胺嘧啶银盐条件选为标准。
通过从全层皮肤对药物释放,药物输送到组织的速度可以计算。通过测量大量的类黄酮穿过皮肤,观察药物的释放速度和显示零动力学提取吸光度,导致Vaseline-based公式穿过皮肤与一个常数。此外,凡士林并不容易从老鼠的背侧皮肤,每日用这个公式比药物治疗在日常应用程序交付。因此,提取与伤口接触的时间更长,和愈合过程完成得更好。
在目前的研究中,局部应用黄芪显著提高伤口愈合率作为评估伤口组织胶原合成增加,发现类似于黔等的研究(52]。组织学研究结果还显示增强扩散成纤维细胞和上皮形成;他们提取组显著优于其他组。羟脯氨酸水平测量伤口组织中的胶原蛋白的生物标志物(细胞修复建筑材料)53]。此外,在当前的研究中,胶原蛋白被马森的三色的染色,评价和胶原蛋白纤维化表示债券。
阿方索等人的评价在体外伤口愈合活动通过划痕试验NHDF细胞系(54]。关闭伤口的速率测定,细胞的迁移证明了伤口愈合。在最近的研究中,选择中等剂量的治疗是基于通过MTT测定毒性评价。显然,伤口迁移和关闭的观察,特别是在提取组,治疗后8 h黄芪提取与控制样本相比,这说明伤口愈合的速度。
总的来说,对于未来的研究,建议测量评估伤口炎症和研究促炎细胞因子提取的抗菌和抗真菌活性。由于我们研究的限制隔离从提取异黄酮糖苷,最好是评估每一个LC / MS化合物在将来的研究中对于伤口愈合分析结果。
5。结论
黄芪小头者显示伤口愈合活动在活的有机体内和在体外由于黄酮类化合物(特别是isoflavonoids)中提取。这些类黄酮对人有很高的亲和力α和β在皮肤组织,行为类似于雌激素,并加速伤口愈合过程。
数据可用性
所有的材料,如老鼠、磺胺嘧啶银盐、凡士林、微生物培养基的文化,和乙醇提取,马赞达兰大学医学科学所提供的。数据从实验室获得马赞达兰大学的医学科学、病理学和血清学等实验室。
的利益冲突
作者宣称没有利益冲突。
确认
作者想表达他们的感谢任何帮助的人进行这项研究。