开发的一种抗氧化剂Phytoextract马樱丹属grisebachiiLymphoprotective活动对在体外砷的毒性

文摘

植物化学物质已被认为在一些疾病具有预防和疗效,如砷(-)诱导免疫抑制。我们的目的是发现lymphoprotective提取物马樱丹属grisebachii卡住了。(马鞭草科)(LG)。我们评估其生物活性和化学成分使用细胞化验。分数从己烷提取敏锐地感应产生亚硝酸盐形成T-activated细胞培养。水萃取发布一小部分没有亚硝酸盐诱导淋巴细胞类型活动。水LG被发现是安全的在扩散和增殖细胞。infusion-derived提取了更好的抗氧化能力酚醛数量比例在淋巴细胞(有影响力的LG-1i享年100岁μg / mL),保护他们在体外As-induced lymphotoxicity。这个令人兴奋的LG phytoextract包含毫克/克的酚醛树脂,58.46%是黄酮类化合物。在酚醛树脂中,唯一的主要化合物是0.723毫克每克干植物绿原酸,除了10未知小化合物。脂肪酸概要文件被评估。它包含了三分之一的饱和脂肪酸,三分之一的ω9,紧随其后的是ω6 (~ 24%)ω3(~ 4%),和稀缺ω7所示。总结,l . grisebachii生物活性和lymphoprotective化合物的来源,这可能抵消其毒性。这支持phytomedical使用和研究以减少相关障碍。

1。介绍

很多阿根廷的植物物种已经被提议作为生物活性化合物的来源可以用来预防和治疗一些人类健康疾病(1]。在这些化合物中,酚醛树脂的主要候选人生物医学潜力,鉴于其抗氧化和多目标的影响。这些过程涉及xenohormesis,有机增强细胞抵抗氧化应激通过消费plant-synthesized化合物(2]。氧化应激是许多慢性障碍与自由基引发氧化还原平衡生产过剩(活性种O, N, S)和损伤的抗氧化防御3]。可以生成活性物种从内部细胞机制或被环境因素诱导体内,如污染物(如砷、农药等)(4]。

免疫系统包括一个复杂的集成的生物防御,旨在保护生物体免受大量病原体,涉及B和T淋巴细胞是至关重要的细胞(5]。鉴于免疫系统受环境影响的一个主要目标氧化剂(二次免疫抑制),免疫恢复可能通过实施特定的生物活性植物化学物质与immunoxenohormetic活动(6]。因此,抗氧化剂可以作为chemopreventive免疫调节药物对化学诱导压力。一个典型的例子是慢性hydroarsenicism或导致砷中毒:多系统综合症由于长期从饮用水砷摄入量。在世界范围内,它提出了高卫生的影响。砷会损害细胞的氧化还原反应导致氧化损伤的自底向上的细胞毒性(7),immunotoxic影响损害细胞和抗体反应(8]。此外,它会加剧炎症反应(9]。

在这方面,在阿根廷phytopharmacological生物勘探是光明的。几个潜在的有益的物种居住在阿根廷中部的山区。马樱丹属grisebachii卡住了。Seckt交货。var。grisebachii(马鞭草科)被选中后ethnopharmacological和实验研究。注入的这种植物是传统的天线部分胃肠道兴奋剂,因为他们改善毒素清除,具有解热、抗菌活动(10]。所有这一切表明一个immunoactive潜力。此外,它在食品和防止展品抗氧化活性在体外砷肾毒性(11]。从这些研究中,这一物种已被建议作为多酚的来源(12]。这些生物活性分子、酚酸、黄酮类化合物具有抗氧化特性的最广泛的群体,其收购取决于遗传、环境和技术变量(13]。

本研究的目的是开发一个从提取物l . grisebachii(LG),通过建立其与细胞的生物活性测定,然后它的化学成分。具体目标是评估最优提取方法,氧化还原安全,抗氧化剂和lymphoprotective效果。

2。材料和方法

2.1。工厂加工

阿根廷马樱丹属grisebachii(LG) Chaquenian phytogeographic地区(14]在夏天收集(GPS坐标:−31.28−64.44),在获得政府同意MinCyT-Cba。标本存入RIOC标本(UNRC、阿根廷)。一克粉,脱水天线部分提取在黑暗中在室温下不断摇动4毫升的己烷(LG-24h: hexanic提取)、水(LG-24m: 24 h水浸渍),或水最初在95°C (LG-1i: 1 h水注入)。然后,提取被过滤(0.45从上层清液中恢复μm HAWG04756过滤器,微孔、巴西)和24小时升华干燥后溶解在50%二甲亚砜(σ,美国)。

2.2。动物保健和细胞培养

Wistar鼠()男女双方都关心据美国伦理指导方针和标准实验室条件下饲养随意生活饮用水< 0.01 mg / L(阿瓜Cordobesas SA阿根廷)和商业食品(脂肪酸简介:14:0 (1.3%)、14:1ω9 (1.8%)、16:0 (21%)、16:1ω7 (0.6%)、18:0 (26%)、18:1ω9 (11.5%)、18:2ω6 (23.8%)、18:3ω3 (2.1%)、20:1ω9 (0.5%)、20:2ω6 (1.3%)、20:4ω6 (0.2%)、20:5ω3(6.7%),22日:1ω9(0.2%))(嘉吉尚驰、阿根廷)。之后,脾细胞是通过机械分散和化学溶血的脾脏,他们培养的37°C的5%的股份有限公司₂气氛rpmi - 1640中10%胎牛血清,100μM环丙沙星,50μ美国M 2-mercaptoethanol(σ)。然后,体外mitogen-induced激活(EVMIA)是通过对1000细胞/μL 5μ克/毫升的伴刀豆球蛋白A或脂多糖为72小时,诱导t或B-activated脾细胞,分别。所有结果都是标准化的结果如果细胞培养,以72 h限制扩散。

2.3。实验设计

2.3.1。识别安全分数

首先,极性和非极性的影响LG分数(200μg / mL, 2 h)比较已经刺激脾细胞(EVMIA之后)抛弃固有提取毒性。极地分数后被证明是安全的,水提取物进行了研究在细胞分裂(在所有EVMIA;100年μg / mL, 3 d)。同时,鉴于在活的有机体内侮辱可能影响响应,两个细胞来源被使用:C(对照组)和口头(两个月暴露大鼠5毫克/公斤/天的NaAsO₂、Anedra实验室、阿根廷)。这些条件是一个公认的导致砷中毒大鼠模型(15),亚硝酸盐氧化(61%与自由基)和炎症生物标记。

2.3.2。一个有效的提取的识别

氧化还原效率(见下文水分数(100)的安全μg / mL, EVMIA期间3 d)进行了测试。

2.3.3。评估的直接在体外保护活动

最有效和安全的phytoextract期间化验EVMIA细胞暴露于0 - 7.5μ克/毫升的,这些条件触发高毒性和允许筛选保护剂(16]。

2.4。生物测试

2.4.1。细胞生存能力

自台盼蓝排斥试验不是一个足够的决心的可行性,resazurin-based化验使用。可行的细胞被染色和刃天青(0.05毫克/毫升在培养基中,6 - 12 h;美国Sigma-Aldrich TOX-8工具包)[17]。然后,可行性计算吸光度的百分比在600 nm对控制()。吸光度读数进行与GloMax-Multi微型板块多模读者(美国Promega Corp .)。

2.4.2。细胞的亚硝酸盐

亚硝酸盐,用作nitrosative压力标记,化验的格里斯反应(18与反应物),购买的维纳实验室(阿根廷)。细胞悬浊液naphthylethylenediamine盐酸盐反应与相同体积的0.1%,1%对氨基苯磺酰胺0.1 N盐酸(室温15分钟)。从标准的亚硝酸钠百分比计算曲线(550海里)。

2.4.3。自由基活动

自由基氧化ethanolic 16毫米N, N, N′, N′-tetramethyl-p-phenylenediamine-1, 4-dihydrochloride解决方案(美国σ)在540海里(读3]。相同量的细胞样本和解决方案的反应在室温下30分钟在一个无氧的环境中。百分比,对控制,被用来计算氧化还原效率的商激进活动(%)在提取酚类含量(%)。

2.5。植物化学

2.5.1。总酚醛树脂

一个解决方案是创建25μL(提取、25μL 2 n Folin-Ciocalteau (Anedra、阿根廷),和150年μ50升的水,然后μL饱和碳酸氢钠溶液添加。30分钟后在37°C在黑暗中孵化,吸光度被记录在750纳米19]。标准曲线是用来计算毫克每克干版的没食子酸提取(毫克/克)。没食子酸是从Riedel-de-Haen(中国)。

2.5.2。总类黄酮

黄酮和黄酮醇确定如下20.:50μL提取的孵化与150年在室温下30分钟μL乙醇(96%)(Cicarelli、阿根廷),10μL(氯化铝(10%),10μL(乙酸钾(1米)(Anedra、阿根廷),和150年μL的水。结果在415海里的毫克当量计算每克干提取槲皮素二水合物(毫克/克)使用标准曲线(丙烯酰胺、英国)。

2.5.3。酚醛分析

酚醛树脂进行了分析通过高效液相色谱二极管阵列检测与HPLC-DAD安捷伦科技1200系列系统配备安捷伦G1312B SL二元梯度泵,安捷伦G1379 B溶剂脱气装置,安捷伦G1367 D SL + WP autosampler,安捷伦G1315 C星光爸爸(ISIDSA UNC)。分离实现了卢娜反相C18柱(证件;美国Phenomenex),设置在35°C使用安捷伦G1316 B列加热器模块。流动相为0.5%甲酸(丙烯酰胺、德国)在超纯水(< 5μgL-1 TOC;缝匠肌、德国)(vv-1,溶剂)和0.5%的甲酸甲醇(贝克,墨西哥人。)(vv-1、溶剂B)。开始为20%,升至50% B在一段3分钟,保持5分钟,其次是第二个增加到70%在7分钟的过程中,保持5分钟,第三在1分钟增加到80%,保持了9分钟,剩下的最后一个浓度10分钟之前运行。流量为0.4毫升/分钟,注入40μL列。爸爸是设定在280、320和350 nm首选和紫外可见光谱波长200 - 600纳米。标准是阿魏酸和咖啡酸(Extrasynthese、法国)、柚皮苷、山柰酚、和p-coumaric酸(丙烯酰胺、英国),和绿原酸柚苷配基,杨梅酮,反式白藜芦醇,芦丁(Sigma-Aldrich,德国)。

2.5.4。脂肪酸概要

脂质被从Folch提取的较低的阶段,这是干下氮流和甲基化与甲苯和甲醇钠(美国σ)在室温下24小时。然后,脂肪酸甲基酯溶解在50%恢复从己烷和正己烷相干在氮和悬浮在己烷。分离是实现Supelco熔融石英毛细管柱(μ米),20厘米/秒氮流量(流动相)和2°C /分钟梯度。珀金埃尔默500来说相关色谱仪与火焰离子化检测(美国沃尔瑟姆)被用于分析(烤箱计划:180°C - 240°C)。标准是NU-Chek-Prep Inc .(美国)和结果表示为总脂肪酸含量的百分比。

2.6。统计分析

数据被表示为平均值±标准错误(SE)从至少三个独立的实验中表现一式三份,除非另有注明。方差分析模型被用来评估不同治疗,其次是图基的测试意味着比较。然后,GLM适合回归实验条件的影响()。分析InfoStat 2012软件(InfoStat集团、阿根廷)。

3所示。结果

3.1。Bioguided提取选择

3.1.1。提取

考虑到溶剂极性决定提取化合物的类型,己烷和水进行比较。Hexanicl . grisebachii提取生产的一个有机部分,引起亚硝酸盐的形成在T-activated文化急性试验()。另一方面,水萃取发布了水分数没有亚硝酸盐诱导淋巴细胞类型活动。因此,这些极地衍生品对B -和T-activated细胞也是安全的,来自在活的有机体内展示出来的动物;也就是说,他们的安全是一个exposure-independent效应和扩散和增殖细胞(数据中找到1和2)。因此,水提取物被选为下一个阶段。

3.1.2。氧化还原效率

考虑到更高的温度促进分子的流动性,热量变化的水可以修改提取概要文件。24 h water-macerated提取证明商高于令人鼓舞的提取(),没有arsenic-related差异;也就是说,最后提取显示更好的抗氧化能力/酚醛数量在所有细胞培养(图3)。因此,选择有影响力的分数。

3.1.3。防止Arsenotoxicity

考虑到在活的有机体内随着暴露与脾细胞活力下降,一个在体外分析的l . grisebachii探索其潜在打击这种毒素是鼓励。首先,砷毒性被确认存在剂量依赖的相关性(浓度低至0.075μg / mL) ()。在这种情况下,有影响力的提取抵消这种毒性剂量依赖性的方式(图4),100年μg / mL减少细胞死亡(包括浓度7.5μg / mL) ()。剂量的十μ保护0.075 g / mLμg / mL的细胞类型。另一方面,B-activated 0.75脾细胞受到保护μ克/毫升,表明增加阻力。降低提取浓度不足以防止As-induced损害与氧化剂感应()。比B-activated T-activated细胞更有责任(%与%,职责。)(),而令人兴奋的提取抗氧化剂在两个()。

3.2。植物化学的选择有影响力的马樱丹属grisebachii提取

3.2.1之上。酚醛树脂

众所周知,溶剂极性和温度确定提取的结果。水的就业产生了1.67倍酚醛比己烷萃取从LG(不同的极性)后24 h浸渍在室温下()。水萃取也可以通过增加其温度降低到1小时。这种方法增加酚提取经典24小时水浸渍的1.55倍,与提取温度的依赖()。这个令人兴奋的phytoextract包含毫克/克的酚醛树脂,58.46%的类黄酮(毫克/克)。在酚醛树脂中,绿原酸是主要的化合物(0.723毫克/克),(图10中未知的小化合物5)。

3.2.2。脂质

增加水的温度允许一些有机化合物提取;因此,脂肪酸指纹可以评估。结果显示,三分之一的饱和脂肪酸,三分之一的ω9日,ω6 (~ 24%),ω3(~ 4%),和稀缺ω7(图5)。

4所示。讨论

本研究追求bioguided识别的植物提取物l . grisebachii(LG)可以战斗lymphotoxicity通过比较不同提取方法和淋巴细胞反应(亚硝酸盐、自由基和细胞生存能力)。

水LG提取物中的酚醛增加是由于存在的主要生物活性分子,如类黄酮和酚酸(绿原)。这是增强了热水的使用,从而提高萃取(21]。虽然亲水有机溶剂(如乙醇)通常用于获得这些类型的化合物(22],相似的药理之间已经证明酒精提取物和那些来自注入23]。因此,成为人类由于生物类黄酮的存在功能性化学组(例如,亲水性羟基和羰基)的多环结构(24]。此外,注入的更好的氧化还原效率的其他冷water-macerated提取表示定性差异每重量更大的生物活性。这可能是有关提取水溶性的从植物耐热性的抗氧化剂25]。此外,其他植物的有机提取物抗氧化剂和cytoprotectors也有报道,但在一定程度上比他们的水(26]。在这项研究中,海拔亚硝酸盐在细胞培养hexanic提取处理,这与酚醛减少。关于这一点,LG代谢物可能现在无极的氧化剂(如nitrosative抗病诱导剂,含氧脂肪酸)(27,28]。

鉴于淋巴细胞反应会受到不同因素的影响(如细胞周期进展,环境暴露,等等),水提取的安全评估。增殖淋巴细胞更容易引起的氧化应激,预计(29日]。然而,水提取淋巴细胞文化是安全的。此外,令人兴奋的抗氧化剂phytoextract马樱丹属grisebachii引发了一场xenohormetic防御砷lymphotoxicity。的一些途径参与建立了这样的保护(30.]。T -之间的差异和B-activated脾细胞显示高B耐化学/环境压力与减少有关生物条件敏感性[31日,32]。此外,提取可能含有B淋巴组织等其他植物酚类化合物衍生品(33]。在另一方面,细胞凋亡作为主要的参与lymphotoxic效应已经证明完全地在化验条件下(34];因此,致死表型没有搜索(事实上,决定晚些时候在细胞培养中最终可能导致混淆关于最初的类型)。因此,细胞的高通量筛查方法phytodrugs被选中(35由于其代表性的免疫细胞反应和细胞凋亡36]。

这些多重效应(抗氧化、cytoprotection和功能性感应)已经在其他在体外系统。例如,100μg / mL LG-1i促进肾脏细胞的大白aethiops(生存能力对控制:%)与降低γ谷酰基转肽酶活动治疗2 h后(控制:与LG-1i:妞妞/细胞,)和4 h(控制:与LG-1i:妞妞/细胞,)(未发表的数据)。这个细胞类型是第一个发现了cytoprotective LG防止As-induced氧化应激(11),这种酶是细胞增强抗氧化还原反应(37]。这支持phytodrugs(例如,flavonoid-related化合物,flavolignanes)可以刺激分子保护途径(38]。同时,有益的影响马樱丹属grisebachii注入小鼠淋巴细胞和猴renocytes表示,他们是独立的物种和细胞类型;也就是说,这种植物的抗氧化生物活性被发现。

鉴于温度有利于脂质在水动力学生物样品(39),溶剂加热时被强制从植物原料中提取他们水提取,与脂肪酸评估植物注入创新。事实上,提取增强通过加热水是体现的存在脂质水注入。这种方法论的方法支持不饱和脂肪酸获得,包括一些基本的免疫反应,这是高度敏感arsenic-induced障碍和干扰30.]。

5。结论

虽然需要进一步的研究以建立其他淋巴细胞功能的影响,本研究提供首次开发的基础马樱丹属grisebachii派生phytodrugs减少砷引起的障碍,一个著名的氧化immunotoxic。在这方面,导致砷中毒是一个全球公共卫生关注,尽管努力补救污染土壤和水,免疫细胞是主要目标。因此,顺序bioguided生物勘探的抗氧化植物,如马樱丹属grisebachii,是一种有价值的方法。此外,植物在阿根廷immunoactive和常见菌群所提到的,这可能代表着丰富的化合物来源phytopharmaceutical发展容易提取使用水性photoprotected thermoassisted方法。

利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

确认

作者要感谢Marta Goleniowski博士学位,和安娜菲格罗亚,学士学位持有人,宝贵的贡献,和加勒特加德纳,医学博士学位的学生,一个本地说英语的人,论文修改。这项工作得到了国家科技推广机构(批准号171/08);科尔多瓦的科学机构(批准号969/05);国立大学和科尔多瓦(批准号162/12)。

引用

1. m . e . Goleniowski g . a . Bongiovanni l . -帕拉西奥市c . o . Nunez和j·j . Cantero“药用植物”Sierra de Comechingones”,阿根廷,“民族药物学杂志,卷107,不。3、324 - 341年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
2. Y.-J。Surh”Xenohormesis机制chemopreventive一些饮食植物化学物质的影响,“纽约科学院上,卷1229,不。1、1 - 6,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
3. g . a . Bongiovanni e·a·索里亚时,a . r . Eynard“植物类黄酮水飞蓟素和槲皮素的影响在CHO-K1 arsenite-induced氧化应激细胞,”食品和化学毒物学,45卷,不。6,971 - 976年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
4. l . Nasreddine和d . Parent-Massin食品污染的金属和杀虫剂在欧盟。我们应该担心吗?”毒物学字母,卷127,不。1 - 3,29-41,2002页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
5. c . a . Janeway Jr .)·特拉弗斯和m . j . Shlomchik m . Walport免疫生物学:健康和疾病的免疫系统,花环科学,纽约,纽约,美国第五版,2001年版。
6. m·k·辛格s s Yadav,诉古普塔和s . Khattri”免疫调节的作用兰officinalis在砷诱导氧化损伤和细胞凋亡在小鼠胸腺细胞,”BMC补充和替代医学第193条,卷。13日,2013年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
7. e·a·索里亚时,a。r . Eynard g . a . Bongiovanni”Cytoprotective水飞蓟素的影响对arsenic-induced上皮细胞凋亡与槲皮素细胞毒性不同,“生命科学,卷87,不。9 - 10,309 - 315年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
8. r . Colognato f . Coppede j·庞帝,e . Sabbioni l·米利,“基因毒性引起的砷化合物在人类周围淋巴细胞分析cytokinesis-block微核分析,“诱变,22卷,不。4、255 - 261年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
9. k·a·拉姆齐·r·e·Foong p·d·狡猾,a . n . Larcombe和g·r·Zosky“生命早期砷暴露和急性和长期应对甲型流感感染的老鼠,”环境健康展望,卷121,不。10日,1187 - 1193年,2013页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
10. g·e·巴博萨,j . j . Cantero c . Nunez a . Pacciaroni和l .阿里扎埃斯皮纳“药用植物:总复习和植物化学的ethnopharmacological阿根廷本土植物的筛选,“Kurtziana,34卷,不。1 - 2、7 - 365年,2009页。视图:谷歌学术搜索
11. e·a·索里亚时,m . e . Goleniowski j . j . Cantero和g . a . Bongiovanni”不同提取物的抗氧化活性对arsenic-induced阿根廷药用植物在肾细胞毒性,”人类和毒理学实验,27卷,不。4、341 - 346年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
12. r .婆罗洲,a·e·莱昂Aguirre, p . Ribotta和j·j . Cantero”药用植物的抗氧化能力科尔多瓦省(阿根廷)及其体外测试食品体系的模式,”食品化学,卷112,不。3、664 - 670年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
13. r·曹“膳食多酚类物质、化学与生物化学营养物质,卷2,不。12日,第1246 - 1231页,2010年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
14. a·l·卡布瑞拉,”地区fitogeograficas阿根廷航空”Y Jardineria Enciclopedia阿根廷de水资源p。85年,ACME SA,布宜诺斯艾利斯,阿根廷,1976。视图:谷歌学术搜索
15. p . n . Rubatto Birri, r·d·佩雷斯·d·Cremonezzi c·a·佩雷斯·m·卢比奥和g . a . Bongiovanni”之间的联系和铜肾皮质积累和慢性砷摄入量后生理和组织学改变,”环境研究,卷110,不。5,417 - 423年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
16. d . Sinha戴伊,r·k·巴塔查里亚和m·罗伊“体外缓解砷毒性的茶多酚在人类淋巴细胞,”《环境病理学、毒理学和肿瘤,26卷,不。3、207 - 220年,2007页。视图:谷歌学术搜索
17. 美国j .特和W.-R。b .巴兹偏见,“刃天青的脱氢酶测定:实用性能监测系统和Ph-dependent毒性的酚类化合物,”生态毒理学和环境安全,25卷,不。1,第89 - 79页,1993。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
18. l . c .绿色d·a·瓦格纳j . Glogowski p l .队长j . s . Wishnok和s . r .坦南鲍姆,双重”分析的硝酸盐、亚硝酸盐和硝酸(15 n)在生物体液,”分析生物化学,卷126,不。1,第138 - 131页,1982。视图:谷歌学术搜索
19. g . Baddi, j . Cegarra g . Merlina j . c .陶醉和m . Hafidi“堆肥过程中多酚类化合物的定性和定量进化的橄榄油厂waste-wheat稻草混合物,”《有害物质,卷165,不。1 - 3、1119 - 1123年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
20. g·s·格罗索,i v c . Carvajal和j .校长“Perfil de黄酮类e指数de oxidacion de进行propoleos接受,“Zootecnia热带,25卷,不。2、95 - 102年,2007页。视图:谷歌学术搜索
21. 问:诉Vuong, j·b·戈尔丁c . e . Stathopoulos m·h·阮和p·d·罗奇,“从绿茶儿茶素的提取条件优化使用热水,”分离科学杂志》,34卷,不。21日,第3106 - 3099页,2011年。视图:谷歌学术搜索
22. m·a·Abbasi k . Rubab t Riaz来说,t . Shahzadi m·哈立德和m . Ajaib体外评估救援不同分数的氧化应激Boerhavia procumbens”,巴基斯坦制药科学杂志》上,25卷,不。2、357 - 364年,2012页。视图:谷歌学术搜索
23. t . Ito m . Kakino s Tazawa et al .,“量化的水和乙醇作为动力提取的多酚和药理分析培养agarwood叶子,”营养科学和维生素学杂志》上,卷。58岁的没有。2、136 - 142年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
24. s . s . Beevi l . n . Mangamoori比比高达,“多酚概要和抗氧化性能萝卜L。”,天然产物的研究,26卷,不。6,557 - 563年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
25. 贼鸥,m . Beffert k·霍普,d . Nadberezny b·弗兰克和a . Scheffler”准备的花草茶输液或浸渍在室温下用槲寄生茶为例,“Scientia Pharmaceutica,卷79,不。1,第155 - 145页,2011。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
26. y . b . Tripathi a·p·查图尔维迪和n Pandey,“黑种草种子提取物对伊诺通过抗氧化的影响潜在的只有:原油/总提取物分子治疗药物,”印度实验生物学杂志》上,50卷,不。6,413 - 418年,2012页。视图:谷歌学术搜索
27. n . Morihara i Sumioka: Ide, t .守口,n . Uda e京,“陈大蒜汁保持心血管在小鼠和大鼠体内平衡,”营养学杂志》,卷136,不。3,页777 - 781年代,2006年。视图:谷歌学术搜索
28. d . c . Doehlert p . Rayas-Duarte花药对赤霉病和m . s . McMullen”,抑制增长面粉凝胶文化由燕麦hexane-soluble化合物(燕麦属马唐L。面粉。”《食品保护,卷74,不。12日,第2191 - 2188页,2011年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
29. a . Thomas-Schoemann f . Batteux c Mongaret et al .,“三氧化二砷对抗癌活性通过调节性T细胞耗竭介导的氧化应激小鼠模型的结肠癌,”免疫学杂志,卷189,不。11日,第5177 - 5171页,2012年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
30. s . i拉莫斯Elizagaray对于那些quimiopreventiva e inmunoprotectora del extracto acuoso de马缨丹grisebachii var. grisebachii en hidroarsenicismo实验[硕士论文)科尔多瓦国立大学,科尔多瓦,西班牙,2013年。
31. j·e·特纳,j·a·博世和s . Aldred”运动给淋巴细胞氧化应激的测量”,生化社会事务,39卷,不。5,1299 - 1304年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
32. c c。沈,周宏儒。梁,c c。王,M.-H。廖,T.-R。1月”,一个细胞谷胱甘肽的作用在氧化铁纳米粒子的微分效应抗原T细胞细胞因子表达,“国际期刊的纳米》第六卷,第2798 - 2791页,2011年。视图:谷歌学术搜索
33. t . Francus“植物polyphenolic-protein轭合物激活小鼠脾细胞和绑定到多个细胞表面组件,”美国实验生物学和医学学会学报》上,卷207,不。1,第126 - 117页,1994。视图:谷歌学术搜索
34. H.-S。Yu W.-T。廖,K.-L。Chang C.-L。Yu, G.-S。陈,“砷诱发肿瘤坏死因子α释放和肿瘤坏死因子受体1在辅助T细胞凋亡信号,”皮肤病学研究杂志》上,卷119,不。4、812 - 819年,2002页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
35. c·d·t·e·O ' neill h . Li Colquhoun, j·a·约翰逊·d·韦伯斯特,和c·a·格雷,“优化微型板块的刃天青试验筛选和获得植物化学的提取物对结核分枝杆菌的分离,“植物化学的分析,2014年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
36. 肥仔y Zhi-Jun: Sriranganathan, t·沃特,s . k . Arastu s A·艾哈迈德,”一个dye-based淋巴细胞增殖试验,允许多种免疫分析:信使rna,细胞遗传学,细胞凋亡,和immunophenotyping研究,“《免疫学方法,卷210,不。1、25 - 39页。1997。视图:谷歌学术搜索
37. a Quiroga, p . l . Quiroga e·马丁内斯·e·a·索里亚时,和m . a . Valentich Anti-breast癌症姜黄素在人类抗氧化活性细胞zr - 75 - 1γ谷氨酰转肽酶抑制。”实验治疗学和肿瘤学杂志》上,8卷,不。3、261 - 266年,2010页。视图:谷歌学术搜索
38. j . Sonnenbichler f . Scalera Sonnenbichler,和r . Weyhenmeyer silibinin的刺激效应和silicristin牛奶蓟Silybum marianum肾脏细胞。”药理学和实验治疗学杂志》上,卷290,不。3、1375 - 1383年,1999页。视图:谷歌学术搜索
39. j .米”的新见解water-phospholipid模型膜相互作用,“Biochimica et Biophysica Acta-Biomembranes,卷1663,不。1 - 2,19-51,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索

版权

版权©2014埃利奥·a·索里亚时et al。这是一个开放的分布式下文章知识共享归属许可,它允许无限制的使用、分配和复制在任何媒介,提供最初的工作是正确引用。