文摘

在目前的研究中,我们调查的可行性,屈硅胶IVR的阴道管理。矩阵型的体外释放特征和储集类型IVR比较沉条件下21天。同时,API辅料相容性和预制剂的研究是由高效液相色谱、红外、DSC方法。生物相容性评价水库系统的耐受性在大鼠组织水平。发现,在强光照射下,高温、高湿度条件下,屈和辅料没有显著的交互作用。储集类型的日常发布IVR约为0.5 mg / d持续21天,大大降低了爆炸效果与矩阵系统。屈时修改的PVPk30水库系统配方,每日释放率增加到1.0 mg / d持续21天。储集类型的累积释放IVR安装于零释放方程。此外,生物相容性,屈IVR系统在这个剂量是安全的。可行性可行性是进一步发展为安全、方便、有效的避孕药物输送和减少剂量间隔。

1。介绍

屈(6 b 7 b 15 b, 16 b-dimethylene-3-oxo-17a-pregn-4-ene-21 17-carbolactone)是一个模拟的antimineralocorticoid螺内酯(图1从androstenolone)合成。不像其他的孕激素,其模拟螺内酯,生物化学和药理学概要文件类似于内源性孕激素,特别是关于antimineralocorticoid和antiandrogenic活动。屈抵消雌激素刺激肾素-血管紧张素-醛固酮系统和阻止睾酮与雄激素受体结合。由于这些特点,它有可能减少体重,血压,和低密度脂蛋白水平,提高高密度脂蛋白水平。作为一个组合,口服避孕药,其与炔雌醇,是有效的,对体重和血脂水平有积极作用1]。

其口服吸收迅速,其血浆浓度峰值时间约为60 - 90分钟,半衰期是- h (2]。这个产品是日常管理,否则会影响避孕效果。因此,持续释放药物优先高于日常管理。阴道内的环(IVR)可以作为一个替代平板电脑的日常管理3]。避孕阴道环自行提供有效的避孕措施,需要较少的频繁的剂量比许多其他形式的避孕措施,并提供了低剂量的激素。NuvaRing(推理法、Oss,荷兰),避孕阴道环被批准用于美国,包含etonogestrel和乙炔雌二醇。是插入到阴道的3周,其次是1周ring-free时期,并通过抑制排卵。大多数女性注意有益影响出血概要文件和NuvaRing[感到满意3]。严重不良事件是罕见的。在智利和秘鲁,progesterone-only阴道避孕环可用于哺乳期妇女。最近更多的研究是世界上正在进行的新配方的阴道内的环(4- - - - - -10]。

在目前的研究中我们调查的可行性,屈IVR由热硫化法与矩阵聚合物和有机硅弹性体封装相同的聚合物。

2。实验

2.1。材料

屈(蝙蝠。20101203)提供的是紫竹药业有限公司第六类弹性体(c6 - 165 A和B部分,0005308947)购买从道康宁公司(美国)。()获得Fengli始创商贸有限公司有限公司(中国,北京)。盐酸、无水酒精、磷酸二氢钠得到从化学试剂国药控股北京有限公司有限公司(中国,北京)。乙腈(高效液相色谱级)购买的费舍尔科学(公平的草坪,新泽西,美国)。其他化学物质和溶剂都是分析试剂和从当地获得商业来源,SDS(蝙蝠:L5750,σ)。

2.2。其溶解度在不同释放介质

过量,屈可以保持饱和状态以下溶剂分别放入密封锥形烧瓶包含25毫升的纯净水,氯化钠溶液,PBS (pH值3.8),0.03% SDS溶液,0.3% SDS溶液在电磁搅拌器(RT5PS25, IKA,德国)37°C 24 h。样品被撤回,随后药物的浓度被紫外可见分光光度法进行评估。

2.3。其溶解性有机硅弹性体(10]

采用差示扫描量热法(DSC)使用的调制仪器总热流曲线并不是解决可逆和不可逆的组件。这条曲线是用来确定其溶解度的固化硅酮弹性体的熔化温度。药物微硅酮弹性体样品含有1.0%,2.0%,5.0%,10.0%,15.0%,和20.0% (w / w),屈被塑造成表1.5毫米厚度的高温和高压,使用开放混合米尔斯(X (S) k - 160,上海翅膀的橡胶和塑料机械有限公司,中国)。样本数据集,重量大约5毫克,从床单和单独放置在重,减少匹配(5毫克)密封铝DSC测试锅(优秀)。进行了测量温度范围40 - 250°C,升温速率的20°C·分钟⁻¹,包括屈的熔点(196 - 200°C)。用铟系统校准验证。的热性能测定结果DSC温度记录器。转变峰下的面积的测量提供了直接的基础计算的能量与相变有关。在这项研究中确定计算和确定的地区被转换为融化的焓。至少有三个每个样本进行的复制。

2.4。制备Drospirenone-Loaded持续硅胶阴道内的戒指

改善解散在体外屈的硅弹性体环、固体分散其准备的传统溶剂蒸发法与聚乙烯吡咯烷酮()作为载体(11]。在此系统中,固体分散体的0.3:1和1:3 wt / wt药物载体的准备。药物和载体溶解在乙醇的混合物。溶剂蒸发压力减少使用真空干燥机在70°C,直到完全蒸发。确保残留溶剂完全移除,固体质量进一步干在真空炉在室温下24至48小时或直到重量不变。由此产生的固体粉和渗。所有的样本通过细孔(150毫米)和存储在干燥环境中直到额外的研究。

硅弹性体c6 - 165 A和B部分部分是混合通过打开混合工厂生产硅弹性体混合。所需数量的屈或屈固体分散添加生产活性混合物,然后将被混合米尔斯和模压在圆模具(内部)在130°C的平板硫化机(QLB-25D / Q,上海翅膀的橡胶和塑料机械有限公司,中国)生产矩阵,屈IVRs 10分钟。矩阵,屈IVR涂上相同类型硅弹性体形成水库系统来控制药物的释放速度。

2.5。在体外药物释放研究

在体外发布测试被执行在解散测试仪器(ZRS8G解散测试仪器,Tiandatianfa科学公司,有限公司)根据溶解方法的标准在中国药典(CP)(2010年版本,装置II,旋转的桨,50 rpm, 37°C, 200毫升的0.3% SDS溶液中)。累积释放百分比进行SDS缓冲溶液。溶解介质是重新每24 h(±30分钟)在21天内。其次是完全重复抽样的释放介质进行每天每个环的21天。样本储存在4°C到检测。

药物释放的评估是紫外可见分光光度法(PerkinElmerλ35 UV / vis系统,美国)。吸光度的标准和样品的解决方案是269纳米波长的测量在每个时期的结束。一个线性校准其阴谋一个c = 0.0502 - 0.0084 4.1 - -16.3的范围了μg·毫升⁻¹()。

2.6。稳定的制备条件下,屈

热的曝光光稳定性,屈在热硫化法条件检查和分析其nondegradability如下:其被加热在130°C和140°C等温地15分钟在空气气氛下烤箱,置于LX 4500强光照射24 h (YG120药物暴露测试仪器,上海工厂实验仪器有限公司,中国)。然后,IR、DSC和高效液相色谱分析样品处理和参与。

2.6.1。红外光谱(IR)

红外光谱被记录在Nexus 670傅立叶变换红外分光光度计(美国的那些时光,热Nicolet)。样本准备在KBr磁盘准备水压机的力量5 T·厘米⁻²3分钟。扫描范围是4000 - 400厘米⁻¹,该决议是4厘米⁻¹和扫描时间是64年。

2.6.2。差示扫描量热法(DSC)

样品,重量大约2.5毫克,单独放置在称重,密封的DSC测试铝锅(美国优秀)。每个样本与参考锅的空气在标准模式下氮气氛。进行了测量温度范围40 - 250°C,在10°C·分钟的加热速度⁻¹从20°C,包括屈的熔点(196 - 200°C)。的热性能测定结果DSC温度记录器。

2.6.3。高效液相色谱法(HPLC)

在乙腈溶解重数量,屈,然后用流动相稀释溶剂已知浓度的2毫克/毫升,然后mixe测试样品。分别注入相同数量的样本,记录色谱图,跟踪参与和治疗,屈的杂质的变化。高效液相色谱条件和梯度洗脱程序,分别介绍了表1和2。

2.7。兼容性,屈和赋形剂的研究

屈,硅橡胶进行兼容性测试,分别为60°C条件下,相对湿度为92.5%,分别和照亮4500 Lx 5 d和10 d,在这段时间里,药物提取和分析被执行。

杂质的变化最终治疗硅弹性体环提取和高效液相色谱法探测到。提取方法的效率约85%是由控制空白戒指与一个已知数量的飙升,屈。测试样本的乙腈溶解在2毫升50毫升离心管在一式三份硅弹性体的降水增加25毫升的助溶剂的水:乙腈= 1:1,使用容量瓶v / v。聚合物是由离心分离2000 rpm为5分钟(济南市Anke TDL-5 Qike设备有限公司,中国),并分析了上层清液,屈imprurities改变通过高效液相色谱法。离心管的瓶盖拧紧和聚四氟乙烯胶带包装过程中尽量减少蒸发。提取的效率,屈的硅矩阵使用这种方法确定的量化提取其内容控制空白硅弹性体颗粒,其添加量。硅弹性体颗粒的混合物,其接受了上面的降水过程和其一样。最终样品的浓度控制是2毫克/毫升。

2.8。形态学的研究应用,屈IVR后阴道组织

为了研究这套装置的生物相容性,阴道组织的形态学研究应用,屈IVR后执行。Oophorectomized女性Sprague-Dawley老鼠重g使用后的恢复期至少7 d。屈IVR切成大约1厘米的杆在preanesthetized植入无菌动物。中线剖腹手术切口,阴道是孤立的从周围的软组织。插入阴道环段通过外部阴道口。执行插入清洁过程由训练有素的技术人员。一旦可视化的外科医生,植入锚定了5点缝线缝合阴道。剖腹手术切口与吸收性缝线和皮肤斯台普斯被关闭。虚假的阴道组织手术组(空白)治疗大鼠(A)和屈IVR老鼠(B)被孤立在第七天21天,固定在10%中性甲醛carbonated-buffered,嵌入在石蜡,切块。hematoxylin-eosin染色后,切片在光学显微镜下观察(×400)。

3所示。结果与讨论

3.1。其溶解度在释放介质

不同溶剂的溶解能力进行调查,以选择最佳的释放介质。屈的溶解度测定13.0μ12.1 g / mL,μ8.9 g / mL,μ15.2 g / mL,μ392.6 g / mL,μ在纯水g / mL,氯化钠溶液,PBS (pH值3.8),0.03% SDS溶液,分别为和0.3% SDS溶液。根据水槽条件,在介质的浓度,屈是12μg / mL 200毫升的药物释放介质如果可能每天最大数量是2.4毫克。5倍浓度是60μ远低于392.6 g / mLμ克/毫升。因此,本文选取0.3% SDS溶液中发布。

3.2。其溶解度在有机硅弹性体

DSC来确定其溶解度熔化温度的有机硅弹性体这套设备(12]。DSC热谱图中描述3。未发现热变化对硅酮弹性体在温度范围内使用。吸热的过渡特征峰出现的drug-elastomer配方包含从1%降至20%,屈。表3展示了各种的热性能,屈在有机硅弹性体配方6不同荷载水平。温谱图得到每个配方的复制没有显示出明显的蚀变转变峰的位置和大小,从每个配方的低标准偏差明显。此外,低标准偏差得到的峰值和发病的温度在每个配方中,显示良好的重现性。表3表明ΔH(熔化焓)线性增加,相应增加,屈载荷。百分比浓度的增加将其从1%到20%导致样品的峰值温度的增加趋势。最低峰值温度观察标本含有药物的1% (°C),而屈观察标本含有20%(最大值°C)。焓的变化dΔH),以其转变峰的面积在温谱图,用来量化测定药物溶解在有机硅弹性体。一块ΔH与屈(%,w / w加载,C线性(Δ)Hc = 48.588−0.0992),相关系数为0.9978。然而,直线没有经过原点。的直线的截距χ设在(ΔH= 0)的价值没有热响应drug-elastomer屈的系统记录,恰逢其溶解在弹性体的熔化温度的药物。因此,硅酮弹性体的溶解度,屈根据DSC方法被发现2.042毫克/克,这可能有助于解释IVR包含药品外观和IVR药物释放的状况。此外,没有看到任何放热峰温谱图表明药物加载硅弹性体矩阵的稳定温度范围测试。

3.3。外表的IVR内部

最后一环有以下特点:矩阵环提供环横断面直径5.0毫米,50.0毫米整体环直径、g和3.4(±0.2)平均体重的戒指。水库环的膜厚度约1.0毫米。屈结合聚合物环不是光学清晰(乳白色的)比空白硅弹性体环由相同的过程没有药物,表明只有屈的一部分溶解在聚合物矩阵。这种现象符合结果,最终优化配方的药物含量都远远超过2毫克/ g药物溶解度的有机硅弹性体从目前溶解度的研究。

3.4。稳定的制备条件下,屈

为了进一步研究药物降解或氧化的可能性,使用傅立叶变换红外光谱收集更多的信息。分析其结构,假设有任何可能的变化。这可能会导致峰展宽及官能团的吸收带的转变。参与,屈的红外光谱,130°C和140°C加热,曝光呈现在图4。没有观察到变化比较参与处理样品。结果表明稳定的高温和强光照射下,屈。

屈的DSC热谱从40到240°C显示没有检测到退化(图5)。屈的熔化温度的恒温动物观察到196°C。没有观察到的放热峰温度斜坡从40到240°C(图2等温步骤中)或196°C(数据未显示)表明没有检测到准备条件下退化,屈(130°C - 140°C)。

屈的稳定性在准备测试环境(高温和强光照射条件)。没有显著的变化数量的杂质,也没有更多的新杂质的高效液相色谱光谱(见图6相比)的治疗,屈样本观察与参与样本。

上述实验结果证实其能够承受高温和曝光IVR过程中不会减少。

3.5。在体外药物释放研究

在体外药物释放溶解装置进行了测试,并释放介质200毫升0.3% SDS会见水槽条件,并释放样品紫外可见分光光度法测定。

屈的平均每日发布概要文件从矩阵IVR和油气藏类型设备,含有50毫克,100毫克和200毫克,如图所示7。矩阵型IVR可以看到,一个相对大量的药物渗透到从设备最初版本期间(“破裂效应”),后跟一个稳态水平下降。初始破裂持续释放的前2天,虽然第一天突然大幅超过2天。第一天的大小爆发和随后的稳态通量(意思是每日发布,毫克/天)从50毫克增加其内容增加到200毫克。然而,关于释放储集类型系统的概要文件,没有明显的“破裂效应”一直在观察和累积,屈释放获得随时间线性验证是一个零级释放率(图10 (b)、表4)与相应的减少每日释放率为所有剂量水平与矩阵型。结果还证实,重要的是要注意,涂层和分层阻止初始破裂效果和提供了一个相当稳定和有效的释放药物的环10]。

由于减少“破裂效应”的特征和储集类型的零级释放率,从50毫克药物内容添加到800毫克一直在研究这种类型的录像机。从过程的角度来看,800毫克加载观察美国最大加载硅弹性体。对于给定的核心/鞘比率,增加药物的唯一影响加载应该延长的时间常数每日发布。从图可以看出8,释放速率不再增加和800毫克600毫克。

发布概要文件的矩阵类型和储层类型,释放通量后三天可以保持恒定速率。零级释放的理由可以屈低分配系数的聚合物和水槽之间的条件利用释放研究。根据模型由简et al。12),可以获得一个零级释放的情况下该系统的厚度药物耗尽区由于小分区系数的聚合物和水槽之间的药物。

这个储层类型提供了优势矩阵类型没有破裂释放的情况下,但需要更高的药物负载要求。因此,增加药物的释放率较低的药物加载调查如下。

作为文献[13)报道,添加剂投入聚合物配方能增加每日率。亲水赋形剂选择在目前的研究。PVP的公司发布的广度、没有效果。然而,其转化成固体分散形式载体,结果产生影响的释放率增加而略有增加大小(图9和表4)。释放率并没有指出增加线性增加加载(图9),而PVP和药物的比例(1:1)最好的结果。

的公司的广度、没有释放的影响,因此,作为把PVP到十字架与弹性体网络没有提供一个更“开放”网络结构导致增强的释放率(13]。疏水属性可能不是通过添加修改的亲水物质PVP弹性体混合交联前/成型。有机硅弹性体疏水材料具有优良的防水特性。还假定PVP-SD屈的溶解度增加,而溶解度降低硅酮弹性体网络。然而,这种方法是特别有用的提高疏水性药物的释放在硅弹性体(14]。

为了比较不同类型的录像机研究本文的累积释放不同类型的屈IVR零释放方程拟合,并累计释放方程基于1天21日数据,以及各自的r系数表4。而释放的矩阵型、储集类型和PVP-SD水库装载200毫克,屈(图10),每日发布的水库,屈IVR系统是0.5毫克,而持续21天释放率和显著降低破裂效应相比,矩阵系统。当其与修改水库系统配方,每日发布数量增加和持续21天的释放率约为1.0 mg / d,减少破裂的影响和恒定速率与矩阵(表4:= 5.04843,9.3079;0.9896)。

推断的累积流量矩阵,储集类型环,PVP-SD储集类型环加载200毫克如图10我们取得了约0.5,1.0毫克,屈每日发布在21天破裂效应较低。它是不确定的量,屈从IVR应被释放在体外因为之间通常存在着差距在体外发布和在活的有机体内阴道释放和随后biodistribution。由于这些原因,控释屈IVR的制定至关重要。鉴于其显示初始loading-dependent发布在我们的配方在体外,加载可能可以调整释放的药物是安全的,在人类被认为足以防止怀孕。此外,我们的这套设计允许调整的PVP内容。

这个系统提供了优势储层系统通过降低药物加载需求和缺席的情况下突然释放。观察药物的释放速率成比例的药物负载在一定范围内。

虽然释放率可以修改通过改变初始加载,这也可能改变系统所需的释放率的持续时间。然而,我们已经表明,持续的零级释放的药物可以获得成功从环从0.3到1.0毫克/天,这取决于药物加载。

3.6。兼容性API和赋形剂的研究

屈的兼容性和/或硅酮弹性体分别测试条件下60°C,相对湿度为92.5%,和照亮4500 Lx,分别为5和10 d,在这段时间里,药物提取和分析。杂质的变化(单个杂质和总杂质)的最终治疗硅弹性体环被溶剂提取,高效液相色谱法检测,计算面积占总峰面积的百分比(%)(表5,6,7)。

我们研究药物降解使用高温度和湿度条件,因为这将表明长期药物降解在环境条件下和建议可能的降解机制。结果显示没有明显退化,屈在5和10天的聚合物相比,天0。此外,没有新的样品色谱图的峰,表明可能退化。总之,这些结果表明,其稳定在各自PVP或硅弹性体。这项研究的结果表明,其可能会稳定制定成硅弹性体阴道内的环为21天的持续释放。

3.7。耐受性,屈IVR的组织水平

这套没有改变阴道组织的形态。图11显示阴道粘膜的组织病理学在阴道内的IVR的应用。而没有治疗的控制,IVR-treated组没有明显迹象表明炎症或坏死。IVR不影响阴道组织的形态,这表明,这套设备是具有良好的生物相容性等药物输送系统可能会对阴道分娩安全。

4所示。结论

阴道内的环(IVR)含屈螺是一种阴道环设备,药物的核心是通过使用热硫化法和有机硅弹性体作为母体聚合物,由同样的封装的聚合物膜。一个方法制备,屈水库系统是通过添加添加剂以增加其溶解度。屈是用作活性药物成分和有机硅弹性体为矩阵和控释膜的代理。被用来增加其溶解度和没有导致其退化梯度法所能检测到的量。在强光、高温和高湿度条件下,其原材料和配方辅料和硅橡胶没有显著的交互作用,表明良好的兼容性。发现其释放速率是增加的在一个恒定的范围。有机硅弹性体也雇佣作为控制膜透性膜。在体外药物释放溶解装置进行了测试,释放介质200毫升0.3% SDS会见水槽条件,并释放样品紫外可见分光光度法测定。每日发布的水库,屈IVR系统是0.5毫克,而持续21天释放率和显著降低破裂效应相比,矩阵系统。当药物被修改水库系统配方,每日发布数量增加和持续21天的释放率1.0 mg / d。储层的累积释放,屈IVR安装于零释放方程。此外,屈IVR系统被耐受性评价大鼠组织水平。屈IVR并不影响阴道组织的形态。

因此,剂型可能进一步发展为安全、方便、有效的避孕药物输送和减少剂量间隔。这项研究的结果表明,其可能是稳定制定成硅弹性体阴道内的环为21天的持续释放。

利益冲突

作者宣称,他们没有任何的利益冲突有关提交论文。

确认

这项工作受到了国家科学和技术支持的资助项目。作者感谢美如花许先生和本博士他协助收购形态学结果分析大鼠阴道组织。