镇痛和抗炎活性松果体roxburghiiSarg。

文摘

Chir松,松果体roxburghii威廉·罗克斯堡命名,产于喜马拉雅山的一棵松树。松果体roxburghiiSarg。(松科)是在印度传统药用数。随着石油的工厂广泛应用于许多草药准备治疗炎症性疾病,目前的研究进行评估树皮提取物的镇痛和抗炎活动。干和碎叶松果体roxburghiiSarg。与石油醚脱脂,然后用酒精提取。酒精提取的剂量100毫克/公斤,300毫克/公斤和500毫克/公斤体重的镇痛和抗炎活动受到评价实验动物模型。镇痛活性评价醋酸段扭动和尾巴浸在瑞士白化小鼠测试;急性和慢性抗炎活性carrageenan-induced爪子水肿和棉花球团在纯种白化大鼠肉芽肿。双氯芬酸钠和吲哚美辛被用作参考药物镇痛和抗炎研究,分别。在目前的研究中,酒精树皮中提取的松果体roxburghiiSarg。了显著的镇痛和抗炎活动测试模型。

1。介绍

炎症反应损伤的细胞和身体组织通过不同的因素,如感染、化学物质,和热力和机械损伤1]。现在大多数的抗炎药可用环氧合酶(COX)的潜在抑制剂的花生四烯酸代谢途径产生前列腺素。前列腺素是痛觉过敏的,强有力的血管舒张药,而且还有助于红斑、水肿和疼痛。因此,治疗炎症性疾病、镇痛和抗炎剂是必需的(2]。非甾体类抗炎药(非甾体抗炎药)是临床上最重要的药物用于治疗炎症性疾病,如关节炎、哮喘和心血管疾病(3]。非甾体类抗炎药(非甾体抗炎药)是最广泛使用的药物由于其功效广泛的疼痛和炎症条件(4]。然而,长期管理的非甾体抗炎药可能引起肠道溃疡、出血和肾疾病由于他们两本构(COX-1)和非选择性抑制环氧酶的诱导(cox - 2)亚型酶(5- - - - - -7]。因此,新的抗炎、镇痛药物缺乏这些影响被搜索世界各地为非甾体抗炎药和鸦片的替代品(8,9]。药用植物被认为是一个重要的新化学物质的来源与潜在的治疗效果。所谓民俗研究植物的使用止痛药、抗炎剂,应被视为一个富有成果的和逻辑的研究策略在寻找新的镇痛和抗炎药(10]。

松果体roxburghiiSarg。是唯一的树装饰标本和有不同的药用价值在喜马拉雅地区的不丹、尼泊尔,克什米尔,锡金,西藏和印度北部的其他地方11]。植物是属于家庭松科松(俗称Chir12]。它由110 - 120年的物种分布在北半球的温带地区,和40多个分类治疗被认为属内的几个主要部门(13]。

松果体roxburghiiSarg。有许多药用用途,木芳香,除臭剂、止血剂、兴奋剂,驱虫剂,消化,肝脏滋补,发汗剂和利尿剂。它是有用的在眼睛、耳朵和咽疾病,犯规溃疡、出血,咯血,穿感染、肠胃气胀,肝脏疾病,支气管炎,炎症,皮肤疾病、瘙痒,头晕眼花11]。

松节油的主要化学成分松果体roxburghiiSarg。是蒎烯,蒎烯、car-3-ene和长叶烯(14,15碳氢化合物(d -和l-pinene),树脂酸、莰烯、葑烯、松油精,和聚合物萜烯(16,17]。

基于上述研究结果,松果体roxburghiiSarg。树皮中提取被评估的镇痛和抗炎作用实验引起的疼痛和炎症。

2。材料和方法

2.1。植物材料

茎皮的松果体roxburghiiSarg。收集来自Morni的丘陵地区,地区Panchkula、哈里亚纳邦的2008年12月,经过身份验证的星期五,乌吉,北阿坎德邦,印度,凭证标本不。129年FHH存放备查。

2.2。准备的提取

阴凉干燥粗糙的树皮粉松果体roxburghiiSarg。每卷数量足够的萃取器是装在顶针(滤纸片制成的)。足够量的酒精添加到水库,在索氏提取器和热连续萃取过程就开始了。这个提取过程持续了大约48小时或直到酒精下来虹吸管变成无色。过量的酒精蒸馏减压下使用旋转真空蒸发器。(Heidolph Laborota 4011,数字)。一个棕色的残渣与12%的收益率从瓶中恢复过来。

2.3。高效液相色谱分析

酒精的树皮中提取的样本松果体roxburghiiSarg。没有任何治疗进行分析。

高效液相色谱系统(日本岛津公司、日本)由一个二极管阵列检测器(SPDM10AVP),溶剂发送模块(LC-10ATVP)、在线脱气器(DGU-14A),一个自我注射器(SIL-10ADVP),流道系统(FCV-14AH),系统控制器(SCL-10AVP)和反相高效液相色谱柱(RP-18 250毫米×4.6毫米,5μ米粒子大小,σ,美国)。流量1毫升/分钟的高效液相色谱法和移动阶段ACN组织0.05%:0.05%的组织水(梯度)70分钟。绿原酸、芸香苷的标准和querctin分别注入(10毫升)。化合物的样本被比较保留时间(Rt)的标准。数据分析是使用类副总裁V6.12 SP2软件(日本岛津公司、日本)。

2.4。动物

Wistar鼠(150 - 250 gm)和瑞士白化小鼠(20 - gm)的性,从国家医药研究所带来的教育和研究,莫哈里(,是保存在医药科学研究所的动物房,Kurukshetra Kurukshetra大学。动物被安置在标准条件下的温度(22±1°C)和12/12 h光/暗周期。他们用标准颗粒饮食(Ashirwad产业,Ropar,旁遮普),可以免费获得水。每组五个动物使用。允许进行这些实验得到的,制度动物伦理委员会(IAEC)。

2.5。急性毒性研究

毒性研究按照国际公认的协议根据经合组织指导425年瑞士白化病老鼠。

3所示。药理作用

3.1。抗炎活性

3.1.1。角叉菜胶诱导的爪子水肿的方法

Carrageenan-induced爪子炎症是根据冬季et al。描述的方法(18]。一个小时后酒精萃取物的口服松果体roxburghiiSarg。(100、300和500毫克/公斤),参考药物(消炎痛,10毫克/公斤)或车辆(渐变80(5%))、注射0.1毫升的卡拉胶(1%角叉菜胶悬在0.9%氯化钠)制成下的每个大鼠右后肢subplantar腱膜。

测量爪体积是通过体积位移技术使用plethysmometer(尤格Basile没有。7140)后立即注射角叉菜胶后,1,2,3,4小时。

Percetages抑制得到使用以下比例: 每组治疗后的平均体积,然后呢是任何治疗前每组的平均体积。

3.1.2。棉粒肉芽肿法

棉粒肉芽肿了波特根据冬季和描述的方法(19]。无菌棉花球(20±0.5毫克)在腹部皮下植入老鼠的区域。动物收到酒精树皮中提取的松果体roxburghiiSarg。(100、300和500毫克/公斤),参考药物(双氯芬酸钠,50毫克/公斤)或车辆(渐变80(5%)),口服,每天一次通过口服套管在连续七天。第八天,老鼠被牺牲,棉花球,球团干燥常数体重60°C和净干重,也就是说,减去的重量棉花球,后确定。

3.2。镇痛活性

3.2.1之上。醋酸诱导翻滚测试方法

这个测试中使用的方法描述了美洲et al。20.]。苦难的总数后腹腔内管理醋酸溶液(1%,10毫升/公斤)被记录在一段10分钟,5分钟后开始醋酸注入。老鼠的酒精树皮提取物治疗松果体roxburghiiSarg。(100、300和500毫克/公斤),或车辆(渐变80(5%))或标准药物(双氯芬酸钠,50毫克/公斤),30分钟前醋酸。苦难和伸展的数量记录并允许表达保护的百分比。

3.2.2。老鼠尾巴浸泡试验

位描述的过程等。21)是用来进行这个测试。介绍了3厘米的尾巴在热水温度55±0.5°C。几分钟后,取出尾巴的老鼠的反应。反应时间是用秒表记录。动物被酒精萃取物的治疗松果体roxburghiiSarg。(100、300和500毫克/公斤),或水(车辆)或标准药物(双氯芬酸钠,50毫克/公斤),30分钟浸泡前的尾巴。反应的时间是在1、2、3和4在政府不同的准备。

3.2.3。Statstical分析

所有的值被表示为±SEM,和数据分析了单向方差分析(方差分析)Dunnett的紧随其后以及使用GraphPad InStat。

4所示。结果

4.1。植物提取物的急性毒性试验

酒精提取的植物松果体roxburghiiSarg。被发现安全的剂量5000毫克/公斤根据425年经合组织指导方针。

4.2。高效液相色谱分析

正确分配不同的化合物是不可能的。从紫外光谱和保留时间的主要山峰,一些化合物类包含在提取已经确定。高效液相色谱法(HPLC)揭示了生物黄酮素,槲皮素、绿原酸、芸香苷(图1)。

4.3。抗炎活性

4.3.1。在老鼠身上Carrageenan-Induced爪子水肿

carrageenan-induced水肿试验,爪子数量和百分比的酒精提取物抑制的年龄松果体roxburghiiSarg。和标准的药物如表所示1。注射角叉菜胶完成1 h口服后提取(100、300和500毫克/公斤),吲哚美辛(参考药物)和水。爪子大小的测量是在注射角叉菜胶,然后1,2,3,4 h后注射角叉菜胶。的酒精萃取物松果体roxburghiiSarg。在所有剂量的爪子水肿表现出显著的抑制参考药物相比(表三小时1)。

4.3.2。棉粒肉芽肿

表2表明,酒精树皮中提取的松果体roxburghiiSarg。表现出一个重要和剂量相关抑制干棉粒肉芽肿的重量。抑制值为100、300和500毫克/公斤的提取是31.11%,36.13%和56.93% (),分别。双氯芬酸钠(参考药物)和水抑制肉芽肿组织形成一个值为92.87 ()%,比观察值略高的剂量80毫克/公斤松果体roxburghiiSarg。提取。

4.4。镇痛活性

4.1.1。醋酸诱导盘绕在老鼠身上测试

的酒精萃取物松果体roxburghiiSarg。(100、300和500毫克/公斤)剂量显著和依赖性减少腹部收缩引起的小鼠1%醋酸溶液。这种保护作用存在剂量依赖的相关性达到了最大抑制80.95%剂量500毫克/公斤。双氯芬酸钠(参考药物)产生了显著的保护作用,90(表的百分比的保护3)。

10/24/11。老鼠尾巴浸泡试验

如表所示4,酒精萃取物松果体roxburghiiSarg。在剂量为500毫克/公斤()体重显著延长反应时间,30分钟口服后提取。60分钟后,酒精提取的松果体roxburghiiSarg。在剂量为300毫克/公斤()和500毫克/公斤(体重明显伸长。90分钟后酒精提取的松果体roxburghiiSarg。在剂量为300毫克/公斤()和500毫克/公斤体重有显著(延长反应时间。120分钟后酒精提取的松果体roxburghiiSarg。100毫克的剂量300毫克和500毫克/公斤体重没有显著延长反应时间。

5。讨论

Carrageenan-induced水肿是常用的作为急性炎症的实验动物模型,被认为是双向的。卡拉胶的早期阶段(1 - 2小时)模型主要由组胺、5 -羟色胺,增加受损组织中前列腺素的合成环境。后期阶段持续通过前列腺素释放和由缓激肽,白细胞三烯,多形核的细胞,组织巨噬细胞产生的前列腺素(10,22]。自提取/分数显著抑制角叉菜胶引起的爪子水肿在第二个阶段,这个发现表明可能抑制环氧酶提取和合成的这种效果类似于由非甾体类抗炎药物,如吲哚美辛,其作用机理是抑制环氧酶的酶。

的炎性肉芽肿是一个典型的特性建立了慢性炎症过程(23,24]。棉花球肉芽肿方法已被广泛用于评估transudative,渗出性、慢性炎症和增殖的组件,因为干球的重量与数量相关的肉芽肿组织(25]。我们发现剂量依赖性抑制小鼠肉芽肿形成,这表明水干树皮中提取的松果体roxburghiiSarg。抑制慢性炎症过程在后期阶段的急性炎症。

大脑和脊髓中枢疼痛机制发挥着重要作用。脊髓背角的具有多种神经递质和受体包括P物质,生长激素抑制素,神经肽Y,抑制性氨基酸,一氧化氮,内源性阿片类物质,不仅是疼痛和炎症的主要目标(26]。尾巴浸渍试验被认为是选择性检查通过阿片受体化合物作用;所有提取/分数提高痛阈也就是说基底延迟,这表明它可能采取行动通过集中中转的镇痛机制。麻醉止痛剂抑制外周和中枢机制的痛苦,而非甾体类抗炎药物抑制只有外围痛苦(27]。提取抑制疼痛与机制,表明植物提取物可以作为麻醉性镇痛药。另一方面,醋酸段扭动模型表示疼痛感会引起局部炎症反应。这样的疼痛刺激会导致自由的花生四烯酸的释放组织磷脂(28]。醋酸诱导扭动的响应是一个敏感的程序来评估周边的止痛剂。响应被认为是由腹腔肥大细胞(29日),酸敏感离子通道(30.)和前列腺素途径(31日]。类黄酮可能增加内源性5 -羟色胺的量也可能与5 -互动₂和5 -₃受体可能参与中枢镇痛活性的机理(32]。此外,层提取显示最高的镇痛活性实验莫德罗可能是由于其高flavonsid内容负责自由基清除活性,这些自由基参与疼痛刺激,和抗氧化剂减少显示这样的痛苦33]。

本研究的结果表明,调查植物表现出非常高的粗提取液抗炎、镇痛的活动。这些活动可能与多酚化合物中提取的存在。AB提取的高效液相色谱分析显示生物黄酮素,槲皮素、芦丁,据报道,抗炎、平喘药,镇痛抗炎,抗氧化,这些发现符合我们的结果。许多植物含有黄酮类化合物已被证明有利尿,泻药,解痉、降压、抗炎的行为(34]。类黄酮和皂苷是众所周知的抑制疼痛知觉的能力以及抗炎作用由于其抑制影响酶参与炎症的化学介质的生产(35]。

抑制类花生酸类黄酮生物合成的能力都有记录。二十烷类,如前列腺素、参与各种免疫反应和终端产品的环氧酶和脂氧合酶途径36]。此外,黄酮类化合物能够抑制中性粒细胞脱颗粒,从而降低花生四烯酸的释放(37]。因此,类黄酮的提取/分数的存在松果体roxburghiiSarg。可能负责抗炎和镇痛活性在瑞士白化小鼠和大鼠。

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