“HemoTypeSC”测试的可行性研究的快速筛查在科特迪瓦镰状细胞病

文摘

镰状细胞病是一种遗传性疾病,主要影响黑人。在撒哈拉以南非洲地区非常广泛,特别是在莱曼“镰刀带”层面,流行的血红蛋白S涉及至少10%的人口在西非和中非可以达到40%。在科特迪瓦,血红蛋白S的患病率约为12 - 14%在普通人群中,大约11.71%的儿童人口在阿比让。另一方面,它的共存与其他血红蛋白交流(6.2%)和等表型β地中海贫血(2.7%)特征也可能导致复合异质镰状细胞病,例如,SC或S /β-地中海贫血在这项研究中。自2009年以来,镰状细胞病被认为是一个公共卫生问题;然而,尽管执行所取得的进展。因此本研究的目的是促进快速筛查的抗争在科特迪瓦镰状细胞病。本研究进行了超过6个月(2019年的助力),包括336名儿童,其中236例如,市政当局在阿比让,患者和100年招募其他孩子血红蛋白与已知表型之后在血液学部门大学医院的患者。使用了两个测试:HemoTypeSC™的快速筛查和血红蛋白电泳的参考方法在实验室中用于确定诊断。研究结果证实的可靠性HemoTypeSC™在100%的敏感性和特异性检测血红蛋白a, S和c .另一方面,这种敏感性和特异性降至98.2%和99.7%,分别,当我们分析所有的336名儿童在一起,包括住宅的情况下被血红蛋白电泳。因此,执行确定测试的重要性后,HemoTypeSC™筛选试验,以确定准确的表型和类型的血红蛋白的比例。血红蛋白S的患病率在子群1 236名儿童的功能是15%。因此的HemoTypeSC™是可靠的,便宜,而且一次性快速筛查和早期诊断的镰状细胞病在科特迪瓦。 The HemoTypeSC™ provides rapid detection of hemoglobin phenotypes HbAA, HbSS, HbSC, HbCC, HbAS, and HbAC.

1。介绍

镰状细胞病是一种遗传性疾病,影响着世界上3%的人口。每年,超过312000名儿童与生俱来的纯合血红蛋白(SS)。大约75%的人生活在撒哈拉沙漠以南的非洲地区,超过50%的患有这些疾病的儿童5岁之前死亡(1,2]。镰状疾病被认为是由他在2009年一个公共卫生问题。在科特迪瓦,研究表明血红蛋白S的患病率在12%和14%之间一般人群根据课程等。3]1967年,大约12%的婴儿人口在阿比让的交流(6.2%)和AFA2或共存β地中海贫血(2.7%)特征根据Danho Bassimbie等人(1988年4]。这些血红蛋白的缺陷通常在主要的镰状细胞综合征常见的起源。

镰状细胞病自2009年以来一直被认为是一个公共卫生问题(世卫组织)。然而,尽管明显的进步主要镰状细胞综合征的治疗,检查在科特迪瓦仍然不足。血红蛋白电泳,镰状细胞性贫血的诊断的参考测试在实验室里,仍然无法负担。Emmel测试,一个典型的筛选试验,目前仍然是乏味的,operator-dependent,过时了,而不是使用。此外,最近的研究进行了2019年在尼日利亚(5)、加纳(6)、印度(7),美国(8)已经证明的有效性HemoTypeSC™测试镰状细胞病的快速筛查,尤其是异常基因的识别和c .这是一个简单和廉价的技术处理,可以使用的护理。

为了有助于减少发病率和死亡率与镰状细胞病通过促进预防和早期诊断病例的管理,我们发现有必要评估的可行性HemoTypeSC™婴儿人口在阿比让。

目标是促进镰状细胞病的快速筛查在科特迪瓦通过评估的性能HemoTypeSC™测试。

2。方法

我们研究中记录了336名儿童,其中包括236名儿童,例如生活在直辖市,患者和100其他儿童血红蛋白表型已知,血液学部门跟进的中央大学医院,患者的实验室。

2.1。类型和持续时间的研究

这是一个可行性研究。这项研究是前瞻性观察性、横断面描述性和分析。这项研究是在一段时间内进行的六(6)个月从2019年4月到9月。

2.2。研究人群

总共有336名儿童被包括在研究中。研究人口分成两个子组:子群1显然包括236名健康儿童例如,招募2学校和1孕产妇和儿童保护健康中心在患者的直辖市子群2包括100名门诊病人随访的血液学大学医院的病房患者血红蛋白的表型在血红蛋白电泳是已知的

2.3。参与网站

研究地点是直辖市,患者在以下网站:子群1,三(3)网站被确定(我)私人小学:高等Primaire Privee (EPP)“小”(2)中学:“大学现代de l 'Autoroute”(CMA)(3)孕产妇和儿童保护健康中心:保护Maternelle等婴儿(PMI)∗注:由于时间限制,新生儿并不包括在最终的研究2组,参与网站的血液学部门中央大学医院,患者的实验室

2.4。选择标准

入选标准如下:子群1任何孩子0-15岁看似健康,招募了孕产妇和儿童保护中心和学校的知情同意家长和孩子们的同意子群2任何0-15岁儿童随访血液学部门的大学医院,患者在同一时期,被称为镰状细胞病病人的血红蛋白表型已经确定由血红蛋白电泳()。

父母被告知,父母和孩子都同意需要(如适用)。

2.5。测试使用

两种类型的测试进展:HemoTypeSC™和血红蛋白电泳。测试应用于两个研究子组。

2.5.1。HemoTypeSC™

HemoTypeSC™是一个快速检测组件用于我们的研究,以确定血红蛋白a, S和C在全血。它被用于第一行快速筛查组1和镰状细胞病的第二目的群2评估其可靠性。

的材料HemoTypeSC™检测组件包括铝箔袋包含50瓶一次性测试条,50瓶一次性血液采样设备,三个可重用的滴管吸液管,和使用要求。

调查人员还提供辅助材料,如饮用水(不是盐的解决方案),计时器,切口设备和刺血测试瓶(1.5 - 5毫升管或瓶),和一个机架举行测试瓶。

(1)原则。HemoTypeSC™是一个竞争激烈的侧流免疫测定结合单克隆抗体测定血红蛋白a, S和c它执行快速检测血红蛋白表型HbAA,哈佛商学院,汇丰、HbCC hba, HbAC。

(2)过程(图1)。这个过程包括6个步骤(参看使用说明的形式)。(1)使用滴管吸移管,加上六(6)滴水测试瓶。在兼容测试瓶架。(2)打开瓶血液采样设备,删除一个血液采样装置,并再次接通瓶。收集血液样本(一个小滴就足够了,1 - 2毫升)。接触血液的白色垫取样器收集血液样本,直到白色垫吸收血滴。确保整个白色垫变红了。(3)血液采样装置插入测试瓶水和漩涡混合(我)足够的旋转是必不可少的血液被适当地转移到测试瓶(2)视觉检查,确保水已成为粉红色或浅红色(3)离开血液采样装置在测试瓶后旋转(4)打开瓶测试条,删除一个测试条,再次接通瓶。插入HemoTypeSC™试验片与箭头指向下面测试瓶(5)等待10分钟(6)采取HemoTypeSC™试验片的测试瓶和阅读结果。比较测试条结果图反面的文档供参考

(3)阅读和解释的结果。红线可能出现在每一个特定位置的三个血红蛋白变体(HbA,哈佛商学院和HbC)和控制位置和比较的图表解释:(我)在条线的存在表明缺乏血液中的血红蛋白变体的样本(2)没有线的条表明血红蛋白变体的存在在血液样本

如果控制线缺席,结果是无效的;测试是无效的,必须重复(注:重要的是要有一个良好的光源识别血红蛋白迁移线带)。

(4)操作员的培训。测试协议的信息会议和培训是提供给运营商的技术人员从Distrilabo非洲,试管产品分销机构,在研究开始的。培训工具是基于使用说明和演示视频。的HemoTypeSC™测试是一个简单的方法来执行它不需要强化训练。运营商是实验室人员和研究助理。然而,训练有素的临床人员还可以执行HemoTypeSC™测试。

2.5.2。血红蛋白电泳(海伦娜方法)

这是典型的琼脂糖凝胶测试中心实验室常用的大学医院,患者生物镰状细胞性贫血的诊断。它被用于这项研究作为一个二线参考方法在表型组1中确认的儿童血红蛋白并确定不同类型的血红蛋白的比例。子群2生病的孩子,也用于检查他们的特定的血红蛋白表型。

2.6。道德的考虑

研究伦理委员会的协议验证卫生部。尊重保密的原则是适用的。父母知情同意孩子的参与研究之前得到包容。主要镰状细胞综合征的病例转诊血液学部门推荐,以及遗传咨询血红蛋白缺陷特征。个人血红蛋白类型卡片记录所有儿童的血红蛋白表型和血型也已建立。

2.7。数据管理

纸质表单中收集的数据,进入EPIDATA 3.1,并保存在外部硬盘。提供分析数据在14.1占据。

3所示。主要发现

3.1。研究样本

336是儿童选择根据随机抽样过程4参与网站级别(从100年的大学医院,患者的血液学部门和236年孕产妇和儿童保护健康中心(PMI),私人小学“EPP LES小”和中学(大学现代de l '高速公路(CMA))直辖市的患者(cf表1))。

子群是指所有儿童和代表研究人口总数的70%。

子群2指的是生病的孩子大学医院血液学部门招募的患者(30%),以评估的可靠性HemoTypeSC™筛选试验。

3.2。社会人口特征

的HemoTypeSC™试验评估了336名儿童参与网站(表41)。(表性分布2)显示两组女性优势(女(54%);男性(46%)),给出了一个整体的性别比为0.84。的性别比例,分别是0.81的子群1和0.89的子群2。年龄分布显示了优势的年龄从6到10年(42%)在两个子组(表3)。

两个子组有相同的年龄结构。年龄从6到10年是主要的。

3.3。分析的敏感性和特异性HemoTypeSC™的检测血红蛋白A, S和C

HemoTypeSC™试验与单克隆抗体结合独立分析特定的三种血红蛋白A, S和c .因此,敏感性和特异性的HemoTypeSC™首次计算出每种类型的血红蛋白(表的检测4):(我)HbA, HemoTypeSC™测试敏感性和特异性100%:这意味着239年积极的结果包含HbA HbA对所有239个样本和97年在所有97个样本不包含HbA负面结果(2)哈佛商学院和负担沉重,HemoTypeSC™测试也有,敏感性和特异性分别为100%

总结在表的值4显示的结果HemoTypeSC™试验相比,参考方法(血红蛋白电泳),考虑到这两个子组。(我)任何标本是杂合的或纯合为每个特定的变体Hb被认为是真阳性的变体(2)任何标本没有特定的血红蛋白被认为是真阴性血红蛋白,不管其他的血红蛋白变体

3.4。血红蛋白表型分析

研究结果显示以下表型:(我)纯合子表型(1)HbAA(野生型或正常)(2)哈佛商学院(纯合子镰状细胞病)(3)HbCC(血红蛋白C疾病)(2)杂合的表型(1)hba(镰状细胞性状)(2)HbAC (AC特征)(3)汇丰复合杂合的镰状细胞病(SC)

在这项研究中,HemoTypeSC™测试可以正确检测表型哈佛商学院,HbCC,汇丰、和HbAC没有假阳性结果,显示100%的敏感性和特异性,分别。(我)HemoTypeSC™未能检测到住宅及其他血红蛋白变体除了哈佛商学院,负担沉重,和HbA,而血红蛋白电泳检测(1)2例HbSFA2(复合S /β0-thalassemia-sickle细胞病)(2)4例HbSAFA2(复合S /β+ thalassemia-sickle细胞病)

因此,灵敏度和阳性预测值(PPV) 0%,分别为SAFA2 (S /β+地中海贫血)和SFA2 (S /β0-thalassemia)。

血红蛋白的电泳的结果相比的HemoTypeSC™测试:(我)SFA2表型(S /β0-thalassemia)产生相同的结果作为党卫军HemoTypeSC™(2)SAFA2表型(S /β+地中海贫血)产生相同的结果在HemoTypeSC™

因此,敏感性和特异性的HemoTypeSC™下降,分别为98.2%和99.7% HemoTypeSC™测试不检测住宅(表5)。

3.5。镰状细胞病的患病率分析子群1(例如)

共有35个孩子子群1 236名儿童的招募从学校和医疗中心异常血红蛋白,也就是说,一个总体患病率为14.8%。S基因存在于12%,C基因在2.8%的情况下。血红蛋白的电泳能带来不同的表现型(表6)。

4所示。讨论

镰状细胞性贫血是最常见的一种遗传疾病在科特迪瓦。在这项研究中,S基因的患病率是12%,236人口的所有孩子。流行率接近那些课程等人报道了1967年(3)和Danho Bassimbie et al。4),1988年估计为11.7%儿童人口在阿比让。这个流行率稳定。促进早期筛查在科特迪瓦似乎是最好的策略,以防止镰状细胞病发病率和死亡率相关。

根据以前的数据在文献中报道,镰状细胞病的早期诊断和管理可以防止70%的死亡与镰状细胞病(8]。早期筛查与镰状细胞病的孩子让孩子发现之前他们有症状或并发症。这些孩子可以与全面的保健和及时管理定期随访,减少发病率和死亡率(9- - - - - -11]。

此外,一些主要障碍实现镰状细胞病筛查项目是高成本的传统诊断方法,缺乏足够的设备和资金不足。基本上,就必须促进快速、廉价和准确的筛查方法,如HemoTypeSC™在科特迪瓦。这种方法已经被评估在其他国家如尼日利亚,加纳,印度(9- - - - - -11]。

因此在我们的研究中,我们评估的可行性HemoTypeSC™试验筛选镰状细胞病的“点”设备直辖市,患者在科特迪瓦。

我们的研究结果表明,HemoTypeSC™是一个可靠、高效、准确的测试检测血红蛋白a, S和C敏感性和特异性为100%(表4)。另一方面,敏感性和特异性的HemoTypeSC™降至98.2%和99.7%,分别,当S /β0-thalassemia和S /β+地中海贫血和血红蛋白电泳检测包括在分析中。如上所述的原则HemoTypeSC™,住宅的敏感性是0%。因此,它不检测血红蛋白F。

先前的研究也证实了我们的发现(5- - - - - -7]。最近的研究使用HemoTypeSC™在撒哈拉以南非洲地区在资源缺乏研究中心还显示100%的精确度的检测基因a, S和C新生儿血液样本含有超过80%的住宅(6,12]。

因此,HemoTypeSC™可以用在科特迪瓦作为镰状细胞病的筛检试验。这是一个快速和可靠的测试检测AA,,交流,党卫军,SC, CC表型(5- - - - - -8]。HemoTypeSC™,定性而不是定量筛选试验,确定HbA的存在与否,哈佛商学院,负担沉重。它可以完成一个确定性测试,帮助其他血红蛋白,如胎儿Hb(住宅)没有检测到的快速筛选试验。事实上,表现型HbSFA2或S /β0-thalassemia将产生的结果为哈佛商学院HemoTypeSC™和表现型SAFA2或S /β+地中海贫血会产生。决策算法建议检测血红蛋白S和C如图2。该算法包含3水平的决定。NB,其他血红蛋白变体,如住宅,HbD, HbE将产生相同的HemoTypeSC HbA™结果。

4.1。1级

HemoTypeSC™证实血红蛋白S的存在,C,和一个,但它不检测住宅和其他变体。

因此,有必要进行二次确定性测试(例如,血红蛋白电泳)确认明确的表型如下:(我)hba可能产生hba或HbSAFA2 (S /β+地中海贫血)(2)哈佛商学院可能产生哈佛商学院或HbSFA2 (S /β0-thalassemia)。(3)HbAA可能产生HbAA或HbAFA2

4.2。2级

当HemoTypeSC测试产生HbAC、HbCC和H表型,这是100%可靠。

4.3。3级

当HemoTypeSC测试产生HbAA表型,也建议进行确定性测试指定了血红蛋白表型HbAA因为它可能产生HbAA或HbAF(其他罕见的血红蛋白变体)。

基本上,HemoTypeSC™是一个可靠的、低成本的筛选试验来检测S基因的存在和百分比和其他异常血红蛋白如C基因。因此建议进行进一步分析和确定测试测定血红蛋白的比例。

基于这些发现,我们因此建议使用HemoTypeSC™镰状疾病筛查的高患病率和低收入的国家设置,例如,科特迪瓦。它必须完成由确定性测试进一步调查。因此,我们提出上述算法(图1)指导镰状细胞性贫血的诊断。该算法也可以面向临床症状。

HemoTypeSC™有助于确定血红蛋白S状态在一般人群中,婴儿,新生儿,孕妇。它可以导致镰状细胞病的预防通过遗传咨询敏感,婚前、产前和新生儿筛查。预防确实减少镰状细胞病的高发。主要镰状细胞病的早期诊断和综合管理综合症确实改善预后的主要镰状细胞综合征儿童和人生活在一起。

除了HemoTypeSC™,还有其他的医疗检查设备如Sickledex和Sicklecheck [13- - - - - -18]。尽管有这些显著的进步镰状细胞病的诊断,这些测试需要特定仪器有关自己的程序。一些限制使用有限的金融资源的国家将这些测试未能发现镰状细胞病的严重贫血。这导致假阳性。的试剂也有一个相对较短的保质期需要定期供应。除了技术性能,HemoTypeSC™也社会经济优势,因为它是一个低成本的测试,例如,USS5相比USS30血红蛋白电泳。

5。结论

HemoTypeSC™是一个快速和低成本处理的检测血红蛋白a, S和c一只需要一滴全血。不制冷,仪器,或能源是必需的。HemoTypeSC™不需要广泛的操作员培训。它提供了一个准确、可靠的诊断异常血红蛋白S和C儿童、新生儿,孕妇,和一般人群。因此,我们建议使用HemoTypeSC™在镰状细胞病的高发的国家,例如,科特迪瓦作为第一线镰状细胞病的筛检试验。此外,我们建议血红蛋白电泳作为一个确定性测试进一步调查。因此我们提出了一种决策算法镰状细胞病的诊断。的HemoTypeSC™筛查必须推广根据世界卫生组织的建议(17),至于非洲战略更好地对抗镰状细胞病。这不仅包括初级预防通过早期婚前、产前,新生儿筛查也质量评估,所有关键利益相关者的承诺。

数据可用性

实验室和流行病学数据用于支持本研究的发现可以从相应的作者。

信息披露

Distrilabo非洲没有影响收集、分析和解释数据,并报告写作或出版决定提交文档。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

确认

Distrilabo非洲向调查人员提供了资金和捐赠HemoTypeSC™的研究。

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