在泰国南部地中海贫血和血红蛋白E献血者

文摘

地中海贫血和血红蛋白(Hb E)在泰国是很常见的。地中海贫血患者特征通常有一个正常的血红蛋白浓度或轻度贫血。因此,thalassemic个人最低可接受的Hb水平可能被接受为献血者。本研究旨在确定的频率α地中海贫血1特征,β在泰国南部地中海贫血特质,Hb E-related综合症献血者。泰国南部起源,一百一十六年自愿献血者招募为地中海贫血和Hb E检查红细胞指数/ dichlorophenolindophenol降水测试。β地中海贫血和Hb E然后确定高效液相色谱和4常见α地中海贫血缺失的特点是单一tube-multiplex gap-polymerase连锁反应。整体人的频率为12.9%,分类如下:纯合子α地中海贫血2(1.7%)、杂合的α地中海贫血1例(1.7%),杂合的β地中海贫血没有α地中海贫血(0.9%)、杂合的Hb Eα地中海贫血(5.2%),对Hb E /双杂合的α地中海贫血1例(1.7%),纯合子Hb Eα地中海贫血(0.9%)和纯合子Hb与杂合的Eα地中海贫血2 (0.9%)。地中海贫血筛查的有效性不仅仅是为了获得高效的红细胞的接受者也鼓励地中海贫血的预防控制程序献血者。

1。介绍

地中海贫血,地中海贫血,Hb E (),最常见的遗传血液疾病,不仅被视为公共卫生问题也在泰国社会经济问题(1,2]。的频率地中海贫血,地中海贫血和Hb E运营商在泰国是年龄在20 - 30%,3 - 9%和10至60%,分别和不同地区与地区之间3,4]。这些异常球蛋白基因在不同组合导致超过60地中海贫血症状包括三个严重thalassemic疾病在泰国发现如Hb巴特的胎儿水肿(纯合子地中海贫血1,- / -),纯合子地中海贫血(⁺/⁺,⁺/⁰,或⁰/⁰),地中海贫血/乙肝E (⁺/或/)。泰国已婚夫妇生下婴儿的风险严重的人(约5.6%2]。减少的数量严重地中海贫血综合征患者的影响,预防和控制计划在泰国地中海贫血筛查是必要的异常基因携带者在一般人群5]。关于地中海贫血诊断的精度,血红细胞Hb E捐助者(Hb E特质或纯合子Hb E)的地中海贫血会导致误诊正常接受者(假阳性)或正常的红细胞捐助者的地中海贫血会导致误诊thalassemic接受者(假阴性)6]。地中海贫血和血红蛋白异常的患病率人口已经在一些研究报道。地中海贫血的血红蛋白浓度在泰国航空公司是变量从贫血到正常范围,因为有不同数量的球蛋白基因缺陷和相互作用的- - -地中海贫血在高频区域(7,8]。根据AABB(美国血库协会)技术手册,最小的血红蛋白浓度为接受献血不小于125 g / L为同种异体捐赠者和110 g / L为自体捐赠(9]。因此,地中海贫血特征与正常血红蛋白浓度可以献血。如今,地中海贫血和血红蛋白异常献血者的研究已经报道在一些人群提供不同频率(10- - - - - -15]。这份报告在泰国是第一个公布的数据,提供了有用的数据为献血者之间的人减少重症地中海贫血的病人。

2。材料和方法

一个横断面研究区域血液中心,泰国红十字会国家血液中心,洛坤府从2013年7月到9月。收集的样本来自不同的医院位于泰国南部。研究协议是审查和批准的机构审查委员会Walailak大学的泰国(IRB编号2013 - 011)。IRB知情同意确认。获得知情同意后,外周血样本收集与EDTA实际上从116年泰国南部自愿献血者曾通过捐赠根据AABB标准自我戒赌。简单地说,捐赠者必须17岁之间的70年和重量超过45公斤,必须身体健康无传染病的风险。根据泰国红十字会献血标准,最小Hb浓度接受献血不小于120 g / L和130 g / L为男性和女性,分别。硫酸铜(CuSO Hb浓度估计₄)比重的方法。硫酸铜比重为1.052(代表Hb浓度120 g / L)用于乙肝筛查女性捐赠者和比重为1.053(代表Hb浓度130 g / L)用于乙肝筛查女性捐赠者。个人一滴血漂或时间太长沉递延,并排除在本研究之外。

全血细胞计数(CBC)是由使用一个自动化血细胞分析仪,mek - 8222 K(日本KOHDEN、东京、日本)。微粒体积(MCV)和dichlorophenolindophenol平均降雨量测试通过使用KKU-DCIP清楚试剂盒(PCL控股,曼谷,泰国)作为地中海贫血和Hb E筛查方法,分别。MCV (< 80 fL)的积极成果和/或DCIP随后Hb类型进行了高效液相色谱法(HPLC)。血红蛋白类型和定量的Hb₂F / E,乙肝,乙肝是由一个自动血红蛋白阳离子交换高效液相色谱法(变体地中海贫血短程序,Bio-rad实验室、大力神、CA)。

基因组DNA被使用从外周血白细胞中提取基因组DNA提取工具包(Geneaid,台北,台湾)根据制造商的指示。基因组DNA的样本的质量和浓度测量和nd - 1000 (NanoDrop技术,威明顿、德)。来描述α3.7 kb(-球蛋白基因删除α^3所示。7(-)和4.2 kbα^4.2)删除类型α地中海贫血2、东南亚()和泰国(删除的类型地中海贫血1是由多路GAP-PCR [16在所有样本MCV (≤80 fL)较低。因此,α地中海贫血2特征并不是脱离正常个体通过DNA测试研究。PCR产品被GeneAmp PCR扩增系统9700(美国珀金埃尔默,CT)。8L (PCR产品electrophoresized在1.5%琼脂糖凝胶,用溴化乙锭染色,可视化和拍摄凝胶文档系统(SynGene礼盒,弗雷德里克,医学博士,美国)。

2.1。统计分析

数据提出了均值±标准差(SD)。血液与非参数数据进行统计比较克鲁斯卡尔-沃利斯检验使用SPSS 17.0版(美国SPSS,芝加哥,IL)。P值< 0.05被认为是具有统计学意义。

3所示。结果

共有116名自愿献血者招募在这项研究中,65名男性(56%)和51岁女性(44%)。所有自愿献血者住在泰国南部。平均年龄(±SD) 33±11.3年(范围:17-58年)。最常见的主题是单身状态(55%)。血型“O”和“B”被发现是共显性的和所有捐助者是积极的Rh血型(D)。平均值的红细胞参数在正常范围值。高变异的红细胞体积(MCV)观察(SD = 6.94),因为人如表所示1。表2代表了人的患病率在116年泰国南部献血者。根据我们的研究设计,地中海贫血1,地中海贫血和Hb E都集中在和确认,因为他们可以导致严重的地中海贫血等下一代Hb巴特的胎儿水肿,纯合子地中海贫血,地中海贫血疾病/乙肝E。正常的个人和地中海贫血2特征没有分化的DNA分析,因为它的高成本和低的重要性。116年捐助者,101(87.1%)捐助者被诊断为正常或杂合的α地中海贫血2和15(12.9%)捐助者被解释为地中海贫血和/或异常血红蛋白。在这些人,Hb E-related障碍(Hb E杂合子和纯合子有或没有地中海贫血)是最常见的人占8.6%(10/116),其次是杂合的α地中海贫血1(杂合的α地中海贫血11.7%并为Hb E和杂合的双重杂合子地中海贫血11.7%)占3.4%(4/116)和杂合的地中海贫血占0.9% (1/116)。

我们将116年的泰国南部献血者分成七组根据地中海贫血的类型和Hb E(红细胞指数、Hb型和DNA分析被用来解释表型)。血液结果列出比较如表所示3。多路复用差距PCR确定球蛋白基因删除如图1。正常的,地中海贫血2特征的主要成分是研究捐赠者。我们发现统计上显著差异的所有血液参数在四组(组I, II, IV和V);当他们使用非参数克鲁斯卡尔-沃利斯检验分析,MCV、妇幼保健和% Hb₂/ E最明显()。在这项研究中,纯合子Hb E地中海贫血交互最低MCV和妇幼保健与其他团体。增加乙肝₂/ E中观察到地中海贫血的特点、Hb E特质和Hb E纯合子。共同继承的地中海贫血在乙肝E杂合子被发现血液参数相比,减少乙肝E杂合子没有地中海贫血的互动。相比之下,交互的地中海贫血在乙肝E纯合子被发现有改善血液参数(增加了Hb、MCV和妇幼保健)与乙肝E与不纯合子α地中海贫血。小红细胞的(MCV < 80 fL)和/或低(妇幼保健< 27 pg)红细胞25.9%(30/116)和26.7%(31/116),分别。在30献血者小红细胞的血红细胞,十五献血者(50%)被发现的人,左边的献血者可能缺铁和/或α地中海贫血2特征。

图1

^{3所示。7 4.2} α ^3所示。7 α α α ^4.2 α α α α α ^{3所示。7 3所示。7} 代表1.5%的琼脂糖凝胶电泳扩增PCR产品描述球蛋白基因缺失类型的多重PCR的差距。2 kb, 1.8 kb, 1.6 kb, 1.4 kb和1.2 kb代表(- 3.7 kb删除片段),正常的片段((-),4.2 kb删除片段),海类型删除片段(),泰国类型删除片段(),分别。M代表1 kb DNA梯。通道1 - 4(积极控制)基因型如下:-/,/,/,/,分别。道5、6、8、9和11 - 13是正常的球蛋白基因型(/)。车道7、10和15是杂合的地中海贫血1 (/)。巷14是纯合子地中海贫血2 (-/- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -- - - - - -)。

HbA₂/ E用于诊断水平地中海贫血(% HbA特征₂= 4.0 - -8.0)和Hb E-related障碍(HbA)₂/ E > 10.0%)。然而,地中海贫血和交互的地中海贫血在地中海贫血和Hb E-related紊乱,红细胞指数和Hb打字不能用于解释。在这项研究中,多路复用PCR用于描述四种常见的差距删除(球蛋白基因α地中海贫血1等位基因(和),地中海贫血2等位基因(-^3所示。7和- - - - - -^4.2 )如图1。表4表明风险等位基因的数量在地中海贫血或Hb E-related献血者。从所有献血者,有17个等位基因(来自13个献血者)可能会导致严重的地中海贫血的后代(风险等位基因频率= 3.7%)。在17个风险等位基因,Hb E等位基因()是最常见的所有风险等位基因(/,^{0 / +}和),12/17(70.6%),紧随其后的是α地中海贫血1等位基因(/),4/17 (23.5%),地中海贫血基因(^{0 / +}),1/17 (5.9%)。

4所示。讨论

献血者选择是至关重要的,确保捐助者和受助者的安全。根据美国血库协会的标准(AABB)、血红蛋白浓度超过125 g / L是接受献血9]。地中海贫血的流行和异常血红蛋白因地区而异,的频率地中海贫血在曼谷,泰国北部从20 - 30%地中海贫血3和9%之间不等。异常血红蛋白之一,乙肝E是最常见的,尤其是在泰国东北部与老挝和柬埔寨和泰国的结,其患病率可达50 - 60% (3,4,17]。的患病率地中海贫血的特点,Hb E特征,纯合子Hb E,在泰国南部地中海贫血1特质夫妇为2.22%,12.08%,1.11%,和3.06%,分别在泰国人口;泰国南部人口被发现地中海贫血患病率最低和Hb E [18]。地中海贫血的发生频率较低的在这个研究类似的模式和Hb E在献血者因为Hb浓度在地中海贫血载体(地中海贫血1特征,地中海贫血的特点和Hb E-related综合症)从正常价值变化非常轻微的贫血7,19,20.]。因此,thalassemic个人能或不能捐血和一些thalassemic个人贫血被排除在本研究之外。地中海贫血在献血者的频率已报告在几个人口(10- - - - - -12,21]。例如,80年在马来西亚献血者,地中海贫血的频率为16.25%,略高于本研究[12]。女子和Chandola22)报道,印度献血者小红细胞症的患病率为5.4% (50/925)。Alabdulaali et al。23公布,镰状细胞性状发现2%(23/1,150)哈立德国王大学医院(KKUH)在利雅得。此外,科比et al。24)发现,2.8% (33/1,162)apheresis捐助者的低意味着血细胞比容值(MCV < 80 fL)。在目前的研究中,发现小红细胞症在献血者是25.9%。这些献血者可以让人缺铁和/或(25,26]。其他红细胞疾病、glucose-6-phosphate脱氢酶缺陷被发现1.1%(33/3,004)在意大利献血者(27),0.3%(1/301)在大都会输血服务(28),0.78%(9/1,150)哈立德国王大学医院(KKUH)在利雅得。glucose-6-phosphate脱氢酶缺乏症的重要性是红细胞破坏在回答几个氧化压力(29日]。红细胞渗透脆性增加,1464年德国健康献血者是1.1% (16/1,464)[30.]。缺铁也观察到在献血者31日,32]。供体的选择是非常重要的保护捐献者和接受者。在这项研究中,两个重要的问题是关注和强调。首先,关于血红细胞的质量,这是常见的做法在许多医院或输血服务中心接受输血的血液捐赠者与地中海贫血较小。然而,两个捐助者纯合子Hb E从这个研究正常Hb水平(12.7和13.9 g / dL)很低的MCV(61.6和67.6 fL)和妇幼保健(19.7和22.0 pg)符合血涂片显示小红细胞的和低红细胞。高质量的包装红细胞(PRC)等定期输血患者严重地中海贫血患者应考虑。从献血者红细胞的地中海贫血会导致误诊接受者(假阳性或假阴性),例如,个人得到了Hb的输血E-related捐助者(Hb E特质或乙肝E纯合子)或Hb E-related个人收到正常献血者的输血(6]。因此,不仅定量筛选,而且定性评价是必要的选择重症地中海贫血病人的血液。其次,献血者可能是航空公司的人在毫不知情的情况下,因为他们可以捐血。在泰国建立了预防和控制程序严重地中海贫血(32]。筛查献血者的人严重的地中海贫血防治策略之一。血红蛋白巴特的胎儿水肿,纯合子地中海贫血,地中海贫血/乙肝E担心在泰国和产前诊断程序(33,34]。三个重要风险等位基因(地中海贫血1,β地中海贫血,Hb E)被发现在这些献血者和他们生下婴儿的风险严重的人。因此,它是非常重要的”来形容人的类型和理解多个基因基因交互为了提供适当的咨询献血者。此外,DNA测试也是需要确认人的表型。

5。结论

这初步研究证明了一个重要的频率地中海贫血1特征,地中海贫血特征,在泰国南部和Hb E-related障碍献血者和显示类似的模式频率较低的普通人群因为献血者的排除标准。提供安全的血液捐献者和接受者双方都,地中海贫血的筛查和Hb ein献血者在高流行国家推荐。都提出了定量和定性的测量红细胞输血前患者红细胞疾病如定期输血地中海贫血患者。从这项研究中获得的数据也提供有用的信息在泰国南部地中海贫血的预防和控制程序的献血者。额外的样品需要支持的重要性血红蛋白病筛查和验证地中海贫血患病率和Hb E献血者。

利益冲突

作者宣称没有利益冲突有关的出版。

确认

作者感谢所有献血者参与这项研究,他们感谢小姐Chadaporn Jutichob,小姐Amornrat Ruangtong,和小姐Parichart Detpichai献血Suratthani单位医院Trang医院,Chumphon医院,Phatthalung医院,医院甲米的联系对象的支持。这项工作得到了泰国红十字会国家血液中心,泰国,和中心的科技设备,Walailak大学,泰国。

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