儿童腺病毒的管理后同种异体造血干细胞移植

文摘

腺病毒(副词)可以造成严重的发病率和死亡率在儿童造血干细胞移植(HSCT)后,发病率高达27%,显著相关的发病率和死亡率。t细胞的移植和严重的淋巴细胞减少是主要的风险因素HSCT后腺病毒疾病的发展。目前的抗病毒治疗是充其量virostatic和可能有明显的副作用。过继转移donor-derived病毒特异性T细胞已被证明是一个有效的策略来预防和治疗人HSCT后感染。这里我们回顾该领域的进展和现在管理的途径的腺病毒的环境具有重要的意义。

1。介绍

腺病毒(副词)导致宿主免疫活性的轻微的疾病,但可以导致免疫功能不全的重要的发病率和死亡率,例如,儿童posthaematopoietic干细胞移植设置。造血干细胞移植(HSCT)可以提供许多血液学的疾病治疗,原发性免疫缺陷、先天性代谢异常。然而,并非所有的移植受者已完全匹配的同胞捐助者和替代供体来源必须寻求。在hla亲缘关系不匹配设置,调节方案通常会包括血清疗法,如阿仑单抗抗胸腺细胞球蛋白组有(单克隆抗体anti-CD52)或(多克隆马或兔胸腺细胞球蛋白(ATG))删除alloreactive T细胞在接收者可引起急性移植物抗宿主病(GVHD)。具有重要时期减少donor-derived免疫系统的t细胞免疫,当调整缓慢,免疫抑制剂的使用是必要的,移植受者尤其容易受病毒而和/或感染。

虽然抗病毒药物如利巴韦林和cidofovir可供治疗人,他们与毒性和相关变量的功效。在过去的十年左右,过继转移donor-derived病毒特异性T细胞的广泛探索作为替代方法来预防和治疗HSCT后副词和其他病毒感染。综述了近期的临床前和临床研究t细胞免疫疗法对副词和监控和管理提供了一个战略allo-HSCT后睡觉的孩子。

2。腺病毒

腺病毒(副词)于1953年首次分离出人类腺样组织获得在腺样体切除术(1]。nonenveloped,双链DNA病毒大小不一,从65到80 nm直径(2]。迄今为止,超过60人已确定类型,可以分为七组,g,血细胞凝集性能的基础上,在啮齿动物致癌潜力和DNA同源性或GC DNA(表的内容1)[3- - - - - -6]。病毒粒子由252衣壳体:240六邻体和12片通安排在一个二十面体形状和核蛋白质核心包含DNA病毒基因组和内部蛋白质。线性,双链DNA基因组34-36 kb大小并将超过30编码结构和非结构蛋白(5,6]。衣壳中的每一片通由基地和棒状外纤维投射的可变长度根据血清型(2,7]。六邻体包含类属特异性的抗原决定因素除了subgroup-specific决定因素和特定类型中和抗原表位(图1)[7]。组织取向不同人在不同的血清型,但通常对应于子组。子组C和E和B病毒通常感染呼吸道;其他B血清型感染尿道(B11、B34 B35);从子组血清型和F目标物种的胃肠道和血清型D眼睛(5,8]。

3所示。体液免疫与副词

六邻体、纤维和在较小程度上片通的主要目标已被证明是难以中和抗体(Nab) [9- - - - - -12]。HSCT后,受试者发达之病毒血症但随后清除感染检测体液免疫反应一段时间后的几个星期,几个月后病毒清除,由8-16-fold serotype-specific夺走的滴定度增加。有趣的是在某些情况下,先前存在的,高的滴定度ADV-specific小伙子血清中并没有阻止发展为病毒血症(13]。在体液免疫显然在anti-ADV免疫中起着至关重要的作用,政府的免疫球蛋白治疗并没有被证明是有效预防管理难以活化或经过验证的利益建立特定病毒血症或器官感染(14,15]。

4所示。细胞介导免疫对副词

细胞免疫对腺病毒一直得到广泛的研究在过去的二十年里,被发现在血清型可交叉反应的,确认保存抗原的存在(16- - - - - -21]。在一群8健康受试者没有之前接触的血清学证据不寻常的B组Ad35,特定的CD4 +扩散已被证明Ad2和Ad35-infected细胞溶解产物(16]。在人类中CD4 + T细胞的反应主要是具体的派生衣壳抗原(16,19,20.),但细胞毒性反应也发现CD8 + T细胞对病毒结构和识别蛋白质。immunodominant CD4 +和CD8 + T细胞抗原表位被发现位于主要衣壳蛋白六邻体和诱导T细胞发现了广泛的交叉反应或反应在特定人群(20.- - - - - -24]。健康成年人较低频率的副词hexon-specific CD8 +(38%)和CD4 + T细胞(81%)在外周血中发现(25]。在一群8健康受试者没有之前接触的血清学证据不寻常的B组Ad35,特定的CD4 +扩散已被证明Ad2和Ad35-infected细胞溶解产物(16]。

5。Adenoviral感染在免疫缺陷的主机

腺病毒在儿科人口80%的1到5岁之间的儿童拥有一个或多个血清型抗体。感染免疫活性的主机通常是良性的,短暂的,最常见的表现为上呼吸道感染(26]。睡觉会导致儿童呼吸道感染的2 - 7%在生命的头5年,负责5 - 11%的病例的病毒性肺炎,在婴幼儿毛细支气管炎。疾病通常持续不到两个星期,但一旦感染病毒潜伏在淋巴组织包括扁桃体,腺样体和肠道。在健康儿童病毒性脱落可以持续几个月或几年。在免疫功能低下的患者副词可以引起严重和长期系统性疾病如肝炎、肺炎、结肠炎、出血性膀胱炎、脑炎(26,27]。免疫抑制的儿科主机特别敏感,尤其是在同种异体移植细胞免疫妥协的地方。人感染的发病率在骨髓移植受者范围从5%到29%在早期研究难以通过常规每周监测发现文化移植后的头100天(7,26,28- - - - - -32]。强大的基于PCR的检测的出现意味着串行副词PCR已成为支柱的常规监测,与病毒隔离报告为17 - 27%的发病率在儿科移植受者4,33]。

这些回顾性和前瞻性研究促进了几个风险因素的识别,预测发展的副词在移植受者感染和/或疾病。一个识别风险因素是t细胞耗竭体外通过CD34 +积极的选择或在活的有机体内阿仑单抗或antithymocyte球蛋白(ATG)。153年一群孩子接受HSCT, adenoviraemia发生在26个孩子(17%),他们收到了t细胞的移植。类似狮子等人发现了人感染发生率显著增加的儿科患者移植组t细胞耗竭移植(4]。和一群76只成年的同种异体移植物接受者副词是孤立的只在接受阿仑单抗的介导t细胞耗竭移植(15 76年20%)[34]。

在多个站点也被检测人感染与儿童侵袭性疾病的风险增加(4,30.,31日]。然而,腺病毒感染的最重要的预测识别大多数研究淋巴细胞减少,与所有患者腺病毒疾病或持久adenoviraemia有绝对淋巴细胞计数(ALC)小于300 /μL (33,34]。adenoviraemia,患者淋巴细胞数量的增加,与间隙的感染和生存的主人而死于adenoviraemia不断增加副词DNA在等离子体加载没有淋巴细胞复苏(13]。进一步说明免疫重建的重要性在adenoviraemia间隙,46个孩子HSCT后前瞻性研究。孩子去世(7/21)人感染没有adenovirus-specific T细胞,显著降低T细胞重建,虽然绝对淋巴细胞计数是0.3×10以上⁹在移植后30天/ L。百分之九十三的患者成功清除副词感染病毒特异性T细胞的存在,而只有54%的孩子没有人感染。他们也有很好的T细胞重建,尤其是CD8 + T细胞(> 0.4×10⁹/ L)在移植后60天35]。在当前时代的前瞻性监测、Hiwarkar等人认为睡觉再活化的影响在291年儿科HSCT过程和发现的CD4计数低于0.15×10⁹/ L后的头3个月,移植作为一个重要的危险因素发展adenoviraemia [36]。总体死亡率副词HSCT后感染范围从6%和60%与成人和儿童(混合种群的研究7,29日,30.,32和儿科患者中19%到83%之间26,33,37]。

6。诊断和监测

实时定量PCR检测的发展使得对准确检测人在各种各样的组织,包括血液、粪便和尿液(2),并允许的前瞻性监测adenoviraemia posttransplantation设置。•卡普曼等人报告平均21天移植后adenoviraemia很明显(33]。前瞻性研究,确定21儿科HSCT患者之感染,90%的感染发生在第一次移植后3个月,超过50%的患者有副词感染HSCT后30天内(35]。最普遍的群腺病毒已经组C [4,33,34],亚型2、5、1、6、31日和4(减少频率)是最普遍的38]。

之间存在相关性高血浆病毒载量和致命的结果或侵入性疾病,与那些死于疾病传播副词有副词DNA负荷远高于患者幸存了下来(39,40]。还有ADV-related疾病的发病和死亡率之间的联系。连续在132年的一项研究儿科病人接受SCT, 91%的人在外周血死了,阿正与adenoviral DNA检测在血液平均29天前死亡。和那些发达传播疾病,病毒在血液检测的中位数超过前3周发病的临床症状(4]。这些早期的研究表明,高病毒载量先于传播疾病的症状;因此前瞻性监测人负载现在实施的许多儿科移植中心。

7所示。管理Adenoviral感染免疫功能不全的孩子

7.1。抗病毒药物

Cidofovir是一个无环核苷膦酸酯衍生物的胞嘧啶转化为一个活跃的细胞内代谢物,Cidofovir二磷酸,细胞激酶(14,41]。活性细胞内药物对其作用机理的二磷酸形式作为竞争性抑制剂和一种底物2′5′脱氧胞苷三磷酸在病毒DNA聚合酶反应(42),从而抑制病毒复制。抗病毒药物选择性更高的亲和力的结果相比,病毒DNA聚合酶细胞DNA聚合酶(8]。

几项研究已经报道了CDV的成功治疗感染人免疫功能不全的主机HSCT后(14,42),特别是早期(43- - - - - -46),结合撤军的免疫抑制33]。在我们的中心,如果血液难以达到> 1000拷贝/毫升连续两次CDV开始5毫克/公斤每星期2星期,紧随其后的是维持剂量的5毫克/公斤每隔两周。显著的副作用包括肾毒性,尤其是当结合使用与其他肾毒性药物如环孢霉素或他克莫司(15]。CDV是一个二阶阴离子,拍摄到近端肾小管细胞的有机阴离子转运antiluminal膜。一旦进入细胞,扩散速度缓慢进入小管腔,以及CDV的胞内半衰期长,可能导致有毒的胞内积累和随后的肾小管坏死。可以减少毒性同时使用口服丙磺舒和静脉hyperhydration41]。丙磺舒争夺肾脏阴离子转运体和连同hyperhydration可以帮助保护管状细胞减少血浆清除率CDV的47,48]。Ljungman等人发表的两个研究使用CDV治疗阿和在126干细胞移植患者合并巨细胞病毒感染44]。肾毒性的风险这两项研究是26%,大部分肾毒性轻微(低度蛋白尿或血清肌酐轻度高程),但大约一半剩下的迹象,停药后肾功能损害的CDV [44]。

利巴韦林的核苷类似物在体外anti-ADV活动报道,但对不同亚型不同。活跃在最难以从物种隔离,所有隔离物种B, D和C (49]。成功的治疗,有传闻人免疫功能低下的患者,但没有为支持更大规模的研究43,50)(审核(15])。没有可证明的作用更昔洛韦在免疫功能低下的患者(或免疫球蛋白治疗14,15]。

最近一个新的口服疗法进行治疗感染人免疫功能不全的患者。CMX001 (hexadecyloxypropyl cidofovir)是一种口服生物利用率的脂质共轭cidofovir良好的口服生物利用度和可以实现更高的细胞内活性药物与cidofovir相比的水平;它也可能有更好的安全性51]。药物是在13个试点免疫功能不全的患者和病毒载量下降近三分之二有≥10倍治疗1周后(51]。CMX001目前正在研究在随机,安慰剂对照,2期临床试验的先发制人的腺病毒疾病的治疗和安慰剂在48儿科和成人造血的细胞移植受者(副词停止试验,NCT01241344)。

7.2。撤军的免疫抑制

Chakrabarti等人报道了先发制人的成功削减或取消免疫抑制治疗,首先检测腺病毒。76年一群成年同种异体移植接受者,15个开发/感染腺病毒疾病。12个患者免疫抑制撤回或减少感染和9决议,而3免疫抑制的病人必须继续屈从于腺病毒病(34]。同样儿科撤军移植受者的免疫抑制与早期抗病毒治疗导致的分辨率adenoviraemia在19/26(86%)的病人33]。因此在设置我们推荐以下算法具有重要的治疗难以(见图2)。

7.3。过继免疫疗法

很明显,复苏之感染需要同种异体HSCT后细胞免疫重建。过继免疫疗法同时使用unmanipulated T细胞和病毒特异性T细胞因此被评为抗病毒免疫重建的方法。

Unmanipulated供者淋巴细胞注入含有病毒特异性T细胞(DLI)一直在EBV感染导致患者试用间隙感染,但增加的风险GHVD由于高频alloreactive细胞(52]。1995年沃尔特等人注入捐赠者CMV-specific CD8 +细胞毒性T淋巴细胞克隆成14接受同种异体骨髓,试图重建对巨细胞病毒细胞免疫力。所有14个病人重建巨细胞病毒免疫通过骨髓移植后49天42。转移CD8 +克隆持续至少8周后完成t细胞疗法(53]。

Hromas等人报道了首次成功治疗的腺病毒感染DLI。之后产生严重ADV-associated出血性膀胱炎的病人T细胞耗竭贪污和没有回应抗病毒药物或免疫球蛋白。后注入1×10⁶/公斤+ 61天患者CD3 +细胞改善在5周不发展GVHD。这成功治疗支持adenovirus-specific CTL的过继转移的基本原理54]。早期的研究在最近的过继免疫治疗一直在总结评论(47,55- - - - - -58]。

8。代的T细胞对副词

为了增加抗病毒疗效和减少alloreactivity的风险隔离的技术已发展成了只有ADV-specific T细胞给病人。史密斯等人在1996年供者外周血树突状细胞作为抗原递呈细胞制造细胞毒性T细胞(ctl)承认放置树突状细胞(dc)从捐赠者感染了野生型腺病毒血清型5(广告)或Ad5应变dl312E1A区域删除的Ad5突变导致病毒在早期和晚期缺陷病毒基因转录。adenovirus-specific T细胞随后被扩展使用virion-pulsed辐照DCs (17]。大多数的ctl CD4 + T细胞,并针对输入病毒蛋白质。他们表现出大但无法杀死靶细胞在标准4-6-hour化验(需要18个小时杀死)和不能充分扩展到CTL线(59]。

从这之后,2004年,利恩和她的小组开发了一种协议重新激活ADV-specific记忆T细胞使用clinical-grade副词从捐赠者的PBMCs向量。PBMCs从6健康ADV-seropositive志愿者刺激与自体树突状细胞(dc)转导Ad5f35 (replication-defective副词向量)。CD4 +和CD8 + T细胞ADV-specific孤立和扩大自体EBV-transformed lymphoblastoid细胞系(拼箱),难以具体杀死59]。因为代DCs作为刺激细胞需要大量的血液,第二个协议使用Ad5f35GFP-transduced PBMCs刺激器和救援人员使用。扩张再次进行拼箱,合成了T细胞特定的反应对副词和EBV。这些CTL线使用Ad5f35生成向量能够识别和杀死自体的细胞感染野生型腺病毒隔离不同血清型和组包括Ad2 Ad4, Ad7, Ad11 [59]。

2006年利恩等人报道了预防的临床使用trispecific(巴尔病毒、巨细胞病毒和副词)11日ctl成人和儿科造血干细胞移植后患者。捐赠者PBMCs转导与重组adenoviral向量编码巨细胞病毒抗原pp65 (Ad5f35pp65)被用来激活巨细胞病毒,ADV-specific T细胞。后续刺激与EBV-transformed拼箱转导相同的向量重新激活EBV-specific T细胞同时保持激活副词的扩张和CMV-specific T细胞(图3 (c))。十五供者细胞毒性t淋巴细胞生成和显示溶细胞的活动对所有三种病毒(62年,63年]。11个病人收到5×10⁶1×10⁸细胞/ m²35岁HSCT后150天。巨细胞病毒,EBV-specific ctl持续扩大治疗的所有个人在4周的政府,而ADV-specific ctl扩展只在最近的活动或感染。所有患者preinfusion减少病毒感染/激活病毒滴定度和分辨率的疾病症状,与扩张的病毒特异性T细胞在外周血中发现的62年]。

为了增加的频率adenovirus-specific T细胞在其CTL,利恩和她的小组移除竞争immunodominant巨细胞病毒抗原和制造bivirus-specific CTL行指示只有巴尔病毒和腺病毒(64年]。二十CTL线,其中13例儿科干细胞移植受者管理:7和6倍同一性移植无关。腺病毒的频率hexon-specific bivirus T细胞的细胞毒性T淋巴细胞显著高于trivirus CTL研究(中位数副词细胞308点形成菌落/ 10⁵细胞毒性t淋巴细胞(46 - 350)比86年证监会/ 10⁵细胞毒性t淋巴细胞(46 - 350)在bivirus产品)62年,64年]。每个病人收到5×10⁶1.35×10⁸细胞/ m²40岁HSCT后150天。没有毒性相关的CTL治疗和没有主题发展新创细胞移植后移植物抗宿主病。没有13发达EBV-associated淋巴增殖性疾病的患者和2的受试者决议adenoviral疾病(64年]。最近在一项多中心研究中,转第三方病毒特异性T细胞(虚拟)严重,患者服用50耐火巨细胞病毒、副词或EBV感染(65年]。32的特异行是来自患者常见的HLA多态性对EBV免疫,巨细胞病毒,或者睡觉,其中18行严重,患者服用50 post-HSCT难治性疾病由于感染这些病毒之一。生成的病毒特异性T细胞转导的PBMC clinical-grade Ad5f35pp65向量与EBV-transformed拼箱,紧随其后的是刺激转导嵌合相同的向量。VSTs被冷冻保存,直到需要。患者被排除在研究如果他们收到了t细胞血清疗法后28天内提出行政日期。完全或部分反应的累积率在6周后注入整个集团的74%。没有直接输注相关的不良事件指出,发达新创移植物抗宿主病2例(1级)。6的8个病人没有线,继续与标准治疗病毒性疾病的死亡。这种方法使用“现成的”第三方VSTs承诺似乎消除一些障碍在病毒细胞疗法的广泛应用而具有重要。它避免了冗长的时间和成本的个人,并没有出现导致移植物抗宿主病从第三方alloreactivity细胞(65年]。

一旦被证实ADV-specific T细胞可以扩展在体外,他们是有效的和保护体内,下一个挑战是要克服物流生产这些产品。上述协议与自体激活捐赠PBMCs单核细胞转导与Ad5f3pp65向量随后引发刺激Ad5f35pp65-transduced EBV-LCL总共需要10 - 14周。这意味着必须预先如果他们制造的产品都是立即对严重的病人;和成本的影响。因此,不同的细胞选择和文化实践探索发展更迅速和具有成本效益的策略ctl的生产。

9。基于细胞因子的选择从供者外周血单核细胞抗原T细胞

2004年Feuchtinger等人描述了clinical-grade隔离策略,扩大供体派生人类ADV-specific T淋巴细胞使用Miltenyi研究(Bergisch格拉德巴赫、德国)干扰素-(IFN -)分泌试验。PBMCs分离得到合适的捐赠者和刺激C型adenoviral抗原(BioWhittaker, Verviers,比利时)16个小时。T细胞抗原特异分泌的干扰素-在第二天发现了这些cytokine-secreting细胞磁富集使用CliniMACS设备(Miltenyi生物技术)。平均数为3.4×10⁶细胞获得平均85%的纯度ADV-specific T细胞。这些孤立的细胞被扩大体外中位数的18天(范围第七至第二十九页天)大于10⁸总使用- 2细胞和自体馈线细胞刺激。生成的T细胞显示ADV-specific干扰素-释放和特定ADV-infected细胞死亡。Alloreactive生成的行扩散混合淋巴细胞培养相比显著降低unmanipulated PBMCs [66年]。

采用上述方法生成ADV-specific T细胞临床Feuchtinger集团于2006年与系统性阿九个孩子感染HSCT后主要白血病或淋巴瘤。这些孩子接受骨髓调节方案与t细胞耗竭HSCT,难以控制的病毒血症不抗病毒药物。T细胞转移了如果一个足够ADV-specific T细胞反应是检测到供体T细胞(> 0.01%)。平均14×10³1.2 /公斤(范围-50×10³/公斤)T细胞被注入移植后的中值+ 77天(范围+ 40 + 378)。t细胞输注在所有九个病人耐受良好,除了一个情况恶化的既存的皮肤GVHD在天10至14。五,六名可显著减少病毒DNA在外周血和凳子在活的有机体内特异性T细胞的扩张。那些没有特定的t细胞反应t细胞过继转移增加或不变后外周血中病毒DNA的负载。跟踪三个病人谁是可能持续ADV-specific t细胞反应检测到4至6个月后t细胞转移。功效是独立于t细胞的剂量转移,表明高效在活的有机体内扩张。4名患者死于谁3死于adenovirus-associated,既存multiorgan失败。3的患者死亡后没有特定的t细胞反应免疫疗法(67年]。

Chatziandreou等人也报道的成功隔离ADV-specific T细胞使用类似协议(69年]。使用Miltenyi干扰素-γ分泌和捕捉试验与腺病毒溶菌产物,ADV-specific T细胞被孤立,扩大,重振/ 2周。筛选了病毒特异性细胞的数量从6 ADV-positive捐助者范围从1到7×10⁵细胞,绝大多数是CD4 +细胞。2周后文化时期,一个1.5到2日志扩张被认为平均细胞数为1×10⁷细胞。这将使注入的10⁵ADV-specific细胞/公斤对于大多数成年人和大量的儿科患者。这种方法提供了14天文化周期短的优势,允许生成细胞反应的第一检测病毒在常规筛查。因此减少劳动强度,更有利的成本:收益(69年]。使用一个类似的干扰素-γ获取协议,五个病人治疗大奥蒙德街医院ADV-specific T细胞从最初的捐赠()同一性父母(或第三方)[60]。所有5个孩子经历了在活的有机体内或体外T细胞耗竭作为调节方案的一部分,难以负荷峰值的血液从5.6×10⁴/ 22×10毫升⁶细胞输注前/毫升。干扰素-γ分泌ADV-specific T细胞之间的捐款是浓缩至19日,24小时后,直接注入没有64%体外扩张(图3(一个)),4个孩子接受10⁴T细胞/接收10公斤,一个孩子⁵T细胞/公斤,平均原始干细胞移植后的80天。三个病人血液中清除副词后一个注入10⁴/公斤,可论证的ADV-specific流通中的T细胞检测到干扰素-γ分泌物化验。不严重,输注相关毒性观察。三个患者死亡:一个细胞输注后由于旁观者GVHD即使病毒血症已经解决(70年),另外两个未能明确病毒和175和56死于天,分别是(60]。

10。肽扩大T细胞

最近为了从更健康的捐赠者多数生成ctl在很短的时间内,Comoli等人使用池五30 mer肽来源于HAdV5六邻体蛋白,产生21 t细胞行有限alloreactivity从20×10的中位数⁶捐赠PMBC和扩大到75×10⁶细胞26天的尽头。这将是足够的输液针对0.5×10⁶细胞/公斤(71年]。2010年Aissi-Rothe等人使用clinical-grade PepTivator-ADV5六邻体(Miltenyi研究,德国)和6人力资源培养时间产生干扰素-分泌ADV-specific T细胞的扩大的中间两IL2和辐照自体馈线细胞(图3 (b))。85×10⁶人T细胞生成平均值为1.7日志扩张和减少1.3登录alloreactivity [61年]。

11。刺激与病毒DNA质粒

2011年贝勒集团另一种方法来快速选择特异性T细胞。而不是使用adenovectors刺激T细胞,树突状细胞和DNA质粒编码LMP2 nucleofected, EBNA1,和BZLF1 (EBV),六邻体和片通(副词)和pp65 IE1 (CMV)作为抗原递呈细胞”。其次,EBV-LCLs被拆除,取而代之的是气体渗透文化设备(G-Rex)促进发展和生存的一个刺激后大细胞数量。激活t细胞培养在il - 4的存在(1000 u /毫升)和IL-7 (10 ng / mL)。这种方法减少生产从10周的时间10天,以及生产成本> 90% (72年]。使用这种方法,22 trivirus 14 bivirus CTL线生产1.5日志从15×10扩张⁶PBMCs开始。10患者病毒再活化(单一或双)治疗27天到52个月HSCT后,与每个病人接受0.5到2×10⁷细胞/ m²。完整的病毒学反应与频率增加病毒特异性T细胞被认为在80%。一个病人开发第二阶段皮肤移植物抗宿主病后注入但没有其他毒性观察(68年]。同样这种方法被用来开发一个制备多克隆(CD4 +和CD8 +) ctl特定7病毒(巴尔病毒、巨细胞病毒、腺病毒、BK人类疱疹病毒6,呼吸道合胞病毒,流感)(73年]。

12。隔离协议使用t细胞激活标记

除了使用干扰素-生产作为一种捕获抗原T细胞,替代隔离策略基于其他T细胞活化标记进行了调查。肯纳先生等人产生抗原T细胞行阿,EBV,巨细胞病毒,来自烟,和C白色的基于磁性细胞分离CD154 + T细胞与抗原16小时的刺激后,紧随其后的是扩张的IL2 IL7, IL15 14天。产品的纯度是8到15%之间,具有更高的频率特异性T细胞相比fungus-specific T细胞(74年]。雷鲍德等人相比,特异性,扩张/分化潜力,并针对巨细胞病毒,副词Th1反应后分离的基于干扰素-抗原特异性T细胞γ释放或表达激活标记(CD137 ND CD154的)。隔离的T细胞表达标记是可行的和更少的时间消耗,但是它导致更小比例的Th1细胞相比,干扰素-γ捕捉可能对应于更少的效应函数在活的有机体内(75年]。

因为CD4 + T细胞在人类难以感染至关重要,Haveman等人探讨的可能性有选择地扩大和隔离ADV-specific CD4 + T细胞。PBMCs刺激了15 mer pan-DR绑定CD4 + T细胞抗原表位人血清型5肽使用人工装甲运兵车,组成的脂质体窝藏副词肽/ HLA二类复合物[76年]。结果t细胞行后7天生产的主要促炎细胞因子(TNF -文化时期α干扰素-γ争取民主变革运动,咆哮,MIP-1α),表达穿孔素和granzyme B,具体ADV-killing,没有alloreactive [76年]。

表2总结最近的临床试验使用病毒特异性T细胞。

13。涉及的财务问题

病毒再活化的经济负担一直在评估最近的一个主要儿科移植中心在英国。通过计算成本的抗病毒药物和过度住院病人住院,病毒再活化成本估计£22500每个病人(相比£800每天例行的住院成本HSCT) [36]。另一方面,尽管产生特异性T细胞可以是一个昂贵的操作,它可能导致更少的人感染患者需要长期住院和/或ICU招生。正在制造的电池生产技术进步减少生产时间和一代的单个产品与特异性CTL多个病毒会更划算。

14。总结

不可否认,腺病毒可以在免疫力低下的儿童造成严重的发病率和死亡率。目前的抗病毒治疗与cidofovir并不总是成功,虽然当前可用的数据新药CMX001似乎有希望。腺病毒的最终间隙需要调整t细胞免疫造血干细胞移植后经常延迟,尤其是在t细胞的移植。已经有了较大的进步,在过去的十年中在病毒特异性T细胞过继转移。然而仍有地面覆盖将t细胞免疫治疗从专家中心标准疗法可用于所有移植受者。

确认

温妮支持Ip技术战略委员会(TSB),一场由企业主导的执行官nondepartmental英国政府公共机构提供资金支持临床试验的adenovirus-specific T细胞会同Cellmedia有限公司瓦萨姆卡西姆收到来自大奥蒙德街医院儿童慈善机构的支持和国家卫生研究所通过生物医学研究委员会。

引用

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