文摘
目标。类风湿性关节炎会影响大约1%的世界人口。这是一种慢性自身免疫性疾病。主要在女性与进步的关节损伤。免疫细胞,尤其是Th1 / Th17淋巴细胞和炎性细胞因子。这些蛋白在免疫系统不同的功能,如IL-16趋化因子;地震可以激活NFκB转录产生炎症的蛋白质;IL-31可以激活JAK / STAT通路导致炎症的产生因素在慢性疾病;IL-33促进IL-16分泌导致淋巴细胞招聘,IL-32和IL-34似乎增加巨噬细胞激活TNF分泌的基于“增大化现实”技术。本研究的目的是评估血清水平的IL-16,地震,IL-31, IL-32, IL-33, IL-34和比较他们的严重程度和治疗RA患者是否有相关性。方法。140 RA患者和40健康献血者招募的风湿病医院das丹尼从联邦大学的伯南布哥。60 AR患者天真的对任何治疗。使用酶联免疫试剂盒测定血清细胞因子水平。结果。血清IL-16 (= 0.0491),地震(< 0.0001),IL-31 (= 0.0004)和IL-32 (= 0.0040)水平显著增加RA患者与健康的捐赠者。这是观察到病人使用leflunomide地震-最低水平,接近控制水平(= 0.0064)。结论。IL-16,地震、IL-31 IL-32增加RA患者的血清。下级的地震是在那些正在leflunomide的基于“增大化现实”技术治疗。
1。介绍
类风湿性关节炎(RA)是一种慢性炎症性疾病。该病主要影响女性。据估计,世界上1%的人口。RA与进步和不可逆转的关节损伤,导致生活质量下降,并增加死亡率(1]。在RA患者中,有一个不平衡抗炎和促炎细胞因子和Th1 / Th17细胞反应(有牵涉2]。促炎细胞因子参与了RA的关键包括肿瘤坏死因子、干扰素-γ,il - 1βil - 6,引发,IL-23 / IL-17 [3]。关于其他细胞因子的作用所知甚少,如IL-16,地震,IL-31, IL-32, IL-33, IL-34,风湿性关节炎的病理生理学。因此,我们将集中我们的努力更好地理解这些其他细胞因子的作用。
IL-16由CD4 + T细胞(4,5),促进免疫细胞CD40配体(招聘的6]。IL-17和地震诱发IL-16生产(7,8),这可能与风湿性关节炎的进展,因为它直接与RA滑膜metalloproteinase-3生产(9]。
地震和IL-33 interleukin-1成员(il - 1)的家庭。地震-参与宿主防御反应招聘细胞为目标组织,启动炎症反应。这种细胞因子可以促进生产的集落刺激因子和一氧化氮10- - - - - -12),导致NF的途径κB转录(13]。NFκB激活诱导il - 1β生产(14]。此外,地震诱发IL-16 [8)和其他炎性细胞因子参与了RA的开发和进展(15]。IL-33激活NFκB和MAP激酶也刺激生产Th2-associated体外细胞因子(16]。在气道炎症疾病,IL-33与嗜酸性粒细胞招募(17]。此外,IL-33呈正相关自身抗体的生成在类风湿性关节炎(18]。
最近的研究表明,IL-31扮演着一个重要的角色在诱导的慢性炎症19,20.和调节组织重构21]。它属于白介素家族,一个潜在的炎性细胞因子(22,23]。另一个促炎细胞因子是IL-32,这可能是一个多功能的蛋白质。它作为一种内源性细胞因子生产的监管机构,可以激活巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子(24]。
IL-34也通过绑定激活巨噬细胞和单核细胞集落刺激因子- 1受体(CSF-1R),促进增殖、生存,吞噬细胞和分化,如巨噬细胞、破骨细胞、朗格汉斯细胞(25,26]。
我们的研究的目的是评估血清IL-16,地震,IL-31, IL-32, IL-33, IL-34 RA患者和关联这些数据与其他实验室和临床数据。
2。材料和方法
2.1。研究人群
血清样本被静脉穿刺获得180名志愿者。总共140例RA患者(130名妇女,10人;(平均年龄54.0±12.0)岁)被招募的风湿病医院诊所的联邦大学的伯南布哥(UFPE)。人口统计数据,目前的药物,临床和实验室数据记录(表1)。接受生物治疗被认为是一个排除标准。在招募病人,60人天真的治疗。RA的诊断建立了ACR /欧拉诊断标准[27),和病人被邀请参加这项研究通过门诊医疗。四十健康献血者年龄和性别相匹配(51.5±8.5年)包含在对照组(CG),它们是免费的任何自身免疫或炎症性疾病。这项研究是经伦理委员会批准的UFPE(协议号53555116.0.0000.5208),根据赫尔辛基宣言的原则。所有科目提供书面同意参加。
2.2。临床数据
个人疾病活动量化使用临床疾病活动指数(CDAI) [2728个关节)和关节疾病活动得分28)(28]。实验室数据从RA患者如红细胞沉降率(ESR)和类风湿因子(RF)积极性HC-UFPE记录。
2.3。细胞因子测定
IL-16血清细胞因子水平,地震、IL-31 IL-32, IL-33,和IL-34重复使用酶联免疫试剂盒测定,根据制造商的说明(研发系统,明尼阿波利斯,美国)在我们的研究中心实验室免疫调节和新的治疗方法(LINAT)。较低的探测范围如下:7.81 pg / ml IL-16;46.80 pg / ml的地震;62.5 pg / ml IL-31;39.06 pg / ml IL-32;11.71 pg / ml IL-33;并为IL-34 31.25 pg / ml。
2.4。统计分析
统计分析的数据进行使用GraphPad Prism 6.1 (GraphPad软件公司,圣地亚哥,CA)统计程序。费雪的和卡方测试是用来验证性别正常,正常和Shapiro-Wilk正常测试验证的数据。数值数据被表示为平均值±标准误差(SE)(年龄和细胞因子的测量)或中值(最大/最小)(数量)如果他们在一个正态分布或中位数和四分位范围(差)如果他们不。Mann-Whitney测试是用来比较血清细胞因子水平。皮尔森和斯皮尔曼相关系数是用于相关性分析。数据被评估为弱(< 0.3),中等(0.3 - -0.7),或强(> 0.7)。的概率值< 0.05被认为是具有统计学意义。
3所示。结果
该研究包括140例,平均年龄为54.0(±12.0)年平均疾病持续时间10.0(±7.8)年。重心由40个志愿者平均年龄为51.5(±8.5)年。风湿病学师的RA和CGs招募在医院诊所的联邦大学的伯南布哥。RA患者包括后完成至少4 ACR /欧拉(2010)[27RA分类标准。表1介绍了临床数据。个人健康CG缺乏临床症状与系统性炎症有关,和家庭的历史是免费的从风湿性疾病。总之,组织均匀性和年龄。
3.1。在RA患者血清细胞因子水平和控制
大部分的RA患者细胞因子水平高于CG。最突出的差异观察地震所表达的值(最小不等式)p基于“增大化现实”技术的价值[23150.0 (41548.0 - -46.8,< 0.0001)和CG[17562.0(24084.0 - -7944.0)],其次是IL-16 [539.1 (1919.1 - -7.8)= 0.0491]和[449.4 (1664.6 - -7.8)],IL-31 [62.5 (27550.0 - -62.5)= 0.0004)和62.5(10194.3 - -62.5),和IL-32 [39.0 (14425.3 - -39.0)< 0.0040]和[39.0(115.0 - -39.0),所有的水平都显著高于在RA患者与控制(图1)。有一个趋势调节血清IL-33和IL-34在RA患者中,但是这些数据没有统计学意义。
(一)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
3.2。协会的血清白介素水平和药物治疗
我们分析了细胞因子的水平,看看是否有任何关系使用皮尔森和斯皮尔曼相关临床参数。然而,没有发现显著差异与CDAI或DAS28标准。在我们的研究中,细胞因子水平也评估患者仅用单一药物治疗(leflunomide、强的松或甲氨蝶呤)。只有通过治疗地震水平表现出显著差异。此外,地震水平在治疗RA组和健康对照组进行比较。这是观察到的地震水平在接受leflunomide治疗的患者与健康对照组相比,最低的,这些都是明显不同于那些没有接受治疗的病人(= 0.0079)或那些被接受强的松(=(图0.0415)2)。地震水平prednisone-treated患者与对照组相似。我们没有找到任何其他细胞因子的水平和治疗之间的联系。
4所示。讨论
类风湿性关节炎是一种常见的自身免疫性疾病,主要影响女性。炎症和抗炎细胞因子可能参与恶化或加强这种情况的恶化,可能作为早期诊断的生物标志物。同时,我们的团队已经演示了一些细胞因子的重要性,如IL-17A和il - 22生成时,在巴西RA人口(30.- - - - - -32]。地震,本研究评估的水平IL-16 IL-31, IL-32, IL-33, IL-34 RA,证明IL-16,地震,IL-31, IL-32调节在RA患者年龄相比,sex-matched健康的捐赠者。这项研究的结果显示,调节IL-16水平,这印证了先前的研究在RA患者(33]然而,与Murota等。)9),我们没有发现临床RA病程和IL-16水平之间的联系。
地震与的严重性有关RA滑膜,表现出了IL-15和il - 1210)或髓过氧物酶增加损伤(34]。此外,它已经发现,地震是调节在系统性红斑狼疮(SLE)血清[35和痛风36)和促炎细胞因子生产中可能发挥重要作用。地震-移植包围的RANKL的表达、可溶性RANKL, csf, gm - csf和osteoprotegerin培养的成纤维细胞(功能)。地震-诱导效应可能促进破骨细胞的成熟导致风湿性关节炎骨退化(37]。地震也被确认为单核细胞产生的细胞因子产生的病毒防御和通过激活inflammasomes [38]。我们组的先前的研究显示,RA PBMCs刺激anti-CD3和anti-CD28表达高水平的地震-文化上层清液(39]。这些发现,我们质疑循环淋巴细胞的地震在RA分泌腺,有高水平的这在RA血清白介素。这是第一个研究巴西RA患者血清的地震水平。
IL-31属于gp130 / il - 6细胞因子家族。由激活表示优先Th2 CD4 + T细胞,及其对免疫系统和RA的多效性的影响尚不清楚。在呼吸系统炎症,IL-31似乎诱导Th1 / Th17细胞分化和它作为一个刺激生产的il - 4和IL-5。2型慢性炎症的作用,如纤维化和组织重构,仍然是未知的(23,40]。我们的数据表明RA患者表现出高血清水平的IL-31。然而,没有发现临床相关性或协会。因此,进一步的工作是需要了解其生理功能在这个病理条件。
Leflunomide是一种口腔疾病修饰治疗风湿病的药物(DMARD)用于风湿性关节炎。这种药物改善了患者的临床状况,因此,他们的生活质量(29日]。MMP-3 Leflunomide会使金属蛋白酶- 1的比例,il - 6、il - 10,证明其在风湿性关节炎的免疫病理作用[41]。我们的研究结果表明,患者在接受治疗leflunomide展出的地震水平低于患者接受其他类型的治疗,如甲氨蝶呤或强的松。在接受leflunomide RA患者治疗中,地震水平类似发现在健康的捐赠者。综上所述,以上的差别可以推测,对这些地震可能leflunomide治疗的结果。此外,阐明这种参与是否直接影响疾病进展,一个横断面研究之前和之后的治疗是必要的。
病人DAS28 CDAI,属于中度和重度,分为两组,分别接受leflunomide治疗和那些没有。在那些接受leflunomide地震水平低,导致我们质疑的地震如何影响风湿性关节炎的病理(数据没有显示)。
此外,地震水平低的病人接受leflunomide治疗相比,CG。对于使用这种药物和疾病的活动(DAS28和CDAI),这是观察到,在接受治疗的患者表现出更高水平的地震。在巴西人口,地震- + 105 CC基因型和C等位基因被发现与对RA的易感性增加有关。这些数据表明,地震-基因多态性可能是一个可能的遗传标记对类风湿性关节炎(42]。
最后,我们发现,IL-16地震,IL-31, IL-32巴西RA患者的调节。Leflunomide已被证明是一个活跃的药物可能降低地震的水平。它仍然需要阐明这种细胞因子如何影响这种疾病。差别和影响是什么对这些另一方面,极难找到患者只有一种类型的治疗;因此,需要进一步研究证实,以确保leflunomide代理减少引起的地震。
5。结论
的地震,我们表明,IL-16 IL-31, IL-32在RA患者的血清水平调节。需要更多的研究来阐明在RA的地震的作用,特别是在减少水平的鉴定leflunomide治疗。理解leflunomide作为治疗剂的作用,这是否是最合适的药物治疗RA病人需要澄清。
数据可用性
数据来自作者的请求。
的利益冲突
作者宣称没有利益冲突有关的出版。
作者的贡献
博士学位。巴勃罗·雷蒙Gualberto卡多佐参与实验,写作,和统计分析;moran。卡米拉de Melo Vilar进行实验和统计分析;博士学位。安德里亚·塔瓦雷斯Dantas本人交出密码招募病人和写的手稿;博士学位。想一想克劳迪娅迪尼斯那样不知满足、洛佩斯品牌招募病人和监督工作;博士学位。伊万•罗查皮塔饼监督工作和提供金融支持;博士学位。 Moacyr Jesus Barreto de Melo Rêgo supervised the work and took the final decision; PhD. Angela Luzia Branco Pinto Duarte recruited patients, supervised the work, and took the final decision; and PhD. Maira Galdino da Rocha Pitta supervised the work and took the final decision.
确认
本研究支持Fundacao德帕罗Ciencia e Tecnologia做Estado de伯南布哥(FACEPE)和Coordenacao de Aperfeicoamento de Pessoal de含量比(披肩)。这项工作也由研究院Ciencia e Tecnologia对位Inovacao Farmaceutica (INCT_if)。