免疫学改变由于血液透析可能干扰肾移植早期并发症

文摘

背景。慢性或中途发生的病变患者免疫系统的终末期肾病(CKD)和间歇性血液透析(HD CKD5D)归因于肾移植急性排斥反应。方法。白细胞子集在流式细胞术,补体的激活,TGF浓度βsCD30 (ELISA)和白细胞介素(CBA)分析了15例肾移植资格之前,期间和之后一个常规HD。结果。高清之前,CD8 +效应细胞的平均比例,CD8 + CCR5 +效应细胞,和HLA-DR +调节性T细胞以及可溶性CD30的平均浓度增加和天真的CD8 + T细胞减少。在高清,显著降低CD4 - CD8 T细胞( )和增加CD25 + T细胞( ),sCD30 ( ),HLA-DR +调节性T细胞( ),和调节性T细胞( )。TGFβ随着时间的推移和sCD30显著增加。补体经典的活动开始稍稍增加后的第一个小时高清透析毕业后,一直持续到十五分钟。减少的功能活动替代途径只是短暂的,随后显著增加后15分钟内完成治疗。结论。HD和同种异体移植物的结果之间可能通过影响T细胞亚群和激活补体系统的两相的课程。

1。介绍

今天,急剧下降的频率是由已故的肾脏移植的捐赠的意愿减少已故肾脏和支持严格的政治和法律环境1- - - - - -4]。因此,消除可能影响或伤害事件,防止急性排斥和实现最优条件器官肾移植的高度复杂的过程是现在的主要问题。

修改的和无法改变的风险因素可能导致肾移植肾功能的结果患者围术期的慢性肾脏疾病(CKD) (5]。CKD5D血液透析(HD),立即在pre -或围手术期阶段应该是与贫穷有关肾移植的结果由于免疫学和免疫效果6]:(i)血流动力学的影响由于血容量减少,血管收缩,肾血浆流量减少了激活肾素-血管紧张素-醛固酮系统(7),(2)由于接触,激活免疫系统的剪切应力,或液压人工表面和膜(8- - - - - -12),或(3)免疫系统的改变由于慢性尿毒症13- - - - - -16]。

在这个前瞻性研究中,我们旨在描述瞬态改变先天和适应性免疫系统应答的新型生物相容性高清设备,即。、新polynephron膜和永久的慢性尿毒症(CKD)的影响。

2。材料和方法

2.1。包含和排除标准、研究方案和材料

在2015年2月至6月,15例前瞻性包括那些在常规慢性间歇性高清使用高通量透析器polynephron膜(Nipro Elisio©15 h,大阪,日本)在门诊透析中心KfH Liebigstraße,德国莱比锡。

所有患者肾移植,在移植项目上市资格。所有的病人给他们书面知情同意参加。研究伦理委员会批准的协议是莱比锡大学的(没有。365-14-17112014)。患者18岁以下或无法同意,免疫缺陷患者或急性感染,患者血红蛋白水平低于10 g / dl和怀孕或哺乳妇女被排除在外。

之前,一个小时后,结束时,15分钟后常规HD会话,2.7毫升EDTA管和一个4毫升全血管被检索。

2.2。血液细胞计数和流式细胞术

每个样本两种涂片染色与装备”Hemacolor Schnellfarbung·冯·Blutausstrichen“由默克公司(达姆施塔特,德国)。随后,100白细胞/对象分析了板中性粒细胞和嗜酸性粒细胞使用显微镜100倍光学放大。

确定个体数量的不同的白细胞,全血与面板筛选——(i)“一般淋巴细胞概述,”(iv)“CD8细胞子集”和(v)“调节性T细胞”——被Boldt et al。17)(见表1 (17])。

125年μl全血为每一个面板与适当的抗体的混合物孵化面板(i) 30μl和面板(iv)和(v) 25μ为15分钟。随后,红血球细胞溶解10分钟使用BD流式细胞仪赖氨酸溶液(BD生物科学、海德堡、德国)。标本在500 g离心5分钟,然后洗两次磷酸盐。之后,分析了细胞在BD FACSCanto二流式细胞分析仪使用BD FACSDiva软件(BD生物科学、海德堡、德国)。

2.3。ELISA和多路传输仪珠数组

我们使用下面的酶联免疫吸附试验(ELISA)制造商的说明中的描述:人类TGFβ1 Quantikine ELISA(美国明尼阿波利斯研发系统,MN 55413)转化生长因子的浓度- (TGF)β和人类sCD30 ELISA (BioVendor Inc .、卡塞尔、德国)浓度的可溶性CD30以及Wieslab惠美联社330年装备和Wieslab惠CP310工具包(Euro-Diagnostica,马尔默,瑞典)定性测定补体替代以及古典的功能。

il - 4、il - 6、il - 10 IL-17A,干扰素-γ和肿瘤坏死因子-α分析多路仪珠阵列使用BD CBA人类可溶性蛋白质Flex系统(BD生物科学、海德堡、德国)。

2.4。统计分析

所有数据提出了与中值范围除非另有指示。统计分析是由使用弗里德曼测试和事后Wilcoxon符号秩检验(σ图11.0版本,圣何塞,加利福尼亚,美国,和IBM SPSS 24日,IBM,阿蒙克,纽约10540年美国)。所有的结果更密切了。Bonferroni调整后( ),所有的结果被认为是重要的。相比之下,实验室内部参考范围和参考范围给出了制造商的指示。

3所示。结果

3.1。研究人口、白细胞计数和血浓缩超滤率的影响

八女七男患者的平均年龄49岁(min-max: 22到66年)treated-except与两次/一个人每周第三周次与慢性间歇性血液透析(表1基线特征)。


病人	性类别(m:男/ f:女)	年龄(年)	血型¹	肾脏疾病²	糖化血红蛋白(%)	c反应蛋白(g / l)	透析时间(月)	累计每周透析剂量(小时)	抗凝³		剩余利尿⁴	血清肌酐(μ摩尔/升)	血液尿素氮(BUN)(更易/ l)	Anti-Hbs抗体(个人/毫升)⁵	先前的移植数量	面板活性抗体(%)

1	米	32	(+)	2	5.7	7.1	55	14.25	素能	1.24	0	836年	12.32	1	1	4
2	f	66年	0 (+)	0	5.1	13.1	60	8	素能	1.43	1	418年	10.22	2	0	0
3	米	37	(+)	0	5.3	19	47	14	素能	1.22	1	1123年	10.59	2	0	0
4	米	36	0 (-)	2	5.2	2	144年	15	LMWH	1.11	0	1296年	12.41	2	0	0
5	米	46	(+)	1	5	8.5	142年	13	LMWH	1.59	0	1275年	14.98	0	1	0
6	米	61年	(+)	0	5.8	13.6	27	12	素能	1.02	1	778年	7.84	2	0	0
7	米	55	0 (-)	0	4.8	12.9	97年	14	LMWH	1.54	1	1193年	14.42	0	0	0
8	f	22	(+)	0	5.2	1。2	45	12	素能	1.86	0	1049年	11.57	2	0	0
9	f	49	0 (-)	0	4.9	3	88年	15	素能	2.14	1	871年	10.13	2	0	18
10	f	57	(+)	0	4.8	2.7	48	13	基于“增大化现实”技术	1.49	0	1061年	9.66	2	0	25
11	米	28	(-)	0	4.6	8.9	44	15	素能	1.12	0	1469年	12.65	2	1	47
12	f	60	B (+)	3	4.5	4.3	45	15	素能	1.84	1	223年	2.29	0	0	70年
13	f	53	B (+)	0	5.2	21.8	111年	14	素能	1.74	1	964年	11.43	1	1	78年
14	f	38	0 (+)	3	8.9	1	33	12	素能	1.26	0	849年	9.24	0	0	78年
15	f	56	B (+)	2	5.6	0.9	68年	13	素能	1.61	0	1069年	13.63	2	1	85年
中位数		49			5.2	7.1	55	14		1.49		1049年	11.43			9

。除了病人没有14白种人。15(越南)。此外,所有患者接受治疗与铁和重组促红细胞生成素。¹血型:(-):恒河阴性;(+):恒河积极。²orellanus cisplatine 0:止痛剂,局部贫血,肾硬化,肾盂肾炎,CKD5D(原因不明),shrinkle肾脏,成人显性遗传性多囊肾病。1:Alport综合征;2:局灶节段性肾小球硬化症;3:糖尿病。³能:依诺肝素;LMWH:低分子量肝素;基于“增大化现实”技术:argatroban。⁴0:≤500毫升;1:> 500毫升。⁵0:< 10;1:10 - 100;2:> 100。

中位数的超滤率(UF)是2100毫升(意思是:1990毫升,min-max: 0到3500毫升)。没有显著增加,嗜酸性粒细胞和嗜中性粒细胞在血液细胞计数白细胞弗里德曼和事后Wilcoxon测试在所有患者和独立分析在佛罗里达大学的组织方面高于或低于2100毫升(表2和3)。


	透析前	经过一个小时的透析	透析结束时	透析结束后15分钟	参考范围

自然杀伤细胞淋巴细胞(%)
中位数(min-max)	9.1 (3.7 - -22.1)	7.3 (3 - 19.8)	11.5 (3.8 -19)	11.6 (3.4 - -21.6)	3-22
自然杀伤T细胞淋巴细胞(%)
中位数(min-max)	1.9 (0.4 - -8.6)	1.6 (0.1 - -5.1)	1.9 (0.4 - -5.9)	2.1 (0.3 - -7.1)	2.1 - -13.7
淋巴细胞的CD4 + T细胞(%)
中位数(min-max)	50.9 (36.8 - -66.5)	53.8 (39.5 - -68.8)	52.3 (43.2 - -64.3)	51.7 (42.6 - -64.5)	31-51
CD8 + T细胞淋巴细胞(%)
中位数(min-max)	24.1 (13.6 - -41.4)	22.5 (13.5 - -27.2)	20.8 (11.6 - -33.8)	22.2 (11.8 -31)	- 35
T细胞CD4 - CD8 T细胞(%)
中位数(min-max)	4.2 (1.9 - -7.7)	3.7 (1.6 - -6.3)	3.3 (1.5 - -5.4)	3.4 (1.7 - -6.5)	3 - 10.2
T细胞CD25 + T细胞(%)
中位数(min-max)	37.4 (24.4 -55)	38.6 (26.9 - -54.8)	40.6 (27.4 - -59.1)	39.5 (26.8 - -56.4)	22.9 - -44.9
CD4 + HLA-DR + T细胞CD4 + T细胞(%)
中位数(min-max)	9.1 (2.8 - -21.7)	9.4 (2.8 - -21.1)	8.5 (3.3 - -27.7)	8.3 (3.4 - -28.4)	做些
CD8 + HLA-DR + T细胞(CD8 + T细胞的%)
中位数(min-max)	23.5 (1.8 - -55.4)	18.6 (1.6 - -53.3)	18 (1.8 - -59.7)	21.9 (1.4 - -61.4)	做些
天真的CD8 + T细胞(CD8 + T细胞的%)
中位数(min-max)	16.5 (8.5 - -43.7)	22.1 (11 - 53.2)	16.6 (6.8 - -46.4)	18.7 (6.8 - -56.5)	28.4 - -66.7
CD8 +效应细胞CD8 + T细胞(%)
中位数(min-max)	31.2 (15.2 - -75.3)	28.1 (3.7 - -52.1)	29.7 (8.6 - -62.5)	30.9 (10.1 - -59.3)	7.4 - -24.6
CD8 + CCR5 +效应细胞CD8 + T细胞(%)
中位数(min-max)	9.3 (0.2 - -29.9)	6 (0.7 -26)	10.4 (1.2 - -25.6)	10.5 (1 - 31.5)	< 5.9
T细胞的调节性T细胞(%)
中位数(min-max)	6.2 (4.3 - -9.2)	6.9 (4.7 - -10.1)	6.9 (4.6 -10)	7.2 (4.5 -10)	2.8 - -7.2
亚群的HLA-DR + treg (%)
中位数(min-max)	25.1 (9.3 - -38.4)	28.2 (9.5 - -38.5)	25.7 (8.6 - -45.8)	26.6 (9.4 -46)	5.9 - -18.8
白细胞的嗜酸性粒细胞(%)
中位数(min-max)	4 (1 - 10)	3(鹿)	3 (- 6)	2 (6)	1 - 3
白细胞的中性粒细胞(%)
中位数(min-max)	63 (51 - 77)	68 (46 - 87)	68 (52 - 79)	67 (50 - 87)	55 - 75

中值(最小(最小)-麦克斯(最大))在fluorescence-activated细胞百分比排序分析(流式细胞仪)除了中性粒细胞和嗜酸性粒细胞计数(由显微镜微分血细胞计数)。用非参数测试统计分析如表所示3。


	弗里德曼	Wilcoxon符号秩检验
期样本	1到4	1和2	1和3	1和4	2和3	2和4	1和4

自然杀伤细胞	0.028	0.018	0.524	0.524	0.121	0.018	0.389
自然杀伤T细胞	0.003	0.003	0.08	0.194	0.268	0.058	0.233
双重否定T细胞	< 0.001	< 0.001	0.005	< 0.001	0.077	0.524	0.244
CD4 + T细胞	0.001	< 0.001	0.121	0.107	0.151	0.095	0.599
CD8 + T细胞	0.01	0.005	0.035	0.055	0.208	0.978	0.208
CD25 + T细胞	0.006	0.042	0.018	0.026	0.229	0.229	0.978
CD4 + HLA-DR + T细胞	0.039	0.002	0.454	0.561	0.169	0.173	0.303
CD8 + HLA-DR + T细胞	0.016	0.001	0.432	0.169	0.89	0.151	0.389
CD8 +幼稚T细胞	0.165	- - - - - -	- - - - - -	- - - - - -	- - - - - -	- - - - - -	- - - - - -
CD8 +效应细胞	0.013	0.007	0.804	0.561	0.121	0.073	0.524
CCR5 + CD8 + T细胞	0.001	0.041	0.454	0.169	0.083	0.007	0.208
调节性T细胞	0.006	0.005	0.003	0.003	0.584	0.359	0.588
HLA-DR + treg	0.05	0.847	0.151	0.005	0.169	0.055	0.083
补充CP	0.046	0.073	0.847	0.359	0.121	0.003	0.296
补充美联社	0.017	0.153	0.03	0.679	0.454	0.073	0.003
TGFβ	< 0.001	< 0.001	0.72	0.359	< 0.001	< 0.001	0.524
sCD30	0.004	0.004	0.454	0.561	0.107	< 0.001	0.326
嗜酸性粒细胞	0.062	- - - - - -	- - - - - -	- - - - - -	- - - - - -	- - - - - -	- - - - - -
中性粒细胞	0.744	- - - - - -	- - - - - -	- - - - - -	- - - - - -	- - - - - -	- - - - - -

血液样本:在(1),(2)一个小时后,结束时(3),结束后15分钟高清(4)。统计分析与弗里德曼测试和事后Wilcoxon符号秩检验。值≤0.003根据Bonferroni被认为是重要的。CP:补体的激活,经典途径;美联社:补体的激活,替代途径。不是测试由于无意义的弗里德曼测试。

3.2。小组反应性抗体、细胞因子和白细胞介素

克鲁斯卡尔-沃利斯检验,无显著性差异的所有提到的参数对面板活性抗体(0 - 5%、6 - 85%和> 85%)检测到Luminex技术(Immucor Dreieich,德国)经常移植前。

浓度的细胞因子和白细胞介素(TNF -α、il - 4、il - 6、il - 10和IL-17)在研究(表没有显著改变2- - - - - -4)。


	透析前	经过一个小时的透析	透析结束时	透析结束后15分钟	参考范围

TGFβ(ng / ml)
中位数(min-max)	23.71 (14.4 - -44.34)	13.47 (6.38 - -22.92)	20.58 (16.19 - -23.25)	20.68 (13.24 - -27.89)	18.3 - -63.4
sCD30 (ng / ml)
中位数(min-max)	80.1 (45.05 - -205.88)	84.45 (38.18 - -212.96)	88.67 (41.75 - -212.47)	85.96 (55.2 - -232.18)	7.7 - -60.5
经典途径(%)
中位数(min-max)	106.4 (86.7 - -124.8)	101.7 (80.6 -115)	104.4 (80.8 - -114.6)	103.9 (85.5 - -118.5)	69 - 129
替代途径(%)
中位数(min-max)	86.7 (54.4 -115)	84.5 (49.8 - -98.4)	78.2 (41.8 - -94.8)	87.9 (63.9 - -104.8)	30 - 113

中提到的制造商的指令(人类TGF -β1 Quantikine ELISA、研发系统;人类sCD30 ELISA, BioVendor;Wieslab惠CP310 Euro-Diagnostica;Wieslab惠美联社330年Euro-Diagnostica)。分钟:最低;马克斯:最大。用非参数测试统计分析如表所示3。

3.3。白细胞子集在流式细胞仪分析

CD16 + CD56 +的频率自然杀伤细胞暂时减少透析的第一个小时内从9.1到7.3% (ref。3 - 22%, )。随后,中值增加了11.6% ( )从第二到第四个样本。的百分比CD3 + CD16 +自然杀伤T细胞显著下降(类似1.9到1.6%,ref。2.1至13.7%, )没有进一步显著增加。此外,一个重要的常数中值下降的双重否定观察T细胞在整个观测期间(4.2 - 3.4%,ref。3 - 10.2%, )。

CD4 + T淋巴细胞显著增加( )从第一到第二个抽样(50.9至53.8%,ref。31日至51%, )。然而,CD8 + T淋巴细胞减少一个小时后,从24.1通过22.5% (ref。18 - 35%, )20.8%的透析会话( )。没有进一步的T细胞亚群的变化随着时间的推移。

对早期活化标记、CD25 + T细胞的平均增加不断在HD(37.4到40.6%,ref。22.9到44.9%, )。类似于CD4 + T细胞,辅助T细胞表达HLA-DR晚激活标记显著增加治疗的第一个小时内(9.1到9.4%,ref。5到25%, ,图1(一))。有趣的是,这种增长是伴随着减少HLA-DR + CD8 + T细胞的比例(23.5到18.6%,ref。5到25%, ,图1 (b))。但是,没有进一步显著变化的频率都可以看到子集。

(一)

(b)

(c)

(d)

(e)

(f)

图1

框块流仪分析外周血淋巴细胞(模拟),及(e)和sCD30之前(f)(1),(2)一个小时后,结束时(3),15分钟后常规血液透析(4)15个病人肾移植。每种情况的虚线说明参考范围。Wilcoxon符号秩检验:所有的结果划定;结果与被认为是重要的(Bonferroni调整)。

天真的CD8 + T细胞的中位数从16.5到22.1%参考值范围28.4 - -66.7%以下。没有这个程序能找到其他相关的改变。不论从第一个第二个抽样(32.1至28.1%, ,图1 (c)),CD8 +效应细胞的百分比高于适当的引用值(7.4 - 24.6%)。频率的中位数的碳碳效应细胞表达趋化因子受体5 (CCR5)类型增加(引用val。: < 5.9%)和从6 - 10.5%不等。在第一个小时,有从9.3下降到6% ( )其次是增加从第二到第四样例(10.5% )。

此外,调节性T细胞的百分比(亚)检测表面抗原的表达明显不断增加,在观察期间(6.2 - 7.2%,ref。2.8到7.2%, ,图1 (d))。此外,调节性T细胞激活的百分比(HLA-DR +)从25.1到28.2%是高于预期值5.9 (ref。18.8%)。比较第一个和第四个样本,典型的增加(25.1 - 26.6%,中值 )。

然而,在这项研究中没有重大改变CD19 + B细胞、CD4 + CD8 + T细胞、CD3 + T细胞CD4 + CD38 + T细胞、CD8 + CD38 + T细胞、CD8 +中央记忆T细胞、CD8 +效应记忆T细胞、CD8 + CCR5 +效应记忆T细胞,TH17细胞,天真的亚群,和监管记忆T细胞。

3.4。TGFβ和sCD30水平

TGFβ是在较低的参考范围(18.3 - -63.7 ng / ml)除了第二个样本之后一个小时的高清在浓度明显降低了从23.7到13.5 ng / ml ( )。随后,浓度显著增加从13.5到20.7 ng / ml /时间( ,表3和4和图1 (e))。

sCD30水平总是高于参考值范围(7.7 - -60.5 ng / ml)揭示显著增加在每一个时期从第一个第二个样本(80.1到84.5 ng / ml, )从第二到第四个样品(84.5到86 ng / ml, ,表3和4和图1 (f))。

3.5。补体系统

补充活动的水平是在古典的参考范围(min-max中位数:101.7 - 106.4%,ref。69 - 129%)以及替代途径(min-max中位数:78.2 - 87.9%,ref。30 - 113%)。

经典通路的活动开始后稍稍增加一个小时的高清,一直持续到十五分钟后透析(101.7至103.9%, )。减少机能活动的替代途径(表明补体激活消费)在透析会话本身(86.7至78.2%, )只是短暂的,其次是显著增加87.9%后15分钟内完成治疗 )。

没有明显差异在统计数据计算样本大小( )排除前肾移植患者(4与贪污function-three患者接受霉酚酸酯500每天两次,一个病人5毫克prednisolone-and移植肾切除术患者)。

4所示。讨论

在这个前瞻性研究中,我们首次研究了相关免疫效应与新polynephron高清膜引起的可能影响肾移植(图的结果2和表5(10- - - - - -14,16,18])。


	改变在高清	文学(评论)		膜

自然杀伤细胞	频率↓	Grooteman et al。14]	8	厘米,CA、PS
自然杀伤细胞	频率↓	目前出版(瞬态)	15	PN
自然杀伤T细胞	频率↓	目前出版(瞬态)	15	PN
CD4 + T淋巴细胞	频率↑	Grooteman et al。14]	8	厘米,CA、PS
		目前出版	15	PN
		Szczepańska et al。15]	12
CD8 + T淋巴细胞	频率=	Grooteman et al。14]	8	PS
	频率↓	Grooteman et al。14]	8	厘米,
	频率↓	目前出版	15	PN
	↓数量	Yoon et al。13]	21
激活标记(CD25、HLA-DR)	频率=	Grooteman et al。14]	8	厘米,CA、PS
	频率↑	目前出版(HLA-DR CD4 + CD25 + T细胞)	15	PN
	频率↓	目前出版T细胞(CD8 + HLA-DR +)	15	PN
调节性T细胞	频率↑	目前出版	15	PN
补体的激活	瞬态增加15分钟内	Girndt et al。18)(MAC)	14	PA, H
	瞬态增加C3a在30分钟	卢梭et al。11]	6	PS、钙、铜
		万利拉et al。12]	12	厘米,H, MC
		Horl et al。10)(所有:铜> S)
	瞬态增加C5a在60分钟	万利拉et al。12]	12	厘米,H, MC
	短暂的下降在60分钟	目前出版(替代&经典途径)	15	PN
TGFβ	瞬态浓度下降	目前出版	15	PN
TGFβ	瞬态浓度下降	Stefoni et al。16]	155年	H,潘、PS
sCD30	浓度↑	目前出版	15	PN

缩写: :透析患者的数量。膜:CA:醋酸纤维素;CM:铜铵;铜:cuprophan;H: Hemophan;主持人:改性纤维素;PA:聚酰胺;潘:polyacrylnitrile;PN: polynephron;PS:聚砜。 References: Grooteman et al. [14),Szczepańska et al。15),Yoon et al。13),Girndt et al。18),卢梭等。11],Varela et al。12],Horl [10],Stefoni et al。16]。

在淋巴细胞方面,一些前面描述的效果不能被发现在我们的病人。影响可以发现在我们的样本TH1、TH2细胞和TH17细胞(9,19]。这可能是由于我们的控制策略,细分细胞彻底,可能缺少一些影响。其他研究结果预期。我们演示了CD8 +效应细胞的频率增加,CD8 + CCR5 +效应细胞,HLA-DR +调节性T细胞,sCD30血清浓度以及天真的频率减少CKD5D患者CD8 + T细胞在外周血资格移植相比,参考范围(图2和表5)。

第一次,我们发现两相的课程与临时降低自然杀伤细胞、CD8 + HLA-DR + T细胞,补充替代路径功能,TGF的浓度β或沿着一个临时增加CD4 + T细胞和CD4 + HLA-DR + T细胞在一个透析会话。两相的过程可能与膜的biocoating关于两亲性聚醚砜膜材料的性质(20.)在第一个两个小时posttransplantation过程可能很重要。显然,芳香组可以包含硫醇的几种生物分子相互作用,羟基、羧基和氨基组只有几个(21]。白细胞子集的变化可能与细胞因子释放由裸膜,可以解释为一种释放现象自导隔间的淋巴组织(22]。

如前所述(23- - - - - -25),我们也观察到显著增加sCD30血清浓度和调节性T细胞的频率的增加以及减少双重否定T细胞。

一般来说,文献中给出的结果关于作文CKD5D患者的外周血白细胞contradictory-Daichou等人报道更高百分比的CD8 + T细胞与健康对照组相比(19],魏玛等人所描述的CD8 + T细胞数量减少(26],Bergstrom等人找不到CD8 + T细胞的频率上的差异(27]。

首先,我们展示的相对比例下降天真的CD8 + T细胞和CD8 +效应细胞的频率增加,HLA-DR + treg CKD5D病人之前高清。符合Litjens et al。28),我们还发现CD8 + CCR5 + T淋巴细胞的频率增加。

我们发现第一次下降的自然杀伤T细胞和自然杀伤细胞在治疗的第一个小时。减少描述的自然杀伤细胞只有三乙酸纤维素膜(14]。

双重否定T细胞(CD4 - CD8)促炎细胞自身免疫性疾病和相关的公差感应29日]。较低的频率在尿毒症患者描述30.]。在我们的研究中,CD4 - CD8 T细胞的比例已经接近较低的参考范围之前在HD高清,进一步降低。

移植排斥的结果被认为是一种自适应免疫反应主要基于T淋巴细胞,即。,CD4 + T细胞,对外国主要组织相容性复合物(31日]。然而,CD8 + T细胞的作用还没有被最终澄清(32]。此外,增加活化标记T细胞CD25和HLA-DR +,与移植排斥反应(33]。

在第一个小时中,我们发现增加CD4 + T细胞和CD4 + HLA-DR + T细胞激活。这种增长是伴随着减少频率的CD8 + T细胞和CD8 + HLA-DR + T细胞。同时,CD3 + T细胞表达的频率激活早期标记CD25增加在整个观察期。

关于CD8 + T细胞亚群,有一个在高清幼稚T细胞减少。这可能是基于激活和随后的微分效应或记忆细胞接触后过滤器。此外,我们观察到的频率的增加效应细胞CD8 +和CD8 +效应细胞的CCR5表达在细胞表面的迁移,是至关重要的淋巴细胞炎症的焦点(34和与移植肾功能丧失28]。然而,Szczepańska等人不能显示任何的频率差异CD8 + CCR5 + T淋巴细胞与健康对照组相比,和一个会话在透析过程中儿童HD (15]。

亚群的百分比显著增加在高清但仍在正常范围内。此外,有一个趋势增加的频率激活亚群在高清。总之,增加细胞一般被认为是负责移植排斥(CD4 + T细胞CD4 + HLA-DR + T细胞、CD3 + CD25 + T细胞、CD8 +效应细胞,和CD8 + CCR5 + T细胞)细胞中也略有增加,可能引起公差(亚群,HLA-DR + treg)。

我们还观察到一个两相的与减少古典补体激活的功能活动的第一个小时内治疗以及透析期间的替代途径,表明瞬态只有温和的补体激活。这种小效应的结果更好的生物相容性如今应用膜(10,18]。因此,毫不奇怪,我们的数据范围内的参考范围。

转化生长因子β与T细胞亚群的分化与慢性同种异体排斥反应,也(16,35]。正如前面所描述的Stefoni et al。16TGF),我们还发现低β水平透析患者明显减少30分钟后恢复治疗基底值完成透析后三个小时。

激活T细胞分裂sCD30从细胞膜23,36),认为高术前[23,24,36- - - - - -38和术后25,39,40)浓度与同种异体移植物损失相关联,即。在浓度超过100 U /毫升(23- - - - - -25]。按照文献[41- - - - - -43),透析期间sCD30浓度升高,进一步增加了会话。

可能是怀疑血液透析滤过的三个物理原则,对流,扩散渗透,可能导致免疫参数的观察到的变化在我们的研究中。然而,我们的病人的超滤率相对较低的中位数两升44),没有明显的中性粒细胞和嗜酸性粒细胞细胞计数的变化被描述在我们的病人。因此,血浓缩在细胞和分子的重要影响,即。,米acromolecules (>60 kDa: CRP, sCD30, and complement factors) or convection of middle size molecules (500-60000 kDa: TGFβ肿瘤坏死因子-α、il - 4、il - 6、il - 10和IL-17),可以忽略在我们的研究人群,没有修正关于执行的超滤率(44- - - - - -46]。消除中间分子是由肾脏患者肾排泄,即。在血液透析、稳态或通过对流。然而,60%的病人有残余排泄超过500毫升,明显降低通常在所有测量分子没有被观察到类似的分子量。相比之下,TGF的血清浓度β在研究过程中增加。

5。结论

CKD5D患者的研究中,频率的CD8 +效应细胞、CD8 + CCR5 +效应细胞,和HLA-DR +调节性T细胞增加,频率天真的CD8 + T细胞减少。sCD30-a生物标志物用于预测被拒绝的浓度升高在HD患者,进一步增加。高清增加调节性T细胞,减少CD4 - CD8 T细胞,并导致两相的课程与瞬时下降(自然杀伤T细胞,CD8 + HLA-DR + T淋巴细胞,激活补体系统,和更高的TGF浓度β)或瞬态增加(CD4 + T淋巴细胞CD4 + HLA-DR + T淋巴细胞)。我们的数据假设的结果的开始后的第一个小时高清中途发生的变化会显著。这个正常化,直到第四个小时。因此,我们认为不考虑短期肾移植前透析。进一步的研究将是必要的详细关注补充系统,biocoating,肾移植后随访这些病人。

缩写

CCR5:	碳碳趋化因子受体5类型
CKD5D:	慢性肾病阶段5透析
EDTA:	乙二胺四乙酸
ELISA:	酶联免疫吸附试验
高清:	血液透析
IL:	白介素
马克斯:	最大
分钟:	最低
PRA:	小组反应性抗体
引用范围:	的参考价值
sCD30:	可溶性CD30
TGF:	转化生长因子
亚群:	调节性T细胞
佛罗里达大学:	超滤。

数据可用性

和/或使用的数据集分析在当前研究可从相应的作者在任何时候以合理的请求。

伦理批准

研究伦理委员会批准的协议是莱比锡大学的(没有。365-14-17112014)。

所有的病人给他们书面知情同意参加。

信息披露

这里介绍的一小部分数据已被证明的海报在18日国会欧洲社会对器官移植和已发布为一个抽象移植国际30(增刊。2),524 (2017)。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

作者的贡献

公里,我们,FMR参与数据分析、解释,设计和编写的手稿。竞赛AB, HMH、可、SS、颗JB, AG)参与数据采集,分析,解释。乌尔里希袋和弗朗兹·马克西米利安Rasche贡献同样这项工作。

确认

我们感谢Heike Knaack女士(IKIT,莱比锡大学)和凯特琳·鲍尔女士(IKIT,莱比锡大学)为他们的优秀的技术援助。我们承认德国研究基金会的支持程序内(DFG)和莱比锡大学开放获取出版。

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