文摘
成釉细胞瘤的一组是良性的,本地咄咄逼人,复发肿瘤的特点是缓慢和渗透性的增长。钙粘蛋白和syndecan-1细胞粘附分子与各种肿瘤的行为,包括造釉细胞瘤。九十九造釉细胞瘤标本进行了研究;钙粘蛋白的表达,通过免疫组织化学方法评估syndecan-1。上皮和上皮syndecan-1高表达在管腔内的/腔的unicystic造釉细胞瘤比壁画unicystic造釉细胞瘤和固体/但囊肿造釉细胞瘤,而syndecan-1较高的基质表达壁画unicystic造釉细胞瘤和固体/但囊肿造釉细胞瘤。同步观察上皮和上皮syndecan-1之间;在所有情况下的表达与强度。有一个强烈的表达与肿瘤大小和复发之间的联系。钙粘蛋白的表达的评估确定的潜在攻击性和syndecan-1是重要的造釉细胞瘤变体。未来的研究需要了解这些标记物的表达与肿瘤侵犯。
1。介绍
成釉细胞瘤是一种上皮瘤起源于牙釉质被描述为一个肿瘤,通常unicentric,断断续续的在增长,和持久的1]。根据世界卫生组织(世卫组织)最近的分类(2),造釉细胞瘤被定义为一种良性上皮牙原性的肿瘤,肿瘤的特点是扩张,逐步增长,复发的倾向,如果不是完全移除。成釉细胞瘤分类如下根据他们的临床和组织病理学特点:固体但(SMA), unicystic (UAM) extraosseous /外围,和转移成釉细胞瘤;两种最常见的类型是SMA和UAM2]。SMA是一个侵略性的肿瘤复发率高,如果没有及时治疗;这个肿瘤的早期表现的特点是增长缓慢和痛苦的扩张,后来展品加速增长和一些并发症,如果经济增长没有控制可以是致命的。SMA有两个常见的组织病理学类型增长模式与预后无关(2]。UAM特点是缓慢的增长,这是一个囊性空腔,在不同类型的上皮可能发生扩展,即鲁米那,管腔内的(UAM-L / I),和壁画(UAM-M)。壁画组件显示攻击性行为,就像观察SMA (2]。
细胞粘附的损失中发挥着重要作用的肿瘤细胞入侵和经济增长的第一个事件发生在上皮来源的肿瘤,如造釉细胞瘤(3]。钙粘蛋白(适应型)是一个calcium-dependent上皮肿瘤细胞粘附分子表达与预后有关;减少或消除适应型表达式与进程有关,入侵,这些类型的肿瘤中预后不良(4- - - - - -7]。Syndecan-1是一个跨膜蛋白聚糖表达成纤维细胞和上皮细胞;它在许多生物过程中发挥着重要作用,如细胞骨架组织,信息粘连,cell-extracellular矩阵(ECM)附着力。Syndecan-1 (Syn1)介导的交互与ECM分子通过其硫酸乙酰肝素链和与heparin-binding生长因子、细胞因子、蛋白酶和蛋白酶抑制剂。这被认为是一个重要的维护结构蛋白(4,8]。Syn1主要定位在基底外侧表面上皮细胞基质中,偶尔成熟的上皮细胞(4]。的上皮表达Syn1 (Syn1E)研究了几种肿瘤;其表达式,它的范围可以从完全没有过度,已经与肿瘤相关的行为(9- - - - - -12]。的基质表达Syn1 (Syn1S)在纤连蛋白和ECM组织变化有关;此外,其表达与血管生成和提高内皮细胞的增殖和促进肿瘤细胞的增殖13]。在成釉细胞瘤,减少或终止Syn1E的表达与肿瘤进展和入侵,而Syn1S表达与细胞入侵,肿瘤进展和转移。
表达谱的适应型、Syn1E Syn1S已经单独评估在先前的研究12,14- - - - - -19]。然而,很少有研究对比适应型的表情,Syn1E, Syn1S在同一个系统中,一个更大的理解这些肿瘤的行为可以通过分析他们的表达谱。
2。材料和方法
2.1。病人
共有九十九名患者治疗成釉细胞瘤进行了分析;临床资料和石蜡块从口腔病理学服务获得大学牙科学院的共和国,乌拉圭。数据对年龄、性别、肿瘤定位、肿瘤大小、radiographical参数和组织病理学参数进行评估。组织病理学诊断的评估由两个有经验的病理学家在牙原性的肿瘤根据世卫组织的最新分类(2]。的情况下评估,有38例UAM-L /我和SMA和UAM-M 23例。
2.2。免疫组织化学
免疫组织化学分析,3μ米厚的部分是准备和安装在幻灯片poly-L-lysine对待。部分是在烤箱deparaffinized 60°C 30分钟,然后孵化二甲苯为5分钟。部分在分级酒精水化系列(100、90、70,50%)和蒸馏水清洗。揭开抗原表位,抗原进行检索与10毫米柠檬酸钠溶液,高或低pH值取决于每个抗体的特点。这个恢复技术进行微波压力罐的最大功率750 W两个5分钟周期,允许冷却至室温,用蒸馏水冲洗。内生与0.9%过氧化氢氧化酵素被封锁,其次是在蒸馏水冲洗和磷酸盐(PBS), pH值7.4。样本为45分钟孵化主要抗体适应型(克隆NCH-38 1: 100年,单克隆鼠标反,Dako,圣克拉拉,CA,美国)和Syn1 (cd - 138,克隆MIB 15日1:100年,单克隆鼠标反,Dako)。随后,部分与另一个生物素化的孵化anti-mouse / anti-rabbit抗体和链霉亲和素过氧化物酶复合物(LSA-B +标记streptavidin-biotin Dako) 30分钟。产品可视化使用3,3-diaminobenzidine-H2O2(Dako)。上皮组织的碎片被用作积极控制,和孵化主要抗体是省略了消极的控制。
2.3。率的表达式
适应型和Syn1E可以观察到细胞的细胞膜和细胞质。适应型的表达式和Syn1E计算由光学显微镜和显微照片获得了使用数码相机(奥林巴斯c - 7070)在四个领域沿着囊性肿瘤细胞更丰富的线条和墙毛囊。平均然后获得基于百分比的总和每个字段针对每种情况的评估。Syn1S表达式分析了肿瘤基质细胞和炎症细胞,使用相同的技术评估,对于适应型和Syn1E基质表达,不考虑炎症细胞的表达。
2.4。强度表达式
在相同的显微照片,表达强度的适应型和Syn1E也评估使用ImageJ细胞膜ImmunoMembrane插件(BioMediTech,坦佩雷,芬兰)。以前报道的技术进行Tuominen et al。(20.]。强度得分为负(0)时,在肿瘤细胞中膜强度表达式是负数或≤10%(图1(一)),它被列为阳性比例> 10%时根据强度是否弱阳性(1 +),适度积极的(2 +),或强烈积极的(3 +)(数据1 (b)- - - - - -1 (d)、职责)。数据1 (e)和1 (f)显示的积极控制表达式适应型和Syn1,分别。由于基质Syn1S的表达特点,其表达强度无法评估。
(一)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
2.5。统计分析
描述性分析描述临床特征。斯皮尔曼等级相关系数()是用来评估率和膜强度之间的关系表达式。克鲁斯卡尔-沃利斯检验是用来确定表达和临床特征的差异。的Mann-Whitney进行测试来确定两组之间的差异率的表达式。结果被认为是具有统计学意义 和等级相关系数()是归类为适度积极的( ),非常积极的( ),非常积极的( )。
3所示。结果
3.1。临床特征和的表达式
UAM-L /我和UAM-M更频繁地观察到在男性患者中,比例为1.2:1和2.3:1,分别;相比之下,SMA病例的性别比例是1:1。关于年龄,所有的类型都经常观察到病人< 30.4岁。34肿瘤被发现后地区的下颌骨,紧随其后的是下颌骨的前地区共有3例。单室的射线模式是最多发的共有54个cases-mostly UAM-L /我的肿瘤,而多腔的模式在SMA肿瘤更频繁。总共16例为未知的情况下,他们没有注册的医疗记录的时候。大小< 5.3厘米是最频繁,出现在相同的频率在UAM-L /我和SMA肿瘤;肿瘤大小> 5.3厘米显示类似的分布。只有7例复发,并确定在SMA(表的情况下1)。
适应型的表达之间的相关性,Syn1E, Syn1S和肿瘤大小和复发提出了表2。
3.2。表达定位
3.2.1之上。UAM-L /我
适应型和Syn1E细胞质中表达的肿瘤细胞肿瘤囊性上皮(腔),在管腔内的肿瘤细胞,并在细胞类似于星状网;最高的表达在肿瘤基底细胞和星状网(数字2(一个)和2 (b))。Syn1S存在于周围的肿瘤间质肿瘤细胞(图2 (b))。
(一)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
3.2.2。UAM-M
适应型和Syn1E在场肿瘤囊性上皮细胞的细胞质中,在管腔内的预测,和肿瘤群岛包含在囊壁。率最高的表达观察肿瘤基底细胞和星状网(数字2 (c)和2 (d))。Syn1S结缔组织中可观察到邻近肿瘤囊性上皮细胞和肿瘤上皮群岛包含在囊壁(图2 (d))。
3.2.3。SMA
适应型和Syn1E在场在肿瘤卵泡模式的岛屿和声带肿瘤上皮细胞的网状模式,主在肿瘤基底细胞和细胞类似于星状网(数字2 (e)和2 (f))。Syn1S结缔组织中可观察到接近岛屿和上皮肿瘤细胞(图的绳索2 (f))。
3.3。表达强度
适应型和Syn1E显示类似的表达水平(< 1%的差异);他们表达了对UAM-L /我的上级。此外,他们的表达水平明显不同(表只有在UAM-M样本3)。Syn1S表达式在SMA和UAM-M不同高< 5%的两个变体之间的,而最低的表情观察UAM-L /我样品(表3)。适应型和Syn1E 2 +的表达强度在所有情况下,用一个中度到高度的正相关系数(图3、表4)。
(一)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
4所示。讨论
成釉细胞瘤是本地咄咄逼人,复发,良性肿瘤与恶性转变成釉细胞癌的可能性(18]。UAM和SMA通常位于下颌骨的提升肢体,其次是身体和下颌联合。放射学,他们现在是定义良好的单室的肿瘤,在大多数情况下,与影响牙齿器官有关,有时显示根吸收和皮质穿孔(2]。世卫组织最近指南(2]表明,入侵囊壁(壁画入侵)成釉细胞的肿瘤细胞在UAM是一个重要的组织病理学因素,这种模仿行为类似发现在SMA (2]。
一般来说,有几个分子过程在成釉细胞瘤肿瘤恶化[21]。这些包括蛋白质与细胞粘附、细胞凋亡调控,细胞周期,细胞增殖,BRAF V600突变,肿瘤,血管生成,骨重建,ECM (22- - - - - -29日]。
在各种肿瘤细胞粘附分子改变,特别是恶性的,有利于发展,入侵,复发和转移3,30.]。适应型分子与肿瘤抑制功能;这些功能可能与细胞粘附的能力,因为在正常细胞生长和迁移时抑制细胞坚持另一个(30.]。适应型的损失在大多数上皮来源的肿瘤可能与攻击性,肿瘤侵袭和转移(4,30.,31日]。我们的结果表明,适应型的速率表达式是UAM-L /我最高的肿瘤。适应型表达高度UAM-L /我和UAM-M样本之间的相似,表明适应型表达可能与细胞粘附能力下降,因此,潜在的肿瘤细胞入侵囊壁。这种可能性可以由SMA的结果,其表达谱低于UAM-L /我和UAM-M。
Martinez-Martinez等。(19)报道,适应型的表达水平和B-catenin很低在成釉细胞瘤和成釉细胞的癌,与我们的结果一致。这表明适应型与肿瘤相关的行为是由于细胞粘附的损失。适应型表达细胞类似的观察星状网三个肿瘤变体包括在这项研究中,这可能证明,如图所示,佩雷拉et al。17),增加表达的适应型促进遥远的细胞之间的粘附,作为UAM-L /我观察到肿瘤。
Syndecans家庭的硫酸乙酰肝素蛋白聚糖表达表面附着细胞在许多不依从细胞。Syndecans由一个四口之家的成员;Syn1是最重要和最良好的。Syn1扮演主要角色在信息和ECM附着力,与各种heparin-binding生长因子,是一个重要的监管机构的细胞粘附和ECM分子(16,24,32]。Syn1已经报道,在肿瘤生物学作为一些恶性肿瘤的预后指标,其表达水平与肿瘤入侵有很强的联系,增殖,细胞粘附[12]。在头颈癌、减少或缺失Syn1表达式与攻击性和不良预后有关(14,25]。
我们的研究结果表明,Syn1E率表达式UAM-L /我价格高,与先前的研究一致的(12]。有趣的是,适应型和Syn1E有差异表达的< 1%;因此,作为在先前的研究26),可能的最小差异适应型和Syn1E表达在成釉细胞瘤相关的协调和监管之间的表达这两种蛋白质和同步增加或减少的表达与肿瘤细胞的粘附能力。几项研究相关同步减少适应型和Syn1E致癌作用的过程和使用它作为预后的指标26]。Syn1S表达与调控细胞生长,细胞增殖,与heparin-binding生长因子家族成员互动的能力,诱导血管生成,促进增长,和肿瘤恶化;它会导致恶性肿瘤的浸润和转移14,25]。
我们的数据表明,UAM-L /我肿瘤有凝聚力的细胞组织具有较低的入侵能力,导致更好的预后,与UAM-M肿瘤,显示较低内聚单元组拥有更具有攻击性的表型,导致骨再吸收,囊性增长,随后壁画入侵。SMA肿瘤比UAM侵略性肿瘤(2];我们的结果表明,UAM-L /我表现出更高的适应型和Syn1E表达式,但不是Syn1S,表达比SMA在较低水平。有趣的是要注意,UAM-M肿瘤被发现是非常类似于SMA。在我们的研究中,较低的差异观察Syn1S表达式UAM-M和SMA肿瘤之间,这可能表明,观察到的表达模式相似行为的相关UAM-M和SMA肿瘤;相反,UAM-L /我肿瘤显示更少的攻击性行为,符合世卫组织最近的指导方针,指出UAM与壁画显示入侵行为类似于SMA (2]。
我们没有找到任何联系临床特征,如性别、年龄、本地化和radiographical模式;然而,我们发现的表达Syn1S有点更高的男性,患者年龄< 30.4年,后下颌骨的地区,和多腔的射线照相模式,表明这些数据可能与肿瘤侵犯有关。影像学特征似乎与成釉细胞瘤的预后相关,随着多腔的射线照相模式被发现与复发的发生率更高(33]。在我们的研究中,多腔的射线照相模式是更频繁地与SMA有关,这变种是更频繁地与复发有关。因此,多腔的射线照相模式是一个重要的风险因素时,应考虑手术治疗,因为它可能与细胞相关的多腔的模式是入侵。
我们发现适应型和Syn1E复发性成釉细胞瘤的表达是最小相比,不再发生的成釉细胞瘤;虽然表达的差异是不高,这是重要的,尤其是Syn1E和Syn1S之间。这个结果可以表明,肿瘤入侵改变有关信息和cell-ECM交互,由细胞粘附分子(34];可能逐渐失去了适应型的表达和Syn1E以及逐渐增加Syn1S表达有关促进肿瘤细胞入侵基质,和获得自治细胞迁移能力和生存能力。这个假说是支持我们的研究结果显示,高表达的适应型,Syn1E, Syn1S在成釉细胞瘤≥5.3厘米大小比< 5.3厘米大小。这可能表明,成釉细胞瘤的生长较慢,并且不断在增长,这些细胞获得迁移和入侵能力,形成瘤巢与复发有关。
5。结论
在这项研究中,我们评估的临床、影像学、组织病理学发现九十九例成釉细胞瘤和有关这些数据的表达适应型,Syn1E, Syn1S。重要的是,我们发现这些蛋白的表达与射线照相模式和肿瘤大小有一个协会复发的重要危险因素。我们建立了一个可能的适应型和Syn1E表达式之间的关系在成釉细胞瘤;同步减少适应型和Syn1E表达被发现与高表达的Syn1S有关。这是一个潜在的因素这些肿瘤的侵犯行为。进一步的研究需要更多的成釉细胞瘤病例,应包括临床随访和适应型和Syn1 coexpression研究评估蛋白参与细胞增殖、凋亡、蛋白质和生长因子蛋白,以及参与骨重建和ECM交互。这可以帮助确定Syn1S表达式,同时减少适应型和Syn1E表达式也与骨重建的机制,肿瘤侵犯,和细胞永生。
的利益冲突
作者宣称没有利益冲突。