评估和Immunolocalization BMP4和FGF8在牙原性囊肿和肿瘤

文摘

生长因子如骨形态发生蛋白4 (BMP4)和纤维母细胞生长因子8 (FGF8)在器官形成中发挥重要作用,特别是在牙发生。他们还认为在肿瘤形成中的作用。因此,任何标准的行为和活动的差异会导致严重的异常包括牙原性囊肿和肿瘤。目前的研究工作研究BMP4的表达和FGF8在牙原性的肿瘤(OT)和囊肿以及开发牙细菌阐明他们的角色。牙齿器官各种牙原性的阶段,30 OTs包括固体但成釉细胞瘤(SMA, 10例),成釉细胞的纤维瘤(AF, 10例),牙原性的粘液瘤(OM, 10例),和牙原性囊肿:牙原性的角化(俄、10例)进行评估上皮和间质成分BMP4的表达和FGF8使用免疫组织化学。BMP4的上皮核表达最高的俄(9例)但是FGF8在SMA(10例)最高。BMP4的间质核表达(8例)( )和FGF8(9例)( 在所有OTs)在OMs明显高。生长因子都积极表现在牙齿发育的不同阶段。BMP4的表达和FGF8 corelates病态的增生性组件,说明可能在发病机制中的作用和发展。

1。介绍

牙原性的肿瘤(OTs)是一个独特的肿瘤组织,来自齿成形装置或其残余,因此发现只在下巴或相关的软组织1]。2005年,世界卫生组织(世卫组织)分类大致在良性和恶性和subclassified他们进一步基于组织的起源,即上皮、间充质,或两者兼而有之;这不过导致夹杂物和分类的牙原性角化(俄)keratocystic牙原性的肿瘤在组1肿瘤(2]。

最近,俄是解决状态,分为囊肿的范畴。根据组织学分类的OTs和牙原性的囊肿(2017),三个良性肿瘤被认为是在这项研究中,即固体但成釉细胞瘤(SMA) group1(上皮来源);成釉细胞的纤维瘤(AF)组2(混合血统);和牙原性粘液瘤(OM)从3组(间充质来源)和俄是包括在研究由于其激进的性质(3]。

OTs像任何肿瘤的发病机理是依赖于两个因素,肿瘤的启动因素和肿瘤恶化因素。基因表达这些因素在OTs表现出惊人的相似之处表现在牙发生(1]。俄起源于残余的牙板serre (rest)由于PTCH1失活,而激活嘘途径导致过度增生(3]。牙发生是一个非常复杂的过程监控的复杂的同源框基因及其信号分子之间的相互作用;声波刺猬(嘘),Wnt, BMP, FGF [4]。

骨形成蛋白(BMP)是转化生长因子(TGF的成员β)总科。有超过30种BMP和是众所周知的被称为信号分子,在细胞增殖起着至关重要的作用,细胞外基质生产随着分化的肿瘤组织(5]。BMP4扮演一个重要角色在Msx-1-dependent间充质为牙齿形态发生牙原性的信号,也是与表皮分化(6,7]。

纤维母细胞生长因子(FGF)执行具备干细胞等多种细胞过程,扩散,antiapoptosis。有18个成员,分组6亚科连同以下4受体(8]。FGF8在胚胎发生中扮演一个重要的角色,需要在牙发生的起始(9]。

牙原性的病理表现为广泛的分子变化。描述的两个因素在OTs很少研究和俄。研究这两个因素会导致更好的理解OTs的行为和俄为建立更好的病理评价流程和开发新的治疗方法。在这一前提下,我们进行了研究评价这两种生长因子的表达在OTs和俄而且与牙发生的不同阶段。

2。材料和方法

2.1。样本采集

40例牙原性的病态,10例为每个SMA,俄,房颤,OM,从六个不同的档案检索机构的印度北部:Teerthanker Mahaveer牙科大学和研究中心,莫拉达巴德( );口腔科学研究所,Bareilly ( );法里达巴德(Sudha Rustagi牙科大学和研究中心 );密拉特Subharti牙科学院( );苏伦德拉牙科大学和研究中心,Sri Ganganagar ( );和印度MedAid,诺伊达( )。部分从下颌化学流产胎儿的组织获得Teerthanker Mahaveer医科大学和研究中心的采购阶段牙发生:牙板,萌芽阶段,限制阶段,贝尔的阶段。三个部分每个3微米的厚度从福尔马林固定石蜡包埋组织。苏木精和伊红染色部分是用于诊断使用标准(2017)。两个部分获得poly-L-lysine-coated幻灯片和沾BMP4和FGF8使用免疫组织化学方法。一些额外的部分表皮样癌和乳腺导管癌病例包括作为控制BMP4和FGF8,分别。研究机构伦理委员会批准,Teerthanker Mahaveer牙科大学和研究中心,Teerthanker Mahaveer大学U.P.莫拉达巴德,印度。

2.2。免疫组织化学

deparaffinised部分补液后poly-L-lysine-coated幻灯片受到免疫组织化学过程。

2.3。BMP4

BMP4的抗体克隆用于检测GTX100875 (Genetex新竹市、台湾、多克隆抗体)。抗体是稀释的稀释1:100加1μl抗体99μl的雷诺阿红稀释®。抗原检索是由沸腾poly-L-ysine幻灯片的部分获得天后Decloaker抗原检索解决方案,BioCare DV2005 L2J(低pH值6.5),它是通过混合1毫升天后Decloaker 19毫升蒸馏水的压力锅在120°C 20 - 25分钟。部分被孵化与抗体室温湿度箱为1小时15分钟。抗体检测,徕卡Novolink™Novocastra聚合物合包# 7290 - ce是用作/方向。表皮样癌是用作积极控制和消极的控制没有初级抗体进行染色。

2.4。FGF8

抗体克隆用于检测FGF8 PA1216(博士德,,而CA,多克隆抗体)。lyophilised抗体的重组是0.2毫升蒸馏水添加到100年μ500 g抗体的产生μ克/毫升。重组抗体稀释的稀释1:200年收益率浓度为0.5μ在雷诺阿红稀释剂g / ml。抗原检索是由沸腾poly-L-lysine幻灯片的部分获得天后Decloaker抗原检索解决方案,BioCare DV2005 L2J(低pH值6.5),它是通过混合1毫升天后Decloaker 19毫升蒸馏水的压力锅在120°C 20 - 25分钟。部分被孵化与抗体室温湿度箱为1小时15分钟。抗体检测,徕卡Novolink Novocastra聚合物合包# 7290 - ce是用作/方向。乳腺导管癌是用作积极控制,和消极的控制没有初级抗体进行染色。

染色标本是由两个观察者根据4 x,然后按顺序检查10倍和40 x放大BMP4和FGF8表达在上皮和间质成分和细胞质或核反应进行评估。总共有五个大功率领域观察到。标本是得分的基础上,细胞染色的数量如下所述。

评分标准:(1)−/负面:没有染色的细胞。(2)细胞被染色+ /积极:< 20%。(3)+ + /强阳性:20 - 80细胞被染色。(4)+ + + /很强的正面:> 80%的细胞被染色。

2.5。统计评估

获得的结果受到统计评估使用SPSS 21.0版。应用卡方检验进行统计评估间比较俄和OTs但由于样本量较小的社会团体内部的对比生长因子评价数据的百分比计算。

3所示。结果

染色标本(数字1和2根据标准)得分。总结了结果表1,2,3。

3.1。牙发生阶段

牙板展示了很强的细胞质积极性BMP4和FGF8外胚层和间充质组件。

芽阶段牙齿器官显示轻微的核BMP4的反应性牙上皮和基质中较弱的染色。FGF8只是发现的反应性牙上皮细胞核和细胞质。

摘要上皮组件和间充质组件在帽阶段反应了FGF8轻度核和细胞质积极性。

贝尔阶段牙齿器官表现出更强的胞质反应这两个因素的上皮和间充质组件。

3.2。造釉细胞瘤

上皮组件的所有10个10例(100%)的SMA证明核本地化FGF8但只有7 10例(70%)无功BMP4,而间质不活性生长因子和演示了一个类似的结果。

3.3。俄

BMP4的核本地化在9的上皮成分被发现的10例(90%)的俄只有7 10例(70%)显示核本地化FGF8,而间质成分稍微活性BMP4, 8的10例(80%),比FGF8, 6 10例(60%)。

3.4。成釉细胞的纤维瘤

AFs显示类似的核和胞质表达BMP4的上皮成分,7的10例(70%),和FGF8, 6例10 (60%)。间叶细胞组件BMP4稍微活性,6 10例(60%)。

3.5。牙原性的粘液瘤

核表达FGF8, 9 10例(90%),比BMP4的都强,8的10例(80%),而胞质反应相当的增长因素。

3.6。BMP4 OTs和俄

核本地化的上皮成分被发现在俄最高(9 10例,90%),而胞质高反应性是AFs(5 10例,50%)。OMs的间质成分(8 10例,80%)最高核BMP4反应( ),而俄(7 10例,70%)更大的胞质反应。

3.7。FGF8在OTs和俄

SMA(10 10例,100%)核活性最高的上皮成分相同,而胞质高反应性是AFs(4 10例,40%)。OMs的间质成分(9 10例,90%)最高核FGF8反应( ),而俄(4 10例,40%)更大的胞质反应。

4所示。讨论

各种组件的牙原性的装置可以确定为起源OTs与俄的来源。他们可能由牙原性的上皮,ectomesenchyme或可能包括组件。OTs的发病机制和俄是一个复杂的过程,这在某些阶段,类似于牙原性的过程。牙发生是一个高度管制的过程监控监管基因和信号的因素。监管属于同源框基因家族和信号因素属于BMP, FGF, Wnt,嘘家庭4]。

我国主要监管机构的发展,organogenetic过程中起主要作用,再生过程和carcinogenetic过程(5,10]。通过调节目标基因转录,各种细胞过程控制这些生长因子,如增殖、分化、凋亡、迁移和血管生成。我国癌症细胞中扮演双重角色监管;他们移植增长在某些肿瘤和其他肿瘤表达下调增长10]。

BMP4属于家人和转化生长因子beta 1 (TGF BMPβ1)总科分泌的信号分子,在胚胎发育中起到至关重要的作用11]。这是一个关键调控分子在开发过程中执行一系列广泛的功能,包括中胚层诱导、肢体形成、牙齿发育、骨诱导和骨折修复。

BMP4导致各种癌症相关的表型,包括细胞生长、分化、迁移,入侵,血管生成,癌症发展和发展是至关重要的。它有一个双重角色proapoptotic和凋亡因子在不同的肿瘤。BMP4也是一个重要的细胞迁移和入侵和监管机构被诱导上皮间充质转变(EMT),授予对癌细胞的迁移,最终帮助转移(12]。BMP FGF轴保持基底角质细胞和扩散过程中起着重要作用表皮层理(7]。

fgf的家庭调节充足数量的发展过程,包括分支形态发生、大脑模式,肢体发展(13,14]。fgf受体及其控制范围广泛的生理功能,调节细胞增殖、存活、迁移和分化。Compagni et al。15)表明,fgf在肿瘤血管生成中起到至关重要的作用。FGF8在开发过程中扮演着关键角色,也在致癌作用。

FGF8最初称为androgen-induced生长因子(AIGF),因为它扮演了一个角色在androgen-dependent增长小鼠乳腺肿瘤细胞的生长线(16]。FGF8发现传授增殖和转移性结直肠癌细胞的能力(17]。它也负责维护祖地位和命运的决心的颅神经嵴细胞18]。Daphna-Iken et al。19]表明FGF8b的生产,和其他FGF8亚型,导致在乳腺肿瘤形成和唾液腺,卵巢表达导致间质增生。

在目前的研究中,SMA表达FGF8显示强于BMP4表达式。FGF8发现诱导牙原性的上皮细胞在牙发生的早期阶段(9]。钟等。20.)发现,FGF8在前列腺上皮细胞过度导致前列腺上皮内瘤变。我们可以得出这样的结论:FGF8表达增加可能在肿瘤的发生和发展中发挥作用诱导例SMA的牙原性的上皮。BMP4的SMA表达被发现依照研究熊本和Ooya21]。有一个减少的表达BMP4在颗粒细胞SMA Sathi等进行的一项研究。22]2007年,但没有颗粒细胞SMA病例包括在我们的研究中。BMP4的表达在细胞鳞状上皮化生acanthomatous类型的SMA是一个独特的发现。

在目前的研究中,BMP4表达强于FGF8在俄的情况下。增加BMP4的表达式在俄被发现依照研究金正日et al。23),但他们被高相反结果et al。24BMP4的差别),间接得出结论对这些信号由于Smad4的表达下降。BMP4负责发现基底细胞角化细胞的增殖能力7]。这项研究由Heikinheimo et al。25)表明,SMA显示一个牙原性的命运而俄显示鳞状上皮的命运。优惠的表达FGF8 SMA和BMP4俄在我们的研究很可能解释牙原性的鳞状上皮的命运,分别。

在我们的研究中获得的结果表明BMP4的表达和FGF8在房颤与等效稍微胞质反应,像BMP4的表达和FGF8铃牙发生阶段。温和的表达和相似之处的成熟阶段牙齿发育可以解释这个肿瘤和分化的懒惰行为/成熟的肿瘤细胞。从获得的结果得出了类似的结论et al。26),显示一个类似的表达FGF2在房颤和成釉细胞的fibroodontoma牙发生和组织分化阶段。

FGF8的表达和BMP4比得上稍微FGF8在OMs的反应性。免疫组织化学研究OMs有关生长因子相关的两个或两个非常稀缺。基于研究结果由莫利纳et al。27),表达VEGF-A和ORM-1可能与血管生成和肿瘤相关的结构粘度在OMs可能影响肿瘤的生长。然而,有限的数据表达upregulation FGF8在英语文献检索发现myxoinflammatory成纤维细胞的肉瘤(28)和其他一些肿瘤(14,17,19]。FGF8还发现有一个协同作用与VEGF在前列腺癌(29日]。结果表明FGF8之间可能的关系开始,进展及其与其他因素的相互作用在OMs的发病机制,这需要进一步的证实。我们可以得出这样的结论:BMP4和FGF8 OM的表达增加可能负责传授积极的自然。

总的来说,BMP4的反应被认为是最高的在俄当考虑上皮和间质成分在所有肿瘤,但在OM间质反应活性最高。所有SMA的上皮成分显示反应FGF8,而OMs的间质反应活性最高。在所有肿瘤中,整个反应在房颤FGF8低相比其他肿瘤,虽然房颤有显著上皮细胞质BMP4的积极性。

我们的结果表达式BMP4的SMA是矛盾的高et al。30.];他们从研究中得出SMA为BMP单克隆抗体但不反应的阳性组2和组3 OTs。他们认为这个表达式在硬组织形成的作用;然而,新角色BMP4基因在肿瘤发生和发展已经被其他研究人员阐明现在BMP4的功能已不再局限于硬组织形成(30.]。BMP4的表达和FGF8在SMA和俄在本研究被皮门特尔(按照研究31日2015年)。

BMP4和FGF8被发现是积极的在不同肿瘤上皮和间质成分的不同程度,表明它们参与上皮和间充质相互作用通过旁分泌和自分泌机制(12]。

研究表明BMP4抑制细胞生长在体外和体内,同时能够诱导迁移,入侵,EMT。双重角色使它一个有趣的生长因子,这或许可以解释肿瘤的侵略本性喜欢OM和俄10]。此外,表达BMP4的角质化组件在俄和acanthomatous SMA在鳞状分化可能表明他们的角色。

过度fgf的上皮细胞通过自分泌引起致癌信号循环,这可能澄清oncogenetic变化发生在牙原性的上皮成分导致SMA的发病机制。

这两个因素的反应性降低房颤的情况下,相比其他牙原性的病态,或许可以解释肿瘤的懒惰行为相比,不同的肿瘤。

总之,结果表明BMP4和FGF8表达在不同牙原性的囊肿和肿瘤有不同强度根据他们的预期行为。更激进的病态生长因子的表达式可能会建议一个类比牙发生增殖阶段。与温和的病理的临床过程,一个较小的表达式观察生长因子可能被认为与牙发生的不同阶段。结果也表明BMP4和FGF8可能牙原性疾病的发病机制中扮演很重要的角色,而且调节他们的临床行为,这需要进一步的基因和蛋白质组学研究样本量较大,为了更好地理解这些元素参与这些疾病。

数据可用性

使用的数据来支持本研究的发现可以从相应的作者。

信息披露

目前的研究提出了作为一个海报题为“比较评估BMP4和FGF8在牙原性的肿瘤”在第18届国际大会在口腔病理学和Medicine-XXV会议的印度口腔颌面病理学家协会会议上,2016年9月,印度钦奈。它被授予二等奖科学演讲的内容和质量。

的利益冲突

国家没有利益冲突,作者仅负责内容和论文的写作。

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