罗丹明123是评价长春碱耐药CHO细胞p -糖蛋白介导的多药耐药的合适荧光探针吗?

摘要

细胞耐药涉及多种机制，如P -糖蛋白(P - gp)过表达、动力学和代谢静止，或细胞内谷胱甘肽水平的增加，限制了癌症治疗的有效性。据报道，阳离子染料罗丹明123 (Rho123)外排的功能评估准确地揭示了耐药表型。为了研究细胞耐药，我们通过多步筛选获得了一个CHO‐K1衍生的长春碱耐药细胞系。该细胞系(CHOVBR)与针对P - gp内部结构域的单克隆抗体(MAb) (C219)反应性高，且Rho123外排活跃，通过平行流式细胞术和荧光分析显示。然而，在类似的实验条件下，药物敏感的亲本细胞系CHO‐K1(以及成髓细胞KG1和KG1a细胞系)也能够泵出Rho123。Western blot分析证实，这些CHO‐K1亲代细胞对C219单抗的反应性非常低。长春碱和维拉帕米都抑制CHO‐K1细胞中的Rho123外排，但对CHOVBR培养无影响。同样，剥夺长春碱一个月也不会影响这些细胞的Rho123外排。我们的结果表明，P - gp的活性似乎是必要的，但并不足以产生耐药性，并且基于Rho123的耐药功能分析应该对每个细胞实验模型进行评估。

分析细胞病理学

罗丹明123是评价长春碱耐药CHO细胞p -糖蛋白介导的多药耐药的合适荧光探针吗?

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