文摘
背景。在兽医,三人葡萄球菌物种是特别重要的特定疾病的主要原因;金黄色葡萄球菌(乳腺炎在反刍动物,马botryomycosis和家禽中熊的脚),美国hycus(猪渗出性表皮炎),美国的中间部(犬脓皮病)。这种疾病条件造成的葡萄球菌家禽中随地点、路线和诱发因素包括伤口的战斗/同类相食,基于病毒感染的免疫抑制或寄生虫侵扰,饲养条件差(拥挤)。本研究的目的是分离和识别葡萄球菌spp从鸡肉和鸡垃圾和人员在养鸡场和确定抗菌药物敏感性的隔离。方法。看似健康的鸡进行了横断面研究,农业人员、和鸡肉窝在亚的斯亚贝巴的家禽农场,埃塞俄比亚。共222个样本组成的101泄殖腔拭子,90气管棉签,17汇集垃圾棉签,7鼻拭子,和7收集池的手,引导拭子从六个农场和检查的存在葡萄球菌物种。抗菌素耐药性与抗菌药物10后也进行了推荐的标准程序。结果。总体的比例葡萄球菌是64/222 (28.83%)。隔离,40/64(62.5%),11/64(17.2%),3/64(4.7%)和10/64 (15.6%)金黄色葡萄球菌,美国hycus,美国的中间部分别,coagulase-negative葡萄球菌(中枢神经系统)。只有一个孤立的金黄色葡萄球菌是所有抗菌素容易测试。10抗生素检测,隔离了抵抗青霉素G最高(96.9%),其次是四环素(78.1%)、阿莫西林、红霉素在同一水平(65.6%)。相反,隔离非常容易环丙沙星(95.3%),其次是Sulphamethoxazole-trimethoprim (85.9%)。64隔离,61/64(95.3%)对三个或更多抗菌素测试。的隔离,38/40 (95%)金黄色葡萄球菌,10/11 (90.9%)美国hycus3/3 (100%)美国的中间部,10/10(100%)的中枢神经系统表现出多药耐药性。结论。本研究显示相当大的比例葡萄球菌spp鸡垃圾和农场工人与耐药的一个潜在来源葡萄球菌物种,更重要的是多药耐药性菌株。分离株的分子特性进一步研究将基本确定耐药基因和耐传播动力学的建立流行病学联系葡萄球菌禽类和人类之间的物种。
1。背景
葡萄球菌是兼性厌氧,non-motile革兰氏阳性球菌,通常形式似的集群(1,2]。在人类和动物,许多葡萄球菌物种共生的皮肤和粘膜表面如上呼吸道,消化道,泌尿生殖系统(3]。除了广泛分布,葡萄球菌可以很容易地传播之间不同的动物物种,人类和动物之间的关系。感染的来源主要是受污染的食品、水和设备,航空公司和临床感染人类和动物,动物和环境的拥挤在一起。描述了各种传播途径包括直接,通过手接触排泄物或接触无生命的对象(污染物),摄入受污染的食物和水,气溶胶,通过向量(4,5]。
葡萄球菌中,一些研究发现最致病性LA-MRSA隔绝猪,牛肉,牛犊,和乳制品农场和这些职业接触者家畜,如农民、兽医或屠宰场工人和其他人员接触牲畜(6]。虽然在集约化畜牧家禽中起着重要作用,只有有限的研究可以在隔离葡萄球菌从家禽和家禽起源供人类食用的食品。一般在动物和人类都是葡萄球菌感染与抗菌药物治疗,最常见的β内酰胺抗生素。这些抗生素对金黄色葡萄球菌的最初是非常有效的,但是β-lactamase-producing葡萄球菌隔离出现在1940年代中期,在几年内及其患病率急剧增加(7,8]。葡萄球菌生物,特别是金黄色葡萄球菌菌株,已知生产beta-lactamases和获得性耐药基因的移动元素,质粒、转座子可能发挥了重要作用在多重耐药的出现9]。在埃塞俄比亚,很少有研究报道有关葡萄球菌分离和鉴定从家禽和家禽农场。因此,本研究的目标是分离和识别和评估的药敏模式葡萄球菌spp从鸡垃圾和家禽农场人员在亚的斯亚贝巴。
2。材料和方法
2.1。研究区域
这项研究是在亚的斯亚贝巴进行的。亚的斯亚贝巴的首都和管理中心是埃塞俄比亚联邦民主共和国。目前,有10个subcities”Kifle Ketemas“在亚的斯亚贝巴城市政府划定地理的基础上设置,人口密度、资产和服务提供者的分布,方便政府(10]。它位于北纬9°3′和38°43′东纵向。是在埃塞俄比亚的中央高地海拔2400 m.a.s.l。它每年平均降雨量1800毫米。年平均最高最低气温26°C和11°C,分别整体平均为18.7°C。最高温度达到5月。主要从6月到9月,雨季延伸。它有一个相对湿度从70%变化到80%在雨季和旱季期间40%到50%。亚的斯亚贝巴覆盖了54000多的土地平均人口超过300万11]。
2.2。研究设计、样本和样本
横断面设计用于生成所需的数据共222个样本,收集了看似健康的随机奇异的鸡。样本类型的泄殖腔和气管拭层和肉鸡,汇集垃圾从每个农场和鼻拭子和汇集的手,引导拭子从农场工人。
一个消息灵通的口头同意了从农场老板和工人。泄殖腔和气管拭子样本收集到一个螺丝封顶试管包含10毫升的缓冲蛋白胨水作为传输媒体。每个样本的标签提供必要的信息,包括取样日期、类型的样本,样本的来源(农场),和识别的动物。最后,样本正确包装在一个冰盒、运输学院微生物实验室的亚的斯亚贝巴大学的兽医和农业Bishoftu,细菌学的分析。
2.3。分离和鉴定
国际标准化组织ISO 6888 - 3:2003,用于隔离和标识葡萄球菌物种从拭子样本。循环完整的pre-enriched样品条纹在血琼脂平板(BAP)富含7% heparinised绵羊血液和孵化的37°C在有氧条件下24 - 48小时之内。盘子被检查的存在葡萄球菌菌落形态特征的基础上(奶油、淡灰色的白色或黄色的殖民地)和溶血的模式。假定殖民地进一步亚文化在营养琼脂板在37°C(午睡)和孵化24 - 48小时之内获得纯粹的殖民地。纯粹的殖民地被转移到营养琼脂偏和储存在4°C进行进一步的生化和药敏试验。葡萄球菌和物种的识别任务是完成基于KOH测试、革兰氏染色法,过氧化氢酶试验、氧化和发酵试验、糖发酵(甘露醇和麦芽糖)测试,凝固酶试验(12]。
2.4。抗菌药物敏感性试验
无菌拭子的标准化悬挂浸入细菌,和多余的液体是表示按下和旋转拖把坚决反对的内部管。拭子是有三个方向,不断刷穆勒辛顿琼脂,和接种板块被允许站3 - 5分钟。硬盘被放置在琼脂表面用无菌钳和轻轻按压的无菌钳,确保完成与琼脂表面接触,和盘子孵化耗氧在37°C盘16 hours-18时间除了万古霉素24小时。抑菌圈直径的测定和价值观得到临床实验室标准研究所(13]。
2.5。数据管理和分析
生成的数据是存储在Microsoft Excel和分析使用SPSS软件版本20。描述性统计等比例、比例和频率分布来计算一些数据。卡方检验(χ2)是用来比较样本来源和类型。
3所示。结果
222个样本的检查,64例(28.8%),(95% cl: 28.12 - -29.54)是积极的葡萄球菌物种,4/22(18.2%),21/59(35.6%),10/28(35.7%),14/62(22.6%),11/23(47.8%)和4/28(14.3%),双相障碍,欧盟,嗯,SA和TE农场,分别是积极的葡萄球菌物种。有统计上显著差异的隔离观察葡萄球菌不同农场( )。
葡萄球菌是独立于4/28(15.69%)和58/194(31.71%)的样品从笼子里的鸟和深层垃圾系统,分别。隔离的葡萄球菌样本层(Bovans布朗)10/57(17.54%),45/134(33.58%),7/1(741.18%),和2/4肉鸡(14.28%)的样本,垃圾,和农场工人,分别是积极的葡萄球菌。没有明显关联隔离率和住房制度( )或示例源( )(表1)。
总数的64/222 (28.8%)葡萄球菌隔离,33/101(32.7%),22/90(24.44%),7/17(41.2%)和2/7(28.6%)从泄殖腔拭子,气管拭子,汇集垃圾拭子,分别和鼻拭子农场的服务员。没有发现隔离池的手,引导拭子的农场。没有统计上的显著差异葡萄球菌隔离不同的样本类型(值= 0.225)(表1)。
222个样本的检查,金黄色葡萄球菌,美国hycus。美国的中间部和中枢神经系统中发现40(18.01%),11(4.95%),3例(1.4%),10例(4.5%),分别为。隔离,金黄色葡萄球菌40/64(62.5%)是最主要的紧随其后美国hycus11/64(17.2%)和中枢神经系统10/64(15.6%)、最后美国的中间部3/64 (4.7%)。金黄色葡萄球菌是与世隔绝的农场农场双相障碍的患病率最高,19/59(32.2%),最低农场SA, 1/23 (3.4%)。其他葡萄球菌物种,美国hycus只是孤立的从三个农场,BD 2/59(3.4%),欧盟3/28(10.7%),和SA 6/23 (26.1%);美国的中间部和中枢神经系统也孤立从三个类似的农场,欧盟,嗯,和SA)与1/28 (3.6%),1/62 (1.6%),1/23 (4.3%)美国的中间部,4/28(14.3%),3/62(4.8%),分别和3/23(13%)的中枢神经系统。有统计差异显著的分离和鉴定葡萄球菌物种不同农场除外美国intermidius( )(表2)。
两种类型的住房系统(笼和深窝),34/194(18.6%)和4/28(14.3%)的深窝和笼型住房制度是积极的金黄色葡萄球菌,分别,但年代。hycus,11/194 (5.7%),美国的中间部,3/194(1.6%),中枢神经系统,10/194(5.2%)只与深层垃圾住房制度,并没有统计上的显著差异葡萄球菌物种之间的隔离和确定住房制度,因为P所有物种的价值是(值> 0.05)(表2)。
在年代taphylococcus物种,金黄色葡萄球菌所有样本来源隔绝,烤焙用具(17.9%)、层(17.5%)、垃圾(23.5%),和人员(14.3%)。这两个美国hycus和中枢神经系统相同的结果(6.7%)从肉鸡孤立;年代。中间部只有隔绝肉鸡(2.2%)。没有统计上的显著差异葡萄球菌物种之间的孤立和识别不同的样本来源(所有物种)(表中值≥0.052)。所有葡萄球菌物种隔离不同样品类型,但没有人确定池的手,引导棉签的农场。金黄色葡萄球菌最高(28.6%),鼻拭子和泄殖腔拭子中最低(12.9%)。金黄色葡萄球菌4 (23.5%)。美国hycus2(21.8%),中枢神经系统1(5.9%)从垃圾分离,但是美国的中间部不是。美国的中间部只有从泄殖腔拭子中分离出来,3/101 (3%)。没有观察到显著关联葡萄球菌物种隔离不同的样本类型除了中枢神经系统( )(表2)。
所有隔离(64)葡萄球菌检测敏感性测试10抗菌光盘。使用抗菌素的药效比较表明,CIP和SXT是最有效的抗生素敏感性的比例为95.3%和85.9%,分别。相反,P和TE显示最穷的功效(易感性)或高电阻对葡萄球菌分离株为96.9%和78.1%,分别为(表3)。
一切积极的样本葡萄球菌物种,金黄色葡萄球菌(40),美国hycus(11),美国的中间部(3),中枢神经系统(10)进行敏感性测试。隔离的38/40 (95%)金黄色葡萄球菌,10/11 (90.9)美国hycus,10/10(100%)的中枢神经系统,3/3 (100%)美国的中间部三个或更多阻力抗菌素,1/40 (2.5%)金黄色葡萄球菌和1/11 (9.1%)美国hycus显示monoresistance,只有1/40 (2.5%)金黄色葡萄球菌是所有抗菌素容易测试。金黄色葡萄球菌是高度耐药(95.0%)的P和VA和TE(72.5%),和高度敏感(97.5%),分别为(87.5%)和CIP和SXT。美国hycus显示更强的抵抗力(100%)P和高度耐药性TE (81.8%);和更大的敏感(100%)SXT(90.9%)和高度敏感CIP和稍显敏感(63.6%)VA和NA。同样的,美国的中间部显示更大的阻力(100%)P, AML, TE,和S,但更大的敏感性(100%)是在弗吉尼亚州。此外,中枢神经系统表现出更强的抵抗力(100%),P和更大的敏感性(100%)CIP(表4)。
64葡萄球菌的隔离,只有一个(1.56%)隔离(金黄色葡萄球菌)容易受到所有测试抗菌药物,而两个(3.13%)被发现monodrug耐药。多药耐药性在61年三个或更多观察抗菌素(95.31%)的隔离(表5)。
4所示。讨论
葡萄球菌种虫害严重细菌在禽流感疾病的病因学,但对家禽中的细菌的存在环境,如在家禽粪便和家禽的房子空气据萨利赫et al。14]。现代家禽行业生产市场化的肉鸡在不到六个星期。这个成就已经通过遗传选择提高喂养,和敏锐的健康管理实践包括使用抗生素作为治疗药物治疗细菌性疾病集约农业系统。抵抗常用抗生素已观察到的细菌存在于家禽以来这些家禽中抗菌药物的介绍(15]。
共有222个样本,64(28.8%)被发现是阳性葡萄球菌物种的发现低于Modestas et al。16报告71%葡萄球菌的物种在考纳斯从家禽产品,立陶宛,但高于15.2%葡萄球菌的物种报道Masdooq et al。17从病原菌与家禽在尼日利亚的呼吸道疾病有关。
总数的隔离,发现62.5%的人金黄色葡萄球菌这是高于以前的工作的18]报道的隔离金黄色葡萄球菌(23.53%)从卵黄囊感染(脐炎)Kombolcha家禽农场,埃塞俄比亚,19报告20.5%金黄色葡萄球菌从鸡在乔斯,尼日利亚。此外,目前的发现显示的患病率金黄色葡萄球菌(62.5%),美国hycus(17.2%),美国的中间部(4.7%)几乎是相同的有2%,而中枢神经系统(15.6%)。在前面的研究在摩洛哥,据报道,金黄色葡萄球菌(40%),葡萄球菌中间部(2%)和葡萄球菌hyicus(4%)远低于54%(即。,40%,4%,2%,54%)的结果(20.在摩洛哥。其他观察也报道了21)的患病率为46%金黄色葡萄球菌当然从家禽产品在埃及是低于目前的研究价值。
样本收集的肉鸡、蛋鸡、垃圾,和农场人员,45(33.58%),10例(17.54%),7(41.18%)和2(14.29%),分别被认为是积极的葡萄球菌物种。同样,萨利赫et al。14报道称,普遍存在的葡萄球菌在烤焙用具是32%相比较,我们发现在肉鸡(33.58%)。此外,他们已经检测到35%葡萄球菌物种层,远高于目前的结果(17.54%)。在我们的研究中,金黄色葡萄球菌从肉鸡和分离层是17.9%和17.5%,分别,这是远低于的发现22报告50.89%金黄色葡萄球菌从肉鸡在伊拉克。同样,目前发现的金黄色葡萄球菌从垃圾(23.5%)低于的发现23在喀土穆州]报告33.3%。在目前的研究中,检测金黄色葡萄球菌从鼻拭子(28.8%)高于的发现24从鼻拭子报告3.61%的家禽农场工人在伊朗;然而,检测隔离的气管拭子(23.3%)远低于的发现25),85%的报道金黄色葡萄球菌从气管拭子。变化检测的隔离可能来自几个因素;实验室的诊断能力的变化可能会因国家而异,地理差异,品种的变化,管理实践等。
在这项研究中,95.0%年代。葡萄球菌隔离是耐青霉素g的一项研究还显示一个类似的发现,96.7%金黄色葡萄球菌被发现是耐青霉素G (26]但略低于100%的抗性报道Otalu et al。27]。在这项研究中,100%的阻力对青霉素G记录美国hycus,中枢神经系统显示最高的阻力。这一发现是一致的20.]从牛奶和乳清在摩洛哥报告了类似的结果。因此,结果表明,多数抗菌素耐药性金黄色葡萄球菌和中枢神经系统的分离可能是由于生产的β-lactamases并可能携带台面式晶体管染色体基因负责生产青霉素结合蛋白改变PBP-2a所显示(15]。
总数的隔离(64)进行药敏试验,61/64(95.3%)已经开发出多药耐药性(耐三个,超过三个抗菌素)。盛行的多药耐药性之间的隔离在当前研究中注明过度或不适当的使用抗生素。这可能是连接到抗菌素使用商业家禽设置这一事实更可能是比小农场的监管。此外,兽医和家禽的农民普遍使用这些抗菌素prophylaxes、生长促进剂,或不准确的剂量不合格人员可以给生病的羊群的可能结果报道的高水平的电阻(25)进行抗菌耐药葡萄球菌从鸡迈杜古里,尼日利亚,同意目前的发现耐多药。
5。结论
目前的研究表明,的结果葡萄球菌是生物之一,广泛分布在研究区家禽养殖场。在这项研究中,共有222个样本检查和处理,和64年(28.83%)葡萄球菌被孤立的金黄色葡萄球菌是最主要的一个,40(62.5%),即使很少或根本没有比较报告在埃塞俄比亚。药敏测试的葡萄球菌隔离在这个研究表明,61/64(95.31%)的隔离,几乎都是多药耐药性(三个,超过三个抗菌素测试),这是一个令人担忧的进一步的研究。因此,进一步的研究应该进行大规模找到感染源和患病率之间的关系找出contaminati的可能来源在与葡萄球菌物种,应该定期进行药敏试验确定的发展抵抗最常见的应用抗生素。
数据可用性
获得的数据可以从相应的作者。
的利益冲突
作者宣称没有利益冲突。
作者的贡献
Fufa Abunna构思和设计实验,试剂和材料。Biyansa Adugna进行了实验,分析和解释数据,写论文。Hika Waktole进行实验。Takele b凝灰岩的构思和设计实验,进行实验,造成试剂和材料。丁卡阿雅拿的构思和设计实验。芬达d Gutema和编辑文章中写道。Reta d Abdi构思和设计实验,进行实验,分析和解释数据,造成试剂,材料,分析工具或数据。
确认
作者要感谢亚的斯亚贝巴大学副总统办公室研究和技术转移资金。作者也想感谢家禽农场主人为他们的合作和人员。