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体积 2021年 |文章的ID 8818308 | https://doi.org/10.1155/2021/8818308

答:说明,m . Hair-Bejo Elawad a·侯赛因Zunita扎卡里亚, 失活的沙门氏菌enteriditis噬菌体类型在鸡和灭活产品的安全性和有效性”,兽医国际, 卷。2021年, 文章的ID8818308, 15 页面, 2021年 https://doi.org/10.1155/2021/8818308

失活的沙门氏菌enteriditis噬菌体类型在鸡和灭活产品的安全性和有效性

学术编辑器:安东尼奥Ortega-Pacheco
收到了 2020年5月05
修改后的 2021年3月20日
接受 2021年04月01
发表 2021年4月13日

文摘

本研究进行灭活沙门氏菌enteriditis噬菌体类型(SE pt)的安全性和有效性并确定灭活SE pt鸡。SE pt 1、3、6, 7, 35是灭活和接种(0.20毫升)124只鸡分成6组(CV1、CV3A CV6A, CV7, CV35,和CV0控制)。抽样进行接种后14天(π)。八只鸡从14天每组分离π为口头挑战0.20毫升/鸡(1010cfu / 6毫升)SE pt和指定CV1C CV3AC, CV6AC, CV7C CV35C, CV0C控制鸡。天7和14 postchallenge (pc),从每组4只鸡牺牲了抽样。没有显著差异在不同群体之间的体重。在挑战组,没有显著的不同组织之间的联系和隔离沙门氏菌在7和14天的电脑。有意义(p< 0.05)在隔离沙门氏菌当CV0C组与其他组的挑战。意义之间没有观察到不同组织对感应的显微结构变化。意义没有观察到7个人电脑和天到第14天电脑计分病变引起的。临床症状和病变总值也记录下来。应用ELISA。只有在CV3AC集团平均抗体效价是1359天14个人电脑。结论是灭活SE pt 3和6是安全的和有效的保护沙门氏菌enteriditis感染鸡。

1。介绍

人类感染由于沙门氏菌血清被认为是主要的全球疾病负担。沙门氏菌血清是一个无处不在的物种,包括超过2600种不同的型。论文可以分为typhoidal和nontyphoidal型沙门氏菌(nt)型1]。然而,禽类产品,作为车辆沙门氏菌,在传输中发挥重要作用的微生物对人类和动物得到巨大的经济损失。在欧盟成员国和美国,是记录chicken-borne的发生沙门氏菌病在人类介于15.7%和85.0%之间(2]。

农场控制措施,限制污染的鸡蛋沙门氏菌,由严格的农业生物和常规化学净化(3),防止胃肠殖民主机的方法包括添加有机酸饲料和水,使用益生菌和竞争排斥产品,和疫苗接种3]。接种疫苗的应用,连同其他控制措施,是一个重要的战略来减少沙门氏菌人类感染的风险,从而减轻食源性疾病(4]。

已经开发出许多类型的疫苗预防沙门氏菌感染,如减毒活疫苗疫苗引起细胞和体液免疫反应,但仍然存在的问题(4]。灭活疫苗可以提供的鸡免疫抑制沙门氏菌殖民的器官,减少脱落在粪便中微生物5]。因为灭活疫苗构成一种知名的有效疫苗,失活沙门氏菌enteriditis将大大有助于疫苗的发展控制的马来西亚隔离沙门氏菌enteriditis。这项研究的目标是不同的灭活沙门氏菌enteriditis噬菌体类型隔离在马来西亚和确定灭活单一的安全性和有效性沙门氏菌enteriditis噬菌体类型SPF鸡。

2。材料和方法

实验过程都进行按照马来西亚Putra大学动物伦理政策研究。

2.1。发展的灭活沙门氏菌enteriditis噬菌体类型

沙门氏菌enteriditis噬菌体类型1、3、6、7,和35隔离,传播,发酵生物反应器,然后单独用福尔马林灭活。

2.2。沙门氏菌enteriditis分离株噬菌体类型

沙门氏菌enteriditis噬菌体类型6(芬欧蓝- 0527),沙门氏菌enteriditis公司芬欧汇川集团噬菌体类型7 (- 0530),沙门氏菌enteriditis噬菌体类型35(芬欧蓝- 0525)被孤立的肝脏样本的一些商业肉鸡在柔佛、马来西亚,而沙门氏菌enteriditis噬菌体类型3(芬欧蓝- 0541)从粪便样品和孤立沙门氏菌enteriditis噬菌体1型(UPM-05)隔绝商业肉鸡肝脏样本在马六甲,马来西亚。所有沙门氏菌enteriditis噬菌体类型在2005年被孤立,然后确定在肠道病原体的实验室,中心的感染,Colindate大道,伦敦,英国。

2.3。确定候选人沙门氏菌enteriditis噬菌体类型

沙门氏菌enteriditis噬菌体类型1、3、6、7,和35在血琼脂培养从股票和孵化24小时37°C。从血琼脂,循环充满细菌的培养到木糖赖氨酸脱氧胆酸盐(XLD)和BGA和孵化24小时37°C。怀疑沙门氏菌殖民地培养到三糖铁尿素(TSI)和偏为生化测试。怀疑殖民地也用于革兰氏染色法。沙门氏菌证实了执行poly-O凝集试验。

2.4。发酵的候选人沙门氏菌enteriditis噬菌体类型

发酵5噬菌体类型分别进行沙门氏菌enteriditis。已确认沙门氏菌殖民地培养20毫升Triptic大豆肉汤在37°C (TSB)和孵化24小时。文化被转移到4升(左)在37°C (TSB)和孵化18个小时。然后,它最终转移到清洗和消毒50 L容量生物反应器(搅拌釜反应器系统s作品218号/ D50生物抑制剂D b·布劳恩生物技术国际)为发酵40 L的TSB 100 rpm, 37°C, pH值为7。根据标准程序,文化是20个小时发酵。发酵过程是连续监控。收成收集到两个消毒塑料鼓。发酵后,甲醛(0.7%)添加一次灭活的产量和混合手动摇晃。生物反应器是每次的发酵下,清洗沙门氏菌enteriditis噬菌体类型。

2.5。生长曲线的测定

在发酵过程中,样品被收集在20毫升每2小时消毒玻璃瓶的文化下发酵。增长率是由连续稀释(10−1,10−2,10−310、…−10),平皿计数。然后从文化下0.5毫升发酵被转移到一个玻璃小瓶含4.50毫升的稀释剂(TSB) 10−1。接下来,0.5毫升的稀释文化被转移到另一个玻璃小瓶含4.50毫升的稀释剂(TSB) 10−2稀释等;这种技术是重复10次。因此,一个串行稀释到10−10进行了。集落形成单位/板计数,0.1毫升的最后3稀释(10−8,10−9,10−10)在两个独立分布在XLD培养皿和孵化24小时37°C。两个培养皿,没有文化,是孵化控制。

2.6。失活的沙门氏菌

失活的细菌是由添加甲醛37%细菌培养的最终浓度0.7%。甲醛37%的收益率沙门氏菌enteriditis噬菌体型发酵后,手动摇晃和储存在室温下混合的24小时。

2.7。测定福尔马林的百分比沙门氏菌失活

福尔马林的浓度对细菌失活的决心沙门氏菌enteriditis噬菌体类型1和沙门氏菌enteriditis噬菌体类型6之前进行不同的失活沙门氏菌enteriditis噬菌体类型。福尔马林浓度不同,从0.1%、0.2%、0.3%,等等…,0.9%是失活的细菌进行测试。TSB文化包含1011细菌培养(cfu) /毫升(1010cfu / 0.1毫升)细菌和37%的甲醛。细菌培养是根据麦克法兰准备方法通过比较细菌培养的浊度与麦克法兰管。福尔马林是一滴一滴地添加到细菌培养和混合温柔颤抖。最终,formalin-added文化孕育了37°C。此外,不育检查在6、12、24、48小时后孵化。

2.8。无菌试验

执行无菌试验确认统一和完整的细菌失活。20毫升的福尔马林说收获收集在一个无菌玻璃瓶子。完整的循环飞跑到2 XLD盘子和保持在37°C孵化。细菌生长的板块进行24后,36,72小时。

2.9。辅助准备和混合

铝硫酸钾溶液(10%)是由稀释100克的硫酸钾铝升蒸馏水。这个辅助添加到收获一鼓和存储72小时。这是添加佐剂的1升的速度10升的收割。

2.10。灭活的填充和标签的产品

指定的产品,并贴上相应的名称沙门氏菌enteriditis噬菌体类型。V1 V3A V6A、V7和V35代表福尔马林灭活沙门氏菌enteriditis噬菌体类型1、3、6、7,和35。无菌塑料瓶满心formalin-inactivated细菌,封顶的进一步使用和储存在4 - 8°C测定5种不同的灭活的安全性和有效性沙门氏菌enteriditis噬菌体类型,即V1、V3A V6A, V7和V35。灭活细菌的安全性和有效性是决定在特定的无菌(SPF)鸡。

2.11。测定灭活产品的安全性和有效性

的formalin-inactivated沙门氏菌enteriditis噬菌体类型(V1 V3A, V6A、V7和V35)是皮下接种背网站SPF鸡脖子的剂量为0.20毫升的灭活沙门氏菌enteriditis噬菌体类型。其他1010cfu /毫升接种物挑战的准备沙门氏菌enteriditis噬菌体类型6。挑战,SPF鸡口服接种剂量为0.20毫升。

2.12。实验设计

一百二十四年刚孵化的SPF鸡。到来,4只鸡牺牲确认SPF的地位。体重,血液样本,收集粪便样本。样品的隔离沙门氏菌收集和组织病理学。剩下的鸡被分成6组20只鸡。组CV1, CV3A、CV6A CV7, CV35, CV0代表鸡接种灭活沙门氏菌enteriditis噬菌体类型1、3、6、7,35和一群未经变质处理的鸡作为对照,分别。

鸡是皮下接种灭活沙门氏菌enteriditis噬菌体类型背的脖子上的剂量0.20毫升/鸡(1010cfu /毫升)。每组是保存在一个单独的笼子里。鸡是提供不需抗生素的饲料和水。抽样进行14天postinoculation(π),之前的鸡的挑战沙门氏菌enteriditis噬菌体类型6(芬欧蓝- 0527)。四只鸡被从每个六组和体重。在牺牲之前,泄殖腔拭子和血液样本收集。总值的损伤进行了调查,样本收集鸡的隔离沙门氏菌和组织病理学。血清样本分离和储存在−20 C ELISA的进一步应用。

剩下的每组16只鸡,每组8只鸡被分离在新房间14天π口头挑战0.20毫升/鸡(1010cfu /毫升)沙门氏菌enteriditis噬菌体类型6(芬欧蓝- 0527)和指定为CV1C CV3AC, CV6AC, CV7C CV35C, CV0C。CV3AC,换句话说,组织CV1C CV6AC, CV7C,和CV35C代表鸡接种灭活产品(V1 V3A, V6A、V7和V35),分别与挑战沙门氏菌enteriditis噬菌体类型6,而CV0C代表控制鸡没有接种但挑战沙门氏菌enteriditis噬菌体类型6。每个group-CV1C挑战后,鸡,CV3AC, CV6AC, CV7C, CV35C-were关在单独的笼子里,提供不需抗生素的饲料和水。天7和14 postchallenge (pc), 4只鸡从组CV1 CV3A, CV6A, CV7, CV35,和CV0也组CV1C CV3AC, CV6AC, CV7C, CV35C, CV0C牺牲抽样。所有的鸡都称重和泄殖腔拭子牺牲后,和血液样本收集。样品的隔离沙门氏菌收集和组织病理学鸡(表1)。


接种灭活SE分 接种组的描述 不。天的鸡牺牲π
D0 D14 D21 D28

CV1 灭活SE PT1 接种而不是挑战 - - - - - - 4 4 4
CV1C 灭活SE PT1 接种和挑战 - - - - - - - - - - - - 4 4
CV3A 灭活SE PT3A 接种而不是挑战 - - - - - - 4 4 4
CV3AC 灭活SE PT3A 接种和挑战 - - - - - - - - - - - - 4 4
CV6A 灭活SE PT6A 接种而不是挑战 - - - - - - 4 4 4
CV6AC 灭活SE PT6A 接种和挑战 - - - - - - - - - - - - 4 4
CV7 灭活SE PT7 接种而不是挑战 - - - - - - 4 4 4
CV7C 灭活SE PT7 接种和挑战 - - - - - - - - - - - - 4 4
CV35 灭活SE PT35 接种而不是挑战 - - - - - - 4 4 4
CV35C 灭活SE PT35 接种和挑战 - - - - - - - - - - - - 4 4
CV0 控制 接种而不是挑战 4 4 4 4
CV0C 控制 Noninoculated和挑战 - - - - - - - - - - - - 4 4

SE PT =沙门氏菌enteriditis噬菌体类型。鸡是接种时一天老SE分和14 postinoculation天的挑战。
2.13。隔离沙门氏菌

midintestinal样本内容,盲肠的内容、泄殖腔拭子、血液、肝脏和脾脏收集从鸡隔离和标识沙门氏菌(6]。

2.14。组织病理学

样品回肠、盲肠、法氏囊、肝脏和脾脏收集,缓冲福尔马林固定在10%。组织处理的标准技术他染色(7]。

2.15。酶联免疫吸附试验(ELISA)

ELISA技术应用于血清收集根据Biocheck协议建议家禽免疫测定SE抗体检测组件,英国。

2.16。统计分析

25使用IBM SPSS统计软件,数据分析与单向方差分析(方差分析)和图基的诚实的显著差异(HSD)成对多重比较方法来确定意义的身体体重增加(8]。皮尔逊卡方检验是用来分析数据的细菌隔离在不同的组织。单向方差分析重复措施应用于分析细菌隔离在不同的数据组织和得分的分析微观病变。然而,对比天对病变组织的严重程度t -测试技术应用。

3所示。结果

3.1。生长曲线

细菌生长是在发酵过程中每2小时计算。它是观察到的细菌繁殖在发酵。有不同的增长率的变化沙门氏菌enteriditis噬菌体类型在2、4、6、8、10、12、14、16、18、20小时后发酵。

3.2。百分比的福尔马林灭活细菌

福尔马林浓度在0.5%以上能够完全灭活细菌。没有观察到经济增长的文化在6、12、24、36、48小时。然而,当福尔马林的浓度分别为0.4%和0.3,细菌生长中注意到文化。

3.3。临床症状和死亡病例与灭活疫苗接种后产品和挑战沙门氏菌enteriditis噬菌体类型6

组的控制:在集团CV0异常的临床症状和死亡病例观察到整个实验。组中的CV0C、抑郁、厌食症、羽毛、腹泻从第二天观察postchallenge (pc)到实验的最后。一个鸡死于第三天的电脑。

与挑战:团体没有挑战和团体组CV1 CV3A, CV6A, CV7, CV35,没有异常的临床症状和死亡病例观察到整个实验。

CV1C组,小鸡抑郁在天1和2 pc。死亡率情况下没有观察到。集团CV3AC,鸡被压抑在12小时电脑。然后,鸡恢复在24小时电脑。然后,没有观察到异常信号到实验的最后。集团CV6AC,鸡没有显示异常的临床症状。然而,只有一个鸡很沮丧,一边站在小时6个人电脑。死亡率情况下没有观察到。集团CV7C,鸡显示抑郁和厌食症天1和2 pc。羽毛在3天观察电脑了。 In the group CV35C, depression and anorexia were observed on day 1 pc. Ruffled feathers were observed on day 3 pc till the end of the experiment. Mortality cases were not reported.

3.4。体重

体重的控制:在集团CV0体重增加不断在整个实验过程。这是35.00±2.10 g和124.00±4.80 g 0和14天π,分别和201.40±4.60 g和325.00±5.70 g天7和14个人电脑,分别。相比没有显著差异时CV0C组天7和14个人电脑。集团CV0C,体重为195.00±3.60,329.00±2.70 g在7和14天电脑,分别。

体重没有挑战和鸡鸡的挑战:在集团CV1,体重为35.00±2.10 g和317.40±5.00 g 0和14天π,分别和205.00±5.20 g和327.50±4.00 g天7和14个人电脑,分别。相比没有显著差异的时候天CV1C小组7和14个人电脑。集团CV1C,体重为202.00±3.90 g和317.40±5.00 g在7和14天电脑,分别。

集团CV3A,体重为35.00±2.10 g和122.50±1.80 g 0和14天π,分别和201.30±2.30 g和324.30±3.40 g天7和14个人电脑,分别。相比没有显著差异时CV3AC组。集团CV3AC,体重为203.80±2.50 g和319.30±6.70 g在7和14天电脑,分别。

集团CV6A,体重为35.00±2.10 g和127.00±2.50 g 0和14天π,分别和199.60±3.40 g和324.00±2.40 g天7和14个人电脑,分别。没有显著区别CV6AC相比时。集团CV6AC,体重为201.00±2.10 g和320.00±9.10 g在7和14天电脑,分别。

集团CV7,体重为35.00±2.10 g和127.50±4.40 g 0和14天π,分别和207.00±3.00 g和325.30±6.80 g天7和14个人电脑,分别。没有显著区别CV7C相比时。集团CV7C,体重为200.40±8.10 g和324.30±7.90 g在7和14天电脑,分别。

集团CV35,体重为35.00±2.10 g和124.50±2.70 g 0和14天π,分别和206.30±3.50 g和322.50±7.20 g天7和14个人电脑,分别。没有显著区别CV35C相比时。集团CV35C,体重为199.00±6.50 g和304.03±7.90 g在7和14天电脑,分别。

3.5。隔离沙门氏菌

隔离沙门氏菌从集团CV0控制:沙门氏菌不是孤立的从所有样本收集整个实验。沙门氏菌不是孤立的从所有鸡接种之前沙门氏菌enteriditis(天0)。

在集团CV0C沙门氏菌隔绝所有样品,但不同的百分比。这些百分比是25%、50%或75%(数据1- - - - - -2)。

隔离沙门氏菌从鸡接种灭活沙门氏菌enteriditis噬菌体1型没有与挑战:挑战和鸡群CV1,沙门氏菌不是孤立的从所有样本收集整个实验。在集团CV1C隔绝不同样本和一些变化(25%或50%)。然而,它也不是孤立的从血和脾天7和14个人电脑和从肝脏14天电脑(数字1- - - - - -2)。

隔离沙门氏菌从鸡接种灭活沙门氏菌enteriditis噬菌体类型3没有与挑战:挑战和鸡群CV3A,沙门氏菌不是孤立的从所有样本收集整个实验。在集团CV3AC沙门氏菌从midintestinal内容孤立的百分比为25%在天7和14日14天pc电脑和盲肠的内容。在其他组织,它不是孤立的在整个实验过程中(数据1- - - - - -2)。

隔离沙门氏菌从鸡接种灭活沙门氏菌enteriditis噬菌体类型6没有与挑战:挑战和鸡群CV6A,沙门氏菌不是孤立的从所有样本收集整个实验。在集团CV6AC孤立的百分比为25% midintestinal内容7天电脑和盲肠的内容在7和14天电脑。在其他组织,它不是孤立的在整个实验过程中(数据1- - - - - -2)。

隔离沙门氏菌从鸡接种灭活沙门氏菌enteriditis噬菌体类型7没有与挑战:挑战和鸡群CV7,沙门氏菌不是孤立的从所有样本收集整个实验。集团CV7C,隔离百分比从25% midintestinal内容和肝脏在天7和14日7天pc电脑和盲肠的内容。然而,在其他组织中,它不是孤立的整个实验(数据1- - - - - -2)。

隔离沙门氏菌从鸡接种灭活沙门氏菌enteriditis噬菌体类型35没有与挑战:挑战和鸡群CV35,沙门氏菌不是孤立的从所有样本收集整个实验。在集团CV35C从midintestinal孤立的比例25%,盲肠的内容天7和14个人电脑和泄殖腔拭子,肝、脾7天电脑,而不是从其他组织分离(数字1- - - - - -2)。

3.6。统计分析的隔离沙门氏菌来自不同组织的鸡接种灭活产品和挑战

卡方协会技术应用于确定有一定组织和隔离的之间的联系沙门氏菌在7和14天的电脑。发现没有明显关联的不同组织和隔离沙门氏菌天7和14个人电脑(表23)。


价值 自由度 Asympototic意义(双向)

皮尔逊卡方的 21.143 15 0.13
似然比 28.103 15 0.92
有效病例数 36

皮尔森的行卡方值= 21.14和解释p= 0.13。这意味着组织之间没有显著相关性沙门氏菌隔离7天电脑。

价值 渐近意义(双向)

皮尔逊卡方的 19.36 0.20
似然比 22.24 0.10
有效病例数 36

皮尔森的行卡方值= 19.36和解释道p= 0.20。这意味着没有显著联系组织和隔离沙门氏菌在14天的电脑。
3.7。统计分析的隔离沙门氏菌从不同组的鸡接种灭活7天电脑产品和挑战

隔离的价值沙门氏菌7天组CV0C电脑计算的隔离在midintestinal内容的价值,隔离在泄殖腔互换的价值,价值的血液,肝脏和脾脏的价值的价值。然后,均值±标准差和标准误。相同的技术被申请组CV1C CV3AC, CV6AC, CV7C, CV35C单向重复测量方差分析(表的应用程序45)。最终,隔离的手段的差异沙门氏菌各个组之间。意义(p< 0.05)观察到的只有CV0C的区别(对照组)和其他组(表6)。


集团 Midintestinal内容 盲肠的内容 泄殖腔拭子 意味着±性病。偏差

CV0C 0.75 0.50 0.75 0.50 0.50 0.50 0.58±0.13
CV1C 0.50 0.25 0.25 0.00 0.25 0.00 0.21±0.19
C3AC 0.25 0.25 0.00 0.00 0.00 0.00 0.08±0.13
C6AC 0.25 0.25 0.00 0.00 0.00 0.00 0.08±0.13
CV7C 0.25 0.25 0.00 0.00 0.25 0.00 0.13±0.14
C35C 0.25 0.25 0.25 0.00 0.25 0.25 0.21±0.10

Std.代表标准。

的意思是 Std.错误 95%置信区间
下界 上界

CV0C 0.58 0.05 0.45 0.72
CV1C 0.21 0.08 0.01 0.401
CV3AC 0.08 0.05 −0.05 0.22
CV6AC 0.08 0.05 −0.05 0.22
CV7C 0.13 0.06 −0.02 0.27
CV35C 0.21 0.04 0.10 0.32

Std.代表标准。

(我)组 (J)组 平均差(i j) Std.错误 团体。 95%置信区间的差异
下界 上界

CV0C CV1C 0.38∗ 0.06 0.02 0.08 0.67
C3AC 0.50∗ 0.07 0.01 0.16 0.84
C6AC 0.50∗ 0.07 0.01 0.16 0.84
CV7C 0.46∗ 0.08 0.03 0.06 0.86
C35C 0.38∗ 0.06 0.02 0.08 0.67
CV1C CV0C −0.38∗ 0.06 0.02 −0.67 −0.08
C3AC 0.13 0.06 1.00 −0.17 0.41
C6AC 0.13 0.06 1.00 −0.17 0.41
CV7C 0.08 0.05 1.00 −0.19 0.36
C35C 0.00 0.07 1.00 −0.34 0.34
CV3AC CV0C −0.50∗ 0.07 0.01 −0.84 −0.16
CV1C −0.13 0.06 1.00 −0.42 0.17
C6AC 0.00 0.00 0.00 0.00
CV7C −0.04 0.04 1.00 −0.26 0.18
C35C −0.13 0.06 1.00 −0.42 0.17
CV6AC CV0C −0.50∗ 0.07 0.01 −0.84 −0.16
CV1C −0.13 0.06 1.00 −0.42 0.17
C3AC 0.00 0.00 0.00 0.00
CV7C −0.04 0.04 1.00 −0.26 0.18
C35C −0.13 0.06 1.00 −0.42 0.17
CV7C CV0C −0.46∗ 0.08 0.03 −0.86 −0.06
CV1C −0.08 0.05 1.00 −0.36 0.19
C3AC 0.04 0.04 1.00 −0.18 0.26
C6AC 0.04 0.04 1.00 −0.18 0.26
C35C −0.08 0.05 1.00 −0.36 0.19
CV35C CV0C −0.38∗ 0.06 0.02 −0.67 −0.08
CV1C 0.00 0.07 1.00 −0.34 0.34
C3AC 0.13 0.06 1.00 −0.17 0.42
C6AC 0.13 0.06 1.00 −0.17 0.42
CV7C 0.08 0.05 1.00 −0.19 0.36

∗代表意义(p< 0.05)。sig,代表的意义。
3.8。统计分析的隔离沙门氏菌从不同组的鸡接种灭活14天的电脑产品和挑战

隔离的整体价值沙门氏菌组CV0C 14天电脑计算的隔离在midintestinal内容的价值,价值的隔离在泄殖腔交换,血液的价值,价值在肝脏和脾脏的价值。然后,均值±标准差和标准误。相同的技术被申请组CV1C CV3AC, CV6AC, CV7C, CV35C单向重复测量方差分析(表的应用78)。最终,隔离的手段的差异沙门氏菌各个组之间。意义(p< 0.05)观察到的只有CV0C的区别(对照组)和其他组(表9)。


Midintestinal内容 盲肠的内容 泄殖腔拭子 意味着±性病。偏差

CV0C 0.75 0.5 0.5 0.5 0.25 0.5 0.50±0.16
CV1C 0.5 0.25 0.5 0 0 0 0.21±0.25
C3AC 0.25 0 0 0 0 0 0.04±0.10
C6AC 0 0.25 0 0 0 0 0.04±0.10
CV7C 0.25 0 0 0 0.25 0 0.08±0.13
C35C 0.25 0.25 0 0 0 0 0.08±0.13

Std.代表标准。

的意思是 Std.错误 95%置信区间
下界 上界

CV0C 0.50 0.07 0.33 0.67
CV1C 0.21 0.10 −0.05 0.47
CV3AC 0.04 0.04 −0.07 0.15
CV6AC 0.04 0.04 −0.07 0.15
CV7C 0.08 0.05 −0.05 0.22
CV35C 0.08 0.05 −0.05 0.22

Std.代表标准。

(我)组 (J)组 平均差(i j) Std.错误 团体。 95%置信区间的差异
下界 上界

CV0C CV1C 0.29 0.08 0.19 −0.11 0.70
C3AC 0.46∗ 0.04 0.00 0.24 0.68
C6AC 0.46∗ 0.08 0.03 0.06 0.86
CV7C 0.42 0.08 0.06 −0.02 0.85
C35C 0.42∗ 0.05 0.01 0.14 0.69
CV1C CV0C −0.29 0.08 0.19 −0.70 0.11
C3AC 0.17 0.08 1.00 −0.27 0.60
C6AC 0.17 0.11 1.00 −0.39 0.72
CV7C 0.13 0.11 1.00 −0.44 0.69
C35C 0.13 0.09 1.00 −0.32 0.57
CV3AC CV0C −0.46∗ 0.04 0.00 −0.68 −0.24
CV1C −0.17 0.08 1.00 −0.60 0.27
C6AC 0.00 0.07 1.00 0.34 0.34
CV7C −0.04 0.04 1.00 −0.26 0.18
C35C −0.04 0.04 1.00 −0.26 0.18
CV6AC CV0C −0.46∗ 0.08 0.03 −0.86 −0.06
CV1C −0.17 0.11 1.00 −0.72 0.39
C3AC 0.00 0.07 1.00 −0.34 0.34
CV7C −0.04 0.08 1.00 −0.45 0.36
C35C −0.04 0.04 1.00 −0.26 0.18
CV7C CV0C −0.42 0.42 0.06 −0.85 0.02
CV1C −0.13 0.13 1.00 −0.69 0.44
C3AC 0.04 0.04 1.00 −0.18 0.26
C6AC 0.04 0.04 1.00 −0.36 0.45
C35C 0.00 0.05 1.00 −0.34 0.34
CV35C CV0C −0.42∗ 0.06 0.01 −0.69 −0.14
CV1C 0.13 0.07 1.00 −0.57 0.32
C3AC 0.04 0.06 1.00 −0.18 0.26
C6AC 0.04 0.06 1.00 −0.18 0.26
CV7C 0.00 0.05 1.00 −0.34 0.34

∗表示意义(p< 0.05)。sig,代表的意义。
3.9。严重损伤

总值病变控制:在CV0组,总在整个实验过程中,并未观察到病变。

集团CV0C,总值病变没有观察到除了扩大鸡法氏囊的14天pc和法氏囊和肝脏肿大鸡死于第三天电脑。

总值病变和鸡鸡接种不同的灭活产品没有挑战不同的灭活产品和挑战:在CV1组和组CV1C,总值病变在整个实验中没有观察到。总值CV3A组和组CV3AC,病变在整个实验中没有观察到。总值CV6A组和组CV6AC,病变在整个实验中没有观察到。总值CV7组和组CV7C,病变在整个实验中没有观察到。总值CV35组和组CV35C,病变在整个实验中没有观察到。

3.10。微观病变回肠

微观病变回肠的控制:在集团CV0微观病变没有检测到整个实验(得分00±00)(数据3- - - - - -4)。集团CV0C,轻微的异染的渗透和堵塞(0.20±0.20)得分在第七天发现了电脑,和轻度到中度嗜异的渗透和堵塞(0.40±0.20)分在一天发现了14个人电脑(数字3- - - - - -4)。

微观病变回肠的鸡接种不同的灭活产品没有挑战和回肠鸡接种不同的产品和挑战:灭活组CV1,病变未检测到整个实验(00±00的得分)。CV1C组、轻度到中度嗜异的渗透和拥塞检测7和14天的电脑。得分为0.20±0.20,0.40±0.20记录在天7和14个人电脑,分别为(数字3- - - - - -4)。

CV3A组、组CV3AC集团CV6A集团CV6AC集团CV7集团CV7C和组CV35,病变没有检测到整个实验。得分为0.00±0.00被记录。然而,在集团CV35C轻微异染的渗透和拥塞检测7和14天的电脑。得分为0.20±0.20,0.40±0.20记录在天7和14个人电脑,分别为(数字3- - - - - -4)。

3.11。微观病变盲肠

微观病变盲肠的控制:在集团CV0,未发现微观病变在整个实验(00±00的得分)。集团CV0C,轻微的异染的渗透和堵塞(0.20±0.20)得分在天发现了7和14个人电脑(数字3- - - - - -4)。

微观病变盲肠的鸡接种不同的灭活产品没有挑战和鸡不同灭活产品和挑战:在CV1组,组CV3A集团CV3AC集团CV6A集团CV6AC集团CV7和组CV35,病变在整个实验中没有发现。得分为0.00±0.00被记录。然而,CV1C组、组CV7C和组CV35C,轻微的异染的渗透和拥塞检测7和14天的电脑。得分为0.20±0.20,0.40±0.20记录在天7和14个人电脑,分别为(数字3- - - - - -4)。

3.12。法氏囊的微观损伤

微观损伤法氏囊的控制:在集团CV0未发现微观病变在整个实验(00±00的得分)。集团CV0C,轻度到中度嗜异的渗透,在天发现了拥堵,坏死7和14个人电脑。得分为0.20±0.20,0.40±0.20记录在天7和14个人电脑,分别为(数字3- - - - - -4)。

微观病变鸡的法氏囊接种灭活产品没有挑战和鸡不同灭活产品和挑战:在CV1组,组CV3A集团CV6A集团CV6AC集团CV7和组CV35,病变在整个实验中没有发现。记录得分为0.00±0.00,而在集团CV1C集团CV3AC集团CV7C和组CV35C,轻度到中度嗜异的渗透,在天发现了拥堵,坏死7和14个人电脑。得分为0.20±0.20,0.40±0.20记录在天7和14个人电脑,分别。然而,坏死没有CV7C(数字3- - - - - -4)。

3.13。微观病变在肝

微观损伤肝脏的控制:在集团CV0微观病变没有检测到整个实验(00±00的得分)。集团CV0C,轻微的异染的渗透和拥堵在第七天发现了电脑。温和的异染的渗透和拥堵在第14天发现了电脑。得分为0.20±0.20,0.40±0.20记录在天7和14个人电脑,分别为(数字3- - - - - -4)。

微观损伤肝脏的鸡接种灭活产品没有挑战和鸡不同灭活产品和挑战:在CV1组,组CV3A集团CV3AC集团CV6A集团CV6AC集团CV7集团CV7C和组CV35,病变在整个实验中没有发现。得分为0.00±0.00记录,而在CV1C组和组CV35C,轻度到中度嗜异的渗透和拥堵在天发现了7和14个人电脑。得分为0.20±0.20,0.40±0.20记录在天7和14个人电脑,分别为(数字3- - - - - -4)。

3.14。微观损伤脾

微观损伤脾的控制:在集团CV0微观病变没有检测到整个实验(00±00的得分)。集团CV0C,轻微的异染的渗透和拥堵在第七天发现了电脑。轻度到中度嗜异的渗透和拥堵在第14天发现了电脑。得分为0.20±0.20,0.40±0.20记录在天7和14个人电脑,分别为(数字3- - - - - -4)。

鸡的微观损伤脾接种不同的灭活产品没有挑战和鸡不同灭活产品和挑战:在CV1组,组CV3A集团CV3AC集团CV6A集团CV6AC集团CV7集团CV7C和组CV35,病变在整个实验中没有发现。得分为0.00±0.00记录,而在CV1C组和组CV35C,轻度到中度嗜异的渗透和拥堵在天发现了7和14个人电脑。得分为0.20±0.20,0.40±0.20记录在天7和14个人电脑,分别为(数字3- - - - - -4)。

3.15。统计分析病变引起的得分沙门氏菌在不同组织的鸡接种灭活7天电脑产品和挑战

异染的渗透(轻度至中度)和拥塞检测不同生长残痕在几乎所有的组织在7天电脑。这个在回肠病变组的得分CV0C添加相同的得分在回肠病变组CV1C回肠的得分相同的病变组CV3AC得分相同的病变在CV6AC回肠,CV7C得分相同的病变,CV35C得分相同的病变。单向方差分析与反复应用措施。均值、标准差和标准误差计算。相同的技术应用在盲肠病变,法氏囊,肝脏和脾脏。发现没有明显差异的不同组织之间相互相比(表10- - - - - -12)。然而,坏死并不涉及,因为只有发现Fabrius囊的。


组织 的意思是 标准偏差 N

回肠 0.10 0.11 6
盲肠 0.13 0.10 6
法氏囊 0.17 0.08 6
0.10 0.11 6
0.10 0.11 6

N代表的数量组(CV0C、CV1C CV3AC, CV6AC, CV7C,和CV35C)。

组织 的意思是 标准错误 95%置信区间 N
下界 上界

回肠 0.10 0.05 −0.02 0.22 6
盲肠 0.13 0.04 0.03 0.24 6
法氏囊 0.17 0.03 0.08 0.25 6
0.10 0.05 −0.02 0.22 6
0.10 0.05 −0.02 0.22 6

N代表挑战接种组的数量。

(我)组织 (J)组织 平均差(我−J) Std.错误 团体。 95%置信区间的差异
下界 上界

回肠 盲肠 −0.03 0.03 1.00 −0.19 0.13
−0.07 0.04 1.00 −0.27 0.14
0.00 0.00 0.00 0.00
0.00 0.00 0.00 0.00
盲肠 回肠 0.03 0.03 1.00 −0.13 0.19
−0.03 0.03 1.00 −0.19 0.13
0.03 0.03 1.00 −0.13 0.19
0.03 0.03 1.00 −0.13 0.19
回肠 0.07 0.04 1.00 −0.14 0.27
盲肠 0.03 0.03 1.00 −0.13 0.19
0.07 0.04 1.00 −0.14 0.27
0.07 0.04 1.00 −0.14 0.27
回肠 0.00 0.00 0.00 0.00
盲肠 −0.03 0.03 1.00 −0.19 0.13
−0.07 0.04 1.00 −0.27 0.14
0.00 0.00 0.00 0.00
回肠 0.00 0.00 0.00 0.00
盲肠 −0.03 0.03 1.00 −0.19 0.13
−0.07 0.04 1.00 −0.27 0.14
0.00 0.00 0.00 0.00

sig,代表的意义。Std.代表标准。
3.16。统计分析病变引起的得分沙门氏菌在不同组织的鸡接种灭活14天的电脑产品和挑战

异染的渗透(轻度至中度)和拥塞检测不同生长残痕在几乎所有组织14天电脑。这个在回肠病变组的得分CV0C添加相同的得分在回肠病变组CV1C,添加到得分相同的病变组CV3AC回肠,添加到得分相同的病变在CV6AC回肠,添加到CV7C得分相同的损伤,并添加到CV35C得分相同的病变。单向方差分析与反复应用措施。均值、标准差和标准误差计算。相同的技术应用在盲肠病变,法氏囊,肝脏和脾脏。发现没有明显差异的不同组织之间相互比较时(表13- - - - - -15)。


组织 的意思是 标准偏差 N

回肠 0.20 0.22 6
盲肠 0.23 0.20 6
法氏囊 0.33 0.16 6
0.20 0.22 6
0.20 0.22 6

N代表的数量组(CV0C、CV1C CV3AC, CV6AC, CV7C,和CV35C)。

组织 的意思是 标准错误 95%置信区间 N
下界 上界

回肠 0.20 0.09 −0.03 0.43 6
盲肠 0.23 0.08 0.03 0.44 6
法氏囊 0.33 0.07 0.16 0.51 6
0.20 0.09 −0.03 0.43 6
0.20 0.09 −0.03 0.43 6

N代表的数量组(CV0C、CV1C CV3AC, CV6AC, CV7C,和CV35C)。

(我)组织 (J)组织 平均差(我−J) Std.错误 团体。 95%置信区间的差异
下界 上界

回肠 盲肠 −0.03 0.08 1.00 −0.42 0.35
−0.13 0.08 1.00 −0.54 0.27
0.00 0.00 0.00 0.00
0.00 0.00 0.00 0.00
盲肠 回肠 0.03 0.08 1.00 −0.35 0.42
−0.10 0.07 1.00 −0.43 0.27
0.03 0.08 1.00 −0.35 0.42
0.03 0.08 1.00 −0.35 0.42
回肠 0.13 0.08 1.00 −0.27 0.54
盲肠 0.10 0.07 1.00 −0.23 0.43
0.13 0.08 1.00 −0.27 0.54
0.13 0.08 1.00 −0.27 0.54
回肠 0.00 0.00 0.00 0.00
盲肠 −0.03 0.08 1.00 −0.42 0.35
−0.13 0.08 1.00 −0.54 0.27
0.00 0.00 0.00 0.00
回肠 0.00 0.00 0.00 0.00
盲肠 −0.03 0.08 1.00 −0.42 0.35
−0.13 0.08 1.00 −0.54 0.27
0.00 0.00 0.00 0.00

Std.代表标准。sig,代表的意义。
3.17。比较7天14电脑引起的对病变的严重程度沙门氏菌在不同组织的鸡接种灭活产品和挑战

异染的渗透和拥堵的总体得分的总和,在不同的组织(回肠、盲肠、法氏囊,肝、脾),7天组CV0C pc计算。然后,总体得分的总和相同的损伤计算组CV1C CV3AC, CV6AC CV7C, CV35C。接下来,这个病变的进球获得了所有组在一起7天电脑。

这种技术在所有组申请同样的病变在14天的电脑。最终,意味着,标准差和标准错误得到的得分病变7天14天pc和而成双样本应用程序t以及。然而,病变的得分手段7个人电脑和天14天电脑没有significantlydifferent(表1617)。


的意思是 N Std.偏差 Std.错误的意思

第七天电脑 0.19 29日 0.36 0.07
第14天电脑 0.24 29日 0.20 0.04

N代表组织的数量。Std.代表标准。

成对的差异 t df Sig (2-tailed)。
的意思是 Std.偏差 Std.错误的意思 95%置信区间的差异
较低的

天7 pc - 14个人电脑 −0.06 0.33 0.06 −.018 0.07 −0.89 28 0.38

df代表自由度。t代表t价值。sig,代表显著性水平。

意思是效价 格林尼治时间 CV % 意思是效价 格林尼治时间 CV % 意思是效价 格林尼治时间 CV %
2周 3周 4周

CV0 2 2 85年 14 11 85年 8 6 78年
CV1 2 2 150年 17 13 64年 14 7 94年
CV3A 11 4 158年 67年 35 143年 17 10 114年
CV6A 12 8 59 24 24 28 15 8 103年
CV7 16 15 53 10 4 113年 10 6 99年
CV35 14 13 51 28 27 28 22 17 76年
CV0C - - - - - - - - - - - - - - - - - - 165年 103年 68年 16 14 64年
CV1C - - - - - - - - - - - - - - - - - - 28 27 35 38 19 71年
CV3AC - - - - - - - - - - - - - - - - - - 18 16 48 1359年 380年 108年
CV6AC - - - - - - - - - - - - - - - - - - 21 17 89年 44 43 133年
CV7C - - - - - - - - - - - - - - - - - - 10 5 109年 18 14 78年
CV35C - - - - - - - - - - - - - - - - - - 8 7 63年 85年 50 110年

3.18。ELISA

应用ELISA检测沙门氏菌enteriditis控制:在群CV0 CV0C和组,沙门氏菌enteriditis抗体并不确定在整个实验过程中(表18)。

应用ELISA检测沙门氏菌enteriditis在鸡接种不同的灭活产品没有挑战和鸡不同灭活产品和挑战:在CV1组,组CV1C集团CV3A集团CV6A集团CV6AC集团CV7集团CV7C集团CV35和组CV35C,沙门氏菌enteriditis抗体并不确定在整个实验过程中(表18)。但在CV3AC组,平均抗体效价是1359个人电脑(表14天18)。

4所示。讨论

研究表明,不同的灭活沙门氏菌enteriditis噬菌体类型可以提供不同级别的预防;换句话说,灭活可能减轻了实验的产品沙门氏菌enteriditis噬菌体类型6感染SPF鸡。这是观察到不同的灭活沙门氏菌enteriditis噬菌体可以减少负载的类型沙门氏菌enteriditis在主机,但不能消除生物(9]。整个研究结果表明灭活沙门氏菌enteriditis噬菌体类型3和6是安全有效的,并且可能有助于减轻沙门氏菌enteriditis噬菌体类型6感染家禽。

不同的接种灭活沙门氏菌enteriditis噬菌体类型缓解临床的挑战相比,控制。所有组接种挑战(CV1C, CV3AC, CV6AC、CV7C CV35C)接受温和比未经变质处理的临床体征,对照组(CV0C)的挑战。缓解临床情况的变化,挑战不同的噬菌体类型的微生物之一,标志着变异的相对有效性控制沙门氏菌enteriditis噬菌体感染类型6。临床体征的变化诱导组间不同接种灭活沙门氏菌enteriditis噬菌体类型是可以理解为有毒性的差异不同沙门氏菌enteriditis噬菌体类型(10因此免疫原性。

抑郁、厌食症、羽毛和腹泻CV0C集团表示,中观察到沙门氏菌enteriditis噬菌体类型6可能导致成熟SPF鸡的临床疾病。此外,很明显从临床症状与挑战接种组有交叉保护的控制疾病。灭活沙门氏菌enteriditis噬菌体类型3和6是最有效的控制临床图片紧随其后沙门氏菌enteriditis噬菌体类型1、7和35。的商业疫苗灭活沙门氏菌enteriditis也有类似的潜力,减轻临床症状与组织控制的挑战。然而,胡伯曼et al。11)报道,没有抑郁症的临床症状或疾病在鸡接种(AviPro®沙门氏菌真空吸尘器E, ELANCO)(商业减毒活肠炎沙门氏菌疫苗基于应变Sm24 / Rif12 / Ssq)疫苗接种以来肉用鸡增殖与三价灭活母鸡沙门氏菌疫苗提供了一个安全的和有效的减少肠道殖民和器官相关型的入侵沙门氏菌血清后的挑战。随后,它可以用于家禽的控制计划来降低污染率和产品(12),所以灭活沙门氏菌enteriditis噬菌体类型(特别是3和6)能发挥有效作用的控制沙门氏菌enteriditis感染在马来西亚。死亡率对照组CV0C和没有接种的死亡率和挑战组织给了证据表明灭活沙门氏菌enteriditis噬菌体类型在特定的无菌效果控制死亡率鸡。有一个减少体重的0.7%和2.8%的鸡群CV0C相比,鸡群CV0 7和14天的电脑。它表明,沙门氏菌enteriditis挑战不利影响人体体重增加。

然而,鸡与挑战沙门氏菌enteriditis噬菌体类型6接种后不同的灭活沙门氏菌enteriditis噬菌体类型获得权重比控制的挑战。这是发现灭活沙门氏菌enteriditis噬菌体类型3和6一个更有效的控制对身体不利的行动相比,体重增加的时候CV0C在天21日和28π,分别。然而,El-Shall et al。13)报道,现场的使用沙门氏菌enteriditis疫苗有很强的保护作用沙门氏菌enteriditis挑战,尤其是对生长性能包括体重增加,支持灭活的建议沙门氏菌enteriditis噬菌体类型3和6的控制沙门氏菌enteriditis感染在马来西亚。

控制策略的主要问题之一沙门氏菌enteriditis殖民的微生物在不同的器官,如输卵管、卵巢、肝、脾、肠、盲肠,因此,粪便脱落12]。的沙门氏菌分离结果表明一个有前途的灭活效果沙门氏菌enteriditis噬菌体类型。沙门氏菌enteriditis从75%的直肠拭子中分离和肠道内容和盲肠的50%,肝脏,脾脏,血液样本组的挑战控制CV0C 7天电脑。比例相同的隔离观察14天电脑除了只有25%减少粪便拭子和肝脏样本。它表示的能力沙门氏菌enteriditis噬菌体类型6岁引起系统性感染甚至在鸡4周大。

所有不同组接种灭活沙门氏菌enteriditis噬菌体类型减少器官殖民和粪便脱落。然而,接种灭活沙门氏菌enteriditis噬菌体类型3和6可能会提供一些保护所面临的挑战和显示巨大的潜力,以减少细菌殖民化和粪便脱落。此外,这两个沙门氏菌enteriditis噬菌体类型3和6消除细菌从肝脏,脾脏,血液和粪便拭子在7天电脑。然而,盲肠和肠内容样本积极CV3AC和CV6AC组7天电脑。此外,在7天的电脑,发现灭活噬菌体类型3能够明确的肠道,而沙门氏菌enteriditis噬菌体类型6扫清了盲肠14天电脑。此外,灭活沙门氏菌enteriditis噬菌体类型1、7和35显示一些潜在防止挑战14天电脑。然而,在一项由Elazomi et al。14),formalin-killed产生的保护沙门氏菌收获的在体外在活的有机体内条件作为候选疫苗在鸡被发现而未予重视。

据报道在一些实验感染鸡的先前的研究沙门氏菌enteriditis可能会导致肠道殖民和相关细菌脱落在粪便中好几个月15]。此外,沙门氏菌,以其不同的型,减少环境中得以生存和持续(9]。然而,在目前的研究中,灭活的疫苗接种沙门氏菌enteriditis噬菌体类型3和6不仅降低了机关殖民也消除了细菌大量的鸡的挑战。

保护水平的变化和其他结果由不同的灭活沙门氏菌enteriditis噬菌体类型依赖于辅助的组成等因素,的压力沙门氏菌enteriditis和失活的方法。严重损伤和组织病理学变化的结果支持微生物的分离的结果。它表明,沙门氏菌enteriditis没有持久的器官。因此,它无法生产总值在不同的组织损伤。没有病变鸡接种控制的挑战可能归因于鸡的时候挑战的时代。此外,组织显示的数量是更高的组织病理学变化控制鸡未接种和挑战(CV0C)比鸡接种与挑战(CV1C、CV3AC CV6AC, CV7C,和CV35C)。它标志着灭活的效果沙门氏菌enteriditis在目前的研究噬菌体类型。

5。结论

得出的结论是,不同的灭活沙门氏菌enteriditis噬菌体类型可能部分防止鸡沙门氏菌enteriditis噬菌体感染类型6。它也提供了证据表明灭活沙门氏菌enteriditis噬菌体类型3和6是安全的和有效的。除此之外,他们的接种可能导致高水平的保护沙门氏菌enteriditis噬菌体类型6感染鸡。

数据可用性

使用的数据来支持本研究的结果包括在本文中。

的利益冲突

作者宣称他们没有利益冲突对本文的作者或出版。

确认

作者感谢个人和机构直接或间接的支持来完成这个项目。这项研究受到了科学、技术和创新,马来西亚(MOSTI)下TechnoFund(批准号6363001和6363001)。

引用

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