分离,鉴定和药敏资料金黄色葡萄球菌从临床乳腺炎Sebeta镇上奶牛场

文摘

进行了横断面研究和周围Sebeta城镇奶牛场Finfinne特区,埃塞俄比亚,从2019年12月至2020年5月到隔离,识别和测试抗菌的磁化率剖面金黄色葡萄球菌从临床乳腺炎。共有116名来自57个泌乳奶牛的牛奶样本有目的的收集与临床乳腺炎。分离和鉴定金黄色葡萄球菌进行了利用初级和二级生化测试。此外,生物测井用于微生物鉴定系统。知道该菌对抗生素产生耐药性,抗菌药物敏感性测试(ATS)上执行Mueller-Hinton琼脂扩散法的磁盘。从116年共有57哺乳期牛和奶头季度检查,21.05%(12/57)和15.52%(18/116)是积极的年代。葡萄球菌分别从临床乳腺炎。从116牛奶样品收集,15.52% (18/116)金黄色葡萄球菌是孤立的,从11个农场调查,约有72.72%(8/11)总体农场临床乳腺炎发病率由于年代。葡萄球菌被记录。所有的18金黄色葡萄球菌隔离容易发现sulphamethoxazole /甲氧苄氨嘧啶、红霉素、庆大霉素、环丙沙星和氯霉素。然而,高水平的观察电阻常用药物如青霉素(88.89%,16/18)和四环素(61.11%,11/18)。观察到的高水平的耐青霉素和四环素也表明需要访问我们引起的乳腺炎的治疗指南金黄色葡萄球菌。因此,改进管理和早期治疗的病例与药物药敏试验后的选择对于每个特定的情况下可以减少阻力的进一步发展的机会,必须解决临床乳房炎发生在埃塞俄比亚Sebeta和其他类似的农场。

1。介绍

在埃塞俄比亚,密集的和半精耕细作的奶牛场的数量一直在增加,由于城市化、人口增加,收入增长。然而,这些奶牛场的管理实践保持传统。在这样的奶牛场,乳腺炎疾病是主要的。乳腺炎是乳腺的炎症主要是由于细菌感染,它的特点是各种各样的局部和全身症状。可以预防乳腺炎通过实施适当的动物健康管理系统。然而,大多数的新兴奶牛场在埃塞俄比亚缺乏最佳管理实践,并倾向于乳腺炎(1]。

牛奶是一种全世界人类饮食中的主要组件,但是它也是一个好媒介的发展许多微生物,尤其是致病菌。然而,对消费者的健康危害可以与牛奶有关,由于人畜共患病原菌的存在和抗菌药物残留(2]。牛奶的质量可能会降低许多因素如掺假、污染期间和之后挤奶,乳房感染的存在(3]。牛奶中致病菌可以来源于牛本身,人类的手,或环境(2]。金黄色葡萄球菌是一个多才多艺的人类和动物的病原体导致各种各样的疾病(4]。

皮肤和粘膜的细菌是殖民者的入侵多个器官。在牲畜,年代。葡萄球菌乳腺炎的一个重要原因,皮肤和软组织感染(SSTI),和(在较小程度上感染运动的系统。手术部位感染(SSI)年代。葡萄球菌是孤立的报道越来越小同伴动物和马(5]。年代。葡萄球菌是最普遍和经济上重要的病原体感染引起炎症乳制品反刍动物(6]。大约30% -40%的乳房炎病例相关的细菌(7]。

金黄色葡萄球菌可以获得牛奶直接排泄与临床和亚临床乳房吗葡萄球菌的乳腺炎或在处理环境污染的原料奶(8,9]。当乳房感染,年代。葡萄球菌可能通过分泌牛奶变量数量多达108 CFU /毫升(7]。出现的抗药性细菌已成为全球公共健康问题影响人类和兽医10]。抗生素对动物的饲养管理的治疗目的或作为生长促进剂可能是一个主要因素的选择antimicrobial-resistant细菌(11]。

滥用抗生素的动物和人类疾病的治疗以及防腐剂牛奶导致多种抗生素抗性的发展,从而呈现了抗生素治疗无效。年代。葡萄球菌据报道经常显示多个抗菌素耐药性模式(12]。没有最近的研究显示当前的患病率和抗菌素耐药性年代。葡萄球菌源自牛奶Sebeta镇的中心区域的埃塞俄比亚。此外,先前的研究在该地区进行的数量也有限。因此,本研究旨在孤立,识别和确定的药敏资料金黄色葡萄球菌从临床乳腺炎的研究区域,最后建议农场主选择真正的抗生素可以治疗年代。葡萄球菌临床乳房炎引起的。

2。材料和方法

2.1。研究区域

Sebeta及周边城镇的研究,围绕Finfinne Oromia特区,埃塞俄比亚。Sebeta位于亚的斯亚贝巴以南约25公里8°55′N 37和38°E′和海拔2356米的高度(图1)。气候很好,年平均温度17.4°C,年平均降雨量1073毫米。

2.2。研究动物

本研究是在牛进行的。泌乳奶牛的品种、杂交(Holstein-Friesian-Zebu十字架)和当地的瘤牛品种,被包括在研究期间。研究人口包括泌乳奶牛,在半精耕细作和集约农业管理系统。共有57个泌乳奶牛和周围Sebeta城镇采样分离和识别年代。葡萄球菌导致临床乳腺炎。

2.3。研究设计和抽样

横断面研究从2019年12月到2020年5月来隔离,识别和确定药敏资料金黄色葡萄球菌在研究区域。11(11)奶牛场1大4中,和6小型农场,随机选择从Sebeta小镇。一个农场被认为是小的动物数量是否< 11、媒介(11日至20日)和大型(> 21)。后适当的临床检查乳房的选择上的奶牛农场,牛只显示临床乳腺炎的迹象,立意抽样的目的是分离和识别年代。葡萄球菌并知道其状态临床乳腺炎的发生。因此,57牛奶样品取样和116从116年季度收集(奶)。然而,剩下的112年季度(228 - 116 = 112)是瞎子,其中一些人在采样时间和血腥的牛奶的猫。

2.4。临床乳腺检查

识别乳腺炎的动物,奶牛的乳房被视觉检查和触诊检查存在的任何损伤,疼痛,热,和肿胀。此外,牛奶从每个季度撤回和检查任何改变颜色和一致性13]。这些临床乳房炎病例诊断的基础上表现可见的迹象,如乳腺的炎症表现为热量和肿胀和疼痛在触诊和/或总变化的牛奶,而被诊断为临床乳腺炎畸形时,萎缩,努力,和纤维化的季度检查(14]。因此,只有牛和乳房季度收集临床病例选择和牛奶的实验室测试。

2.5。样品采集和处理

样本收集无菌如[15]。他们之前收集挤奶。牛奶收集过程进行清洗乳头后,初始流牛奶丢弃,奶嘴建议擦洗用棉花球75%的酒精滋润。采集标本与螺钉帽在无菌玻璃小瓶和封闭。瓶标有一个永久的标记,以便标记很容易读当瓶放置在架子上。10毫升的牛奶瓶收集到一个水平举行第一次流牛奶后被丢弃。集合后,样品被放置在一个冰箱+ 4°C和运往国家动物健康诊断和调查中心(NAHDIC)处理和储存在4°C到接种年代。葡萄球菌分离和鉴定就开始了。

2.6。细菌鉴定

1毫升的牛奶样品收集在9毫升pre-enriched脑心浸液肉汤孵化24小时37°C。铂环量的孵化文化飞跑到甘露醇盐琼脂(OXOID)选择性和微分媒体从有氧锻炼然后孵化24小时37°C。年代。葡萄球菌是根据他们的克反应,形态、溶血、过氧化氢酶试验。甘露醇发酵殖民地镀1%麦芽糖紫色琼脂基地和检测凝固酶(4小时),色素生产(金黄色)(B图2)和麦芽糖发酵(D图2)。然后,OmniLog /生物测井(全自动涂布基于微型板块的细菌鉴定系统)使用的第三代微型板块与协议一种方法被用来进一步确认可疑的殖民地。

2.7。抗菌药物敏感性试验

药敏试验(AST)进行由磁盘Mueller-Hinton琼脂扩散法(图3(b))16]。三到五个独立殖民地的孤立年代。葡萄球菌被转移到5毫升0.85%的盐水。使用微浊度测量和调整到0.5麦克法兰(图3(a))。测量浊度后,无菌棉拭子浸入暂停然后Mueller-Hinton琼脂板是由旋转接种60°。抗菌光盘被应用于媒体使用盘式分配器和培养16小时。

测量带的抑制是通过使用一个数字卡尺。10抗菌素选择根据国家埃塞俄比亚AMR监测战略文档(17]。青霉素G, 10单位;阿莫西林+克拉维酸(20 + 10),30岁μg;环丙沙星,10μg;头孢西丁,30μg;氯霉素,30μg;四环素,30μg;庆大霉素,30μg;红霉素,15μg;sulphamethoxazole /甲氧苄氨嘧啶;头孢噻肟,30μg (OXOID光盘),测量区抑制期间使用。标准断点解释基于临床和实验室标准协会(18),而年代。葡萄球菌写明ATCC 25923作为质量控制在每次运行压力。

2.8。数据管理和分析

使用Microsoft Excel数据管理和计算的描述性统计。数据编码和进入MS Excel电子表格。比例计算的总数除以积极隔离/牛的总数和季度检查。

3所示。结果

3.1。细菌的分离和鉴定

从116年共有57哺乳期牛和奶头季度检查,21.05%(12/57)和15.52%(18/116)是积极的年代。葡萄球菌分别造成临床乳腺炎(表1)。从116牛奶样品收集,15.52% (18/116)金黄色葡萄球菌被隔绝泌乳奶牛有临床乳腺炎的形式揭示乳腺炎的活跃情况下可见炎症的迹象在乳腺和牛奶质量的变化。

在这项研究中,总共有11个农场和8的农场被发现积极的调查年代。葡萄球菌(表2)。因此,整个群临床乳腺炎发病率由于年代。葡萄球菌被记录为72.72%。

3.2。药敏资料

18药敏数据年代。葡萄球菌隔离表所示3。所有18个年代。葡萄球菌隔离是容易sulphamethoxazole /甲氧苄氨嘧啶、红霉素、庆大霉素、环丙沙星和氯霉素。阻力的各种利率,88.89%(11/18)对青霉素,61.11%(11/18),四环素、头孢西丁5.56%(1/18),5.56%(1/18),阿莫西林+克拉维酸,在这项研究中(表进行记录3)。

的耐药年代。葡萄球菌隔离2(11.11%)被发现对3抗生素耐药盘主要对青霉素G,四环素、头孢西丁、阿莫西林+克拉维酸和8(44.44%)隔离是耐青霉素G和四环素。

4所示。讨论

这项研究是进行所有类型(小,中,大)的奶牛场Sebeta城里隔离年代。葡萄球菌从季度显示临床乳腺炎和确定的流行年代。葡萄球菌临床乳房炎引起的。结果显示整体患病率15.52%,季度水平,21.05%在牛的水平年代。葡萄球菌临床乳房炎引起的。

在当前的研究中,发现15.52%的年代。葡萄球菌被孤立和确定从季度临床乳腺炎。类似的结果被报道Esron et al。4),报告15.5%年代。葡萄球菌临床乳腺炎和患病率13.3%年代。葡萄球菌季度隔离在亚的斯亚贝巴奶牛场。本研究的发现是高于先前的报道。这个更高的患病率可能是由于糟糕的管理实行的农场。时间收集样品的过程中,我们观察到,他们不遵循严格的农业生物安全,妥善清洁地板,和洗涤的动物尸体。此外,他们也不练习正确的挤奶顺序,它是健康奶牛挤奶(奶牛乳腺炎),然后接着挤奶的健康,然后最后,挤奶,奶牛临床乳腺炎。

然而,较高的检出率被其他作者报道(19,20.人孤立年代。葡萄球菌73.3%和40.5%的发病率在季度和动物水平,分别从亚的斯亚贝巴奶牛场。盛行的年代。葡萄球菌是由于其传染性的性质和适应生存的乳房,建立慢性和亚临床感染。从乳房,有棚的牛奶,作为感染源健康奶牛在挤奶过程中(21]。

很难消除乳腺的细菌由于非常低的自我治愈,很多因素影响治疗后治愈,这是一般低(22]。群/农场患病率也记录高(72.72%),这意味着从十一(11)农场采样,八(8)发现阳性年代。葡萄球菌。这也是由于糟糕的管理实行的农场和由于临床乳腺炎的治疗用抗生素(青霉素G和四环素)具有耐药性年代。葡萄球菌。

同样,目前的研究表明一个非常高水平的阻力位为88.89%和61.11%金黄色葡萄球菌分别分离青霉素G和四环素(表3)。这么高的年代。葡萄球菌耐青霉素G和四环素抗生素可能是由于这样的事实,农场的动物卫生专家/区域没有其他药物的首选治疗乳腺炎,相反,他们反复使用青霉素G和四环素治疗期间。本研究的发现类似于(23电阻),报告96.7%,(24),报告87.2%的阻力。这种高水平的阻力是由于生产青霉素酶酶(一种隔离β内酰胺酶)水解beta-lactam青霉素(环25]。

5。结论和建议

目前的研究表明更高的发生年代。葡萄球菌引起临床乳腺炎在动物水平和非常高的患病率在农场/群水平考虑乳腺炎也可以发生在亚临床形式在农场。隔离的年代。葡萄球菌从临床乳腺炎展示了惊人的存在的阻力水平常用的抗菌药物,如青霉素G和四环素暗示可能抵抗长时间的发展,不加选择地使用的抗生素。另一方面,S。葡萄球菌还发现敏感抗生素如甲氧苄氨嘧啶、红霉素、庆大霉素、环丙沙星和氯霉素,表明这些抗生素没有常用的农场乳腺炎的治疗选择。

上述研究结果的基础上,下面的建议转发:(我)农场管理等农业生物安全,良好的农场卫生,挤奶秩序应该练习,提高预防和控制年代。葡萄球菌乳腺炎和农场的牛奶产量最大化(2)作为一个短期的解决方案,牛阳性发现年代。葡萄球菌与临床乳腺炎应与红霉素治疗或者庆大霉素、环丙沙星抗生素治疗乳腺炎和最小化风险传染给其他健康的奶牛(3)实现一个系统的应用程序在体外抗生素敏感性试验前使用抗生素在治疗和预防乳房内的感染,它可以被视为一个长期的解决方案来控制乳腺炎(iv)常规筛查和带杯考试的奶牛和文化等细菌感染季度检查应进行适当的治疗管理。

数据可用性

使用的数据集和分析在当前研究可从相应的作者在合理的请求。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

确认

作者要感谢国家动物健康诊断和调查中心(NAHDIC)金融、物流、和其他材料的支持。作者承认研究区域的农场主人收集样品的过程中自愿的参与和支持。

引用

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