喀麦隆马鲁瓦地区比较皮内结核菌素试验诊断牛结核病的解释标准

摘要

皮内结核菌素试验(TST)是活体牛结核病(Tb)诊断的首选方法。这项工作是为了评估单一皮内比较宫颈结核菌素(SICCT)试验在喀麦隆马鲁瓦随机选取的牛身上的效果，对结核病灶的检测以及病灶中结核病灶和抗酸杆菌的检测。屠宰牛在肉品检验中出现结核病变的比例为22.28%，抗牛-结核抗体检出率为68.57%，结核病变检出率为32.95%，结核病变加抗酸杆菌检出率为22.35%。≥2 mm、≥2.5 mm、≥3 mm、≥3.5 mm和≥4 mm切割处sicct -牛- tb阳性牛分别为35.29%、29.41%、25.88%、24.7%和21.18%。在严重的解释中获得较高的敏感性和预测值。在≥3mm和≥3.5 mm切割时性能最好。对于结核病灶，≥3mm和≥3.5 mm的敏感性为67.8%，特异性为94.7%和96.5%。≥3mm和≥3.5 mm的结核病灶检出灵敏度为89.4%，特异性为92.4%和93.9%。这些发现揭示了sicct -牛- tb的解释应该在≥3 mm和/或≥3.5 mm的截断点。严格的TST解释对于喀麦隆马鲁瓦地区牛结核病的最佳诊断至关重要。

1.介绍

牛结核病(Tb)是一种主要由动物和人类引起的慢性细菌性疾病牛结核分枝杆菌．虽然在包括喀麦隆在内的撒哈拉以南非洲，但牛结核病被忽视并受到潜意化[1那2］．在牛结核病流行且未得到控制或部分控制的地区，人结核病是由于牛分枝杆菌进食受污染的鲜奶和肉类产品，以及吸入受感染牛只的咳嗽喷雾剂，可能会引致咳嗽[3.-8.］．在喀麦隆的一些地区，通过比较宫颈结核菌素试验、在屠宰场屠宰肉检验中发现结核病变、杆菌抗酸染色和培养分离菌的分子分析，已诊断出牛普遍存在结核病[1那9.那10］．同时,牛分枝杆菌在喀麦隆西部和西北部地区已报告人类感染禽流感[11那12］．

牛结核病对牲畜和动物产品的国际贸易有重大影响[13］．皮内注射结核菌素皮肤试验(TST)是国际领域的选择方法诊断牛结核病的活的动物和世界动物卫生组织(OIE)建议增加皮肤厚度差异测试的积极应该至少4毫米后72小时(13］．然而，TST的性能受到环境和宿主因素以及所用结核菌素的性质的影响[14-19]。特定地理区域或国家的完美分界点在其他环境或其他国家可能没有用处[14那17那20.[测试真正的阳性疾病状态的测试能力取决于其在所测试的人口中疾病的敏感性，特异性和患病率[14］．世界动物卫生组织建议的截止值主要是在发达国家制定的牛根据特定国家的疾病状况及其疾病控制计划的目标，采用牛和不同的临界值[17］．乍得、埃塞俄比亚和坦桑尼亚采用了严厉的解释[15那17那21-23在地区或畜群中牛分枝杆菌根据兽医的酌情决定，证实感染[17］．

TST结合屠宰阳性反应堆检查结核病变;疑似结核病标本培养;和其他现代诊断技术(例如γ -干扰素、ESAT-6试验以及血清学和荧光偏振试验)已经进行了比较，并正在验证在各种环境条件下最大限度地诊断牛结核病[14那24-28］．本研究旨在评估喀麦隆马鲁瓦地区牛结核患病率，评估TST在诊断牛结核瘤牛中的诊断效果。

2.材料和方法

2．1.研究区域及人口

从Maroua附近的牲畜市场上取牛，准备在Makabaye屠宰场屠宰。Makabaye屠宰场为Maroua市及其周边地区(北纬10°30 ' -10°40 '和东经14°20 ' -14°30 ')的居民提供牛肉，每天大约屠宰20头牛。Awah-Ndukum等人记录的TST牛结核病患病率为4.67% (3.89%-5.44%)[29在喀麦隆高地使用国际兽疫局推荐标准，以95%的置信度和预期精度≥5%(如前面所述)估计检测至少一个阳性反应器所需的牛数[30.］．该研究的牛的选择是基于动物随机到达屠宰场和牛主从屠宰场的每日记录中随机生成的方法，他们的动物被判断为适合屠宰。然而，用于TST性能研究的牛是被判定适合屠宰且至少在屠宰场停留72小时后才屠宰的牛。

2.2。牛结核病的检测

2013年11月至2014年3月，通过颈静脉穿刺法从175头随机选择的屠宰牛身上采集血液，提取血清进行抗BTb抗体（抗牛Ab®）的横向流动分析。单皮内比较性宫颈结核菌素（SICCT）对175只随机选择的动物中的86头进行了皮肤试验[13在至少72小时后被屠杀。在屠宰这175只动物之后，根据政府关于兽医卫生检查和动物传染病通报的立法，JT在屠宰场兽医人员的协助下进行了密集的肉类检查[31］．如前所述，尸体的尸检也证实了病理学的证据[32-34］．简单地说，检查程序采用肉眼检查和触诊肺、肝、肾、胸部和头部的淋巴结、肠系膜淋巴结、身体的其他淋巴结和胴体的其他部位/器官。

血清被提取并储存在−20°C，直到进行分析。同样,68组织标本,可疑肺结核病变(53个胸和7腹部淋巴结和肝组织8日)从86年SICCT牛结核病牛屠宰的175瘤牛研究中收集到无菌塑料容器和储存在−20°C分析前两个月。个别动物的资料，例如检查门齿估计的年龄[35，性别，品种[31那36，以及身体状况评分[37]在采血时被记录。磨碎结核病灶[38]，直接涂片镜检及Ziehl-Neelsen (ZN)染色证实抗酸结核杆菌和侧流快速检测血清抗体均按标准程序进行[13那39-41[如制造商所述（Anigen Bovine TBAb®，Bionote Inc.，韩国）所述。简而言之，在即可使用的一次性侧向流动套件中，10 μL的检测血清倒进样品孔中，1分钟后，将3滴显影缓冲液(试剂盒提供的一部分)放入缓冲孔中。20分钟后对结果进行解释。结果窗口中出现两条紫色条带，即检测区域和控制线，表明抗体结果为阳性，而除了可见的紫色控制线外，检测区域中没有条带为阴性。无效的测试是在结果窗口内看不到有色带。对照色带的出现，无论是阳性的还是阴性的分析，都表明试验工作正常。

研究人员对项目进行了风险评估，以避免对参与项目的所有人和动物造成危害。在进行研究之前，需要获得相关部门的伦理许可。研究目的通常是在当地兽医、屠宰场当地领导和或可信赖的中介机构的协助下向目标参与者解释的。在得到主人的知情同意后，对动物进行了测试。除了小颈静脉穿刺采血，皮内注射禽类和牛结核菌素，以及为安全目的的程序性限制操作，动物没有遭受痛苦。屠宰和处理牛尸的工作按喀麦隆兽医服务部门所述进行[31］．包括锌染色在内的所有实验室分析均在配备II类生物安全柜的实验室进行。

2．3.数据分析

数据录入Microsoft Excel，然后转入SPSS 20和R软件。不同的诊断技术产生了牛结核病的频率分布。采用卡方检验评估TST的敏感性，并评估各种相关性。中华民国(接收操作特性)分析亦用于评估TST在不同分界点的诊断表现[30.］．

结果

3.1。牛结核病的患病率

研究期间在Makabaye-Maroua屠宰的736头牛中，22.28%(164头)以上的牛在肉类检验时出现肉眼可见的结核病变。牛结核病病变分布如下:123(9.76%)的雄性动物,152 613(24.80%)的雌性动物,44岁的133(33.08%)动物5到10年,120年的597(20.10%)动物年龄超过10年,62年的302 (20.53%)Peulh萨赫勒瘤牛,86 242(35.54%)像是属于博罗罗/富拉尼族瘤牛,192(8.33%)和16 Toupouri-Massa瘤牛。

随机抽取175头牛，采用侧流法检测其抗牛Tb抗体阳性率为68.57% (95% CI: 61.69 ~ 75.45)。对这175头牛中的86头进行了单皮内比较宫颈结核菌素(SICCT)皮肤试验，结果显示30头(35.29%，95% CI: 25.1-45.4)、25头(29.41%，95% CI: 19.7-39.1)、22头(25.88%，95% CI: 16.6-35.2)、21头(24.7%，95% CI: 15.5-33.8)和18头(21.18%，95% CI:12.5-29.8)在≥2mm、≥2.5 mm、≥3mm、≥3.5 mm和≥4mm分界点处的阳性反应釜。86只动物中，28只(32.95%，95% CI: 22.95-42.93)和19只(22.35%，95% CI: 13.5-31.2)分别检出结核病灶和结核病灶+抗酸杆菌。超过73.26%(63)的86 SICCT动物anti-bovine阳性结核抗体相应的明显的利率为3.49%,31.40%,29.07%,25.58%,24.42%,和20.93%的动物SICCT牛结核病和anti-bovine结核抗体阳性< 2毫米,≥2毫米,≥2.5毫米,≥3毫米,≥3.5毫米,和≥4毫米截止点,分别。

３.２．结核菌素皮试在牛结核检测中的诊断性能

在喀麦隆马鲁阿，使用结核病灶检测和结核病灶中伴有抗酸杆菌的检测作为确定疾病状态的参考，SICCT技术在不同临界点诊断牛结核病的性能如表所示1．根据计算出的SICCT与结核病灶和结核病灶加抗酸杆菌检测的敏感性和特异性值，重度解释SICCT检测可检出更多疾病病例。SICCT在≥2.0 mm分界点检出病例最高，但在≥3 mm和≥3.5 mm分界点检出病例总体表现较好。SICCT在≥3mm和≥3.5 mm切点处的敏感性与≥4mm切点处的敏感性无显著性差异[]对结核病变的检测，但显著高于[]以检测结核病变和抗酸杆菌来确定疾病状态。

值得一提的是，总的来说，SICCT的预测值通常更高≥3. 嗯和≥3.5 mm截止点与建议的OIE相比(≥4. 事实上，SICCT检测结核病灶的阳性预测值为73.3（63.9–82.7）；80.0（71.5–88.5）；86.3（78.9–93.6）；90.4（84.1–96.6）；88.8（82.1–95.5）和阴性预测值为89.0（82.3–95.6）；86.6（79.3–93.8）；85.7（78.2–93.1）；85.9（78.5–93.2）；82.0（73.8–90.1）在≥2. 嗯，≥2.5 嗯，≥3. 嗯，≥3.5 嗯,还有≥4. 因此，SICCT检测结核病灶和抗酸杆菌的阳性预测值为63.3（53.05–73.54）；72（62.45–81.54）；77.3（68.39–86.20）；81（72.66–89.34）；77.8（68.96–86.63）和阴性预测值为100；98.3（95.5–100）；96.8（93–100）; 96.9 (93–100); 92.5 (86.9–98.1).

此外，中华民国(接收操作特性)分析发现，在截断点< 4mm处曲线下面积明显增大，尤其是在截断点≥3.5 mm处[0.822(0.711-0.932)]和病灶中检出结核病灶+抗酸杆菌[0.92(0.83-1)][图]1］．根据检测到所有SICCT截止点的TB病变的ROC曲线下的区域在0.7和0.9之间，表明这些截止值仅对牛TB的检测相当富有信息。但是，截止点≥3.5mm的SICCT显着更高（)与SICCT相比，在≥4mm截止点的区分能力。ROC曲线根据检测的检测肺结核病变+抗酸杆菌的病变,所有SICCT截止点< 4毫米0.9和1之间,尤其是≥3毫米和≥3.5毫米截止点,表明这些截止值非常的牛结核病的检测。因此，ROC结果也证实了SICCT牛结核病检测的严重解释[特别是在≥3mm和≥3.5 mm截断点]的敏感性和特异性评估。

4.讨论

本研究中牛的宏观结核病变检出率[22.28–32.95%]远高于喀麦隆沿海和西部高地地区报告的<1%至4.25%的检出率[29那42]，而抗牛结核病抗体的流行率[68.57%和73.26%]高于巴门达地区的60% [42]，高原地区为37.17% [43］．同样，基于截止点≥4mm，≥3mm和≥2mm的结核病皮肤测试的显着较高的SICCT牛TB流行估计值为3.59％-7.48％，8.92％-13.25％和11.77％AWAH-Ndukum等人记录的-17.26％。[43在高地地区。然而，本研究中SICCT牛结核病/抗牛结核病抗体动物反应率与Awah-Ndukum等人的结果一致[43报告SICCT牛结核病/抗牛结核病抗体反应器的比例显著高于≥2 mm组，其次是≥3 mm和≥4 mm截断点组。这些发现表明，与喀麦隆其他地区相比，马鲁瓦地区牛结核病在牛中高度流行，需要对SICCT牛结核病结果进行严格解释。

尸检的结核病病变和示范的抗酸杆菌直接显微镜是在这项研究中用于定义疾病状态牛,牛结核病的结核菌素皮肤试验的性能评估与细菌学的文化,是在其他地方使用参考诊断测试(13］．然而，结核病变的检出比检出病变中有抗酸杆菌的结核病变的灵敏度低。Ameni等人也使用了结核病灶的肉眼检查和抗酸杆菌的显示[15在埃塞俄比亚和Ngandolo等人[21]，以评估结核菌素皮试的诊断效果。在这项研究中，在喀麦隆马鲁瓦的牛中获得了在严重SICCT解释，特别是≥3mm和≥3.5 mm的牛结核病的最佳检测结果。这些发现与Ameni等人的发现相似[15据据督察，在埃塞俄比亚的严重解释> 2 mm截止点的严重解释中获得了埃比亚牛牛结核蛋白皮肤试验的改善诊断性能。在乍得，Ngandolo等。[21[还表示，阿拉伯Zebus和博罗罗Zebus的结核蛋白皮肤测试的最佳诊断性能> 2 mm截止点。目前的结果与AWAH-Ndukum等人的同意。[43他观察到，与喀麦隆高原[阿达马瓦和西北]的Goudali、Red Bororo和White Fulani zebus及其杂交品种的抗牛结核病抗体检测相比，结核菌素皮肤试验在≥3 mm切点处获得了更好的牛结核病诊断。

结核菌素皮肤试验是目前在活体动物中对牛结核病进行国际现场诊断的最有效和负担得起的技术[14那24］．此外，测试基于延迟的超敏反应[13］．皮内比较宫颈结核菌素(ICCT)皮肤试验涉及在颈部皮肤的不同部位皮内注射牛结核菌素(BT)和鸡结核菌素(AT)，比只使用BT的简单皮内结核菌素(SIT)皮肤试验提供更具体的结果[16那17］．世界动物卫生组织(OIE)建议，在72小时后，测试呈阳性的皮肤厚度增加幅度应为>4毫米。[13］．然而，世界动物卫生组织建议的临界值主要是在发达国家设立的牛牛[15，在牛结核病患病率极低[≤0.1%]的流行病学背景下，并实施严格的检测和屠宰根除政策[24］．事实上，世界各地根据某一特定国家的疾病状况及其疾病控制方案的目标采用了不同的截止值[17].例如，在非洲，>2 嗯，≥3. 嗯，>4 嗯,还有≥4. 乍得、埃塞俄比亚和坦桑尼亚使用了毫米截止点[15那17那22那23那44］．

ROC分析和敏感性评估支持本研究中结核菌素皮肤试验的严格解释，特别是≥3mm和≥3.5 mm切点和[43]提出了对结核菌素皮肤试验诊断牛结核病的严格解释BOS奖项喀麦隆的牛，那里的牛结核病流行率高且广泛。结核菌素皮肤试验的表现也受到环境因素、宿主因素（免疫状况、遗传学等）、受试人群中疾病的流行率以及所用结核菌素性质的影响[14-19］．一个特定地理区域的完美分界点在另一个环境中可能就没有那么有用了[14那17]测试能力准确预测真正的阳性疾病状态取决于其在所测试的人口中疾病的敏感性，特异性和患病率[14］．结核菌素皮肤试验的过高敏感性会在解释试验结果时产生假阳性反应。然而，改进诊断的严格解释已经在以下地区或畜群中进行牛分枝杆菌根据兽医的酌情决定，证实感染[17］．

在本研究中，以结核病灶检测为参比试验的结核菌素皮试的最佳个体灵敏度[≥3.5 mm截点时67.8%(57.8-77.7)]低于世界动物卫生组织(OIE)的中位个体灵敏度[80% (52.0-100)][13]推荐> 4 mm截止点[14］．结核菌素皮试在≥3.5 mm切点处的最佳个体敏感性(89.4%(82.8-95.9))高于OIE在推荐切点处的最佳个体敏感性中位数(82.8-95.9)。OIE建议的值是一个非常宽的离散值(52.0-100%)的中位数，相比之下，本研究中最佳总体值的离散值非常窄(57.8-77.7%和82.8-95.9%)。SICCT牛结核病检测,研究显示高(检测肺结核病变和无意义的重要检测肺结核病变伴有空军基地病变的金标准)敏感性严重(< 4毫米截止)解释相比,解释世界动物卫生组织建议(≥4毫米)截止值。对SICCT结果的严格解释诊断出更多的牛结核病病例，这对于管理高人畜共患病潜力非常重要[1]，以及高度的社会经济和文化影响[45在喀麦隆发现了牛结核病。本研究获得的敏感性与Ameni等人的值相似[15谁报道了埃塞俄比亚和Delafosse等人的2毫米截止点68.8％。[23在乍得，94%的患者≥4毫米。结核菌素皮试的敏感性受多种因素影响，过敏反应随动物的不同而有较大的波动。由注射结核菌素引起的迟发性超敏反应可在宿主暴露于杆菌制剂3至6周后出现，而最近感染的动物可能对注射结核菌素没有充分反应[46].短期内，幼小动物[小牛]和怀孕母牛[母牛]的反应会减少[47］．

据报道，在结核菌素皮试期间，无能量会导致假阴性反应，但其原因尚不清楚[48］．然而，最近感染的牛，由于营养不良、胃肠道寄生虫、其他并发感染而处于应激状态的牛，以及患有广泛性结核病的牛，将对结核菌素皮肤试验无反应[47那48］．因此，不应排除牛呈现差异SICCT皮肤厚度≤4mm的差异≤4mm，它们不受牛结核病的影响，尤其是高处流行区域和动物致敏感的动物，例如在喀麦隆29］．这些动物实际上可以被感染，但根本可能没有反应或未反应，因为它们的免疫系统可能不会被充分刺激≥4mm OIE在推荐的截止点发生的阳性反应[47那48］．此外，诸如压力的条件可能会损害其免疫功能[49动物可能对环境分枝杆菌敏感[50］．此外，在疾病的晚期或病程接近尾声时，受感染宿主的能力可能达到饱和，预期的超敏反应可能无法观察到[51］．此外，有些动物可能在其整个生命周期内完全无能量[24那52］．这些现象是结核菌素皮肤试验敏感性随环境和动物种群变化而波动的原因。

本研究表明，在截断值小于世界动物卫生组织(OIE)推荐的截断值>4 mm的情况下，对结核菌素皮试进行严格的解释对于最佳诊断牛结核病至关重要BOS奖项在喀麦隆马鲁瓦的牛。考虑到该区域的流行病学和环境背景，应在≥3毫米或≥3.5毫米的分界点进行解释。

相互竞争的利益

两位作者宣称他们没有相互竞争的利益。

参考文献

1. J.Awah Ndukum，A.C.Kudi，G.S.Bah，G.Bradley，V.Ngu Ngwa和P.L.Dickmu，“喀麦隆高原牛结核病的风险因素分析和对公共卫生的影响，”非洲动物卫生和生产通报第62期4，pp。353-376,2014。浏览：谷歌学术搜索
2. A. R. Boukary, E. Thys, S. Mamadou等人，“La结核病à牛结核分枝杆菌en Afrique subsaharienne。”Médecine Vétérinaire，卷。155，pp。23-37,2011。浏览：谷歌学术搜索
3. C.H.柯林斯和J.M.格兰奇，“动物传染的含义牛结核分枝杆菌感染。”爱尔兰兽医杂志》，卷。41，pp。363-366,1987。浏览：谷歌学术搜索
4. O. Cosivi, J. M. Grange, C. J. dabn等人，“人畜共患结核病由于牛结核分枝杆菌在发展中国家,“新发传染病，第4卷，第4期。1，页59-70,1998。浏览：出版商的网站|谷歌学术搜索
5. E.Etter、P.Donado、F.Jori、A.Caron、F.Goutard和F.Roger，“风险分析与牛结核病，一种重新出现的人畜共患病，”纽约科学院的历史，第1081卷，第61-73页，2006，新出现的人畜共患病对动物健康的影响:第八届热带兽医学会两年一次会议。浏览：谷歌学术搜索
6. G.Moda、C.J.Daborn、J.M.Grange和O.Cosivi，“动物传染的重要性牛结核分枝杆菌,”肺结核和肺病第77期2，第103-108页，1996。浏览：出版商的网站|谷歌学术搜索
7. C. Thoen, P. LoBue, and I. de Kantor， "重要性牛结核分枝杆菌是一种人畜共患病,”兽医微生物学，第112卷，第112期。2-4，页339-345,2006。浏览：出版商的网站|谷歌学术搜索
8. J. E. Shitaye, W. Tsegaye, I. Pavlik，“埃塞俄比亚动物和人类人群中的牛结核病感染:综述”，Veterinarni药物号，第52卷。8，页317-332,2007。浏览：谷歌学术搜索
9. J. Awah-Ndukum, A. C. Kudi, G. Bradley et al.，“分子基因分型牛结核分枝杆菌从喀麦隆西北部地区的牛组织中分离出来的，”热带动物卫生与生产第45卷第5期3, pp. 829-836, 2013。浏览：出版商的网站|谷歌学术搜索
10. F.Koro Koro、E.F.Bouba、A.F.Ngatchou、S.Eyangoh和F.-X.Etoa，“对喀麦隆屠宰牛中当前牛结核病流行率的首次洞察：雅温得和杜阿拉主要屠宰场的案例，”英国微生物学研究杂志，第3卷，第2期。3，页272-279,2013。浏览：出版商的网站|谷歌学术搜索
11. S. N. niobee - eyangoh, C. Kuaban, P. Sorlin et al.， "遗传多样性结核分枝杆菌喀麦隆肺结核患者的复杂菌株，”临床微生物学杂志号，第41卷。6，PP。2547-2553,2003。浏览：出版商的网站|谷歌学术搜索
12. “喀麦隆牛结核病的分子流行病学研究”第6届国际M. Bovis会议的诉讼程序，卡迪夫，英国，2014。浏览：谷歌学术搜索
13. 世界动物卫生组织,陆生动物诊断试验和疫苗手册，2009年，《2008年世界动物卫生组织陆地手册》，世界动物卫生组织，法国巴黎，2009年，http://www.oie.int/eng/normes/mmanual/a_summry.htm.．
14. R. T. Goodchild, M. Vordermeier, R. Clifton-Hadley, R. de la Rua-Domenech，《牛结核病的尸检诊断:未经证实的试验反应堆的重要性》，政府兽医杂志》，第16卷，第5期。1, pp. 65-71, 2006。浏览：谷歌学术搜索
15. G. Ameni, G. Hewinson, A. Aseffa, D. Young, M. Vordermeier，“比较皮内结核菌素试验用于埃塞俄比亚中部牛结核病诊断的解释标准评估”，临床和疫苗免疫学，第15卷，第5期。8, pp. 1272-1276, 2008。浏览：出版商的网站|谷歌学术搜索
16. J.Francis、C.L.Choi和A.J.Frost，“牛结核病的诊断，特别是牛PPD结核菌素，”澳大利亚兽医杂志》，第49卷，第49期。5，页246-251,1973。浏览：出版商的网站|谷歌学术搜索
17. M. L. Monaghan，M.L.Veherty，J. D.Colins，J.F. Kazda和P. J.Quinn，“Tuberculin测试”，兽医微生物学，卷。40，不。1-2，pp。111-124,1994。浏览：出版商的网站|谷歌学术搜索
18. T.Marcotty，F. Matthys，J.Goyfroid等，“非洲的肺结核和布鲁克病：被忽视的一群或少数公共卫生问题？多学科研讨会的结果，“热带医学和寄生虫学，第103卷，第5期，第401-4112009页。浏览：出版商的网站|谷歌学术搜索
19. M.-F。Humblet, M. Gilbert, M. Govaerts, M. Fauville-Dufaux, K. Walravens, and C. Saegerman，“基于全国分子流行病学对比利时牛结核病危险因素的新评估”，临床微生物学杂志，第48卷，第48期8，页2802 - 2808,2010。浏览：出版商的网站|谷歌学术搜索
20. S. a . J. Strain, M. James和W. J. M. Stanley，“牛结核病:牛中牛分枝杆菌感染诊断试验综述”，农业食品和生物科学研究所细菌学分会兽医科学部，卷。45，PP。8-23，2011年。浏览：谷歌学术搜索
21. B. N. Ngandolo, C. Diguimbaye-Djaibé， B. Müller等，“结核牛的诊断和死后检验:牛的尸体destinés à l’attage，”Revue d'Élevage et de Médecine Vétérinaire des Pays Tropicaux第62期1，第5-12页，2009。浏览：谷歌学术搜索
22. R. R. Kazwala, D. M. Kambarage, C. J. Daborn, J. Nyange, S. F. H. Jiwa，和J. M. Sharp，“坦桑尼亚南部高地牛中发生牛结核病的相关危险因素”，兽医研究通讯，卷。25，不。8，pp。609-614,2001。浏览：出版商的网站|谷歌学术搜索
23. A. Delafosse, F. Goutard和E. Thébaud，“Epidémiologie de la tuberculosis and de la brucellose des bovins en zone périurbaine d'Abéché， Tchad，”Revue d'Élevage et de Médecine Vétérinaire des Pays Tropicaux，第55卷，第55期1，页5-13,2002。浏览：谷歌学术搜索
24. R. de la Rua-domenech，A.T. Goodchild，H. M.Vordermeier，R. G.Hewinson，K.H. Christiansen和R. S. Clifton-Hadley，“牛结核病诊断：对结核蛋白检验的审查，γ-干扰素分析和其他辅助诊断技术兽医科学研究，第81卷，第2期，第190-210页，2006年。浏览：出版商的网站|谷歌学术搜索
25. J. M. Pollock, J. McNair, H. Bassett等人，“对ESAT-6的特异性延迟型超敏反应确定结核病感染牛，”临床微生物学杂志号，第41卷。5，页1856-1860,2003。浏览：出版商的网站|谷歌学术搜索
26. M. Amadori, S. Tameni, P. Scaccaglia, S. Cavirani, I. L. Archetti, R. Q. Giandomenico，“抗体检测鉴定牛结核分枝杆菌来华的牛羊群。”临床微生物学杂志第36卷第2期2, 1998。浏览：谷歌学术搜索
27. B. M. Buddle, P. G. Livingstone，和G. W. de Lisle，“牛结核病死前诊断的进展”，新西兰兽医杂志(第57卷)4，第173-180页，2009。浏览：出版商的网站|谷歌学术搜索
28. M.L.Thom，J.C.Hope，M.McAulay等人，“结核菌素试验对牛分枝杆菌感染期间细胞介导免疫反应发展的影响，”兽医免疫学和免疫病理学，第114卷，第2期。1-2，页25-36,2006。浏览：出版商的网站|谷歌学术搜索
29. J. Awah-Ndukum, A. C. Kudi, G. Bradley等，“根据对屠宰牛的损伤检测和活牛的结核菌素皮肤试验，喀麦隆高地牛结核病流行情况”，Veterinarni药物(第57卷)2，第59-76页，2012。浏览：谷歌学术搜索
30. m . Thrusfield兽医流行病学，卷。610布莱克威尔出版公司，《布莱克威尔科学》，英国牛津，2007年第3版。
31. MINEPIA，“La stratégie sectoriel de l'élevage, des peches et industries animales”机柜管理2000 MINEPIA， A. Doufissa, Ed.，牲畜、渔业和动物工业部，雅温得，喀麦隆雅温得，2002年。浏览：谷歌学术搜索
32. 粮农组织、主要动物保健工作者手册，联合国粮食及农业组织，罗马，意大利，1994。
33. j·f·格雷西和d·s·柯林斯，肉卫生， Bailliére Tindall，伦敦，英国，第9版，1992。
34. 答:谷物,牛肉检验-解剖、生理和疾病条件，诺丁汉大学出版社，英国诺丁汉，第二版，2008年。
35. j . Turton如何估算牛的年龄，国家农业部，ARC-Onderstepoort兽医研究所，比勒陀利亚，南非，1999。
36. r .退缩传统牲畜品种:西非生态的地理分布和动态，海外发展研究所，伦敦，英国，1999。
37. M. J.尼科尔森和M. H.巴特沃斯，瘤牛状况评分指南，国际非洲畜牧中心，亚的斯亚贝巴，埃塞俄比亚，1986年。
38. C. Diguimbaye, M. Hilty, R. Ngandolo等，“药物的分子特性和耐药测试结核分枝杆菌从乍得分离出来，”临床微生物学杂志，第44卷，第4期，第1575-1577页，2006年。浏览：出版商的网站|谷歌学术搜索
39. B. E. Strong和G. P. Kubica，分枝杆菌结核分枝杆菌的分离和鉴定 - II级实验室的指南美国，亚特兰大，亚特兰大，1985年，公共卫生服务部门，实验室改进计划办公室，实验室培训和咨询部门。
40. 世卫组织结核病控制中的实验室服务.第三部分：培养，世界卫生组织（WHO），日内瓦，瑞士，1998年。
41. WHO，结核病控制的实验室服务第二部分:显微镜，世界卫生组织，瑞士日内瓦，1998年。
42. J. Awah Ndukum, a . Caleb Kudi, G. Bradley, I. N. Ane-Anyangwe, S. Fon-Tebug, J. Tchoumboue， "喀麦隆沿海和西部高地地区屠宰场的牛结核病流行:引起公众健康关注的一个原因"，兽医国际，卷。2010年，第495015号，8页，2010年。浏览：出版商的网站|谷歌学术搜索
43. J. Awah-Ndukum, A. C. Kudi, G. S. Bah等，“喀麦隆高地牛的牛结核病:改良切断处血清流行率估计和结核菌素皮肤试验反应堆的比率”，兽医国际文章编号798502,13页，2012。浏览：出版商的网站|谷歌学术搜索
44. B.N.R.Ngandolo，B.Müller，C.Diguimbaye Djaïbe等人，“荧光偏振和结核菌素皮肤试验在乍得牛结核病诊断中的比较评估，”预防兽医学，第89卷，第89期。1-2页，81-89,2009。浏览：出版商的网站|谷歌学术搜索
45. J.Awah-Ndukum，K.P.P.Mingoas，V.NGU NGWA，M.G.V.Ndjaro Leng和P. A.Zoli，“屠宰场的Sodepa Abattir中的屠体和器官谴责的原因和相关财务损失”全球Veterinara，出版。浏览：谷歌学术搜索
46. J. Francis，“对结核病的易感性和感染途径”澳大利亚兽医杂志》，第47卷，第9号，第414页，1971年。浏览：出版商的网站|谷歌学术搜索
47. G. Ameni和G. Medhin，“胃肠道寄生虫病对牛结核病诊断中结核菌素试验的影响”，应用动物研究学报第18卷第2期2，页221-224,2000。浏览：出版商的网站|谷歌学术搜索
48. F. O. Inangolet, B. Demelash, J. Oloya, J. Opuda-Asibo和E. Skjerve，“乌干达Katakwi和Moroto地区边境地区迁移和农牧牛群中牛结核病的横断面研究”，热带动物卫生与生产，第40卷，第7期，第501-508页，2008年。浏览：出版商的网站|谷歌学术搜索
49. C. O. Thoen, P. a . LoBue, D. a . Enarson, J. B. Kaneene, and I. N. de Kantor，《结核病:动物和人类的一种重新出现的疾病》，veterinaria Italiana.第45卷第5期1，pp。135-181,2009。浏览：谷歌学术搜索
50. M. V. Palmer, W. R. Waters, T. C. Thacker, R. Greenwald, J. Esfandiari, K. P. Lyashchenko，“不同结核菌素皮肤试验方案对实验感染的牛γ干扰素和抗体反应的影响牛结核分枝杆菌,”临床和疫苗免疫学，卷。13，不。3，pp。387-394,2006。浏览：出版商的网站|谷歌学术搜索
51. A. W. Lepper, C. W. Pearson，和L. A. Corner，“肉牛结核菌素的无能量”，澳大利亚兽医杂志》，第53卷，第53期5，第214-216页，1977。浏览：出版商的网站|谷歌学术搜索
52. j·m·波洛克和s·d·尼尔分枝杆菌玻利感染和结核病，兽医杂志》第163期2，页115-127,2002。浏览：出版商的网站|谷歌学术搜索

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