伊朗西南部Boyer-Ahmad地区啮齿动物原生动物寄生虫及其人畜共患病意义

摘要

背景野生啮齿动物是各种人畜共患疾病的宿主，如弓形虫病、巴贝斯病和利什曼病。目前的研究旨在评估伊朗西南部博耶艾哈迈德地区啮齿动物的原生动物感染情况。材料和方法．采用谢尔曼捕鼠器在Boyer-Ahmad区、Kohgiluyeh和Boyer-Ahmad省不同地区共捕获鼠类52只。根据与动物打交道的伦理，每只啮齿动物都被乙醚麻醉，然后解剖。从各种组织中采集样本，从结肠和小肠内容物中收集粪便样本。每只鼠取2 ~ 5 mL血，检测血清抗虫活性利什曼虫抗体，ELISA，或抗弓形虫抗体，通过改良凝集试验（MAT）。从每只啮齿动物的脑组织样本中提取DNA，并使用PCR鉴定其DNA弓形虫．结果．采用寄生虫学方法对52份鼠粪便标本进行调查，发现肠道原虫感染28例(53.8%)。52只鼠中，感染19只(36.5%)毛滴虫， 10 (19.2%)贾第虫属缪里斯11例(21.2%)痢疾10例(19.2%)酵母菌属有3例（5.8%）感染病毒唇鞭毛虫属有7例（13.5%）感染了病毒内阿米巴科有1例（1.9%）感染了病毒Retortamonas3例(5.77%)弓形虫6例（11.54%）感染了病毒锥虫属lewisi．抗体弓形虫在5例（9.61%）患者的血清中检测到，分子生物学研究结果显示弓形虫3只（5.77%）啮齿动物感染。该研究结果表明，伊朗西南部科吉卢耶省和博耶艾哈迈德省的啮齿动物感染了几种血液和肠道寄生虫；其中一些可能对该地区的居民和家畜构成潜在风险。

1.介绍

啮齿动物是地球上最常见和最重要的哺乳动物，因为它们能适应不同的位置和环境的变化。这些动物几乎生活在除南极洲以外的每一个大陆上[1.]啮齿动物被认为是各种人畜共患病的宿主，包括弓形虫病、巴贝斯虫病和利什曼病[1.–4.］．但是，啮齿动物不能直接引起人类疾病，人类接触啮齿动物的粪便和分泌物，主要传播给人类。人畜共患病病原体可通过啮齿动物的尿液、粪便、毛发和唾液传播给人类[2.］．人类活动改变啮齿动物生活场所的生态系统，在人畜共患病流行病学中具有重要作用。鉴于啮齿动物对人类的损害和经济损失，以及它们对健康的重要性，似乎有必要对啮齿动物进行寄生虫学研究[2.］．在伊朗进行了几项关于野生啮齿动物寄生虫感染的研究[5.–10］．然而，由于我国不同地区的生态差异，在每个生态环境中啮齿动物的寄生动物群可能是不同的。这一观点为在该国其他地区进行啮齿动物寄生虫感染的新研究提供了依据。目前的研究旨在评估伊朗西南部Boyer-Ahmad地区啮齿动物的寄生原虫感染。

2.材料和方法

2．1.研究区

博伊尔-艾哈迈德区位于Kohgiluyeh和博伊尔-艾哈迈德省。该省位于伊朗西南部，地理坐标为30°40 ' 12^″北纬51°36 ' 0^″该省有两种类型的热带和寒冷的气候和Boyer-Ahmad地区位于寒冷的地区。该地区长期的平均雨雪量超过600毫米，该县的大片地区被橡树、野生开心果和山杏仁森林覆盖。人民的主要职业是农业实践和饲养牲畜。

2．2．鼠类的收集与鉴定

根据研究区地图，2014年夏秋，在Boyer-Ahmad县不同地区采用Sherman烤杏仁捕鼠器作为诱饵，共采集鼠类52只。选取了该地区的不同地区进行抽样，包括Kakan、Madvan、Tange Sorkh、Kal Morgah、Mansourabad和Dehno村。移送实验室后，根据形态学特征鉴定鼠属和鼠种。这样做是为了找出每一种啮齿动物中原生动物寄生虫的比率。

2.3.啮齿动物原生动物感染的评估

将啮齿类动物转移到实验室后，用乙醚麻醉，并从心脏采集血样。仔细检查啮齿类动物的不同部位并制备必要的样本。在玻片上制备啮齿类动物的肝脏、脾脏和外周血涂片，用甲醇固定，并用Giemsa染色en涂片通过100倍放大的光学显微镜进行研究。

用Lugol溶液对啮齿动物粪便样本进行临时染色，以检测任何原生动物囊肿或滋养体。用福尔马林-乙酸乙酯沉淀法和硫酸锌浮选法对样品进行了检测，并用常规光学显微镜对所得材料进行了观察。还从啮齿动物粪便标本中制备涂片，并用三色染色。将浓缩法获得的粪便沉淀物或浮物制成涂片，甲醇固定，抗酸染色，检测粪便样品中球虫寄生虫。

２.４.鼠类血清样本的血清学评估

采用间接ELISA法检测鼠血清抗虫活性利什曼虫抗体。此外，如前所述，对啮齿动物血清样品进行MAT，以评估抗弓形虫抗体(11］．用1:20和1:40两种稀释剂研究血清，MAT效价为1:40或更高的样品为阳性。

2.5。鼠类组织样本的分子分析

根据制造商（伊朗德黑兰Yekta Tajhiz Azma）的说明，使用DNA提取试剂盒从每只啮齿类动物的脑组织样本中提取DNA。进行PCR以扩增529 bp基因弓形虫，正如Edvinsson等人所描述的[12］．所使用的引物分别为TOXOF CAG GGA GGA AGA CGA AAGTTG和TOXOR CAG ACA CAG TGC ATC TGG ATT。PCR产物在1.5%琼脂糖凝胶中分离，用溴化乙啶染色。

2.6。统计分析

采用SPSS软件(第16版)进行统计学分析。采用卡方检验检验鼠类寄生虫感染与相关研究因素(鼠种、性别、采集地点、体重)的相关性。

3.结果

本研究共捕获鼠类52只，其中25只(48.1%)。梅里恩, 15 (28.8%)鼠属10 (19.2%)Apodemus1 (1.9%)Calomyscus，及1（1.9%）Arvicola．捕获鼠中雄性28只(53.8%)，雌性24只(46.2%)。

采用寄生虫学方法检测52份鼠粪标本，感染原虫37份(71.1%)，未感染原虫15份(28.8%)。52只鼠中，感染19只(36.5%)毛滴虫， 10 (19.2%)鼠疫， 11 (21.2%)痢疾， 10 (19.2%)酵母菌属，3人（5.8%）患有唇鞭毛虫属， 7 (13.5%)内阿米巴科1例(1.9%)Retortamonas．血液和组织原虫感染3只(5.77%)弓形虫6例(11.54%)锥虫属lewisi（图1.).反-利什曼虫在8只（15.34%）啮齿动物的血清中检测到抗体，其中6只啮齿动物也感染了病毒锥虫属lewisi．没有利什曼虫在血清阳性啮齿动物的肝脏或脾脏印模涂片中观察到寄生虫2.显示了在啮齿动物粪便三色染色样本中检测到的一些肠道原生动物。

52只鼠中有19只(36.5%)出现多重感染。同时感染毛滴虫和痢疾5.8%，毛滴虫和鼠疫在1.9%,鼠疫和锥虫属在1.9%,酵母菌属和鼠疫在1.9%,毛滴虫和酵母菌属在1.9%,痢疾和酵母菌属1.9%的啮齿动物。同时感染酵母菌属,锥虫属,内阿米巴科在1.9%的啮齿动物中观察到。

本研究中感染肠道原虫的鼠类中，雌性占54.2%，雄性占45.8%。统计分析显示，各原生动物种类与鼠类性别无显著相关()．

感染率最高的是鼠疫(70%),毛滴虫(36.8%),内阿米巴科(71.4%),锥虫属(100%)和酵母菌属（60%）出现在鼠属属和最高感染率痢疾（54.5%）见于该属梅里恩统计分析表明，原生动物感染与啮齿动物属之间存在显著相关性()．表格1.按鼠属显示原生动物感染的分布。

分子研究的结果显示弓形虫3只(5.77%)鼠感染;两男一女。啮齿动物感染弓形虫来自Apodemus,梅里恩,Calomyscus属图3.显示从啮齿动物脑组织中分离出的DNA的PCR产物。

改良抗酸染色法检测粪便标本，未见球虫感染病例。

4.讨论

啮齿动物被认为是一些寄生虫和原生动物寄生虫的宿主[1.,2.].在啮齿动物的原生动物寄生虫中弓形虫这在啮齿类动物中很常见，这些动物可以作为这种原生动物的自然宿主弓形虫在啮齿动物中，以祈猫为主，关于猫在传播中的作用弓形虫卵囊在环境中是重要的[13］．的速度弓形虫啮齿动物的感染因特定地区的生态状况而不同。在目前的研究中，弓形虫感染是所研究啮齿类动物的常见原生动物。Saki和Khademvatan报告了6%的感染率弓形虫伊朗南部阿瓦士地区的啮齿动物[14］．Mercier等人在2013年对尼日尔尼亚美地区的766只啮齿动物进行了评估弓形虫1.96%的啮齿动物受感染[15］．在目前的研究中，弓形虫感染发生在Apodemus,梅里恩,Calomyscus属，据我们所知，这是分子检测的第一份报告弓形虫感染Calomyscus来自伊朗。

另一种重要的寄生虫感染是利什曼病，啮齿动物作为宿主在其传播中发挥了重要作用。在伊朗，许多种类的啮齿动物已被确认为皮肤利什曼病的宿主[3.–5.］．Mohebali等人报道了不同种类的啮齿动物感染，包括大菱鲆,利比库松,梅里恩hurrianae具有L.大调[16]．Rassi等人报道了这一点梅里恩libycus是伊朗南部法尔斯省皮肤利什曼病的主要宿主[17］．在本研究中，利什曼虫在所有被研究的啮齿动物中未检测到感染。其原因是，利什曼病主要见于伊朗的热带和亚热带地区，而Boyer-Ahmad地区位于该国寒冷和山区，不被认为是皮肤利什曼病的流行重点。虽然内脏利什曼病在这个地区并不少见，但它的宿主是狗、食肉动物或猫，而不是啮齿动物[18–20.］．

啮齿动物经常感染肠道原生动物，并可能成为其中一些动物的宿主毛滴虫,痢疾,鼠疫在被研究的啮齿动物中检测到。的速度贾第虫属2013年巴勒斯坦Al Hindi和Abu-Haddaf研究发现，啮齿类动物肠道原虫感染率为14.6%，肠道原虫感染率为96.3%田鼠和48.3%Apodemus2000年，Rasti和同事在伊朗卡山的研究中发现了2.5%，2001年，Kia和同事在伊朗南部阿瓦兹的研究中发现了2.7% [7.,21–23］．在目前的研究中，比率鼠疫鼠类感染率较高。需要进一步研究比较这些从啮齿动物分离的原生动物与人分离的原生动物的基因型。

血液原生动物感染，锥虫属,在我们研究的啮齿动物中很常见。在伊朗南部阿瓦士的Kia等人的研究中报道了这种寄生虫较低的感染率(10%)[7.]而巴西（21.7%）和印度（82.3%）的感染率较高[24,25］．

在本研究中，未发现啮齿动物感染肠道球虫，而其他研究报道了这些动物感染球虫[21］．这种差异可能是由于研究区域的气候条件不同，以及啮齿动物的营养或栖息地偏好。

总的来说，目前的研究结果表明，在伊朗西南部的Kohgiluyeh和Boyer-Ahmad省的啮齿动物感染了许多肠道和血液原生动物。其中一些原生动物可能对该地区的居民和家畜有潜在的危险。啮齿类动物肠道原虫感染的高流行率可能与该地区不安全的人类粪便处理以及人类和动物肥料的使用有关。

利益冲突

作者声明本文的发表不存在利益冲突。

致谢

本文所描述的结果是Zeinab Seifollahi硕士论文的一部分。该研究由设拉子医学科学大学副校长办公室资助(第7322-93号批准)。

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