文摘
本研究的目的是评估的流行狗红细胞抗原(DEA) 1、4和7在Ibizan猎犬,比较结果与DEA在西班牙灰的患病率,并确定风险的致敏后第一次输血的血液不是DEA类型1和急性溶血反应的概率后第二个不相容的输血使用无类型的DEA 1血。DEA 1、4、7状态在92年决定Ibizan猎犬。结果与之前报道的发病率相比西班牙灰。致敏的风险和溶血性输血反应测定Ibizan猎犬和Ibizan猎犬和西班牙之间的灰。DEA的流行1、4、7为75%,98.9%,和25%,分别。有一个更高的表达DEA Ibizan猎犬的1和7比西班牙的灰。敏化的概率接受狗DEA 1的输血在Ibizan猎犬Ibizan猎犬和西班牙之间为18.5%,灰是13.7%。每组急性溶血反应的概率是3.5%和1.9%,分别。有更高的患病率DEA Ibizan猎犬的1和7比其他视觉猎犬。
1。介绍
国际标准化的七个犬血型分类的狗的红细胞抗原(DEA) 1, 3, 4, 5, 6, 7, 81]。其他抗原系统已报告,如最近描述Dal血型(2),但这些系统已经标准化。捐赠者可能表达多个血型和犬红细胞血型可以消极或积极的对于任何给定的(3]。
DEA 1和7是最重要的血型对犬输血。DEA 1抗原最近被归类为一种独特的DEA表面抗原决定基与变量表达式(而不是不同的等位基因的表达,DEA 1.1, DEA 1.2, 1.3和DEA,就像先前认为的)(4)和存在于犬的大约一半人口(5- - - - - -11]。没有天然抗体DEA 1狗。DEA 1 -狗接触DEA 1正红血球将成为“敏感”生产的9天内anti-DEA 1抗体[12,13]。Anti-DEA 1抗体已报告在之前敏化引起急性溶血性输血反应DEA 1 -狗[14]。
据报道,DEA 7抗原自然发生在40到72%的人口(犬8,9,13,15,16]。10至40%的狗这些抗原为阴性天然抗体DEA 7 (3,17)和延迟红细胞生存被认为发生在抗原-狗接收DEA 7积极血(15]。
还有一个盛行的DEA 4抗原(98 - 100%)犬人口(3,8,9,16]和溶血性输血反应由于DEA 4同种抗体已经被报道在一只狗18]。
理想献血没有血液抗原的类型,通常导致无与伦比的接受者的反应。没有认可的定义一个通用犬捐献者。最严格的定义通用犬捐赠者将一只狗- DEA 1, DEA 3、DEA 5、DEA 7和积极的DEA 4。因为98%的狗是阳性DEA 4, DEA 4 -狗的稀缺性意味着这种抗原不太可能影响供体的选择。一些输血专家不排除DEA 7积极的狗从捐赠者池。事实上万能供血者的概念在DEA的狗一直以来讨论测试3和DEA 5抗原往往无法获得,这些测试的质量是可变的;目前血清只能打字DEA 1, 4, 7抗原。正如前面提出的(14],普遍的捐助者是DEA因此通常被认为是狗1和7负。现场即时测试目前仅可DEA 1,虽然在专业实验室、多克隆抗血清可用于DEA 4和DEA 7打字。
Ibizan猎犬是中型视觉猎犬来自伊比沙岛的岛。他们传统上使用的巴利阿里群岛(和在西班牙和法国)猎杀兔子和其他小游戏。近年来在全球范围内传播这个品种通过各种应用程序。依比沙猎犬分类是国际犬业协会(FCI)组5节(施皮茨和原始类型)和原始type-hunting狗。这只狗是一个典型的和健壮的代表最古老的品种之一仍然存在(http://www.fci.be/en/nomenclature/ibizan podenco - 89. - html)。
本研究的目标是3倍:(1)评估DEA的患病率1,DEA 4和DEA 7血型Ibizan猎犬;(2)比较结果与先前发表的命,其他视觉猎犬(即。,西班牙灵缇犬);(3)确定收件人的风险敏感第一次输血后不输入DEA 1和急性溶血反应的概率后第二个不相容的输血无类型之间的DEA 1在Ibizan猎犬和Ibizan猎犬和西班牙的灰。
2。材料和方法
2.1。样品
在这个前瞻性研究EDTA-anticoagulated血液样本收集从2015年1月的92名健康拥有Ibizan猎犬。狗在1年期和3岁之间,89是女性(96.7%)和3是男性(3.3%),和所有生活在伊比沙岛岛,西班牙。
与业主同意头收集血液样本23 G针(Sterican布劳恩®,b·布劳恩Melsungen AG Melsungen,德国)连接到一个2毫升注射器(Injekt布劳恩®,b·布劳恩Melsungen AG Melsungen,德国)。他们转移到1毫升EDTA-anticoagulated管和存储4和5°C之间。所有收集的血液样本的研究,以确定在这个品种血型的分布。这项研究是根据欧洲立法(2010/63 /欧盟)。在所有血液样本类型进行如下所述。
2.2。DEA 1血打字
DEA 1状态决定使用商用卡凝集技术(RapidVet-H,犬DEA 1.1, Agrolabo SpA、Scarmagno,都灵,意大利)根据制造商的指示,如前所述19,20.]。的原理基于凝集试验是可见红细胞凝集反应产生约束力的DEA 1红细胞表面抗原小鼠单克隆抗体,是冻干卡测试。
2.3。DEA 4和DEA 7血型检定
分析DEA 4和7的抗原是由凝胶柱凝集在超小型电子管(卡片氯化钠,凝集素酶测试和冷,直径,长满水芹的FR,瑞士)如前所述[21)使用多克隆抗体anti-DEA由动物血液资源国际(美国ABRINT Stockbridge, MI)。
Anti-DEA 4和7的抗体和本研究中使用进口意大利卫生部长的授权(协议授权号0021278 - 15/10/2014 dgsaf dgsaf - p)。血型检定进行输血兽医部门(牧师)大学的米兰,米兰,意大利。
短暂的25μL 0.8%的红细胞悬液由暂停10μL的RBC丸1毫升的低离子强度溶液(丽丝丽丝,ID-DILUENT 2,修改方案,直径,长满水芹的FR,瑞士)是混合着25μL DEA 7的抗体或15μL DEA 4抗体反应室的盐水凝胶列。所有样品包括负控制列与生理盐水。凝胶列在4°C孵化30分钟,然后被离心机在一个特殊的凝胶柱卡离心机(ID-CENTRIFUGE 24年代,DiaMed-ID微输入系统,长满水芹的苏尔Morat,瑞士)在80 g×10分钟。最后,凝胶柱卡存在和胶合强度进行评估。只有结果验证了消极的控制包括在分析中。
卡片是视觉解释如下:(0)负,当所有红血球底部的列;1 +,当红细胞啤切很少被分散在凝胶的下部,与大多数红血球底部的管;2 +,当所有红血球凝集和分散凝胶;3 +,当一些红细胞啤切被分散在上部的凝胶和大部分的红血球表面形成一条红线凝胶;和4 +,当所有红细胞表面形成凝胶的红线上。结果理解为消极的如果没有凝集或1 +凝集在场,而≥2 +凝集反应被认为是积极的。
2.4。敏化和输血风险分析DEA 1
依比沙猎犬的概率成为致敏后第一次输血的血液保存和打印DEA 1是使用以下公式计算5,10]:
相同的概率狗发展与另一个不兼容的输血的急性溶血反应使用无类型的血液从任何其他的狗是使用以下公式计算10]:
2.5。统计分析
结果分析了绝对流行的分析。使用应急表或确切概率法的流行DEA 1、4、7和普遍捐助者Ibizan猎犬计算相比,本研究是拥有205人口的西班牙灰(galgo)的患病率DEA 1、4、7和环球捐助者(即。,DEA 1和7 - DEA 4积极)为54.6%,100%,8%,和46.7%,分别为(22]。
所有执行统计分析使用统计软件(14.10.2 Medcalc软件版本、Mariakerke、比利时)设置为与意义。
3所示。结果
3.1。DEA 1、DEA 4, DEA 7患病率
DEA 1血型,69(75%)狗阳性和23(25%)测试呈阴性反应。DEA 4血型,91(98.9%)狗阳性(所有显示4 +凝集)和1(1.1%)狗测试呈阴性反应。DEA 7血型,23(25%)狗阳性(16样本显示3 +凝集和7样本显示2 +凝集)和69年(75%)-(无样品显示凝集)。92只狗,16 (17.4%)DEA 4只积极(通用捐助者)和1(1.1%)狗对所有DEA是负面的。所有控制样品在凝胶列测试-(无凝集)。
3.2。DEA的比较1、4、7患病率与西班牙灰
Ibizan猎犬DEA的患病率明显高于1和DEA 7积极性比西班牙灰(和、职责)。普遍的流行捐助者(DEA 1和DEA 7 -和DEA 4积极的还是消极的)是低Ibizan猎犬(比西班牙灰)。没有显著差异DEA 4 2品种之间的患病率。
3.3。致敏的风险DEA 1和溶血性急性反应在一个无类型的接受者
依比沙猎犬接受者的概率成为致敏后,首先从一个依比沙猎犬供体输血的血液,所以没有和类型化的DEA大约是1 5 (18.8%)。相同的概率狗发展与另一个不兼容的输血的急性溶血反应使用DEA血液无类型1与其他依比沙猎犬是3.5%。
收件人依比沙猎犬的概率成为致敏后第一次输血的血液从西班牙灰狗,所以没有和类型化的DEA大约是1 7 (13.7%)。相同的概率狗发展与另一个不兼容的输血的急性溶血反应使用无类型的DEA 1血从西班牙灰狗是1.9%。
4所示。讨论
有品种和地理差异的患病率不同血型抗原(8,15]。供者型血很重要为了犬献血者选择兼容。积极的患病率在潜在的捐赠者人口抗原可用于计算这种抗原的可能性将导致输血不良反应,因此与输血相关的风险评估。
在这项研究的流行DEA 1表达Ibizan猎犬是75%,高于此前报道的其他纯品种7- - - - - -9,15,16和交叉繁殖狗6]。DEA的流行1 Ibizan猎犬也远高于在其他视觉猎犬之前报道,如灰和西班牙的灰,DEA的流行1据报道为13.1% [16)和51.7% (11),分别。DEA 1的患病率在统计学上显著高于Ibizan猎犬比西班牙人口的灰检测DEA 1 (22]。
所有92 Ibizan猎犬血液类型,只有一个是DEA 4负。这个普遍存在的DEA 4表达与患病率(98.9%)在协议一般犬人口(6,7,9,16,21]。
DEA 7-positive狗研究人群的患病率(25%)报告类似于黄金猎犬在美国和巴西分别地(25%和27%)。[7,9]但高于饲养杂交品种报告的患病率(11%)和德国牧羊犬在巴西(8%)(6)和美国(29.1%)低于灰(16)和土耳其皮肤病的狗(71.1%)(8]。DEA 7的流行表达Ibizan猎犬在人口统计学上显著高于西班牙灰之前测试的作者对DEA 7 (22]。这些结果证实,对于其他类型的狗血,DEA 7不同人群的患病率。
普遍的流行或“理想”捐赠者,也就是说,狗只对DEA 4积极或消极DEA,在我们的人口Ibizan猎犬,是18.5%。这是低于57.3%中灰的患病率16)和西班牙人口的家伙以前血液类型,普遍流行的捐助者(46.7%22]。
在这项研究中收件人的概率变得敏感,产生抗体DEA 1后第一个输血的血液保存和DEA 1的输入为18.8%(1 5)在Ibizan猎犬和13.7%之间(1 7)Ibizan猎犬和西班牙的灰。这些概率低于此前报道在狗从葡萄牙10),在西班牙西班牙灰(11和狗在巴西5概率在24.5%、22.9%和24.9%,分别。溶血性输血反应的风险也低于6%之前的一项研究报告10]因为有更高的患病率的DEA 1积极性Ibizan猎犬(这些狗可以接收DEA 1负或DEA 1正起初血液输血没有输血反应)。
这种凝胶凝集技术已经使用了几十年。这个测试是检测敏感的DEA 1和适合筛查献血者血液银行项目(19,20.]。本研究使用,只有狗血的打字,第三次列凝胶与多克隆抗体凝集DEA 4和DEA 7 [21,22]。列凝胶凝集试验是简单的执行,不需要洗涤红细胞,只需要小样本和试剂卷,收益率结果简单阅读和稳定(三天)。验证了该技术的研究多克隆抗体DEA 4和7表明,识别的测试并不是100%敏感DEA 7 (21]。事实上,当凝胶凝集与管凝集(被认为是黄金标准),有12不和谐的结果DEA 7(84%)的一致性。凝胶凝集试验的特异性为100%,敏感性为53% DEA 7正样本的识别与管相比凝集(21]。这可能代表一个限制我们的研究,DEA的真正流行7积极的狗可能是高于发现使用这个测试。
本研究的另一个限制是,研究人口Ibizan猎犬是几乎都是女性,镜像Ibizan猎犬的环境生活。猎人在主要运行这些狗女包,女性被认为是更好的猎人。此外,我们不知道如何在这项研究中使用的狗都密切相关。有可能是一个封闭的人口密切相关的个人偏见的流行的血型。最后DEA 3、DEA 5,木豆的血型没有测试自相关抗血清当时无法进行研究。
5。结论
Ibizan猎犬的人口研究显示不同的流行DEA 1和7对先前的报道其他视觉猎犬。尽管致敏的风险和不兼容的输血后急性输血反应低,仍然是最佳实践的血型和输血前cross-match接受者。
伦理批准
所有适用的国际、国家和/或机构动物保健和使用指南。
利益冲突
作者宣称没有利益冲突有关的出版。