文摘

一个横断面研究2231小反刍动物埃塞俄比亚阿法尔田园地区四个地区的调查结核病流行病学的山羊和绵羊使用比较皮内注射结核菌素皮肤试验,尸检,mycobacteriological文化和分子分型方法。小反刍动物的整体动物结核病患病率为0.5% (95% CI: 0.2% - -0.7%)≥4毫米,3.8% (95% CI: 3% - -4.7%)截止≥2毫米。群患病率为20%(95%置信区间CI: 12 - 28%)和47%(95%置信区间CI: 37 - 56%)≥4毫米和≥2毫米截止点,分别。整体动物鸟型结核菌感染患病率为2.8%(95%置信区间CI: 2.1 - -3.5%)和6.8%(95%置信区间CI: 5.8 - -7.9%)≥4毫米和≥2毫米截止点,分别。Mycobacteriological文化和分子特性的隔离组织病变的结核菌素反应堆山羊导致隔离结核分枝杆菌(SIT149)和非结核分枝杆菌肺结核和tuberculosis-like疾病的病原体山羊,分别。的隔离结核分枝杆菌在山羊表明潜在的病原体的传播从人类在小反刍动物的作用,需要进一步调查该地区在人类结核病的流行病学。

1。背景

埃塞俄比亚有一个最大的山羊和绵羊资源在非洲国家中,估计有2190万只山羊和羊2590万只(1]。山羊和绵羊对经济和粮食安全作出了重大贡献的贫困农民。大约73%的国家人口山羊和绵羊人口的25%在低地国家的牧区(2]。在游牧地区,山羊和绵羊主要用于牛奶和肉类生产和创造收入的所有者。尽管人口众多和潜在使用小反刍动物,生产系统影响饲料短缺,可怜的动物的基因组成,广泛发生的牲畜疾病,如肺结核具有经济和公共卫生意义的社区。

结核病的山羊和绵羊是由成员引起的结核分枝杆菌复杂主要由牛结核分枝杆菌和分枝杆菌caprae(3- - - - - -14)和一些所致结核分枝杆菌(15,16]。流行病学研究表明,肺结核在山羊和绵羊有一个广泛的全球分销和报道在世界的各个国家,包括新西兰、苏丹、西班牙、尼日利亚、英国、意大利、阿尔及利亚、埃塞俄比亚(3- - - - - -17]。在埃塞俄比亚,牛结核病流行的牛;然而,结核病的山羊和绵羊的地位并没有被很好的研究尽管与牛的密切接触。进行一些研究到目前为止在中央高地埃塞俄比亚表示结核病在小反刍动物的存在低水平的患病率(4.2%)基于屠宰场考试成绩(14)和3.1%使用单一的皮内注射结核菌素试验(17]。在低地牧区人口众多的山羊和绵羊存在,疾病的状态是未知的。

牲畜在游牧地区是主要的食物和收入来源,此外,拥有牲畜提供了一个衡量牧民社区的社会地位。在埃塞俄比亚,包括远处的牧民,牧民的习惯食用生动物产品尤其是牛奶是常见的和牧民和他们的动物亲密的身体接触。远处牧民消耗山羊和绵羊奶很一般,和保护这些小反刍动物捕食者,牧民把这些动物非常靠近他们的房子。这些条件都是潜在的风险因素的传播人畜共患疾病,如结核病的动物对人类起源,反之亦然。山羊和绵羊也常见浇水和放牧点牛可能支持这些家畜分枝杆菌物种之间的传播。牛和骆驼的田园地区先前的研究表明各地区结核病流行的本质18- - - - - -22]。因此,本研究旨在调查结核病流行病学的山羊和绵羊和特征的病原体在远处田园地区埃塞俄比亚。

2。材料和方法

2.1。研究区域

这项研究是在四个地区进行,即Amibara, Dubti, Afambo, Chifra远处田园地区的地区。远处田园地区位于埃塞俄比亚东北部在39°34 E′和42°28′经度和8°49′,北纬14°30′。该地区股票共同国际边界与厄立特里亚东北部和东部的吉布提,它的特点是一个干旱和半干旱气候较低和不稳定的降雨23]。

在遥远地区,大约有4268000 2464000山羊和绵羊在田园和agropastoral生产管理系统(24]。远处牧民的不同种类的家养动物,这些动物共同浇灌点和放牧的网站。小反刍动物通常在他们的村庄附近吃草/浏览,虽然牛和骆驼可能长途旅行寻找草和浏览树。小反刍动物的浇点通常与牛和骆驼创建一个共享亲密的种间相互作用在这些家畜,这可能会增加传播的风险从牛分枝杆菌或骆驼小反刍动物,反之亦然。

2.2。研究设计

进行横断面研究的4个地区远处田园区域分区,共14和21个村庄被包括在研究中根据入选标准(可访问性、安全性和牧民参与研究的意愿)。村庄在每个街道都包括在获得老家族领导人同意参与这项研究。在这项研究中,山羊和绵羊由一个所有者及其近亲属在这种情况下,如果动物共同放牧网站,浇点,和夜晚收容所,他们认为是一群计算群患病率。总共有103的羊群(群)的小反刍动物被CIDT测试测试。

2.3。研究动物

CIDT测试、小反刍动物的年龄6个月以上没有任何疾病的临床症状是包括在内。研究英汉动物每个测试绵羊和山羊信息(如性别、年龄、身体状况得分,哺乳期和生殖状态,和奇偶校验号码)当时收集和记录的测试。每个动物除虫后与antihelmintic药物测试。共有2231个小反刍动物(347年1884只山羊和绵羊)使用CIDT进行了测试。

2.4。比较皮内注射结核菌素皮肤试验(CIDT)

CIDT测试是由注射牛纯蛋白衍生物(产后抑郁症)和禽流感的产后抑郁症(AsureQuality公司观察牛和禽流感的结核菌素太惠灵顿,奥克兰,新西兰)。两个网站在皮肤上的mid-neck动物,12厘米,被剃,皮肤厚度用卡尺测量。一个站点被注射0.1毫升的整除2500国际单位/毫升牛产后抑郁症到真皮,和其他类似的注射0.1毫升的2500国际单位/毫升禽流感产后抑郁症。72 h后,注射部位的皮肤厚度测量和记录。结果解释根据国际des既往办公室的建议(25]在≥4毫米截止还有≥2毫米截止(26]。因此,在截止≥4毫米,如果注射部位的皮肤厚度的增加牛产后抑郁症(PPD-B)大于注射部位的皮肤厚度的增加鸟类产后抑郁症(PPD-A)和PPD-B - PPD-A小于2毫米,2 - 4毫米,或4毫米以上,动物被归类为负的,怀疑,分别基于CIDT测试或积极的反应堆。在截止≥2毫米,如果PPD-B之间的区别和PPD-A大于或等于2毫米,动物被认为是积极的,而如果小于2毫米的差异,动物被认为是负面的。皮肤厚度的变化大时PPD-A注射部位,动物被认为是积极的分枝杆菌物种以外结核分枝杆菌复杂。一群(群)被认为是积极如果至少一个反应堆结核菌素的动物。

2.5。体况评分

山羊和绵羊的体况评分进行使用指导方针由兰斯顿大学和建立ESGIP体况评分指南(27,28]。因此,在观察的基础上的解剖部位如脊柱、肋骨,刺,研究动物分为精益(得分1 - 2),中等(3 - 4),或脂肪(大于5)。

年代测定进行了基于生齿根据Vatta和他的同事29日),采用ESGPIP指南估计年龄的绵羊和山羊30.]。

2.6。后期检查

组织与可疑病变从五个从肺结核菌素反应堆屠宰山羊是无菌收集叶(左顶端,左膈,正确的顶端,对心脏,右膈和右附件),淋巴结的头(咽后的和下颌),淋巴结,肺(纵隔和支气管),和肠系膜淋巴结。数据收集的存在、大小和分布可见病变在每个尸体。样本包含可见的病变组织收集并放在无菌通用瓶包含5毫升的0.9%生理盐水(pH值7.2)和保持在−20°C Semera区域动物卫生实验室,直到他们被运送到了ALIPB实验室在冷链隔离的病原体。

2.7。隔离的分枝杆菌组织样本

隔离的分枝杆菌组织是按照世界动物卫生组织协议(31日]。短暂,标本使用无菌刀片切割成碎片,然后均质杵和臼。匀浆是净化通过添加同等体积的4%氢氧化钠随后离心1000克15分钟。上层清液被丢弃,而沉积物中和1% (0.1 n)盐酸使用酚红作为指标。中和实现时,溶液的颜色由紫色变为黄色。此后,0.1毫升的暂停从每个样本传播到的斜率Lowenstein-Jensen (LJ)媒介。LJ媒体重复使用;一个富含丙酮酸钠,而另一个是富含甘油。文化在37°C孵化一周的倾斜位置,在直立位置为11周每周观察分枝杆菌生长。无论何时,殖民地被认为,接种和Ziehl-Neelsen染色进行确认抗酸杆菌的存在。 Positive colonies were preserved with freezing media, and some portions of the colonies were heat-killed in water bath at 80°C for 45 minutes. The frozen and heat killed isolates were stored at −20°C for future mycobacteriology and further molecular typing analysis.

2.8。分枝杆菌分离株的分子表征

分枝杆菌属类型进行了如前所述[32),和spoligotyping结核分枝杆菌复杂的分离山羊被Kamerbeek表现如前所述,合著者(33]。这两种方法是前出版(详细描述22]。

2.9。数据管理和分析

数据分类、过滤、编码使用EpiData软件和微软Excel表,并转移和分析使用占据版本11(占据Corp .,拼贴站,TX)。皮尔逊卡方被用来评估不同分类的关联变量的统计显著性皮肤测试结果。二元和多元逻辑回归分析量化原油和调整预定的风险因素对结核菌素反应的影响。P值小于5%被认为是具有统计学意义。在评估不同风险因素的影响的情况下或与相应的95%置信区间,统计意义被认为如果置信区间不包括一个在其值。

3所示。结果

3.1。动物的发病率

CIDT的基础上测试,动物结核病患病率为0.5%(10/2231)在截止≥4毫米和3.8%(86/2231)截止≥2毫米。≥2毫米分界点,反应堆的比例有显著差异在四个地区(= 26.385,P绵羊和山羊之间= 0.000),(= 6.46,P= 0.011)和妊娠孕妇和女性之间(= 5.342,P= 0.021)(表1)。≥2毫米分界点多变量逻辑回归分析表明,年龄小反刍动物(5年以上)13倍的可能性是结核菌素反应堆相比年龄类别小于2岁(调整或= 13.79;置信区间:2.22—-85.55)。带有奇偶校验的雌性小反刍动物数量大于4有0.05的几率被牛结核菌素积极性相对于那些小于2平价数字(调整或= 0.05;置信区间:0.01—-0.31)(表2)。≥4毫米截止点,没有统计学意义差异的比例牛结核菌素组与不同变量之间的积极性。

3.2。群流行

群患病率为20%(95%置信区间CI: 12 - 28%)和47%(95%置信区间CI: 37 - 56%)≥4毫米和≥2毫米截止点,分别。在多变量逻辑回归分析中,没有发现显著的协会之间的群体积极组织关系的起源、群大小类别和生产系统在≥2毫米分界点(表3)。

3.3。普遍存在的鸟型分支杆菌复杂的感染

根据CIDT禽流感结核菌素皮肤反应的试验结果,整体动物普遍存在的鸟型分支杆菌复杂的感染为2.8%(95%置信区间CI: 2.1 - -3.5%)和6.8%(95%置信区间CI: 5.8 - -7.9%)≥4毫米和≥2毫米截止点,分别。

3.4。后期病变结核菌素反应堆山羊

五只山羊都积极在CIDT牛结核病测试截止≥4毫米购买,屠杀,追究严重结核性损伤。结核性损伤检测在不同器官(左膈肺、咽后的淋巴结,腮腺淋巴结,右支气管淋巴结,肠系膜淋巴结,肠壁,和肠系膜)。其中两个已经部分传播肺结核病变涉及肺、肠和胸和腹部淋巴结的蛀牙。经肺、切口病变显示淡黄色的干酪的材料表明结核性损伤(图的特征1)。肠系膜和肠系膜淋巴结病变观察绿色放电。

3.5。从山羊分子类型的隔离

所有组织样本来自结核菌素反应堆屠宰山羊都积极为分枝杆菌增长LJ培养基。进一步的分子特征表明,隔离是人类类型之一结核分枝杆菌(SIT149)从山羊标本(图2),和其他人nontuberculosis分枝杆菌的物种。SIT149隔离的山羊是强有力的反应堆牛结核菌素试验高皮肤硬化的区别(PPD-B - PPD-A = 10毫米),尸检结果显示,典型的结核菌素病变肺、支气管淋巴结,尾纵隔淋巴结,也在肠系膜淋巴结的山羊nontuberculosis分枝杆菌物种隔离显示硬化皮肤鸟结核和牛结核菌素注射部位。此外,在尸检病理病变观察到在咽后的局部淋巴结和肠系膜淋巴结。

4所示。讨论

信息几乎没有在小反刍动物结核病在埃塞俄比亚即使牛结核病流行在埃塞俄比亚的牛34]。在这项研究中,0.5%的患病率在≥4毫米截止和3.8%≥2毫米分界点是记录在小反刍动物在远处的四区田园埃塞俄比亚东北部地区。古清十郎的结果是同意和Agga14报告4.2%在Mdjo屠宰场屠宰山羊和Tafesse和合作者的报告17)记录3.1%的患病率在山羊与皮内注射结核菌素皮肤试验。最近的一项研究进行山羊和绵羊的中央埃塞俄比亚使用CIDT也显示较低的结核病患病率在2毫米分界点(0.41%)(16)这可能表明一个总体低流行率的结核病在小反刍动物的国家。然而,我们的结果是不同于以前的研究结果,在埃塞俄比亚南部Hamer田园区,这说明疾病的缺席186年山羊使用CIDT测试(21]。这种差异可能是相关的,地理位置的差异的两个研究疾病的流行病学可能在这些领域之间变化。

积极的反应堆的比例明显高于Dubti地区比其他地区可能相关的农业系统,小反刍动物有更高的交互与牛Dubti地区比其他地区,从而有利于分枝杆菌物种之间的潜在传播牛和山羊。老山羊和绵羊显示更高比例的积极性在结核菌素试验结果可能与这一事实有关年老的动物有较长的持续时间和重复的机会接触分枝杆菌感染他们的年龄。类似的结果已经被其他研究者报道,在牛34,35]。雌性动物有更多的奇偶校验数字显示,结核菌素试验结果更高比例的积极性较低的比奇偶校验号码。这可能是有关动物和动物的年龄高的平价数量在他们年龄老,增加他们的机会接触分枝杆菌感染的寿命更长时间。

Mycobacteriological文化组织病变的五个结核菌素反应堆山羊进行了隔离结核分枝杆菌和nontuberculosis分枝杆菌的物种。在这项研究中,结核分枝杆菌应变SIT149隔绝山羊暗示其从人类传染给山羊的可能性。类似的压力一直在孤立的骆驼在埃塞俄比亚东南部[田园地区36]。SIT149应变的结核分枝杆菌是一个占主导地位的应变在埃塞俄比亚(37),这是一个常见的隔离在人类肺结核病人从同一远处田园地区表明隔离一直循环。远处牧民与山羊和绵羊有亲密的接触,经常保持年轻的山羊和绵羊在家里晚上这可能是一个潜在的因素从人类病人传染给动物。以往的研究牛埃塞俄比亚的证明结核分枝杆菌通常是孤立的牛结核性损伤的埃塞俄比亚在不同地区(38,39]。

在羊,我们观察到1.44%的结核病患病率在2毫米分界点,没有4毫米的分界点。结果与之前的研究结果相一致,羊结核病报道与结核菌素皮肤试验和尸检结果(3,4,9,10,12,16]。

总之,本研究显示适度低流行率的结核病在埃塞俄比亚远处田园地区的山羊和绵羊。结核分枝杆菌和nontuberculosis分枝杆菌分离病原体在山羊的地区的结核病。的隔离结核分枝杆菌在山羊表明需要进一步的研究来理解跨物种传播动力学结核分枝杆菌和小反刍动物的作用在人类结核病的流行病学在牧区环境潜在的感染和传播的流行病学危险因素之间的牲畜和人类的存在。此外,识别nontuberculosis从结核分枝杆菌病变山羊表明其重要性在小反刍动物结核病的流行病学和还需要进一步的研究来确定物种及其对该地区牧民的公共卫生意义。一般来说,类似于先前的研究在牛和骆驼的田园埃塞俄比亚地区(18,20.- - - - - -22,36)已表明肺结核的特有性质在这些物种中,这项研究的结果也表明肺结核在远处小反刍动物的重要性田园地区进一步强调需要设计一个可行的国家结核病控制策略在牲畜。

作者的贡献

通用卡萨岛导致的设计研究中,参与了收集、分析和解释数据,起草和修订。f . Abebe导致的设计研究,解释数据和批判性的修订。y Worku和m . Legesse导致了研究设计、数据收集、数据分析和解释和批判修正。g . Medhin参与研究设计,数据分析和解释和批判修正。g . Bjune参与研究设计和批判性的修订。G。Ameni导致了研究设计、数据收集、数据分析和解释和批判修正。所有作者阅读和批准了期末论文。

确认

作者感谢远方的牧民和远处田园区域国家愿意参与研究和支持研究。作者承认Aklilu引理病理学研究所亚的斯亚贝巴大学的卫生和社会部门的社区医学研究所的奥斯陆大学和亚的斯亚贝巴大学兽医学院的整体支持研究。他们也感谢在ALIPB结核病实验室工作人员的现场和实验室工作。本研究在经济上支持的挪威发展研究和教育项目(NUFU PRO-2007/10198)。